Формула определения группы крови и резус фактора. Определение резус фактора: анализ, особенности
Для определения групповой принадлежности крови необходимо следующее оснащение; два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток 1(0), 2(А), 3(В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки 4(АВ) (в каждую ампулу с сывороткой опускают сухую чистую пипетку), флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, чисто вымытая сухая тарелка, предметные стекла, стерильные копьевидные иглы для прокола мякоти пальца, стерильные марлевые шарики, спирт. Определение проводят в помещении с хорошим освещением и температурой от 15 до 25°С.
Как обычно, как некоторые трансплантации органов, такие как роговицы, сердце и почки, ничто не сравнится с количеством переливаний крови в современном мире. Но история успеха донорства крови, которая может спасти жизни в операциях или неотложной помощи, довольно недавняя.
Было время, когда кровь была самой загадочной составляющей человеческого тела. На протяжении тысячелетий философы и натуралисты не знали о системе кровообращения, но также о веществах, составляющих эту красную жидкость, и о функциях, которые она выполняет. Это был английский доктор Уильям Харви, который расшифровал некоторые из этих загадок.
Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указанием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления. Ампулой без этикетки пользоваться запрещается. Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркировкой: 1(0) - бесцветная, 2(А) - голубая, 3(В) - красная, 4(АВ) - желтая. Соответствующая цветовая маркировка имеется на этикетке в виде цветных полос: на этикетке сыворотки 1(0) полос нет, сыворотки 2 (А) - две полосы синего цвета, сыворотки 3(В) - три полосы красного цвета и сыворотки 4(АВ) -четыре полосы желтого цвета. Сыворотки хранят при температуре 4-10°С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной, ампула сохранной. Наличие хлопьев, осадка, помутнение являются признаками непригодности сыворотки. Титр сыворотки должен быть не менее 1: 32, активность- высокой: первые признаки агглютинации должны появляться не позднее 30 с. Сыворотки с просроченными сроками хранения к использованию не пригодны.
Первые известные переливания датируются, по крайней мере, столетием раньше, в попытках, которые часто заканчивались летальным исходом. Врачи старого понятия не имели, что кровь донорской боли может быть заражена каким-то патологическим агентом. Гораздо меньше они думали, что, хотя она всегда красная, кровь может варьироваться по своему химическому составу от одного человека к другому и что это изменение может привести к серьезной реакции иммунной системы.
Есть десятки систем ввода крови, но эти два являются самыми важными. Кровь - это путь общения с организмом, куда проникает кислород, питательные вещества из уже переваренной пищи и побочные продукты метаболизма - серия химических реакций в каждой клетке - которые должны быть устранены из организма. Кислород заряжается в виде оксигемоглобина эритроцитами. Эти клетки плавают в плазме, жидкость образуется в основном из воды, которая помимо эритроцитов содержит антитела, белки, сахара, гормоны и углекислый газ, которые будут высвобождаться путем дыхания.
Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты 1(0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий 1(0), 2 (А), III (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьем. Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путем покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации.
Это эритроциты и антитела, которые определяют совместимость крови между двумя людьми. Разница между этими разновидностями состоит в существовании или нет определенных антигенов, инкапсулирующих поверхность клеток, агглютиногенов. Помните: антигены - это вещества, которые вызывают иммунную систему для защиты организма. Антигены могут поступать из окружающей среды в качестве возбудителей болезней - бактерий и вирусов - или вырабатываться самим организмом.
Антигены активируют антитела, называемые агглютининами, в плазме. Существует несколько типов агглютинина. Те, которые соответствуют антигенам А и В, являются анти-А и анти-В. Эти агглютинины связываются с клетками крови другого типа, заставляя их сгущаться и разрушать.
При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании. При отрицательной реакции капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен. Возможны следующие 4 комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками 1(0), 2(А), 3(В) групп.
