Dom › Zanimljivo je › Određivanje individualne kompatibilnosti krvi. Testovi kompatibilnosti tijekom transfuzije krvi

Određivanje individualne kompatibilnosti krvi. Testovi kompatibilnosti tijekom transfuzije krvi

pojedinosti

Prilikom transfuzije krvi liječnik mora učiniti sljedeće:
1. Odrediti indikacije za transfuziju krvi, identificirati kontraindikacije, prikupiti transfuzijsku anamnezu.
2. Odredite krvnu grupu i Rh faktor primatelja.
3. Odabrati odgovarajuću (jednogrupnu i jednorezusnu) krv i makroskopski ocijeniti njezinu prikladnost.
4. Ponovno provjerite krvnu grupu davatelja (iz bočice) prema ABO sustavu.
5. Provesti test individualne kompatibilnosti prema ABO sustavu.
6. Provesti test za individualnu kompatibilnost prema Rh faktoru.
7. Provedite biološki test.
8. Obavite transfuziju krvi.
9. Ispunite dokumentaciju.

PRIKUPLJANJE TRANSFUZIOL0G0 ANAMNEZA

Od pacijenta je potrebno saznati poznaje li svoju skupinu i Rh faktor (koristi se kao dodatna informacija), jesu li u prošlosti bile transfuzije krvi i njezinih komponenti, je li bilo komplikacija. Kod žena je potrebno utvrditi prisutnost trudnoća i njihovih komplikacija (osobito kod Rh negativnih žena).

MAKROSKOPSKA OCJENA PODOBNOSTI KRVI

Tijekom vizualnog pregleda potrebno je obratiti pažnju na:
■ Ispravnost.
■ Rok trajanja.
■ Čvrsto pakiranje.
■ Krv treba podijeliti u tri sloja (crveni eritrociti na dnu, uska siva traka leukocita i trombocita iznad, žuta prozirna plazma iznad njih).
■ Plazma mora biti bistra, bez filmova i ljuskica (zaražena krv) i ugrušaka te bez crvene boje (hemoliza).
Ako barem jedan od navedenih zahtjeva nije ispunjen makroskopskom procjenom, takva se krv ne može transfuzirati.

TESTOVI INDIVIDUALNE KOMPATIBILNOSTI

Prije postavljanja reakcija primatelju se uzima krv iz vene koja se dijeli na ugrušak i serum (taloženjem ili centrifugiranjem).

a) Test individualne kompatibilnosti prema ABO sustavu
Velika kap (0,1 ml) krvnog seruma primatelja i mala kap (0,01 ml) krvi darivatelja iz bočice se nanose na bijelu površinu i međusobno se miješaju, povremeno protresajući ploču. Reakcija se provodi na temperaturi od 15-25 ° C, rezultati se procjenjuju nakon 5 minuta: odsutnost aglutinacije eritrocita davatelja ukazuje na kompatibilnost krvi davatelja i primatelja prema ABO sustavu. Pojava aglutinacije ukazuje na njihovu nekompatibilnost - takva se krv ne može transfuzirati ovom pacijentu.

b) Testirajte individualnu kompatibilnost prema Rh faktoru
Nakon što je utvrđena kompatibilnost krvi davatelja i primatelja prema ABO sustavu, potrebno je utvrditi kompatibilnost u odnosu na Rh faktor. Test kompatibilnosti Rh faktora može se provesti na jedan od dva načina:
■ test s 33% poliglucinom,
■ test korištenjem 10% želatine.
U kliničkoj praksi najviše se koristi test s poliglucinom.

Uzorak pomoću 33% poliglucina
Reakcija se provodi u epruveti za centrifugiranje bez zagrijavanja 5 minuta. Na dno epruvete dodaju se 2 kapi seruma primatelja, 1 kap krvi davatelja i 1 kap 33% otopine poliglucina. Nakon toga sadržaj se miješa naginjanjem epruvete i rotiranjem oko svoje osi, pri čemu se sadržaj ravnomjerno raspoređuje po stjenkama. Epruveta se okreće 5 minuta, nakon čega se doda 3-4 ml fiziološke otopine i lagano promiješa, naginjući epruvetu 2-3 puta u vodoravnu ravninu (bez mućkanja!). Nakon toga se procjenjuje rezultat: prisutnost aglutinacije eritrocita ukazuje na nekompatibilnost krvi davatelja i primatelja prema Rh faktoru, takva se krv ne može transfuzirati. Ujednačeno bojenje sadržaja u epruveti, odsutnost reakcije aglutinacije ukazuje na kompatibilnost krvi davatelja i primatelja u smislu Rh faktora.

Uzmite uzorak koristeći 10% želatinu
Na dno epruvete stavi se 1 kap eritrocita donora prethodno ispranih deseterostrukim volumenom fiziološke otopine, zatim se dodaju 2 kapi 10% otopine želatine zagrijane do ukapljivanja i 2 kapi seruma primatelja.
Pomiješajte sadržaj epruvete i stavite vodena kupka na temperaturi od 46-48 C 10 minuta. Nakon toga se u epruvetu doda 6-8 ml fiziološke otopine, sadržaj se pomiješa, okrećući epruvetu 1-2 puta i ocjenjuje se rezultat: prisutnost aglutinacije ukazuje na nekompatibilnost krvi davatelja i primatelja. , njegova transfuzija je neprihvatljiva.

Ako sadržaj epruvete ostane jednoliko obojen i nema reakcije aglutinacije, krv davatelja je prema Rh faktoru kompatibilna s krvlju primatelja.
Kod nekih primatelja (u prisutnosti nepotpunih latentnih ili blokirajućih protutijela, niske aktivnosti imunoloških protutijela) ovi testovi ne otkrivaju nekompatibilnost. U tim slučajevima provodi se individualni odabir krvi darivatelja.
Individualni odabir krvi davatelja potreban je za sljedeće skupine primatelja:
1. Izoimunizirani prethodnim transfuzijama krvi ili trudnoćama.
2. Oni koji su prošli komplikaciju transfuzije krvi.
3. Potrebna masivna transfuzija krvi.
4. Ako je nemoguće preuzeti kompatibilna krv konvencionalni testovi kompatibilnosti.

BIOLOŠKI UZORAK

postoji veliki broj manje skupine sustava koji mogu uzrokovati komplikacije. Kako bi se isključila ova mogućnost, na početku transfuzije krvi provodi se još jedan test kompatibilnosti - biološki test.

