Качествено определяне на протеин в урината. Изтеглете книгата "Клинични лабораторни изследвания" (2.84Mb)

Принцип на метода:

Относителната плътност на урината обикновено е 1,015-1,025 g/cm 3 . Определянето на относителната плътност на урината се извършва с помощта на специални малки ареометри, наречени урометри. Урометрите са два вида: първият е за урина с ниска и нормална относителна плътност (с деления от 1000 до 1,030 g / cm3), вторият - за урина с висока относителна плътност (с деления от 1,030 до 1,060 g / cm3). ).

НАПРЕДЪК

В малък цилиндър с такъв диаметър, че урометърът да плува свободно в него, изследваната урина се излива по стената и урометърът внимателно се потапя в нея. Отчитането се извършва чрез вземане на линията на скалата на урометъра, която съответства на долния менискус на течността. Всички определяния се правят при температура от 20 0 C, тъй като скалата на урометъра е градуирана в съответствие с тази температура. Ако урината има различна температура, тогава за всеки 3 0 C над тази температура трябва да добавите и за всеки 3 0 C по-долу - да извадите 0,001 от показанието на скалата на урометъра.

Откриване на патологични компоненти на урината

1. Качествени реакции за откриване на белтък в урината - а) проба на Гелер с концентрирана азотна киселина

Принцип на метода:

Концентрираната минерална киселина HNO 3 причинява денатурация на протеина и образува комплексни соли на протеина с киселина. На границата на два слоя течности се образува утайка под формата на малък бял пръстен.

Напредък

В епруветката се налива 1 ml концентрирана HNO 3, епруветката се накланя под ъгъл 45 0 и с пипета внимателно се наслоява 1 ml урина по стената.

б) тест с концентрирана сулфосалицилова киселина

Принцип на метода:

Концентрираната органична сулфосалицилова киселина причинява денатурация на протеини. Утаяването на протеин под формата на утайка или мътност е свързано с дехидратацията на протеиновите частици и образуването на сложни соли на протеина с киселини.

Напредък

Към 1 ml урина се добавят 3 капки 20% сулфосалицилова киселина. При наличие на белтък в урината се образува бяла утайка.

2. Количествено определяне на протеин в урината с помощта на

тест - ленти "Албуфан".

Принцип на метода:

Тестът се основава на принципа на "грешка на индикаторния протеин". Реактивната зона съдържа кислороден буфер и специален индикатор, който променя цвета си от жълто през зелено до синьо в присъствието на протеини.

Тестът е силно чувствителен към албумин и реагира на наличието му в урината в концентрация 0,10-0,15 g/l. Протеините с високо молекулно тегло като имуноглобулините се измерват с по-малка чувствителност от албумините. Протеини с ниско молекулно тегло като бета-2 микроглобулин, протеин на Bence-Jones практически не се откриват от този тест.

Оценка на теста: положителен тест се счита, ако цветът на реактивната зона се промени. В зависимост от концентрацията на албумин в урината, реактивната зона може да придобие оттенък от зелено до синьо. Тези нюанси се сравняват с цветна скала, чиито зони съответстват на концентрации на протеин от 0,3, 1, 3, 10 g/l.

НАПРЕДЪК

Без да докосвате реактивната зона с ръце, спуснете тест лентата за 1-2 секунди в тест урината, така че зоната да се намокри. След това отстранете излишната урина от лентата и след около 1 минута сравнете цвета на индикационната зона с цветната скала на комплекта и определете количеството протеин, което се изразява в g/l.

Ти не си роб!
Затворен образователен курс за деца от елита: "Истинското устройство на света."
http://noslave.org

От Уикипедия, свободната енциклопедия

Тест на Гелер, по името на австр патолог J.F. Heller, общо име качествена реакцияна белтък в урината. Пробата е с чувствителност 0,033 g/l и се използва в клинична диагностика протеинурия. Принципът на откриване на протеин се основава на неговата денатурация под въздействието на денатуриращ фактор - концентриран азотна киселинаили реактив Ларионова.

Трябва да се отбележи, че определено количество протеин винаги присъства в урината, но по правило концентрацията му в урината на здрав човек е под прага на чувствителност на качествена реакция и не се открива с прости методи. За количества протеин над 0,033 g/l пробата не е подходяща. При по-високи концентрации разредете урината или използвайте албуминометър на Esbach.