Есть еще два типа крови. Совместимость крови зависит от другой типизации: резус-фактор. Человек может быть резус-положительным или резус-отрицательным. Это зависит от наличия или иного другого антигена на поверхности эритроцитов. Поскольку продуцирование антител занимает немного времени, немедленных проблем при переливании нет, но в конечном итоге. Одной из таких проблем является эмбриональный эритробластоз или гемолитическая болезнь новорожденного. Эритробластоз - это заболевание, которое вызывает разрыв красных кровяных телец и высвобождает гемоглобин в плазме.
1. Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации.
Исследуемая кровь 1(0) группы.
2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой
2 (А) группы обеих серий и положительная с сыворотками
1(0) и 3(В) групп. Исследуемая кровь 2(А) группы.
3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой
1П(В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой
1(0) и 2(А) групп. Исследуемая кровь 3(В) группы.
При разрушении эритроцитов индивидуум рискует стать анемичным или изменил размер некоторых органов. В первой беременности организм матери развивает иммунитет, а плод не достигается антителами. В человеческом роде определение типа крови включает в себя три аллельных гена. Это наследование типа полиалелии или множественных аллелей. В популяции встречаются три или более аллеля, но каждый индивидуум представляет комбинацию из двух из них.
Наследование резус-фактора простое, всего лишь случай полного доминирования, например, воспроизводство гороха Менделя. Теперь мы можем повторно представить полную таблицу типов крови, связав фенотипы с соответствующим генотипом. Каждая группа крови соответствует своего рода биологическому удостоверению крови каждого человека или группы лиц. Характеристики крови являются наследственными, в основном постоянными и часто различимыми между разными людьми, даже группами людей.
4. Сыворотки 1(0), 2(А), 3(В) групп дают положительную
реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит 4(АВ) группе. Но
прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию
изогемагглютинации со стандартной сывороткой 4(АВ) группы
нотой же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации
позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к 4(АВ)
группе.
На поверхности это антигены, которые исходят от наших родителей и принадлежат к данной группе крови. Отсутствие или наличие этих антигенов на «наших» эритроцитах, таким образом, определяет нашу принадлежность к группе крови. Группы крови группируются в системы. Существует много «систем», но на практике используются две системы групп крови: система «Резус». В обоих случаях это антигенные системы, прикрепленные к эритроцитам.
В жидкой части крови находятся антитела, которые могут взаимодействовать с этими антигенами. Однако если кровь, содержащую антигены А, смешивают с кровью, содержащей анти-А сгусток крови. Эта реакция называется несовместимостью группы крови. Около 85% европейцев относятся к группе резус-положительной крови. Определение фактора резуса очень важно в случае беременности.
Сведения о группе крови больного вносят в историю болезни, делают соответствующую отметку на титульном листе за подписью врача, проводившего исследование, с указанием даты исследования.
Во всех сомнительных случаях необходимо произвести повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий или с помощью стандартных эритроцитов.
В случае первой беременности это обычно не имеет последствий. Но через секунду существует риск несоответствия крови между матерью и ребенком, если этот второй ребенок снова снова резус: антитела, которые были разработаны матерью - в некоторых случаях - передаются в крови ребенка и вызвать агглютинацию крови у ребенка.
Это осложнение может быть смертельным для ребенка. Поэтому важно знать свою группу крови. И не только в случае беременности. К счастью, сегодня у нас есть необходимые инструменты для определения групп крови, и мы давно знаем, что это «универсальные доноры», которые являются «универсальными реципиентами».
Определение группы крови системы АВО с помощью моноклональных антител анти-А и анти-В (целиклоны анти-А и анти-В). Целиклоны анти-А н анти-В применяются для определения группы крови человека системы АВО взамен стандартных изогемагглютиннруюших сывороток путем выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в целиклонах:
Без знания групп крови одно или другое было бы невозможно. Реакции несовместимости между группой крови донора и реципиента могут привести к серьезным осложнениям и даже привести к смерти реципиента. Во время трансплантации эта несовместимость приведет к отказу от трансплантированного органа. Поэтому необходимо определить группу крови донора и реципиента перед любым переливанием или трансплантацией.
