التحديد النوعي للبروتين في البول. تنزيل كتاب "Clinical Laboratory Research" (2.84Mb)

مبدأ الطريقة:

عادة ما تكون الكثافة النسبية للبول 1.015-1.025 جم / سم 3. يتم تحديد الكثافة النسبية للبول باستخدام مقاييس سوائل صغيرة خاصة تسمى أجهزة قياس البول. أجهزة قياس البول من نوعين: الأول للبول بكثافة نسبية منخفضة وعادية (مع أقسام من 1.000 إلى 1.030 جم / سم 3) ، والثاني - للبول بكثافة نسبية عالية (مع أقسام من 1.030 إلى 1.060 جم ​​/ سم 3) ).

تقدم

في أسطوانة صغيرة بقطر يطفو فيه مقياس البول بحرية ، يُسكب بول الاختبار على طول الجدار ويغمر فيه مقياس البول بعناية. تتم القراءة عن طريق أخذ الخط على مقياس مقياس البول ، والذي يتوافق مع الغضروف المفصلي السفلي للسائل. يتم إجراء جميع التحديدات عند درجة حرارة 20 درجة مئوية ، حيث أن مقياس المسالك متدرج وفقًا لدرجة الحرارة هذه. إذا كانت درجة حرارة البول مختلفة ، فكل 3 0 درجة مئوية فوق هذه الدرجة تحتاج إلى إضافتها ، ولكل 3 0 درجة مئوية أدناه - اطرح 0.001 من قراءة مقياس البول.

الكشف عن المكونات المرضية للبول

1. التفاعلات النوعية للكشف عن البروتين في البول - أ) اختبار جيلر مع حمض النيتريك المركز

مبدأ الطريقة:

يتسبب الحمض المعدني المركز HNO 3 في تمسخ البروتين وتشكيل أملاح معقدة من البروتين مع الحمض. عند حدود طبقتين من السوائل ، يتشكل راسب على شكل حلقة بيضاء صغيرة.

تقدم

يُسكب 1 مل من HNO 3 المركز في أنبوب الاختبار ، ويميل أنبوب الاختبار بزاوية 45 0 ويتم وضع 1 مل من البول بعناية على طول الجدار باستخدام ماصة.

ب) اختبار مع حمض السلفوساليسيليك المركز

مبدأ الطريقة:

يتسبب حمض السلفوساليسيليك العضوي المركز في تمسخ البروتين. يرتبط ترسيب البروتين على شكل راسب أو تعكر بجفاف جزيئات البروتين وتكوين أملاح معقدة للبروتين مع الأحماض.

تقدم

إلى 1 مل من البول صب 3 قطرات من 20 ٪ حمض السلفوساليسيليك. في وجود البروتين في البول ، يتشكل راسب أبيض.

2. التحديد الكمي للبروتين في البول باستخدام

اختبار - شرائط "البوفان".

مبدأ الطريقة:

يعتمد الاختبار على مبدأ "مؤشر خطأ البروتين". تحتوي المنطقة التفاعلية على مخزن للأكسجين ومؤشر خاص يتغير لونه من الأصفر إلى الأخضر إلى الأزرق في وجود البروتينات.

الاختبار شديد الحساسية للألبومين ويتفاعل مع وجوده في البول بتركيز 0.10-0.15 جم / لتر. يتم قياس البروتينات عالية الوزن الجزيئي مثل الغلوبولين المناعي بحساسية أقل من الألبومين. لا يتم اكتشاف البروتينات ذات الوزن الجزيئي المنخفض مثل بيتا 2 ميكروغلوبولين وبروتين بينس جونز عمليًا بواسطة هذا الاختبار.

تقييم الاختبار: يعتبر الاختبار الإيجابي إذا تغير لون المنطقة التفاعلية. اعتمادًا على تركيز الألبومين في البول ، يمكن أن تأخذ المنطقة التفاعلية لونًا من الأخضر إلى الأزرق. تتم مقارنة هذه الظلال بمقياس لوني ، تتوافق مناطقه مع تركيزات البروتين 0.3 ، 1 ، 3 ، 10 جم / لتر.

تقدم

دون لمس المنطقة التفاعلية بيديك ، قم بخفض شريط الاختبار لمدة 1-2 ثانية في بول الاختبار بحيث تكون المنطقة مبللة. ثم قم بإزالة البول الزائد من الشريط وبعد حوالي دقيقة قارن لون منطقة الإشارة بمقياس اللون في المجموعة وحدد كمية البروتين ، والتي يتم التعبير عنها بالجرام / لتر.