За определяне на количеството на общия протеин в урината се използва метод, базиран на теста на Гелер - методът на Брандберг-Робъртс-Столников (W. Roberts, 1830-1899, английски терапевт). Техниката включва разреждане на урината до долната граница на чувствителност на пробата (0,033 g / l) и времето за образуване на пръстен от 2-3 минути.

Напредък на анализа

Реактиви: концентрирана (димяща) азотна киселина или реактив на Ларионова. Урината, която ще се изследва, трябва да е бистра и кисела.

Приготвяне на реактива на Ларионова

Приготвя се наситен разтвор на натриев хлорид (20-30 g сол се разтварят в 100 ml топла вода, оставя се да престои, докато изстине). Супернатантата се изхвърля и филтрира. Към 99 ml от филтрата добавете 1 ml концентрирана азотна киселина (можете да замените 2 ml на солна киселина).

Техника на изследване

Приблизително същото количество урина внимателно се наслоява по стената в епруветка с 1-2 ml от реактива. При наличие на протеин след около 2-3 минути се наблюдава помътняване на границата между течностите - бял пръстен от денатуриран протеин.

При използване на азотна киселина може да възникне фалшив положителен резултат поради високата концентрация на нуклеоалбумин или уратни соли. В първия случай той изчезва при леко разклащане на тръбата, а във втория случай пръстенът е разположен много по-високо от интерфейса между средата и изчезва при нагряване; при повторение на теста с разредена урина пръстенът не се образува. Понякога се появява и кафеникав пигментиран пръстен от окисляване на урохрома с азотна киселина.

Използването на реагента Larionic, за разлика от азотната киселина, има редица предимства: пигментните пръстени не се образуват на границата на наслояване, а положителният резултат дава по-ясни протеинови пръстени.

Вижте също

Напишете отзив за статията "Тест на Гелър"

Връзки

Литература

[[C:Wikipedia:Статии без изображения (държава: Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. )]][[C:Wikipedia:Статии без изображения (държава: Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. )]]Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер Грешка в Lua: callParserFunction: функцията "#property" не беше намерена. Тест на Гелер

Откъс, характеризиращ теста на Гелър

Бях ужасно наранен и тъжен за тях, за себе си и за всички онези, които се бореха, все още вярвайки, че могат да променят нещо... Но можеха ли?.. Ако всички, които се биеха, само умираха, тя Какъв е смисълът от такова война?
Изведнъж друга снимка се появи точно пред мен...
В същата малка каменна “килия”, където на пода все още лежеше окървавеното тяло на Магдалена, около нея коленичиха рицарите от нейния храм... Всички те бяха необичайно облечени в бели - снежнобели дълги дрехи. Те стояха около Магдалена с гордо наведени глави, а сълзите се стичаха по суровите им, вкаменени лица на потоци... Пръв стана Магът, чийто приятел Йоан някога беше. Той внимателно, сякаш се страхуваше да не се нарани, потопи пръсти в раната и с окървавена ръка нарисува на гърдите си нещо подобно на кървав кръст... Вторият направи същото. Така те се надигнаха на свой ред и, като потопиха ръцете си в свята кръв, нарисуваха червени кръстове върху снежнобелите си дрехи... Усетих, че косата ми настръхва. Беше като някакъв зловещ ритуал, който все още не можех да разбера...
„Защо правят това, Север?..“ – попитах тихо, сякаш се страхувах, че ще ме чуят.
— Това е клетва, Айсидора. Клетва за вечно отмъщение... Те се заклеха в кръвта на Магдалена - най-святата кръв за тях - да отмъстят за нейната смърт. Оттогава рицарите на храма носели бели наметала с червени кръстове. Само почти никой от външните лица никога не е знаел истинското им значение ... И по някаква причина всички много бързо „забравиха“, че рицарите на храма преди смъртта на Магдалена бяха облечени в прости тъмнокафяви гащеризони, които не бяха „украсени“ с никакви кръстове . Рицарите на храма, подобно на катарите, мразеха кръста в смисъла, в който християнската църква го „почита“. Те го смятаха за подъл и зъл инструмент за убийство, инструмент за смърт. И това, което рисуваха на гърдите си с кръвта на Магдалена, имаше съвсем друго значение. Просто църквата напълно „преначерта“ значението на Рицарите на храма според нуждите си, както всичко останало, свързано с Радомир и Магдалена...
По същия начин, след смъртта си, тя публично обяви починалата Магдалена за улична жена ...
- също отрече децата на Христос и брака му с Магдалена ...
- също ги унищожи и двамата "в името на Христовата вяра", с която и двамата се бориха яростно през целия си живот ...
- също унищожиха Катар, използвайки името на Христос... името на човека, чиято Вяра и Знание те учеха...
- унищожава и тамплиерите (рицарите на храма), като ги обявява за слуги на дявола, клевети и лее с кал делата им и вулгаризира самия Учител, който е пряк потомък на Радомир и Магдалена...
Отървавайки се от всеки, който по някакъв начин би могъл да посочи низостта и подлостта на „най-светите“ дяволи на Рим, християнската църква създаде легенда, която беше надеждно потвърдена от „неоспорими доказателства“, които никой никога не беше проверил по някаква причина, и на никого не му е хрумвало да мисли какво се случва.