Номер клона должен быть указан в листе данных и флаконе. Соответственно используются внутренние средства контроля качества. Эти два теста должны быть выполнены в двух экземплярах двумя специалистами, вне контекста законно запланированной автоматизации.
Определяют группу крови при температуре от 15 до 25°С. На фарфоровую пластину или маркированную тарелку наносят по одной большой капле целиклонов анти-А и анти-В, рядом наносят каплю исследуемой крови в 10 раз меньшего размера и смешивают отдельными палочками или уголками предметных стекол. Пластинку слегка покачивают и наблюдают за реакцией в течение 2,5 мин. Реакция обычно наступает впервые 3-5 с и проявляется образованием мелких красных агрегатов, а затем хлопьев. Возможны следующие варианты реакции агглютинации.
Это определение должно быть выполнено в двух экземплярах двумя специалистами, вне контекста законно запланированной автоматизации. Эти проверки будут проводиться ежедневно в тех же технических условиях, что и образцы. Они точно изложены в решении от 26 апреля.
Аналитическая проверка типизации эритроцитов основана на. Любая несогласованность между глобулярным тестом и плазменным тестом требует не проверять группу крови, проводить консультирование по переливанию крови и исследовать аномалию. Этот свидетель, если он отрицательный, гарантирует глобулярный тест.
1. Агглютинация отсутствует с целиклонами анти-А и анти-В -
кровь не содержит агглютиногенов А и В - исследуемая кровь
группы 1
2. Агглютинация наблюдается с целиклонами анти-А, эритро-
циты исследуемой крови содержат агглютиноген А - исследуе
мая кровь группы II (А).
3. Агглютинация наблюдается с целиклоном анти-В. Эритро
циты исследуемой крови содержат агглютиноген В - исследуемая
кровь группы II(В).
Этот тест гарантирует, если он отрицательный, плазменный тест. В этом случае определение 2-х технических специалистов с использованием двух разных партий реактивов и свидетелей в настоящее время является обязательным вне контекста автоматизации, предусмотренного арестом 26 апреля.
Любая аномалия требует сначала проверить соответствие реагентов, используемых при анализе результатов, полученных с помощью внутренних контролей качества, их аспекта и даты их истечения. Обнаружение аномалии с участием реагентов требует разрушения реагентов и возобновления анализа с другими конформными реагентами. Аналогично, независимо от вида аномалии, необходимо будет проверить отсутствие изменение качества образца крови, подлежащего тестированию. Гемолизированный или старый образец требует от пациента отбора проб с новым образцом крови.
4. Агглютинация наблюдается с целиклонами анти-А и анти-В.
Эритроциты содержат агглютиногены А и В - исследуемая кровь
группы 4(АВ)
5. При наличии реакции агглютинации с целиклонами анти-А и анти-В [группа крови 4(АВ)] для исключения неспецифической агглютинации производят дополнительное контрольное исследование с изотоническим раствором хлорида натрия. Большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора смешивают с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. Отсутствие агглютинации подтверждает принадлежность исследуемой крови к 4(АВ) группе. При наличии агглютинации проводят определение группы крови с использованием отмытых стандартных эритроцитов.
Неоднозначная реакция: слабая или суб-детектируемая агглютинация. Таким образом, антигенная плотность при рождении ниже, чем у «взрослых» реакционных гормонов, приобретенных примерно через 2 года. Таким образом, интенсивность реакции агглютинации может варьироваться от одного реагента к другому во время набора этих гематок. Документ для группировки крови, установленный по этому случаю, является лишь предварительным значением в течение шести месяцев.
Антигенное ослабление у некоторых субъектов
Антигенная слабость может наблюдаться у некоторых более старых испытуемых, кроме какой-либо конкретной патологии. Гематки пациентов группы А1-группы, в основном из-за бацилларной деацетилазы, наиболее иммунокомпрометированы инфекцией, обычно суперинфекцией рака толстой кишки. Это явление является кратковременным, и группа пациентов А может быть подтверждена на расстоянии от инфекционного эпизода.