انت لست عبدا!
دورة تربوية مغلقة لأبناء النخبة: "الترتيب الحقيقي للعالم".
http://noslave.org

من ويكيبيديا، الموسوعة الحرة

اختبار جيلر، سميت على اسم النمساوي عالم الأمراض جي إف هيلر ، الاسم الشائع رد فعل نوعيعلى ال بروتين في البول. العينة لديها حساسية 0.033 جم / لتر وتستخدم في التشخيص السريري بروتينية. يعتمد مبدأ اكتشاف البروتين على تمسخه الطبيعي تحت تأثير عامل تغيير طبيعة - مركز حمض النيتريكأو كاشف Larionova.

وتجدر الإشارة إلى أن كمية معينة من البروتين موجودة دائمًا في البول ، ولكن كقاعدة عامة ، يكون تركيزها في بول الشخص السليم أقل من عتبة الحساسية للتفاعل النوعي ولا يتم اكتشافها بالطرق البسيطة. بالنسبة لكميات البروتين التي تزيد عن 0.033 جم / لتر ، فإن العينة غير مناسبة. في التركيزات الأعلى قم بتخفيف البول أو استخدم مقياس الزلال Esbach.

لتحديد كمية البروتين الكلي في البول ، يتم استخدام طريقة تعتمد على اختبار Geller - طريقة Brandberg-Roberts-Stolnikov (W. Roberts ، 1830-1899 ، معالج إنجليزي). تتضمن هذه التقنية تخفيف البول إلى الحد الأدنى لحساسية العينة (0.033 جم / لتر) وزمن تكوين الحلقة من 2-3 دقائق.

تقدم التحليل

الكواشف: حمض النيتريك المركز (المدخن) أو كاشف لاريونوفا. يجب أن يكون البول المراد اختباره صافياً وحامضياً.

تحضير كاشف Larionova

تحضير محلول مشبع من كلوريد الصوديوم (يذوب 20-30 جم من الملح في 100 مل من الماء الدافئ ، ويترك حتى يبرد). يتم التخلص من المادة الطافية وتصفيتها. أضف إلى 99 مل من المرشح 1 مل من حمض النيتريك المركز (يمكنك استبدال 2 مل حمض الهيدروكلوريك).

تقنية البحث

يتم وضع نفس الكمية تقريبًا من البول بعناية على طول الجدار في أنبوب اختبار مع 1-2 مل من الكاشف. في وجود البروتين ، بعد حوالي 2-3 دقائق ، لوحظ وجود عكارة في السطح الفاصل بين السوائل - حلقة بيضاء من البروتين المشوه.

قد تحدث نتيجة إيجابية خاطئة عند استخدام حمض النيتريك ، بسبب التركيز العالي للألبومين النووي أو أملاح اليورات. في الحالة الأولى ، تختفي عندما يهتز الأنبوب قليلاً ، وفي الحالة الثانية ، تكون الحلقة أعلى بكثير من الواجهة بين الوسائط وتختفي عند تسخينها ؛ عند تكرار الاختبار مع البول المخفف ، لا تتشكل الحلقة. في بعض الأحيان تظهر حلقة مصطبغة بنية اللون أيضًا من أكسدة urochrome بحمض النيتريك.

استخدام كاشف Larionic ، على عكس حمض النيتريك ، له عدد من المزايا: لا تتشكل حلقات الصبغ عند حدود الطبقات ، والنتيجة الإيجابية تعطي حلقات بروتين أكثر وضوحًا.

أنظر أيضا

اكتب تعليقًا على المقالة "اختبار جيلر"

الروابط

المؤلفات

[[C: ويكيبيديا: مقالات بدون صور (الدولة: خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". )]] [[C: Wikipedia: مقالات بدون صور (الدولة: خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". )]]خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر خطأ Lua: وظيفة callParser: لم يتم العثور على الوظيفة "#property". اختبار جيلر