Съставът на работното място за определяне на протеин в урината включва следните елементи:

1. Химични епруветки, аглутинация.
2. Комплект градуирани пипети.
3. Пипети с тесен изтеглен край.
4. Алкохолни лампи или газова горелка.
5. Черна хартия.
6. Ледена оцетна киселина.
7. сулфосалицилова киселина.
8. Концентрирана азотна киселина.
9. Дестилирана вода.

Методи за определяне на протеин в урината

Всички методи, използвани за качествено определяне на протеин в урината, се основават на протеинова коагулация. Коагулацията на протеина се проявява чрез мътност, изразена в различна степен (от опалесценция до висока мътност) или лющене.

Качественото определяне на протеин в урината може да се извърши по един от следните начини:

1. кипене с 10% разтвор на оцетна киселина;
2. реакция с 20% разтвор на сулфосалицилова киселина;
3. реакция с 50% разтвор на азотна киселина (тест на Geller);
4. реакция с 1% разтвор на азотна киселина в наситен разтвор на готварска сол (модифициран тест на Гелер според Ларионова).

Преди качественото определяне на протеина в урината се извършва следната подготвителна работа:
1. Мътната урина се филтрира през хартиен филтър. Ако не е възможно да се получи прозрачен филтрат, се извършва повторно филтриране през същия филтър или урината се смесва с малко количество диатомит или талк, след което се филтрира.
2. Ако урината има алкална реакция, тя се подкислява с 10% разтвор на оцетна киселина до леко кисела реакция под контрола на лакмус или универсална индикаторна хартия.
3. С ниско съдържание на сол (светложълта или бледожълта урина с ниско специфично тегло) за всеки
към пробата се добавят няколко капки наситен разтвор на натриев хлорид, тъй като липсата на соли причинява коагулация на протеина.
4. Степента на мътност се наблюдава на черен фон. Фонът е черен картон или черна хартия, използвани във фотографията. Отчитането на реакцията на черен фон ви позволява да идентифицирате най-малката степен на мътност.

Номерираните епруветки се поставят в отделна стойка. Те предизвикват една от следните реакции.

1. Тест за кипене с 10% разтвор на оцетна киселина. Този тест изисква 10% разтвор на оцетна киселина, който се приготвя по следния начин: 10 ml ледена оцетна киселина се поставят в цилиндър и се допълват с дестилирана вода до 100 ml.

Техника за определяне на протеини. 10-12 ml филтрирана урина с леко кисела реакция се поставят в химическа епруветка. След това горната част на епруветката с урина леко се нагрява до кипене и към нея се добавят 8-10 капки 10% разтвор на оцетна киселина. Епруветка с урина се разглежда на черен фон в пропускаща светлина. При наличие на белтък в урината се появява мътност в различна степен (от опалесценция до голяма мътност) или падат люспи. Контролата е долната част на епруветката, която не е подложена на нагряване. Този тест открива количеството протеин, започвайки от 0,015% o (% o - промил).