Фенотипы Низкий и слабый
В некоторых случаях агглютинация может быть чрезвычайно низкой и присутствие антигенов А или В может быть подтверждено только методом фиксации-элюирования.Цел и клоны анти-А и анти-В выпускаются в жидком виде в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный (анти-А) и синий (анти-В) цвет. Хранят их в холодильнике при температуре 2-8°С. Срок хранения 2 года.
Определение резус-фактора . Исследование крови на резус-принадлежность методом конглютинации проводят с помощью специальных сывороток анти-резус в лабораторных условиях. В экстренных ситуациях возможно определение резус-фактора экспресс методом у постели больного. Предварительно проводят определение групповой принадлежности (по системе АВО).
Низкие фенотипы в других системах
После подтверждения второго образца документ для группировки крови должен быть состояние этого конкретного фенотипа и указывают на соответствующее трансфузионное отношение. Наличие слабых фенотипов в других системах может наблюдаться при наборе эритроцитов в других системах группы крови.
Образ двойной популяции характеризуется наличием агглютинатов на розовом фоне свободных гематок. Реальность этого изображения должна быть проверена под микроскопом. Это может быть связано с существованием двух популяций гематок, обладающих различными антигенами, или с конкретным поведением клеток в присутствии определенных реагентов.
Оснащение: две различные серии стандартных сывороток антирезус, соответствующих групповой принадлежности определяемой крови, или совместимые в групповом отношении стандартные отмытые одногруппные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты, чашка Петри, водяная баня, пипетки для сывороток, предметные стекла или стеклянные палочки.
Наличие определенного клинического контекста. Когда количество переливаемой крови высок, гематит пациента может быть замаскирован: это особенно характерно при переливании при матке или переливании крови при родах. Двойная популяция связана с существованием материнской и неофетальной гематитов. Затем необходим венозный анализ крови.
Двойное население является преходящим и свидетелем «приема» трансплантата в сроке после трансплантации, которое затем может полностью исчезнуть с постепенной заменой полушария реципиента донорами. популяция на расстоянии от трансплантата является свидетелем повторного появления костного мозга реципиента рецидива его болезни.
На чашку Петри наносят подряд 3 большие капли сыворотки анти-резус одной серии и параллельно - 3 капли сыворотки другой серии, получая два горизонтальных ряда сывороток. Затем в 1-Й вертикальный ряд сывороток обеих серий вносят по небольшой капле исследуемой крови (соотношение сыворотки и крови 1.0: 1 или 5: 1), в средний ряд - по такой же капле стандартных резус-положительных эритроцитов (контроль активности) и в 3-й ряд - резус-отрицательные стандартные эритроциты (контроль специфичности). Отдельной для каждой капли стеклянной палочкой или углом предметного стекла тщательно перемешивают сыворотку и эритроциты, чашки закрывают крышкой и помещают на водяную баню при температуре 46-48°С. Спустя 10 мин учитывают результат, просматривая чашку в проходящем свете. В капле со стандартными резус-положительными эритроцитами должна быть агглютинация, в капле с резус-отрицательными эритроцитами она должна отсутствовать. Если в каплях обеих серий сывороток с исследуемыми эритроцитами определяется агглютинация, кровь резус положительная, если она отсутствует,- кровь резус-отрицательная.
Тема без патологии. Некоторые злокачественные гемопатии сопровождаются антигенным ослаблением гематок, полученных из патологических клонов. Двойная популяция развивается с исчезновением болезни в случае рецидива и вновь появляется в случае рецидива. После подтверждения второго образца следует установить временный иммуногематологический документ с подходящим режимом переливания.