مقتطف يميز اختبار جيلر

لقد تأذيت وحزنت بشدة عليهم ، ونفسي ، ولكل من قاتلوا ، وما زلت أعتقد أنهم يستطيعون تغيير شيء ما ... ولكن هل يستطيعون ذلك؟ .. إذا مات كل من قاتل فقط ، فهل هي ما هو الهدف من هذا؟ حرب؟
وفجأة ظهرت صورة أخرى أمامي مباشرة ...
في نفس "الزنزانة" الحجرية الصغيرة ، حيث لا يزال جسد المجدلين الملطخ بالدماء ملقى على الأرض ، وقف فرسان معبدها حولها ، راكعين ... كانوا جميعًا يرتدون ملابس بيضاء طويلة - ناصعة البياض. . وقفوا حول المجدلية ورؤوسهم الفخورة تنحني ، والدموع تنهمر على وجوههم المؤخرة والمتحجرة في الجداول ... كان أول من قام هو الماجوس ، الذي كان صديقه يوحنا ذات يوم. لقد غمس بعناية أصابعه في الجرح ، كما لو كان خائفًا من إيذاء نفسه ، وبيده الملطخة بالدماء رسم شيئًا يشبه صليبًا دمويًا على صدره ... والثاني فعل الشيء نفسه. فقاموا بدورهم ، وغمسوا أيديهم بوقار في الدم المقدس ، ورسموا صليبًا أحمر على أرديةهم البيضاء الثلجية ... شعرت أن شعري يبدأ في الوقوف عند النهاية. كان مثل نوع من الطقوس المخيفة ، التي ما زلت لا أستطيع فهمها ...
"لماذا يفعلون هذا ، سيفر؟ .." سألته بهدوء ، وكأنهم يخشون أن يسمعوني.
"إنه قسم ، إيسيدورا. قسم الانتقام الأبدي .. أقسموا بدم المجدلية - الدم الأقدس بالنسبة لهم - أن ينتقموا لموتها. ومنذ ذلك الحين ، ارتدى فرسان الهيكل عباءات بيضاء عليها صليب أحمر. لم يكن أي من الغرباء فقط يعرف معناها الحقيقي ... ولسبب ما ، "نسي" الجميع بسرعة أن فرسان المعبد قبل وفاة المجدلية كانوا يرتدون ثيابًا بنية داكنة بسيطة ، وليس "مزينًا" بأي صلبان . كان فرسان الهيكل ، مثل الكاثار ، يكرهون الصليب بالمعنى الذي "تبجله" الكنيسة المسيحية. لقد اعتبروه أداة دنيئة وشريرة للقتل ، وأداة موت. وما رسموه على صدورهم بدم المجدلية كان له معنى مختلف تمامًا. كل ما في الأمر أن الكنيسة "أعادت رسم" معنى فرسان المعبد بالكامل ليناسب احتياجاتها ، مثل كل شيء آخر متعلق برادومير وماغدالينا ....
وبنفس الطريقة ، بعد وفاتها ، أعلنت علنًا أن الراحلة المجدلية كانت امرأة في الشارع ...
- كما أنكر أبناء المسيح وزواجه من المجدلية ...
- كما دمرهما كلاهما "باسم إيمان المسيح" ، حيث حارب كلاهما بضراوة طوال حياته ...
- كما دمروا قطر باسم المسيح ... اسم الشخص الذي علموا إيمانه وعلمه ...
- كما دمرت فرسان الهيكل ، معلنة إياهم أتباع الشيطان ، وسبّوا على أفعالهم بالوحل وقذفهم بالوحل ، وابتذال السيد نفسه ، الذي كان سليلًا مباشرًا لرادومير والمجدلية ...
بعد أن تخلصت من كل من يستطيع أن يشير بطريقة أو بأخرى إلى دناءة ودناء الشياطين "الأقدس" في روما ، خلقت الكنيسة المسيحية أسطورة تم تأكيدها بشكل موثوق من خلال "دليل لا جدال فيه" ، والذي لم يتحقق أحد من أي وقت مضى لسبب ما ، ولم يخطر ببال أحد أن يفكر فيما يحدث.

يتضمن تكوين مكان العمل لتحديد البروتين في البول العناصر التالية:

1. أنابيب اختبار كيميائية ، تراص.
2. مجموعة ماصات متدرجة.
3. الماصات ذات النهاية الضيقة المرسومة.
4. مصابيح الكحول أو موقد الغاز.
5. ورقة سوداء.
6. حمض الخليك الجليدي.
7. حمض السلفوساليسيليك.
8. حمض النيتريك المركز.
9. ماء مقطرة.

طرق تحديد البروتين في البول

تعتمد جميع الطرق المستخدمة في التحديد النوعي للبروتين في البول على تخثر البروتين. يتجلى تخثر البروتين في التعكر بدرجات متفاوتة (من البريق إلى العكارة العالية) أو التقشر.

يمكن إجراء التحديد النوعي للبروتين في البول بإحدى الطرق التالية:

1. الغليان بمحلول حمض الخليك بنسبة 10 ٪ ؛
2. التفاعل مع محلول 20٪ من حمض السلفوساليسيليك ؛
3. التفاعل مع محلول حمض النيتريك بنسبة 50٪ (اختبار جيلر) ؛
4. التفاعل مع محلول 1٪ من حمض النيتريك في محلول مشبع من الملح الشائع (اختبار جيلر المعدل وفقًا لـ Larionova).