2. Реакция с 20% разтвор на сулфосалицилова киселина. 20% разтвор на сулфосалицилова киселина се приготвя по следния начин: 20 g сулфосалицилова киселина се разтварят в 70-80 ml дестилирана вода, прехвърлят се в цилиндър от 100 ml и се долива дестилирана вода до марката. Приготвеният реактив се съхранява в тъмен стъклен съд.

Техника за определяне на протеини. В две епруветки с еднакъв диаметър се поставят 2-3 ml филтрирана урина със слабо кисела реакция, към една от епруветките се добавят 3-4 капки 20% разтвор на сулфосалицилова киселина, другата епруветка служи за контрола . Ако в епруветката с реагента има протеин, ще се появи мътност или люспи от коагулиран протеин. В контролната тръба течността остава бистра. Сулфосалициловата киселина, заедно със серумния протеин, утаява албумози (пептиди), които са продукт на разграждането на протеина. За да се изясни причината за мътна урина, епруветката с урина се нагрява. Мътността, причинена от серумните протеини, се засилва, докато мътността, дължаща се на наличието на албумоза, изчезва. Този тест има същата чувствителност като предишния.

3. Реакция с 50% разтвор на азотна киселина (тест на Гелер). 50% разтвор на азотна киселина се приготвя, както следва: 50 ml дестилирана вода (разреждане 1: 1) се добавят към 50 ml азотна киселина със специфично тегло 1,2-1,4.

Техника за определяне на протеини. Изсипете 1 ml 50% азотна киселина в тясна малка епруветка (аглутинационна утайка). 1 ml филтрирана тестова урина се събира в пипета с тесен изтеглен край, наслагва се върху реагента и епруветката се прехвърля във вертикално положение. В присъствието на протеин се появява бял пръстен на границата на течностите. Времето на появата на пръстена, неговите свойства зависят от количеството протеин: ако протеинът е нисък, тогава пръстенът не се появява веднага, следователно външният му вид се наблюдава за 2,5-3 минути. Минималното количество протеин, определено по този метод, е 0,033°/oo. При по-ниско съдържание на протеин в урината пръстенът не се образува. Отчитане на резултатите от реакцията, получена на черен фон в пропускаща светлина.

4. Реакцията с 1% разтвор на азотна киселина в наситен разтвор на готварска сол е модифициран тест на Гелер (според Ларионова).За теста се използва 1% разтвор на азотна киселина, приготвен в наситен разтвор на готварска сол (реактив на Ларионова). 35 g готварска сол се разтварят в 100 ml дестилирана вода, разтворът се филтрира, 99 ml от приготвения наситен разтвор на натриев хлорид се добавят към 1 ml концентрирана азотна киселина със специфично тегло 1,2-1,4.

Техника за определяне на протеин същото като при реакцията с 50% разтвор на азотна киселина (тест на Geller), но вместо 1 ml 50% разтвор на азотна киселина в епруветка се излива 1 ml реактив на Ларионова и се излива 1 ml урина. наслоени върху него. Появата на бял пръстен на границата на течностите показва наличието на протеин в изследваната урина. Тестът на Larionova е толкова чувствителен, колкото и тестът на Heller.

5. Колориметричен (сух) тест за качествено определяне на протеин. Колориметричният (сух) тест за качествено определяне на протеин в урината се основава на ефекта, който протеинът оказва върху цвета на индикатора в буферен разтвор.

Техника за определяне на протеини. Парче индикаторна хартия, предназначено за определяне на протеина, се потапя в урината за кратко време. Пробата се счита за положителна, ако хартията стане синьо-зелена.