Двойная популяция по отношению к нескольким маркерам может наблюдаться у дизиготных близнецов из-за естественной прививки гемопоэтальных стволовых клеток во время эмбриональной жизни. После анализа фенотипа другого близнеца и выявления нескольких двойных популяций должен быть составлен иммуногематологический документ, показывающий состояние гемопоэтической химии и указывающий на подходящее трансфузионное отношение.
Следует помнить о том, что добавлять изотонический раствор хлорида натрия в каплю сыворотки, как это принято при определении групповой принадлежности крови по системе АВО, категорически запрещено, так как это может нарушить реакцию агглютинации.
Для экспресс-метода определения резус-фактора используют специальный реагент - сыворотку анти-резус 4(АВ) группы, разведенную 20-30% раствором альбумина человека или 30- 33% раствора полиглюкина, используемую как вещество, способствующее агрегации эритроцитов при комнатной температуре.
Каплю стандартной сыворотки анти-резус 4(АВ) группы наносят на предметное стекло или чашку Петри и параллельно наносят каплю резус-отрицательной сыворотки 4(АВ) группы, не содержащей антител. К ним добавляют в 2-3 раза меньшего объема каплю исследуемой крови, перемешивают углом предметного стекла, стеклянной палочкой или путем покачивания в течение 3-4 мин, после чего добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия и по истечении 5 мин учитывают реакцию. При наличии агглютинации эритроцитов с сывороткой анти-резус и отсутствии с контрольной сывороткой кровь резус-положительная, при отсутствии агглютинации с обеими сыворотками кровь резус-отрицательная. В случаях появления агглютинации с обеими сыворотками реакцию следует рассматривать как сомнительную и для экстренного переливания следует использовать только резус-отрицательную кровь, а при ее отсутствии в опасной для жизни больного ситуации возможно переливание резус-положительной крови после проведения пробы на совместимость по резус-фактору.
©2015-2017 сайт
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Для определения групповой принадлежности крови необходимо следующее оснащение: два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток I(0), II(А), III (В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки IV(АВ) (в каждую ампулу с сывороткой опускают сухую чистую пипетку), флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, чисто вымытая сухая тарелка, предметные стекла, стерильные копьевидные иглы для прокола кожи пальца, стерильные марлевые шарики, спирт. Определение проводят в помещении с хорошим освещением, при температуре от 15 до 25 ° С.
Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указанием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления. Ампулой без этикетки пользоваться запрещается. Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВ0 выпускают с определённой цветовой маркировкой: I(0) - бесцветная, II (А) - голубая, III (В) - красная, IV(АВ) - жёлтая. Маркировка имеется на этикетке в виде цветных полос: на этикетке сыворотки I(0) полос нет, сыворотки II (А) - две полосы синего цвета, сыворотки III (В) - три полосы красного цвета и сыворотки IV(АВ) - четыре полосы жёлтого цвета. Сыворотки хранят при температуре 4-10 ° С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной, ампула - сохранной. Наличие хлопьев, осадка, помутнения являются признаками непригодности сыворотки. Титр сыворотки должен быть не менее 1:32, активность - высокая: первые признаки агглютинации должны появляться не позднее чем через 30 с. Сыворотки с истекшим сроком хранения к использованию непригодны.
Тарелку делят цветным карандашом на четыре квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I(0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I(0), II (А), III (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьём. Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие капли разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путём покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путём покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации (рис. 37, см. цв. вкл.).
При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зёрнышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании. При отрицательной реакции капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зёрен. Возможны следующие четыре комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками I(0), II(А), III(В) групп.
1. Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь - I(0) группы.
2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой II(А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I(0) и III(В) групп. Исследуемая кровь - II(А) группы.
3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III(В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I(0) и III(А) групп. Исследуемая кровь - III(В) группы.
4. Сыворотки I(0), II(А), III(В) групп дают положительную реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит к IV(АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV(АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV(АВ) группе.
Выявление других комбинаций свидетельствует о неправильном определении групповой принадлежности крови больного.
Сведения о группе крови больного вносят в историю болезни, делают соответствующую отметку на титульном листе за подписью врача, проводившего исследование, с указанием даты исследования.