قبل التحديد النوعي للبروتين في البول ، يتم تنفيذ الأعمال التحضيرية التالية:
1. يتم ترشيح البول العكر من خلال مرشح ورقي. إذا لم يكن من الممكن الحصول على مرشح شفاف ، يتم إجراء إعادة الترشيح من خلال نفس الفلتر ، أو يتم خلط البول بكمية صغيرة من التراب الدياتومي أو التلك ، وبعد ذلك يتم ترشيحه.
2. إذا كان للبول تفاعل قلوي ، فإنه يتم تحمضه بمحلول 10٪ من حمض الأسيتيك إلى تفاعل حمضي طفيف تحت سيطرة عباد الشمس أو ورقة مؤشر عالمية.
3. ذات محتوى ملح منخفض (أصفر فاتح أو بول أصفر باهت مع ثقل نوعي منخفض) لكل منهما
تُضاف بضع قطرات من محلول كلوريد الصوديوم المشبع إلى العينة ، لأن نقص الأملاح يؤدي إلى تخثر البروتين.
4. لوحظت درجة التعكر باستخدام خلفية سوداء. الخلفية عبارة عن ورق مقوى أسود أو ورق أسود يستخدم في التصوير الفوتوغرافي. يتيح لك حساب التفاعل على خلفية سوداء تحديد أدنى درجة من التعكر.

يتم وضع أنابيب الاختبار المرقمة في رف منفصل. أنها تنتج واحدة من ردود الفعل التالية.

1. اختبار الغليان بمحلول حمض الأسيتيك بنسبة 10٪. يتطلب هذا الاختبار محلول 10 ٪ من حمض الأسيتيك ، والذي يتم تحضيره على النحو التالي: يتم وضع 10 مل من حمض الأسيتيك الجليدي في أسطوانة وتغطيتها بالماء المقطر حتى علامة 100 مل.

تقنية تحديد البروتين. يتم وضع 10-12 مل من البول المرشح للتفاعل الحمضي الطفيف في أنبوب اختبار كيميائي. ثم يتم تسخين الجزء العلوي من أنبوب الاختبار مع البول بلطف حتى الغليان وتضاف إليه 8-10 قطرات من محلول 10٪ من حمض الأسيتيك. يُنظر إلى أنبوب اختبار به بول على خلفية سوداء في الضوء المنقول. في وجود البروتين في البول ، تظهر العكارة بدرجات متفاوتة (من البريق إلى العكارة الشديدة) أو تتساقط الرقائق. التحكم هو الجزء السفلي من أنبوب الاختبار ، ولا يتعرض للتسخين. يكتشف هذا الاختبار كمية البروتين بدءًا من 0.015٪ o (٪ o - promille).

2. التفاعل مع محلول حمض السلفوساليسيليك 20٪. يتم تحضير محلول 20٪ من حمض السلفوساليسيليك على النحو التالي: يذوب 20 جم من حمض السلفوساليسيليك في 70-80 مل من الماء المقطر ، وينقل إلى أسطوانة سعة 100 مل ويعلوها بالماء المقطر حتى العلامة. يتم تخزين الكاشف المحضر في وعاء زجاجي داكن.

تقنية تحديد البروتين. في أنبوبين من نفس القطر ، يتم وضع 2-3 مل من البول المصفى لتفاعل حامض ضعيف ، وتضاف 3-4 قطرات من محلول 20٪ من حمض السلفوساليسيليك إلى أحد الأنابيب إلى البول ، والأنبوب الآخر يخدم كعنصر تحكم. إذا كان البروتين موجودًا في أنبوب الكاشف ، فستظهر عكارة أو رقائق من البروتين المتخثر. في أنبوب التحكم ، يبقى السائل صافياً. حمض السلفوساليسيليك ، جنبًا إلى جنب مع بروتين المصل ، يترسب الألبومات (الببتيدات) ، والتي تنتج عن تكسير البروتين. من أجل توضيح سبب عكر البول ، يتم تسخين أنبوب الاختبار مع البول. يتم تعزيز التعكر الناتج عن بروتينات المصل ، بينما تختفي التعكر بسبب وجود الألبوموز. هذا الاختبار له نفس حساسية الاختبار السابق.

3. تفاعل بمحلول حمض النيتريك بنسبة 50٪ (اختبار جيلر). يتم تحضير محلول 50٪ من حمض النيتريك على النحو التالي: يضاف 50 مل من الماء المقطر (تخفيف 1: 1) إلى 50 مل من حمض النيتريك بثقل نوعي يبلغ 1.2-1.4.

تقنية تحديد البروتين. صب 1 مل من حمض النيتريك بنسبة 50٪ في أنبوب اختبار صغير ضيق (ترصيص ناز). يتم جمع 1 مل من بول الاختبار المفلتر في ماصة ذات نهاية ضيقة ممدودة ، موضوعة في طبقات على الكاشف ، ويتم نقل الأنبوب إلى الوضع الرأسي. في وجود البروتين تظهر حلقة بيضاء في واجهة السوائل. وقت ظهور الحلقة ، وتعتمد خصائصها على كمية البروتين: إذا كان البروتين منخفضًا ، فلن تظهر الحلقة على الفور ، لذلك يتم مراقبة مظهرها لمدة 2.5-3 دقائق. الحد الأدنى من البروتين الذي تحدده هذه الطريقة هو 0.033 درجة / oo. مع انخفاض محتوى البروتين في البول ، لا تتشكل الحلقة. حساب نتائج التفاعل الناتج على خلفية سوداء في الضوء المرسل.