Количествено определяне на протеин в урината

Количественото определяне на протеина в урината се основава на факта, че когато урината, съдържаща протеин, се наслои върху 50% разтвор на азотна киселина или реактив на Ларионова, на границата на две течности се образува бял пръстен, а ако се появи прозрачен бял пръстен с 3 минути, тогава съдържанието на протеин е 0,033% около или 33 mg в 1000 ml урина. Появата на пръстена по-рано от 3 минути показва по-високо съдържание на протеин в урината.
При количествено определяне на протеина в урината се спазват следните правила:

1. Количественото определяне на протеина се извършва само в онези части от урината, където той е открит качествено.
2. Определянето се извършва с внимателно филтрирана урина.
3. Следвайте точно техниката на наслояване на тестовата урина върху 50% разтвор на азотна киселина или реактив на Ларионова в съотношение на реагента към урината (1: 1).
4. Времето на появата на пръстена се определя от хронометър: при окончателното изчисляване на количеството протеин се взема предвид времето за наслояване на урината върху азотна киселина, което е 15 секунди.
5. Урината се разрежда въз основа на свойствата на пръстена. В този случай всяко следващо разреждане на урината се приготвя от предишното.
6. Пръстените са идентифицирани на черен фон.

Най-често срещаните са два метода за количествено определяне на протеин в урината: методът на Робъртс-Столников-Брандберг и методът на С. Л. Ерлих и А. Я. Алтхаузен.

1. Метод на Робъртс-Столников-Брандберг.Съгласно този метод количеството протеин в урината се определя чрез разреждането му, докато следващото наслояване на урината върху 50% разтвор на азотна киселина или пръстенния реагент на Ларионов се появи точно след 3 минути. Количеството протеин се изчислява, като 0,033% се умножи по степента на разреждане на урината. Полученият резултат изразява количеството протеин в милиграми на 1000 ml урина, т.е. в ppm (% o).
2. Методът на С. Л. Ерлих и А. Я. Алтхаузен.В стелаж се поставят редица аглутинационни епруветки, в които първо се излива 1 ml 50% разтвор на азотна киселина или реактив на Ларионова. Тестовата урина се взема с отделна чиста суха пипета с тесен изтеглен край и се наслоява върху реактива, след което се включва хронометърът. Времето на поява на пръстена се следи чрез поставяне на епруветката върху черен фон. Когато се появи пръстенът, хронометърът се изключва.

При наслояване на урината, в зависимост от количеството протеин, може да се появи компактен, широк или нишковиден пръстен. Компактен, широк пръстен се появява веднага след наслояване на урината върху реагента. Нишковидният пръстен може да се появи веднага, преди изтичане на една минута или в интервал от една до 4 минути.

Когато в рамките на една до 4 минути се появи нишковиден пръстен, не е необходимо разреждане на урината!
За да се изчисли количеството протеин в този случай, е достатъчно да се използва табличният план, предложен от авторите (Таблица 1).

Пример 1При наслояване на урината върху реагента се образува нишковиден пръстен след 2 минути. Ако пръстенът се е образувал до 3 минути, тогава количеството протеин ще бъде 0,033%.

В този случай пръстенът се образува по-рано. Съответната корекция, според план таблицата, за време от 2 минути е 1 + 1/8. Това означава, че протеинът в тази част от урината ще бъде 1 + 1/8 пъти повече от 0,033 ° / oo, т.е. 0,033% o X (1 + 1/8) \u003d 0,037 ° / oo.

Когато се появи нишковиден пръстен до 1 минута, т.е. след 40-60 секунди, се прави едно разреждане на урината 1,5 пъти (2 части урина + 1 част вода) и след това разредената урина отново се наслоява върху реагента. и външният вид на пръстена се записва. При изчисляване на резултатите се взема предвид, че урината е разредена 1,5 пъти.

Пример 2След наслояване на урина, разредена 1,5 пъти, след 2 минути се появи нишковиден пръстен. Ако пръстенът се появи след 3 минути, тогава протеинът ще бъде 0,033%. Съответната поправка по таблицата-план, за време от 2 минути е 1 + 1/8. Протеинът в урината съдържа 0,033% oX1,5X (1 + 1/8) \u003d 0,056% o.

Ако нишковидният пръстен се появи веднага, урината се разрежда 2 пъти (1 част урина + 1 част вода). Разредената урина отново се наслоява върху реактива и след 1 минута се отбелязва появата на пръстена.

Пример 3При наслояване на урина, разредена 2 пъти върху реагента, се появява нишковиден пръстен след 1 минута 15 секунди. Тогава количеството протеин в изследваната урина, по аналогия с предишните изчисления, ще бъде равно на
0,033% oX2X (1 + 3/8) \u003d 0,091%.
Ако се появи широк пръстен, урината се разрежда 4 пъти (1 част урина + 3 части вода).
При последващо наслояване на разредена урина може да се образува нишковиден пръстен както преди, така и след една минута. В такива случаи изчисляването на количеството протеин се извършва по аналогия с предишните примери, т.е. 0,033% o се умножава по степента на разреждане и по съответната корекция.