Ошибки при определении групповой принадлежности крови возможны в ситуациях, когда при фактическом наличии агглютинации она не выявляется или, наоборот, выявляется агглютинация при её фактическом отсутствии. Невыявленная агглютинация может быть обусловлена: 1) слабой активностью стандартной сыворотки или низкой агглютинабельностью эритроцитов; 2) избыточным количеством исследуемой крови, добавляемой к стандартной сыворотке; 3) замедленной реакцией агглютинации при высокой температуре окружающей среды.
Чтобы избежать ошибок, необходимо использовать активные, с достаточно высоким титром сыворотки при соотношении объёма исследуемой крови и стандартной сыворотки 1:5, 1:10. Исследование проводят при температуре не выше 25 ° С, оценивать результаты следует не ранее чем через 5 мин от начала исследования.
Выявление агглютинации при её фактическом отсутствии может быть обусловлено подсыханием капли сыворотки и образованием «монетных» столбиков эритроцитов или проявлением холодовой агглютинации, если исследование проводят при температуре окружающей среды ниже 15 ° С. Добавление капли изотонического раствора хлорида натрия к исследуемой крови и сыворотке и проведение исследований при температуре выше 15 ° С позволяют избежать указанных ошибок. Ошибки в определении группы крови всегда связаны с нарушением методики исследования, поэтому необходимо тщательное соблюдение всех правил исследования.
Во всех сомнительных случаях необходимо повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий или с помощью стандартных эритроцитов.
Определение группы крови по системе АВ0 с помощью моноклональных антител анти-А и анти-В (цоликлоны анти-А и анти-В)
Цоликлоны анти-А и анти-В применяют для определения группы крови человека по системе АВ0 вместо стандартных изогемагглютинирующих сывороток путём выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в цоликлонах.
Моноклональные антитела анти-А и анти-В продуцируются двумя различными гибридомами, полученными в результате слияния мышечных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Названные цоликлоны представляют собой разведённую асцитическую жидкость мышей-носителей гибридомы, содержащую IgM против антигенов А и В. Цоликлоны дают более быструю и более выраженную реакцию агглютинации, чем стандартные АВ0-сыворотки.
Определяют группу крови при температуре от 15 до 25 °С. На фарфоровую пластину или маркированную тарелку наносят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В, рядом наносят каплю исследуемой крови в 10 раз меньшего размера и смешивают отдельными палочками или уголками предметных стекол. Пластинку слегка покачивают и наблюдают за реакцией в течение 2,5 мин. Реакция обычно наступает в первые 3-5 с и проявляется образованием мелких красных агрегатов, а затем хлопьев. Возможны следующие варианты реакции агглютинации.
1. Агглютинация отсутствует с цоликлонами анти-А и анти-В, кровь не содержит агглютиногенов А и В - исследуемая кровь группы I (0) (рис. 38, см. цв. вкл.).
2. Агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А, эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген А - исследуемая кровь группы II(А).
3. Агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В, эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген В - исследуемая кровь группы III (В).
4. Агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А и анти-В, эритроциты содержат агглютиногены А и В - исследуемая кровь группы IV(АВ) (табл. 2).
Таблица 2.
Реакция агглютинации исследуемых эритроцитов с цоликлонами анти-А и анти-В
При наличии реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти- В [группа крови IV(АВ)] для исключения неспецифической агглютинации производят дополнительное контрольное исследование с изотоническим раствором хлорида натрия. Большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора смешивают с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. Отсутствие агглютинации подтверждает принадлежность исследуемой крови к IV(АВ) группе. При наличии агглютинации проводят определение группы крови с использованием отмытых стандартных эритроцитов.
Цоликлоны анти-А и анти-В выпускаются в жидком виде в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный (анти-А) и синий (анти- В) цвета. Хранят в холодильнике при температуре 2-8 °С. Срок хранения 2 года.