Najprije se mlazom transfuzira 10-15 ml krvi, nakon čega se transfuzija prekida (začepi kapaljka) i prati se stanje bolesnika 3 minute. S odsutnošću kliničke manifestacije reakcije ili komplikacije (povećan broj otkucaja srca, disanje, otežano disanje, otežano disanje, crvenilo lica itd.) ponovno se uvodi 10-15 ml krvi i ponovno se promatra bolesnika 3 minute. Ovo se ponavlja tri puta.

Izostanak reakcija kod bolesnika nakon trostruke provjere znak je kompatibilnosti infundirane krvi i služi kao temelj za provođenje cjelokupne transfuzije krvi.
Ako je krv davatelja i primatelja nekompatibilna tijekom biološke pretrage, ponašanje bolesnika postaje nemirno: tahikardija, otežano disanje, crvenilo lica, osjećaj zimice ili topline, stezanje u prsima, bolovi u trbuhu i vrlo važna značajka- Bolovi u lumbalnoj regiji.
Kada se pojave ovi znakovi, krv se smatra nekompatibilnom i ne provodi se transfuzija krvi.

PROVEDBA HEMO TRANSFUZIJE

U nedostatku znakova biološke nekompatibilnosti, započinje transfuzija krvi kap po kap. Prije transfuzije, bočica transfuzirane krvi mora biti na sobna temperatura unutar 30-40 minuta, au hitnim slučajevima zagrijava se na 37 ° C u vodenoj kupelji. Transfuzija se provodi pomoću jednokratnog sustava za transfuziju krvi s filtrom, obično brzinom od 40-60 kapi u minuti.
Tijekom transfuzije krvi nastavlja se praćenje stanja bolesnika. Nakon transfuzije posuda s ostacima transfuzijskog medija (oko 15 ml) i serumom primatelja čuvaju se 2 dana u hladnjaku kako bi se mogla analizirati komplikacije transfuzije krvi ako se one razviju.

POPUNJAVANJE DOKUMENTACIJE

Nakon završetka transfuzije, liječnik upisuje protokol transfuzije krvi u povijest bolesti:
■ indikacije za transfuziju,
■ podaci iz putovnice svake bočice: ime davatelja, krvna grupa, Rh-pripadnost, broj bočice, datum uzimanja krvi,
■ krvnu grupu i Rh faktor primatelja i darivatelja,
■ rezultate pretraga individualne podudarnosti krvi davatelja i primatelja prema ABO sustavu i Rh faktoru,
■ rezultat biološkog uzorka,
■ prisutnost reakcija i komplikacija,
■ datum, ime liječnika koji je izvršio transfuziju krvi, potpis.

PROMATRANJE BOLESNIKA NAKON HEMOTRANSFUZIJE

Primatelj nakon transfuzije krvi promatra 2 sata mirovanje a tijekom dana ga promatra dežurni i dežurni liječnik. Posebno pažljivo praćenje provodi se tijekom prva tri sata nakon transfuzije krvi. Procjenjuje se prisutnost tegoba, promjene u općem stanju, svakih sat vremena mjeri se tjelesna temperatura, puls i krvni tlak. Potrebno je makroskopski procijeniti prvu porciju urina nakon transfuzije krvi, obratiti pozornost na očuvanost mokrenja i boju urina.
Sljedeći dan obvezno je napraviti kliničku analizu krvi i opća analiza urin.

TESTOVI INDIVIDUALNE KOMPATIBILNOSTI DARIVATELJA I PRIMATELJA KRVI

Svrha individualnog testa kompatibilnosti je spriječiti transfuzije nekompatibilnih crvenih krvnih stanica. Testiranje seruma primatelja s eritrocitima namjeravanog darivatelja je najviše pouzdan način otkrivanje protutijela koja mogu uzrokovati oštećenje transfuziranih eritrocita, posttransfuzijske reakcije, uključujući hemolitičke. Ovaj vam test omogućuje sljedeće:

potvrditi ABO kompatibilnost davatelja i primatelja;
identificirati sva protutijela u serumu primatelja usmjerena protiv antigena eritrocita donora.

Test za individualnu kompatibilnost krvi za antigene ABO sustava

Napredak definicije:

na čistu, suhu površinu tablete ili ploče na sobnoj temperaturi nanijeti i pomiješati serum primatelja i krv darivatelja u omjeru 10:1;
povremeno tresući tabletu, promatrajte tijek reakcije;
u nedostatku aglutinacije unutar 5 minuta, krv je kompatibilna. Prisutnost aglutinacije ukazuje na nekompatibilnost krvi primatelja i davatelja. Ova se krv ne može transfuzirati. U sumnjivim slučajevima, rezultat testa prati se pod mikroskopom: u prisutnosti "stupaca novčića" koji nestaju nakon dodavanja tople (+37 ° C) 0,9% otopine natrijevog klorida, krv je kompatibilna; ako su u kapi smjese vidljivi aglutinati koji se ne rasprše kada se doda topla 0,9% otopina natrijeva klorida, krv je inkompatibilna.

Test kompatibilnosti krvi za antigene Rhesus sustava pomoću 33% otopine poliglucina

Budući da je osjetljivost ovog testa niska, koristite ga u stacionarnom stanju medicinske ustanove Nije preporučeno. Dopušteno je provesti test kompatibilnosti s 33% otopinom poliglucina ako je potrebno provesti transfuziju krvi u ekstremnim uvjetima.

Test kompatibilnosti za antigene Rhesus sustava ne zamjenjuje, već nadopunjuje test kompatibilnosti za antigene ABO sustava.

Napredak definicije:

Na dno označene epruvete dodaju se 2 kapi seruma bolesnika, jedna kap krvi davatelja i jedna kap 33% otopine poliglucina;
promiješajte sadržaj epruvete mućkanjem;
polako okrenite epruvetu tako da se sadržaj rasporedi po stjenkama epruvete. To povećava ozbiljnost reakcije aglutinacije;
nakon 5 minuta dodajte 2-3 ml fiziološke otopine;
promiješajte sadržaj laganim okretanjem epruvete 2-3 puta bez mućkanja;
prisutnost aglutinacije u epruveti ukazuje na to da krv davatelja nije kompatibilna s krvlju pacijenta i stoga se ne može transfuzirati. Ako sadržaj epruvete ostane jednoliko obojen i nema znakova aglutinacije eritrocita, krv je kompatibilna.