Пример 1Пръстенът след разреждане на урината 4 пъти се появи веднага. Урината се разрежда 2 пъти. След наслояване на урина, разредена 8 пъти (4X2), след 1,5 минути се образува нишковиден пръстен. В този случай количеството протеин е 0,033% oX8X1,25 \u003d 0,33% o и т.н.
Когато се появи компактен пръстен, урината се разрежда 8 пъти (1 част урина + 7 части вода). При последващо наслояване на разредена урина върху реагента може да се образува или компактен, или широк, или нишковиден пръстен.

Пример 2Когато урината се наслои върху азотна киселина, веднага се образува компактен пръстен. Урината се разрежда 8 пъти (1 част урина + 7 части вода) и отново се наслоява. Това отново доведе до компактен пръстен. След това урината се разрежда още 8 пъти (за това 1 част от разредената урина се поема в цилиндър или в епруветка и към нея се добавят 7 части вода). След още едно наслояване на разредена урина веднага се образува нишковиден пръстен. Урината се разрежда 2 пъти (1 част урина + 1 част вода). След следващото наслояване на разредена урина, за 2 минути се образува нишковиден пръстен. Изчисляването на количеството протеин в дадена част от урината се извършва, както следва: 0,033,% oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4,8% o.

В допълнение към плановата таблица има таблица с изчислени протеинови числа (Таблица 2). Ако урината не е разредена, тогава количеството протеин се намира в колоната "Цяла неразредена урина". При разреждане на урината с цяло число пъти (8,4,2) се използва таблица 1. 1. Когато разреждате урината 1,5 пъти, използвайте таблицата. 2.

Техника за използване на таблица за определяне на съдържанието на протеин в урината

В съответните колони на таблицата са посочени времето на появата на пръстена и степента на разреждане на урината.
Числото, разположено в точката на пресичане на хоризонталните и вертикалните линии, изтеглени от тези два индикатора, показва количеството протеин в тестовата урина (% o).

Възможно е при положителен качествен тест за протеин пръстенът да не се образува при наслояване върху 50% разтвор на азотна киселина. Това означава, че количеството протеин в урината е по-малко от 0,033%. В такива случаи количеството протеин във формуляра за анализ се означава като "следи".

Ако протеинът е количествено определен, съдържанието на протеин в ppromille се отбелязва във формата за анализ на урината, например „протеин - 0,66% o“.

В допълнение към количественото определяне на протеина в отделна част от урината се изчислява дневното му количество в грамове. За целта се събира дневна урина, измерва се нейното количество и се определя съдържанието на протеин в промила. След това се прави калкулация. Например, дневното количество урина е 1800 ml, протеин - 7 ° / oo. Това означава, че протеинът в дневното количество урина съдържа: 1,8X7 \u003d 12,6 g.

първо трябва да се филтрира.

Проба със сулфосалицилова киселина. Най-чувствителен и често срещан е тестът с 20% разтвор на сулфосалицилова киселина.

Напредък на дефиницията. Две химични епруветки са маркирани: "О" - опит и "К" - контрола. В двете епруветки се наливат 4-5 ml чиста урина. Добавете 4-5 капки 20% разтвор на сулфосалицилова киселина в експериментална епруветка, разбъркайте добре. И двете епруветки се изследват една до друга на черен фон. При наличие на протеин в епруветката се отбелязва мътност. Контролната тръба се използва за сравнение. Чувствителността на теста със сулфосалицилова киселина е 0,015 g/l.

Продуктите на разцепване на протеини - албумоза - също дават положителна реакция със сулфосалицилова киселина. За да се определи причината за мътността, пробата се нагрява. В този случай замъгляването, причинено от наличието на албумин, изчезва и замъгляването, причинено от наличието на протеина, се увеличава.