4. التفاعل مع محلول 1٪ من حمض النيتريك في محلول مشبع من الملح الشائع هو اختبار جيلر المعدل (وفقًا لاريونوفا).للاختبار ، يتم استخدام محلول 1٪ من حمض النيتريك ، محضر في محلول مشبع من الملح الشائع (كاشف لاريونوفا). يذوب 35 جم من الملح الشائع في 100 مل من الماء المقطر ، ويرشح المحلول ، ويضاف 99 مل من محلول كلوريد الصوديوم المشبع المحضر إلى 1 مل من حمض النيتريك المركز بثقل نوعي قدره 1.2-1.4.

تقنية تحديد البروتين كما هو الحال في التفاعل مع محلول 50٪ من حمض النيتريك (اختبار جيلر) ، ولكن بدلاً من 1 مل من محلول 50٪ من حمض النيتريك ، يتم سكب 1 مل من كاشف Larionova في أنبوب اختبار و 1 مل من البول طبقات عليه. يشير ظهور حلقة بيضاء عند حدود السوائل إلى وجود بروتين في بول الاختبار. اختبار Larionova حساس مثل اختبار هيلر.

5. اختبار القياس اللوني (الجاف) للتقدير النوعي للبروتين. يعتمد الاختبار اللوني (الجاف) للتحديد النوعي للبروتين في البول على تأثير البروتين على لون المؤشر في محلول عازل.

تقنية تحديد البروتين. يتم غمر قطعة من ورق المؤشر المصمم لتحديد البروتين في البول لفترة قصيرة. تعتبر العينة موجبة إذا تحولت الورقة إلى اللون الأزرق والأخضر.

القياس الكمي للبروتين في البول

يعتمد التحديد الكمي للبروتين في البول على حقيقة أنه عندما يتم وضع طبقة من البروتين في البول على محلول بنسبة 50٪ من حمض النيتريك أو كاشف لاريونوفا ، تتشكل حلقة بيضاء عند حدود سائلين ، وإذا ظهرت حلقة بيضاء صافية في غضون 3 دقائق ، يكون محتوى البروتين 0.033٪ أو 33 مجم في 1000 مل من البول. يشير ظهور الحلقة قبل 3 دقائق إلى وجود محتوى بروتين أعلى في البول.
عند قياس كمية البروتين في البول ، يتم اتباع القواعد التالية:

1. يتم إجراء التحديد الكمي للبروتين فقط في تلك الأجزاء من البول حيث تم اكتشافه نوعياً.
2. يتم التحديد بالبول المصفى بعناية.
3. راقب بدقة تقنية وضع بول الاختبار على محلول 50٪ من حمض النيتريك أو كاشف لاريونوفا في نسبة الكاشف إلى البول (1: 1).
4. يتم تحديد وقت ظهور الحلقة بواسطة ساعة توقيت: في الحساب النهائي لكمية البروتين ، يؤخذ في الاعتبار وقت وضع طبقات من البول على حمض النيتريك ، وهو 15 ثانية.
5. يتم تخفيف البول بناءً على خصائص الحلقة. في هذه الحالة ، يتم تحضير كل تخفيف لاحق للبول من السابق.
6. يتم تحديد الحلقات على خلفية سوداء.

الأكثر شيوعًا هما طريقتان للتقدير الكمي للبروتين في البول: طريقة روبرتس-ستولنيكوف-براندبيرج وطريقة S.L. Erlich و A. Ya. Althausen.

1. طريقة روبرتس-ستولنيكوف-براندبرج.وفقًا لهذه الطريقة ، يتم تحديد كمية البروتين في البول عن طريق تخفيفه حتى تظهر الحلقة تمامًا لمدة 3 دقائق مع الطبقة التالية من البول على محلول 50٪ من حمض النيتريك أو كاشف لاريونوف. يتم حساب كمية البروتين بضرب 0.033٪ في درجة تمييع البول. النتيجة التي تم الحصول عليها تعبر عن كمية البروتين بالملليجرام لكل 1000 مل من البول ، أي جزء في المليون (٪ o).
2. طريقة S.L Erlich و A. Ya. Althausen.يتم وضع عدد من أنابيب التراص في رف ، حيث يتم أولاً سكب 1 مل من محلول 50٪ من حمض النيتريك أو كاشف Larionova. يتم أخذ بول الاختبار باستخدام ماصة منفصلة ونظيفة وجافة ذات نهاية ضيقة ممدودة وطبقات على الكاشف ، وبعد ذلك يتم تشغيل ساعة الإيقاف. يتم مراقبة وقت ظهور الحلقة عن طريق وضع أنبوب الاختبار على خلفية سوداء. عندما تظهر الحلقة ، يتم إيقاف تشغيل ساعة الإيقاف.