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću centrifugiranja

Napredak definicije:

stavite 2 kapi seruma primatelja na dno označene epruvete;
dodati 1 kap 5% suspenzije tri puta ispranih eritrocita donora u otopini niske ionske jakosti - RNIS (u nedostatku RNIS može se koristiti fiziološka otopina, u tom slučaju pogoršava se fiksacija antitijela). Metoda pripreme 5% suspenzije tri puta ispranih eritrocita navedena je u opisu neizravnog Coombsovog testa;
neposredno nakon miješanja eritrocita davatelja i seruma primatelja uzorak se centrifugira 15-20 s na 2000 okretaja u minuti;
lagano protresajući epruvetu, resuspendirajte stanični sediment i vizualno odredite prisutnost aglutinata. Prisutnost hemolize i/ili aglutinata može značiti:
- a) nekompatibilnost prema ABO sustavu;
- b) prisutnost u serumu primatelja kompletnih hladnih protutijela različite specifičnosti (anti-M, anti-N, anti-S, itd.).

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću otopine želatine

Potrebno je koristiti čistu, bez listića, prozirnu želatinu, koja se stvrdnjava na temperaturi od +4°C. Želatinu ne treba zamrzavati. Da bi se isključila nespecifična aglutinacija eritrocita s otopinom želatine, preporučljivo je provjeriti svaku seriju želatine u kontroli s nesenzibiliziranim eritrocitima.

Napredak definicije:

zagrijavana 10% otopina želatine u vodenoj kupelji da se ukapi (+46-48°C) 10 minuta;
2 kapi zagrijane 10% otopine želatine dodaju se u smjesu eritrocita donora i seruma primatelja (u omjeru 1:2) i dobro promiješaju;
10 minuta inkubirati epruvetu na +46-48°C u vodenoj kupelji ili 30 minuta u termostatu;
dodajte 5-8 ml fiziološke otopine i lagano promiješajte, okrećući epruvetu 1-2 puta;
vizualno odrediti prisutnost ili odsutnost aglutinacije eritrocita. Na negativan rezultat prenijeti kap suspenzije eritrocita iz epruvete na predmetno staklo i mikroskopirati pri malom povećanju.

Kao negativna kontrola koriste se sljedeći uzorci:

a) mješavina donorskih eritrocita sa želatinom i 0,9% otopinom natrijevog klorida (u omjeru 1:2:2);
b) mješavina eritrocita i seruma primatelja sa želatinom (u omjeru 1:2:2).

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću antiglobulinskog reagensa

Nemojte ponovno zamrzavati-otapati antiglobulinski reagens. Za kontrolu kvalitete antiglobulinskog reagensa preporučljivo je provesti antiglobulinski test s Rh pozitivnim eritrocitima senzibiliziranim IgG (nepotpunim) anti-D protutijelima.

Napredak definicije:

Provedite test za individualnu kompatibilnost krvi pomoću centrifugiranja. Ako se ne otkrije hemoliza, a eritrociti stvaraju homogenu suspenziju nakon mućkanja epruvete:

inkubirajte epruvetu na 37°C: 15 minuta kada koristite RNIS ili 45 minuta kada koristite fiziološku otopinu;
centrifugirajte epruvetu 15-20 s na 2000-3000 o/min;
vizualno odrediti prisutnost hemolize u supernatantu;
lagano protresajući epruvetu, resuspendirajte stanični sediment i vizualno odredite prisutnost aglutinata. Prisutnost hemolize i/ili aglutinata ukazuje da primatelj ima potpuna topla antitijela na antigene eritrocita donora;
u nedostatku hemolize i aglutinacije, eritrociti se temeljito isperu 3-4 puta, svaki put s 5-10 ml fiziološke otopine;
ukloniti slanu otopinu;
dodajte 1-2 kapi antiglobulinskog reagensa u sediment eritrocita i dobro promiješajte;
centrifugirati 15-20 s na 2000-3000 o/min;
nježno resuspendirajte sediment eritrocita i vizualno odredite prisutnost ili odsutnost aglutinacije;
vizualno odrediti prisutnost ili odsutnost aglutinacije eritrocita.

Ako je rezultat negativan, kap suspenzije eritrocita se iz epruvete prenese na predmetno staklo i mikroskopira pod malim povećanjem.

Kada se otkrije aglutinacija, krv davatelja i primatelja je nekompatibilna za antigene eritrocita.

Kao uzorci negativne kontrole koriste se:

mješavina 5% suspenzije ispitivanih eritrocita s 0,9% otopinom natrijeva klorida (u omjeru 1:2) - kontrola spontane aglutinacije;
mješavina 5% suspenzije ispitivanih eritrocita s antiglobulinskim reagensom (u omjeru 1: 2) - kontrola autosenzibilizacije.

Kontrola aktivnosti antiglobulinskog reagensa (uvijek pozitivna reakcija) je mješavina 5% suspenzije donorskih eritrocita skupine 0 (I) D + senzibiliziranih anti-Rh serumom (sadrži anti-D antitijela klase IgG) i antiglobulinski reagens (u omjeru 1:2).

Praćenje specifičnosti antiglobulinskog reagensa (uvijek povratni udar) - mješavina 5% suspenzije donorskih eritrocita skupine 0 (I) D - (nakon inkubacije s anti-Rhesus serumom tijekom 45 minuta) i antiglobulinskog reagensa (u omjeru 1: 2).

Čuvajte antiglobulinski reagens zamrznut na -20°C (suhi reagens može se čuvati na sobnoj temperaturi). Ponovljeno zamrzavanje-odmrzavanje reagensa je neprihvatljivo.

Razlozi lažno pozitivnih rezultata:

prisutnost autoantitijela na površini testnih eritrocita;
testni eritrociti sadrže mikrobne nečistoće;
kršenje načina centrifugiranja ( mehanička oštećenja membrane eritrocita pod prekomjernim opterećenjem).

Razlozi za lažno negativne rezultate:

testni eritrociti su slabo oprani ili su na stijenkama epruvete prisutni ostaci serumskih proteina;
kršenje režima pranja ili inkubacije;
gubitak aktivnosti seruma ili ispitnih eritrocita tijekom skladištenja;
niska aktivnost antiglobulinskog reagensa;
nedovoljno vrijeme inkubacije.

Stranica

Praktična transfuziologija / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. itd. - Moskva: Triada-T, 1996. - 435 str.

Vodič za vojnu transfuziologiju / Ed. E. A. Nečajev. - Moskva, 1991. - 280 str.

Vodič za transfuzijsku medicinu / Ed. E. P. Svedentsova. - Kirov, 1999.- 716s.

Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Klinička transfuziologija.- M.: GEOTAR MEDICINA, 1997.- 575 str.

Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Sigurna transfuzija krvi: Vodič za liječnike - St. Petersburg: Peter, 2000. - 320 str.

Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Imunološka i infektivna sigurnost hemokomponentne terapije - St. Petersburg: Nauka, 1998. - 232 str.