Пръстенов тест на Хелър. Напредък на дефиницията. Изсипете 1 - 1,5 ml 50% азотна киселина или реактив на Ларионова в центрофужна епруветка. След това слой върху

киселина същото количество урина, така че течността да не се смесва. При наличие на протеин на границата на течността се появява бял пръстен. Реакцията се оценява на черен фон и се отчита времето на поява на нишковидния пръстен.Чувствителността на пробата е 0,033 g/l. При това съдържание на протеин се появява бял нишковиден пръстен на повърхността на течностите между 2-рата и 3-тата минута.

техника на наслояване. Урината винаги се наслагва върху киселина, тъй като относителната плътност на урината е по-ниска от тази на киселините. Напластяването се извършва с пастьорова пипета с балон, която събира малко количество урина. След това урината се въвежда в тясната част на центрофужната епруветка, като се държи под ъгъл, наслоява се капка по капка, като бавно се спуска урината по стените на епруветката.

Недостатъкът на пробата е появата на пигментен пръстен от окисляването на урохром с азотна киселина.Този кафеникав пръстен може да попречи на определянето. В урината, съдържаща урат, понякога се появява белезникав пръстен над границата на течността.

По-ясен резултат от теста на Хелър се получава, ако вместо 50% разтвор на азотна киселина се използва реактив на Ларионова (1% разтвор на азотна киселина в наситен разтвор на натриев хлорид).

количествено определяне

Количеството протеин в урината може да се определи по два начина: 1) по метода на Brandberg-Roberts-Stolnikov с разреждане на урината; 2) според мътността, образувана от добавянето на 3% сулфосалицилова киселина.

Метод Брандберг-Робъртс-Столников. Този метод се основава на пръстеновидния тест на Heller. Известно е, че когато съдържанието на протеин в урината е 0,033 g / l, на 2-3-та минута се образува нишковиден пръстен.Ако протеинът в урината съдържа повече от 0,033 g / l, тогава пръстенът се появява по-рано и не широк нишковиден. Такава урина трябва да се разреди с дестилирана вода и отново да се наслои с азотна киселина с разредена урина. Ако след наслояването между 2-рата и 3-тата минута се появи нишковиден пръстен, тогава разреждането трябва да се счита за завършено. Количеството протеин в този случай се определя чрез умножаване на 0,033 g/l ng по степента на разреждане на урината. Разреждането на урината се избира, като се използва следната приблизителна оценка на свойствата! пръстени: ако веднага след наслояването се появи нишковиден пръстен, урината се разрежда 2 пъти, ако веднага се появи широк пръстен, 4 пъти, ако веднага се появи компактен пръстен, 8 или 10 пъти.

Разреждането на урината се извършва в епруветка за измерване на центрофуга, като се налива урина до марката 1 ml и се добавя вода до марката, колко пъти се прави разреждането. Съдържанието на епруветката се разбърква старателно с пастьорска пипета с балон.

Понякога трябва да разреждате урината няколко пъти. В този случай при изчисляване на количеството протеин се вземат предвид всички разреждания. Пример. При наслояване на цяла урина веднага се появи компактен пръстен. Урината се разрежда 10 пъти в епруветка за измерване на центрофуга (1 ml урина и 9 ml вода до марка 10). Слой разредена 10 пъти урина върху азотна киселина. Ако незабавно се появи широк пръстен, тогава определянето не е завършено, то трябва да продължи. От първото разреждане от 10 пъти е необходимо да се направи друго разреждане от 4 пъти. Общата степен на разреждане в този случай ще бъде 40 (10x4). С урина, разредена 40 пъти, отново се поставя пръстеновидният тест на Heller. Когато между 2-рата и 3-тата минута се появи нишковиден пръстен, определянето трябва да се счита за завършено.

Когато работите, можете да използвате корекцията на Erlich-Althausen, ако нишковидният пръстен се появи преди 2-рата минута. За да не се разрежда допълнително урината, авторите предлагат да се определи времето на появата на нишковидния пръстен и да се коригира изчислението за време. В този случай количеството протеин се изчислява, като 0,033 g/l се умножи по степента на разреждане и по корекцията. Стойностите на измененията са обобщени в табл. 3.

Таблица 3. Корекционни стойности за определяне на протеин

Време за формиране" Корекция на пръстена, мин. Време за формиране Корекция на пръстена, мин