عند وضع طبقات من البول ، اعتمادًا على كمية البروتين ، قد تظهر حلقة مدمجة أو عريضة أو تشبه الخيوط. تظهر حلقة مدمجة واسعة على الفور بعد وضع طبقات من البول على الكاشف. قد تظهر الحلقة الشبيهة بالخيط على الفور ، قبل انقضاء دقيقة واحدة ، أو في الفترة الفاصلة من دقيقة إلى 4 دقائق.

عندما تظهر حلقة خيطية في غضون دقيقة إلى 4 دقائق ، فليس من الضروري تخفيف البول!
لحساب كمية البروتين في هذه الحالة ، يكفي استخدام خطة الجدول التي اقترحها المؤلفون (الجدول 1).

مثال 1عند وضع البول على الكاشف ، تشكلت حلقة خيطية بعد دقيقتين. إذا كانت الحلقة قد تشكلت لمدة 3 دقائق ، فإن كمية البروتين ستكون 0.033٪.

في هذه الحالة ، تكونت الحلقة في وقت سابق. التصحيح المقابل ، وفقًا لجدول الخطة ، لمدة دقيقتين هو 1 + 1/8. هذا يعني أن البروتين في هذا الجزء من البول سيكون 1 + 1/8 مرة أكثر من 0.033 درجة / oo ، أي 0.033٪ o X (1 + 1/8) \ u003d 0.037 ° / oo.

عندما تظهر حلقة خيطية لمدة تصل إلى دقيقة واحدة ، أي بعد 40-60 ثانية ، يتم تخفيف واحد للبول بمقدار 1.5 مرة (جزءان من البول + جزء واحد من الماء) ، ثم يتم وضع البول المخفف مرة أخرى على الكاشف ويتم تسجيل مظهر الحلقة. عند حساب النتائج ، يؤخذ في الاعتبار أن البول قد تم تخفيفه 1.5 مرة.

مثال 2بعد تخفيف طبقات البول 1.5 مرة ، ظهرت حلقة خيطية لمدة دقيقتين. إذا ظهرت الحلقة لمدة 3 دقائق ، فسيكون البروتين 0.033٪. التعديل المقابل وفقًا لخطة الجدول ، لمدة دقيقتين هو 1 + 1/8. يحتوي البروتين في البول على 0.033٪ oX1.5X (1 + 1/8) \ u003d 0.056٪ o.

إذا ظهرت الحلقة الخيطية على الفور ، يتم تخفيف البول مرتين (جزء واحد من البول + جزء من الماء). يوضع البول المخفف مرة أخرى على الكاشف ويلاحظ ظهور الحلقة بعد دقيقة واحدة.

مثال 3عند وضع طبقات من البول مخفف مرتين على الكاشف ، ظهرت حلقة خيطية بعد دقيقة واحدة و 15 ثانية. ثم ستكون كمية البروتين في البول قيد الدراسة ، قياسا على الحسابات السابقة ، مساوية
0.033٪ oX2X (1 + 3/8) = 0.091٪.
في حالة ظهور حلقة عريضة ، يتم تخفيف البول 4 مرات (جزء واحد من البول + 3 أجزاء من الماء).
مع الطبقات اللاحقة من البول المخفف ، يمكن أن تتكون حلقة خيطية قبل وبعد دقيقة واحدة. في مثل هذه الحالات ، يتم حساب كمية البروتين عن طريق القياس مع الأمثلة السابقة ، أي 0.033٪ o مضروبة بدرجة التخفيف والتصحيح المقابل.

مثال 1ظهرت الحلقة بعد تخفيف البول 4 مرات على الفور. يخفف البول مرتين. بعد وضع طبقات من البول المخفف 8 مرات (4 × 2) ، تشكلت حلقة خيطية بعد 1.5 دقيقة. في هذه الحالة ، كمية البروتين هي 0.033٪ oX8X1.25 \ u003d 0.33٪ o ، إلخ.
عندما تظهر حلقة مضغوطة ، يتم تخفيف البول 8 مرات (جزء واحد من البول + 7 أجزاء من الماء). عند وضع طبقة لاحقة من البول المخفف على الكاشف ، قد تتكون حلقة مدمجة أو عريضة أو خيطية.