Schiffman F.J. Patofiziologija krvi / Per. s engleskog - M. - St. Petersburg: Izdavačka kuća BINOM - Nevski dijalekt, 2000. - 448 str.

Transfuzija krvi u kliničkoj medicini / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 str.

Izvor: Medicinsko laboratorijska dijagnostika, programi i algoritmi. ur. prof. Karpishchenko A.I., St. Petersburg, Intermedica, 2001

Kod transfuzije krvnih sastojaka koji sadrže eritrocite, osim određivanja krvne grupe i Rh faktora, provode se dva testa kojima se utvrđuje prisutnost potpunih i nepotpunih protutijela na eritrocite davatelja u primatelja. Osim toga, u bez greške provodi se trostruki biološki test.

Kod transfuzije plazme i njezinih pripravaka provodi se samo trostruki biološki test.

Prilikom transfuzije krvnih sastojaka iz nekoliko bočica ili spremnika pacijentu, potrebno je napraviti testove kompatibilnosti sa sadržajem svake bočice ili spremnika, čak i ako pokazuju da je krv primljena od istog darivatelja.

Test ukupnih antitijela

Prethodno nazvan "Test za individualnu kompatibilnost", "Hladni test". Omogućuje identifikaciju aglutinina na antigene ABO, MNSs, Lewis, itd. sustava.

Test se izvodi s krvnim serumom primatelja koji se dobiva centrifugiranjem ili taloženjem krvi. Serum je prikladan za upotrebu pod uvjetom da se čuva u hladnjaku na temperaturi od +4ºS ne duže od 2 dana.

Na bijelu pločicu nakapaju se 2-3 kapi bolesnikova krvnog seruma na koje se doda 5 puta manja kap krvi ili eritrocitne mase davatelja (iz posude) - omjer krvi i seruma je približno 1: 10. Krv se miješa sa serumom staklenim štapićem s otopljenim krajem, zatim se pločica trese 5 minuta, promatrajući tijek reakcije. Nakon navedenog vremena, preporuča se dodati 1-2 kapi fiziološke otopine u reakcijsku smjesu kako bi se uklonila "lažna aglutinacija".

Odsutnost aglutinacije ukazuje na kompatibilnost krvi davatelja i primatelja, a pojava aglutinacije ukazuje na njihovu nekompatibilnost i neprihvatljivost ove transfuzije krvi.

Nepotpun test na antitijela

Prethodno nazvan "test kompatibilnosti Rh faktora", "toplinski test".

Može se izvesti na nekoliko načina. Najosjetljiviji je neizravni Coombsov test. Međutim, njegova provedba je prilično teška, zahtijeva poseban reagens (anti-Rhesus serum) i dosta vremena (oko 2 sata). Kao rezultat toga, Coombsov test se provodi samo u laboratorijskim uvjetima za posebne indikacije, za individualni odabir krvi "teškim" primateljima. Nešto je inferiorniji od njega u točnosti, ali test s 10% otopinom želatine u vodenoj kupelji tehnički je lakši. Test s 33% otopinom poliglucina tehnički je najjednostavniji i najbrži, ali i najmanje točan. Za potrebe praktičnog javnog zdravstva najprikladniji je uzorak s 10% otopinom želatine u vodenoj kupelji.

Ispitivanje kompatibilnosti Rh faktora pomoću 10% otopine želatine.

Bit reakcije je stvaranje koloidnog medija i povišena temperatura, u kojem se nepotpuna protutijela adsorbiraju na molekule želatine i, u interakciji s površinskim antigenima eritrocita, aglutiniraju ih.

Uzorak se pravi u epruvetama na temperaturi od + 46-48ºS 10 - 15 minuta. Na dno epruvete, odnosno označeno, staviti 1 kap eritrocita donora, zatim dodati 2 kapi seruma bolesnika i 2 kapi 10% otopine želatine zagrijane do ukapljivanja. Otopina želatine mora se pažljivo ispitati prije upotrebe. Kod zamućenja ili pojave pahuljica, želatina je neprikladna. Sadržaj epruvete se miješa mućkanjem i stavlja u vodenu kupelj na temperaturi od + 46-48ºS 10 - 15 minuta ili u termostat na istoj temperaturi 30 minuta. Zatim se u epruvetu doda 5-8 ml izotonične otopine natrijevog klorida, sadržaj se promiješa 1-2 puta okretanjem epruvete i gleda na svjetlu golim okom ili povećalom.

Prisutnost aglutinacije u obliku suspenzije malih, rjeđe velikih kvržica na pozadini pročišćene ili potpuno obezbojene tekućine znači da je krv davatelja nekompatibilna s krvlju pacijenta i ne može mu se transfuzirati.

Ako sadržaj epruvete ostane jednoliko obojen, blago opalescentan, nema aglutinacije eritrocita, tada je krv davatelja kompatibilna s krvlju bolesnika u odnosu na Rh faktor Rh (D).

NB ! U Uputama iz 2002. godine, u usporedbi s prethodnim uputama, unesene su izmjene u tehniku postavljanja uzorka s 10% želatinom u vodenoj kupelji. Prethodno je vrijeme zadržavanja u vodenoj kupelji bilo 10 min. nove upute- 15 minuta. Uveo upotrebu termostata umjesto vodene kupelji.

Ispitivanje kompatibilnosti Rh faktora pomoću 33% otopine poliglucina.

Bit testa je ista kao i prethodni, ali je faktor temperature isključen.

Uzorak se provodi u epruveti bez zagrijavanja 5 minuta. Na prethodno označeno dno epruvete dodaju se 2 kapi seruma bolesnika, 1 kap krvi davatelja i 1 kap 33% otopine poliglucina, posebno proizvedene za tu svrhu u bočicama od 5 ml. Sadržaj epruvete se promiješa mućkanjem, zatim se epruveta nagne do gotovo vodoravne razine i polako okreće kako bi se sadržaj epruvete rasporedio po stjenkama. Ovaj postupak se nastavlja 5 minuta. Zatim se u epruvetu doda 3-4 ml izotonične otopine natrijevog klorida, promiješa se 2-3 puta glatkim okretanjem epruvete, zatvaranjem čepom i promatranjem svjetla golim okom.

Ako u otopini postoje aglutinati na pozadini pročišćene ili potpuno obezbojene tekućine, daje se zaključak da krv davatelja nije kompatibilna s krvlju pacijenta i ne može mu se transfuzirati. Ako sadržaj epruvete ostane ravnomjerno obojen, bez znakova aglutinacije, tada se donosi zaključak o kompatibilnosti krvi bolesnika i davatelja u smislu Rh o (D) faktora.

Test kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka. Tehnologija izvedbe. Priručnik za liječnike./GOU DPO KSMA Roszdrav. - Kazan, 2011. - 35 str.

U priručniku su prikazane tehnologije za provođenje testova individualne kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka davatelja kako bi se spriječile posttransfuzijske komplikacije hemolitičkog tipa. Zahtjevi za uzorke krvi, za specijaliste koji provode pretrage, kao i postupak provođenja pretraga, ovisno o vrsti transfuzijskog sredstva za transfuziju i karakteristikama provođenja pretraga u određene kategorije pacijenata.

Priručnik sadrži popis opreme i reagensa potrebnih za ispitivanje individualne kompatibilnosti.

Namijenjen je liječnicima svih specijalnosti koji provode transfuzijsku terapiju. Može se koristiti u izobrazbi specijalista u višim i srednjim medicinskim obrazovnim ustanovama.

IZ vodič za učenje mogu se naći u knjižnici GOU DPO KSMA Roszdrav na 420012, Kazan, ul. Muštari, 11

Uvod. Svrha testiranja individualne kompatibilnosti je spriječiti transfuzije nekompatibilnih krvnih sastojaka. Kompatibilnost se odnosi na povoljnu kombinaciju krvi davatelja i krvi primatelja. Njihova biološki nemoguća kombinacija antigena i antitijela različitih grupnih sustava određuje nekompatibilnost krvi davatelja i primatelja.

ABO krvna grupa je skup antigena grupe A i B i prirodnih anti-A, anti-B antitijela, koja je nasljedno određena i ne mijenja se tijekom života.

Rhesus sustav jedan je od najpolimorfnijih antigenih sustava ljudskih eritrocita. Uključuje oko 50 serološki različitih antigena, ne računajući slabe, prijelazne i djelomične oblike. Na ljudskim eritrocitima nalazi se 5 glavnih antigena Rhesus sustava (D, C, c, E, e). Najveći klinički značaj ima antigen D. Posjedujući izražena imunogena svojstva, antigen D je u 95% uzrok hemolitičke bolesti novorođenčeta, kao i uzrok teških posttransfuzijskih komplikacija. Osobe s antigenom D nazivaju se Rh pozitivnima (Rh+), a one koje nemaju antigen D nazivaju se Rh negativnima (Rh-).

Trenutno je poznato više od 236 eritrocitnih antigena, koji su raspoređeni u 29 genetski neovisnih sustava. Antigeni ABO i Rhesus sustava od najveće su kliničke važnosti. Eritrocitni sustavi Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd imaju manje praktična vrijednost, budući da relativno rijetko izazivaju preosjetljivost. Ovi sustavi postaju značajni u višestrukim transfuzijama krvi crvenih krvnih stanica, ponavljanim trudnoćama. Protutijela na sve ove antigene mogu se formirati kod osobe bilo koje krvne grupe ABO sustava, Rhesus (bez obzira na Rh pripadnost). Nastaju pod istim uvjetima kao i anti-D protutijela (višestruke transfuzije crvenih krvnih stanica, ponovljene trudnoće) i može uzrokovati posttransfuzijske komplikacije hemolitičkog tipa i hemolitičku bolest novorođenčeta. Ako se primatelju čija krv sadrži protutijela transfuzira krv davatelja čiji eritrociti sadrže antigene protiv kojih su usmjerena protutijela, takva će se krv u tijelu primatelja uništiti, tj. ona je nekompatibilna s njim.

Ovaj priručnik prikazuje tehnologiju izvođenja testova individualne kompatibilnosti, daje zahtjeve za uzorke krvi, za stručnjake koji provode testove, kao i postupak za provođenje testova ovisno o vrsti transfuzijskog sredstva za transfuziju i karakteristike provođenja testova u određenim kategorijama bolesnika. .

Tehnologija za izvođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka:

1. Značajke metodologije za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka

1.1. Zahtjevi za uzorke krvi

Prije postupka uzimanja krvi za ispitivanje kompatibilnosti navodi se prezime, ime i patronim primatelja. Uzimaju suhu, čistu epruvetu na koju se stavljaju sljedeći podaci o pacijentu: puno ime, datum uzorkovanja krvi, za stacionarne pacijente - broj medicinske kartice. Krv pacijenta se uzima iz vene u količini od 3-5 ml i prenosi u označenu epruvetu. Za dobivanje seruma, epruveta s uzorkom krvi ostavi se na sobnoj temperaturi najmanje 1 sat ili, u hitni slučajevi, centrifugirano u laboratorijskoj centrifugi pri brzini od 1500-2000 okretaja u minuti. unutar 5 minuta. Upotrebljava se uzorak krvi primatelja koji se čuva na t+2 0 …+8 0 S ne više od dva dana.

Hemolizirana krv se ne koristi za istraživanje. U prisutnosti hemolize, postupak uzimanja krvi se ponavlja.

Uzorak krvi primatelja prije transfuzije pohranjuje se 5 dana na +2 0 …+8 0 C. To je potrebno za daljnje pretrage krvi primatelja u specijaliziranom krvotvornom laboratoriju u slučaju posttransfuzijske komplikacije.

U slučaju posttransfuzijske komplikacije, uzorak krvi primatelja prije transfuzije i ostaci transfuzijske podloge šalju se na analizu u specijalizirani laboratorij krvne službe.

1.2. Zahtjevi za prostorije

Imunohematološke studije provode se u prostoriji s prirodnim svjetlom, temperatura zraka u prostoriji treba biti unutar +15 0 S ... +25 0 S.

1.3. Opći zahtjevi za ispitivanje kompatibilnosti

Prije transfuzije krvnih sastojaka provode se testovi na individualnu kompatibilnost prema sustavima ABO i Rhesus te biološki uzorak.

Kod testiranja individualne kompatibilnosti prema ABO sustavu utvrđuje se kompatibilnost i prema MNS sustavu, a kod testiranja individualne kompatibilnosti prema Rhesus sustavu također se otkriva kompatibilnost prema drugim klinički značajnim sustavima krvnih grupa (Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd).

Ispitivanje kompatibilnosti neposredno prije svake transfuzije provodi liječnik koji transfuzira konzerviranu krv i njezine sastojke, nakon kontrolnog redefinicije krvne grupe primatelja i darivatelja te kontrolnog redefinicije Rh - pripadnosti krvi primatelja. Hitnost transfuzije ne oslobađa od testiranja na kompatibilnost.

1.4. Zahtjevi za opseg studija, ovisno o vrsti transfuzijskog medija za transfuziju

1.4.1. Transfuzija nositelja krvnih plinova

Prije transfuzije nosača krvnog plina provode se testovi individualne kompatibilnosti krvi primatelja i davatelja, uključujući autodonora, prema sustavima ABO i Rhesus, kao i biološki test nakon provedbe kontrolnih studija skupinu i Rh pripadnost krvi bolesnika te grupnu pripadnost eritrocita davatelja (autodonora).