مثال 2عندما تم وضع البول في طبقات على حمض النيتريك ، تشكلت على الفور حلقة مدمجة. يتم تخفيف البول 8 مرات (جزء واحد من البول + 7 أجزاء من الماء) ومرة ​​أخرى يتم وضعه في طبقات. نتج عن هذا مرة أخرى حلقة مضغوطة. ثم يتم تخفيف البول 8 مرات أخرى (لهذا ، يتم أخذ جزء واحد من البول المخفف في أسطوانة أو في أنبوب اختبار ويضاف إليه 7 أجزاء من الماء). بعد طبقة أخرى من البول المخفف ، تشكلت على الفور حلقة خيطية. يخفف البول مرتين (جزء من البول + جزء من الماء). بعد الطبقة التالية من البول المخفف ، تشكلت حلقة خيطية لمدة دقيقتين. يتم حساب كمية البروتين في جزء معين من البول على النحو التالي: 0.033 ،٪ oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4.8٪ o.

بالإضافة إلى جدول الخطة ، يوجد جدول بأرقام البروتين المحسوبة (الجدول 2). إذا لم يتم تخفيف البول ، فستجد كمية البروتين في عمود "البول الكامل غير المخفف". عند تمييع البول بعدد صحيح من المرات (8،4،2) ، يتم استخدام الجدول 1. 1. عند تمييع البول بمقدار 1.5 مرة ، استخدم الطاولة. 2.

تقنية استخدام الجدول لتحديد محتوى البروتين في البول

في الأعمدة المقابلة من الجدول ، يشار إلى وقت ظهور الحلقة ودرجة تمييع البول.
يشير الرقم الموجود عند نقطة تقاطع الخطوط الأفقية والعمودية المرسومة من هذين المؤشرين إلى كمية البروتين في بول الاختبار (٪ o).

من الممكن أنه مع الاختبار النوعي الإيجابي للبروتين ، لا تتشكل الحلقة عند وضعها في طبقات على محلول بنسبة 50٪ من حمض النيتريك. وهذا يعني أن كمية البروتين في البول أقل من 0.033٪. في مثل هذه الحالات ، يُشار إلى كمية البروتين في نموذج التحليل باسم "آثار".

إذا تم تحديد كمية البروتين ، يتم تسجيل محتوى البروتين في ppromille في شكل تحليل البول ، على سبيل المثال ، "البروتين - 0.66٪ o".

بالإضافة إلى التحديد الكمي للبروتين في جزء منفصل من البول ، يتم حساب الكمية اليومية بالجرام. لهذا الغرض ، يتم جمع البول يوميًا وقياس كميته وتحديد محتوى البروتين في البروميل. ثم يتم إجراء الحساب. على سبيل المثال ، الكمية اليومية من البول 1800 مل ، البروتين - 7 درجات / oo. هذا يعني أن البروتين الموجود في الكمية اليومية من البول يحتوي على: 1.8X7 \ u003d 12.6 جم.

يجب أن يتم تصفيته أولاً.

عينة مع حمض السلفوساليسيليك. الأكثر حساسية والأكثر شيوعًا هو الاختبار بمحلول 20٪ من حمض السلفوساليسيليك.

تقدم التعريف. تم وضع علامة على أنبوبين كيميائيين: "O" - تجربة و "K" - تحكم. يتم سكب 4-5 مل من البول الصافي في كلا الأنبوبين. أضف 4-5 قطرات من محلول 20٪ من حمض السلفوساليسيليك إلى أنبوب اختبار تجريبي ، واخلط جيدًا. يتم فحص كلا الأنبوبين جنبًا إلى جنب على خلفية سوداء. في وجود البروتين في أنبوب الاختبار ، لوحظ التعكر. يستخدم أنبوب التحكم للمقارنة. تبلغ حساسية الاختبار بحمض السلفوساليسيليك 0.015 جم / لتر.

منتجات انقسام البروتين - الألبوموز - تعطي أيضًا تفاعلًا إيجابيًا مع حمض السلفوساليسيليك. لتحديد سبب التعكر ، يتم تسخين العينة. في الوقت نفسه ، يختفي الضباب الناجم عن وجود الألبومين ، ويزداد الضباب الناجم عن وجود البروتين.

اختبار حلقة هيلر. تقدم التعريف. صب 1 - 1.5 مل من حمض النيتريك بنسبة 50٪ أو كاشف Larionova في أنبوب الطرد المركزي. ثم طبقة

احماض نفس كمية البول حتى لا يختلط السائل. في وجود البروتين عند حدود السائل ، تظهر حلقة بيضاء. يتم تقييم التفاعل على خلفية سوداء ويؤخذ في الاعتبار وقت ظهور الحلقة الخيطية ، وتكون حساسية العينة 0.033 جم / لتر. مع محتوى البروتين هذا ، تظهر حلقة بيضاء تشبه الخيوط في واجهة السوائل بين الدقيقتين الثانية والثالثة.