Testovi kompatibilnosti za ABO i Rhesus krvne grupe provode se odvojeno, ne mogu se međusobno zamijeniti, jer antitijela drugačija priroda zahtijevati različite metode za tvoje otkriće.

Ispitivanje individualne kompatibilnosti po ABO sustavu provodi se prema jednoj od sljedećih metoda: ispitivanje kompatibilnosti u avionu na sobnoj temperaturi ili u gel testu.

Ispitivanje individualne kompatibilnosti prema Rhesus sustavu provodi se na jedan od sljedećih načina: test s 33% otopinom poliglucina, test s 10% otopinom želatine ili u gel testu.

1.4.2. Transfuzija korektora hemostaze i fibrinolize, sredstva za korekciju imuniteta

Prije transfuzije korektora hemostaze i fibrinolize, sredstava za korekciju imuniteta krvi, provodi se biološki test.

1.5. Zahtjevi za stručnjake

Ispitivanje individualne kompatibilnosti provode specijalisti imunohematologije na specijaliziranim tečajevima usavršavanja u ustanovama dodatne strukovno obrazovanje i (ili) na temelju ustanova krvne službe Republike Tatarstan (vidi tablicu 1).

stol 1

Zahtjevi za stručnjake za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka

Medicinska ustanova	Provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka	medicinsko osoblje	Dodatni zahtjevi za medicinsko osoblje
Bolnica, uključujući dnevnu bolnicu, u izvanbolničkim uvjetima	Prije svake transfuzije krvi i njezinih sastojaka	Liječnik koji izravno daje transfuziju	Mora imati posebnu obuku iz imunohematologije na specijaliziranim tečajevima usavršavanja u ustanovama dodatnog stručnog obrazovanja i (ili) u ustanovama krvne službe Republike Tatarstan najmanje jednom svakih 5 godina.

2. Materijalna sredstva

Za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti mora biti opremljeno zasebno mjesto (ili posebna prostorija), koja je opremljena u skladu sa zahtjevima naredbe Ministarstva zdravstva Ruske Federacije br. 2 od 01.09. /1998 "O odobrenju uputa za imunoserologiju".

2.1 Uređaji, alati, proizvodi medicinsku svrhu

tablica 2

Uređaji, instrumenti, medicinski proizvodi potrebni za provođenje testova kompatibilnosti, kao i alternativni uređaji i proizvodi medicinske opreme.

Naziv uređaja, proizvoda medicinske tehnologije itd.	Broj uređaja alati, proizvodi medicinska tehnologija	Alternativni uređaj, proizvod medicinske opreme
Test kompatibilnosti krvnih grupa ABO sustava (u avionu)
Stolni laboratorij		Stol obložen plastikom

Stolna lampa		zidna lampa
Ploče za imunohematološke studije	1 kom. za 1 studiju	Tanjur bijela boja porculanski ili emajlirani
Pasterova pipeta
staklene šipke (lopatice)	Od 1 do 10 kom.	plastični štap
Pješčani sat 5 minuta		Štoperica


staklene naočale		staklene posude
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Laboratorij za centrifuge
pomoću 33% otopine poliglucina (in vitro)
Stolni laboratorij		Stol obložen plastikom

Stolna lampa		zidna lampa
Cijev centrifuge		biološka epruveta
Pasterova pipeta		Automatska pipeta promjenjivog volumena (20-200 µl)
Pješčani sat 5 minuta		Štoperica
Lupa s povećanjem od 4-6x
Laboratorijski stalak s 10 utičnica
staklene naočale		staklene posude
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Laboratorij za centrifuge
Rhesus test kompatibilnosti pomoću 10% otopine želatine (in vitro)
Stolni laboratorij		Stol obložen plastikom

Stolna lampa		zidna lampa

Vodena kupelj na 46-48 0 C		Termostat za 46-48 0 S
Pasterova pipeta		Automatska pipeta promjenjivog volumena (20-200 µl)
Epruvete s tankim stijenkama (kapacitet ne manji od 10 ml)		Cijev centrifuge
Pješčani sat 15 minuta		Štoperica
Lupa s povećanjem od 4-6x
Laboratorijski stalak s 10 utičnica
staklene naočale		staklene posude
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Laboratorij za centrifuge

Stolni laboratorij		Stol obložen plastikom

Stolna lampa		zidna lampa
Automatska pipeta promjenjivog volumena	5-40 µl 1 kom. 100-1000 µl 1 kom.
Laboratorijski stalak s 10 utičnica
staklene naočale		staklene posude
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Laboratorij za centrifuge
Centrifuga s gel karticom
Inkubator na 37 0 S		Termostat na 37 0 S
Cijev centrifuge		biološka epruveta

2.2. Reagensi

Za provođenje testova individualne kompatibilnosti prije transfuzije krvi i njezinih komponenti potrebni su reagensi koji su prikazani u tablici 3.

Tablica 3

Reagensi potrebni za ispitivanje kompatibilnosti

Naziv reagensa	Dokument koji regulira korištenje reagens	Količina reagensa potrebna za rad 1. studija	Uvjeti i značajke skladištenja reagensa, rad s njim *
ABO test kompatibilnosti ravno na sobnoj temperaturi
Otopina natrijevog klorida, 0,9%			Pohranjeno u t+15…+25 0 S.
Test kompatibilnosti pomoću 33% otopine poliglucina
Otopina poliglucina, 33,0%	Naredba Ministarstva zdravstva Ruske Federacije od 25. studenog 2002. br. 363 "O odobrenju Uputa za uporabu komponenti krvi"		Pohranjeno u
Otopina natrijevog klorida, 0,9%			Pohranjeno u
Test kompatibilnosti pomoću 10% otopine želatine
Otopina želatine, 10,0%	Naredba Ministarstva zdravstva Ruske Federacije od 25. studenog 2002. br. 363 "O odobrenju uputa za uporabu komponenti krvi"		Pohranjeno u
Otopina natrijevog klorida, 0,9%			Pohranjeno u
Test kompatibilnosti prema ABO sustavu i Rhesus sustavu pomoću dijagnostičkih kartica s gelom
Coombs+ dijagnostičke kartice	Upute uključene u dijagnostičke kartice	Od 1/4 do 1/3 kom. ovisno o korištenoj dijagnostičkoj kartici.	Pohranjeno u t+15…+25 0 S.
Otopina za pripremu suspenzije ispitivanih eritrocita	Upute u prilogu rješenja	Od 0,5 do 1,0 ml, ovisno o proizvođaču	Pohranjeno u

* - Temperaturu unutar hladnjače, gdje se čuvaju reagensi, kontrolira bolničar dva puta dnevno. Očitanja termometra bilježe se u „Dnevnik upisa temperaturni režim pohranjivanje dijagnostičkih standarda za imunohematološke studije” (vidi Dodatak 1).

2.3 Ostali potrošni materijal

Drugi potrošni materijal koristi se za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih sastojaka (vidi tablicu 4).

Tablica 4

Ime	Količina	Bilješka
Pamučna gaza	Za 1 tampon: vata - 3,0 gr., zavoj - 30 cm.	Za sušenje pipeta i staklenih štapića
Medicinske rukavice za jednokratnu upotrebu	1 par za svaka 3 sata rada	Odmah zamijenite ako je slomljen ili jako zaprljan.
Otopina natrijevog klorida, 0,9%		Za pranje pipeta i štapića
Etilni alkohol, medicinski, 70,0%	3,0 gr. za 1 tretman	Za obradu ruku osoblja nakon završetka rada
Otopina za dezinfekciju	U skladu s metodološkim uputama za korištenje dezinformacija. sredstva dopuštena za korištenje u Ruskoj Federaciji i Republici Tatarstan	Za dezinfekciju biološki materijal, laboratorijsko staklo i radno mjesto.
Nastavci za automatske pipete promjenjivog volumena, jednokratni	4 stvari. za 1 studiju

3. Postupak ispitivanja kompatibilnosti

Svrha testiranja kompatibilnosti je spriječiti transfuziju bankovne krvi i njezinih komponenti koje nisu kompatibilne s krvlju primatelja. Za testove kompatibilnosti koristi se krvni serum primatelja i uzorak krvi davatelja.

Ako se bolesniku transfuzira konzervirana krv i njezine komponente iz više spremnika, testovi kompatibilnosti provode se sa svakim spremnikom, čak i ako pokazuju da su krvni sastojci dobiveni od istog davatelja.

3.1 Testovi individualne kompatibilnosti prema ABO sustavu

3.1.1 Test kompatibilnosti za krvne grupe ABO sustava (u avionu)

Ispitivanje se provodi na navlaženoj površinskoj ploči.

1. Tableta je označena, za koju je naznačen puni naziv. i krvna grupa primatelja, puno ime i prezime te krvnu grupu davatelja i broj krvne posude.

2. Serum se pažljivo uzima iz epruvete s krvlju primatelja koja se testira i nanosi se na tabletu 1 velikom kapi (100 µl).

3. Mala kap (10 µl) donorskih eritrocita uzima se iz segmenta epruvete plastične vrećice s transfuzijskim medijem, koji je pripremljen za transfuziju ovom konkretnom pacijentu, i nanosi se pored seruma primatelja (omjer serum/eritrociti 10: 1).

4. Kapi se miješaju staklenim štapićem.

5. Promatrajte reakciju 5 minuta uz stalno mućkanje ploče. Nakon tog vremena dodaju se 1-2 kapi (50-100 µl) otopine natrijevog klorida, 0,9%.

reakcija u kapi može biti pozitivna ili negativna.

a) pozitivan rezultat (+) izražava se u aglutinaciji eritrocita, aglutinati su vidljivi golim okom u obliku malih ili velikih crvenih nakupina. Krv je nekompatibilna, nemoguće ju je transfuzirati! (vidi sliku 1).

Slika 1. Krv davatelja i primatelja je nekompatibilna

b) s negativnim rezultatom (-), kap ostaje homogeno obojena crveno, u njoj se ne detektiraju aglutinati. Krv davatelja je kompatibilna s krvlju primatelja (vidi sliku 2).

Slika 2. Krv davatelja je kompatibilna s krvlju primatelja

3.2. Testovi za individualnu kompatibilnost prema Rhesus sustavu

3.2.1. Test kompatibilnosti pomoću 33% otopine poliglucina

Redoslijed studije:

1. Za istraživanje uzmite epruvetu (centrifuga ili bilo koja druga, kapaciteta najmanje 10 ml). Cijev je označena, za koju je naznačen puni naziv. i krvnu grupu primatelja, te puno ime i prezime darivatelja, broj spremnika s krvlju.

2. Serum se pažljivo uzima pipetom iz epruvete s krvlju primatelja koja se testira i dodaju se 2 kapi (100 µl) na dno epruvete.

3. Jedna kap (50 µl) donorskih eritrocita uzme se iz segmenta epruvete plastične vrećice s transfuzijskim medijem, koji je pripremljen za transfuziju ovom pacijentu, u istu epruvetu, 1 kap (50 µl) dodaje se 33% otopina poliglucina.

4. Sadržaj epruvete se promiješa mućkanjem, a zatim se polagano okreće duž osi, naginjući gotovo u vodoravan položaj kako bi se sadržaj razlio po njezinim stijenkama. Ovaj postupak se izvodi unutar pet minuta.

5. Nakon pet minuta dodajte 3-5 ml fiziološke otopine u epruvetu. riješenje. Sadržaj epruveta se miješa okretanjem epruveta 2-3 puta (bez mućkanja!)

Tumačenje rezultata reakcije:

rezultat se uzima u obzir gledanjem epruveta na svjetlu golim okom ili kroz povećalo.

Ako se u epruveti uoči aglutinacija u obliku suspenzije malih ili velikih crvenih grudica na pozadini pročišćene ili potpuno obezbojene tekućine, tada krv davatelja nije kompatibilna s krvlju primatelja. Ne možete preliti!

Ako se u epruveti nalazi jednoliko obojena, blago opalescentna tekućina bez znakova aglutinacije eritrocita, to znači da je krv davatelja kompatibilna s krvlju primatelja u odnosu na antigene Rhesus sustava i drugih klinički značajnih sustava (vidi sliku 3). .

Slika 3. Rezultati ispitivanja uzoraka za kompatibilnost prema Rhesus sustavu (koristeći 33% otopinu poliglucina i 10% otopinu želatine)

3.2.2. Ispitivanje kompatibilnosti pomoću 10% otopine želatine

Otopina želatine mora se pažljivo ispitati prije upotrebe. Kod zamućenja ili pojave pahuljica, kao i gubitka želatinoznih svojstava na t + 4 0 S ... + 8 0 S, želatina je neprikladna.

Redoslijed studije:

1. Uzmite epruvetu za istraživanje (kapacitet ne manji od 10 ml). Označava se epruveta za koju se navodi puno ime i prezime, krvna grupa primatelja i davatelja te broj posude s krvlju.