تقنية الطبقات. يتم دائمًا فرض البول على الحمض ، لأن الكثافة النسبية للبول أقل من كثافة الأحماض. تتم عملية التصفيف باستخدام ماصة باستور مع بالون ، والذي يجمع كمية صغيرة من البول. ثم يتم إدخال البول في الجزء الضيق من أنبوب الطرد المركزي ، مع إمساكه بزاوية ، متدرجًا قطرة بقطرة ، ويخفض البول ببطء على طول جدران الأنبوب.

عيب العينة هو ظهور حلقة صبغية من أكسدة urochrome بحمض النيتريك ، وهذه الحلقة البنية قد تتداخل مع التحديد. في البول المحتوي على اليورات ، تظهر أحيانًا حلقة بيضاء فوق حدود السائل.

يتم الحصول على نتيجة أوضح لاختبار هيلر إذا تم استخدام كاشف لاريونوفا بدلاً من محلول 50٪ من حمض النيتريك (محلول 1٪ من حمض النيتريك في محلول مشبع من كلوريد الصوديوم).

الكميات

يمكن تحديد كمية البروتين في البول بطريقتين: 1) بواسطة طريقة Brandberg-Roberts-Stolnikov مع تخفيف البول ؛ 2) طبقاً للتعكر الناتج عن إضافة 3٪ حمض السلفوساليسيليك.

طريقة براندبرج-روبرتس-ستولنيكوف. تعتمد هذه الطريقة على اختبار حلقة هيلر. من المعروف أنه عندما يكون محتوى البروتين في البول 0.033 جم / لتر ، تتشكل حلقة خيطية في الدقيقة 2-3.إذا كان البروتين في البول يحتوي على أكثر من 0.033 جم / لتر ، تظهر الحلقة في وقت سابق ، و ليست خيطية واسعة. يجب تخفيف هذا البول بالماء المقطر ومرة ​​أخرى مع طبقات حمض النيتريك مع البول المخفف. إذا ظهرت حلقة شبيهة بالخيوط بين الدقيقتين الثانية والثالثة بعد وضع طبقات ، فيجب اعتبار التخفيف كاملاً. يتم تحديد كمية البروتين في هذه الحالة بضرب 0.033 جم / لتر نانوغرام درجة تخفيف البول. يتم اختيار تمييع البول باستخدام التقييم التقريبي التالي للخصائص! الحلقات: إذا ظهرت حلقة خيطية على الفور بعد وضع طبقات ، يتم تخفيف البول مرتين ، إذا ظهرت حلقة عريضة على الفور ، 4 مرات ، إذا ظهرت حلقة مضغوطة على الفور ، 8 أو 10 مرات.

يتم تخفيف البول في أنبوب قياس للطرد المركزي ، وسكب البول حتى علامة 1 مل وإضافة الماء إلى العلامة ، وكم مرة يتم التخفيف. يتم خلط محتويات أنبوب الاختبار جيدًا باستخدام ماصة باستور بواسطة بالون.

في بعض الأحيان يجب عليك تخفيف البول عدة مرات. في هذه الحالة ، عند حساب كمية البروتين ، يتم أخذ جميع التخفيفات في الاعتبار. مثال. عند وضع طبقات من البول بالكامل ، ظهرت حلقة مضغوطة على الفور. يخفف البول 10 مرات في أنبوب قياس للطرد المركزي (1 مل من البول و 9 مل من الماء للاحتفال 10). طبقة مخففة 10 مرات البول على حمض النيتريك. إذا ظهرت حلقة عريضة على الفور ، فإن التحديد لم يكتمل ، يجب أن يستمر. من أول تخفيف 10 مرات ، من الضروري إجراء تخفيف آخر 4 مرات. سيكون معدل التخفيف الكلي في هذه الحالة 40 (10x4). مع تخفيف البول 40 مرة ، يتم إجراء اختبار حلقة هيلر مرة أخرى. عندما تظهر حلقة خيطية بين الدقائق الثانية والثالثة ، يجب اعتبار التحديد كاملاً.

عند العمل ، يمكنك استخدام تصحيح Erlich-Althausen ، إذا ظهرت الحلقة الخيطية قبل الدقيقة الثانية. من أجل عدم تخفيف البول أكثر ، اقترح المؤلفون تحديد وقت ظهور الحلقة الخيطية وتصحيح حساب الوقت. في هذه الحالة ، يتم حساب كمية البروتين بضرب 0.033 جم / لتر في درجة التخفيف والتصحيح. تم تلخيص قيم التعديلات في الجدول. 3.

الجدول 3. قيم التصحيح لتحديد البروتين

وقت التشكيل "تصحيح الحلقة ، دقيقة وقت التكوين ، تصحيح الحلقة ، دقيقة