2. Uzima se jedna kap (50 µl) eritrocita donora iz segmenta epruvete plastične vrećice s transfuzijskim medijem koji je pripremljen za transfuziju ovom pacijentu, stavlja se u epruvetu, 2 kapi (100 µl) 10% otopine želatine zagrijane u vodenoj kupelji dodaju se u tekućinu na temperaturi od +46 0 C ... +48 0 C. Pipetom pažljivo uzmite serum iz epruvete s krvlju primatelja i dodajte 2 kapi ( 100 μl) na dno epruvete.

3. Sadržaj epruvete se promućka da se izmiješa i stavi u vodenu kupelj (t+46 0 …+48 0 C) na 15 minuta ili u termostat (t+46 0 …+48 0 C) na 45 minuta. minuta.

4. Nakon završetka inkubacije epruveta se izvadi, doda se 5-8 ml fiziološke otopine. otopine, sadržaj epruvete se miješa s jednim ili dva preokreta i ocjenjuje se rezultat studije.

Tumačenje rezultata reakcije.

rezultat se uzima u obzir promatranjem epruveta na svjetlu golim okom ili kroz povećalo, a zatim se gleda mikroskopom. Da biste to učinili, kap sadržaja epruvete stavite na predmetno staklo i pregledajte pod malim povećanjem.

Ako se u epruveti uoči aglutinacija u obliku suspenzije malih ili velikih crvenih kvržica na pozadini pročišćene ili potpuno obezbojene tekućine, to znači da je krv davatelja nekompatibilna s krvlju primatelja i ne smije mu se transfuzirati. .

3.3. Test kompatibilnosti gela

Prilikom postavljanja u gel test odmah se provode testovi kompatibilnosti prema ABO sustavu (u neutralnoj mikroepruveti) i test kompatibilnosti prema Rhesus sustavu (u Coombsovoj mikroepruveti).

Redoslijed studije:

1. Prije studije provjerite dijagnostičke kartice. Nemojte koristiti kartice ako u gelu postoje lebdeći mjehurići, mikroepruveta ne sadrži supernatant, uočeno je smanjenje volumena gela ili njegovo pucanje.

2. Mikroepruvete su potpisane (ime primatelja i broj uzorka davatelja).

3. Iz dijela epruvete plastične vrećice s transfuzijskim medijem, koji je pripremljen za transfuziju ovom bolesniku, automatskom se pipetom uzme 10 μl eritrocita donora i stavi u epruvetu centrifuge.

4. Dodajte 1 ml otopine za razrjeđivanje.

5. Otvorite potreban iznos mikroepruvete (po jedna Coombsova i neutralna mikroepruveta).

6. Automatskom pipetom dodajte 50 µl razrijeđenih eritrocita donora u Coombsovu i neutralnu mikroepruvetu.

7. Dodajte 25 µl seruma primatelja u obje mikroepruvete.

8. Inkubirajte na t+37 0 C 15 minuta.

9. Nakon inkubacije, kartica se centrifugira u gel centrifugi za kartice (vrijeme i brzina se postavljaju automatski).

Tumačenje rezultata:

ako se sediment eritrocita nalazi na dnu mikroepruvete, tada se uzorak smatra kompatibilnim (vidi sliku 4 br. 1). Ako se aglutinati zadržavaju na površini gela ili u njegovoj debljini, tada je uzorak nekompatibilan (vidi sliku 4 br. 2-6).

№1 №2 №3 №4 №5 №6

Slika 4. Rezultati istraživanja uzoraka za individualnu kompatibilnost prema Rhesus sustavu metodom gela

3.4. biološki uzorak

Za provođenje biološkog testa koriste se krv i njezine komponente pripremljene za transfuziju.

Biološki uzorak provodi se neovisno o volumenu medija za transfuziju krvi i brzini njegove primjene. Ako je potrebno transfuzirati više doza krvi i njezinih sastojaka, prije početka transfuzije svake nove doze provodi se biološki test.

Tehnika:

Jednom se transfuzira 10 ml medija za transfuziju krvi brzinom od 2-3 ml (40-60 kapi) u minuti, zatim se transfuzija prekida i primatelj se prati 3 minute, kontrolirajući mu puls, brzinu disanja, krvni tlak, opće stanje, boja kože, mjeriti tjelesnu temperaturu. Ovaj postupak se ponavlja još dva puta. Pojava tijekom ovog razdoblja čak i jednog od ovih klinički simptomi kao što su zimica, bol u leđima, osjećaj topline i stezanja u prsima, glavobolja, mučnina ili povraćanje, zahtijeva hitan prekid transfuzije i odbijanje transfuzije ovog transfuzijskog sredstva. Uzorak krvi šalje se u specijalizirani laboratorij krvotvorne službe za individualni odabir crvenih krvnih stanica.

Hitnost transfuzije krvnih sastojaka ne oslobađa od provođenja biološke pretrage. Tijekom nje moguće je nastaviti transfuziju slanih otopina.

Kod transfuzije krvi i njezinih komponenti pod anestezijom, reakcija ili početne komplikacije ocjenjuju se nemotiviranim povećanjem krvarenja u kirurškoj rani, smanjenjem krvni tlak i povećan broj otkucaja srca, promjena boje urina tijekom kateterizacije Mjehur, kao i prema rezultatima testa za otkrivanje rane hemolize. U takvim slučajevima prekida se transfuzija ovog sredstva za transfuziju krvi, kirurg i anesteziolog-reanimatologinja, zajedno s transfuziologom, dužni su otkriti uzrok hemodinamskih poremećaja. Ako ih ništa osim transfuzije ne može uzrokovati, onda se ovaj hemotransfuzijski medij ne transfuzira, o daljnjoj transfuzijskoj terapiji odlučuju sami, ovisno o kliničkim i laboratorijskim podacima.

Biološki test, kao i individualni test kompatibilnosti, također je obavezan u slučajevima kada se transfuzira individualno odabrana u laboratoriju ili fenotipizirana eritrocitna masa ili suspenzija.

Nakon završetka transfuzije, donorska posuda s malom količinom preostalog medija za transfuziju krvi koja se koristi za ispitivanje individualne kompatibilnosti podliježe obavezna konzervacija u roku od 48 sati na temperaturi od +2 0 C…+8 0 C.

Nakon transfuzije, primatelj se pridržava odmora u krevetu dva sata i promatra ga liječnik ili dežurni liječnik. Svakih sat vremena mjeri mu se tjelesna temperatura i krvni tlak, fiksirajući ove pokazatelje u medicinskom kartonu pacijenta. Prati se prisutnost i satni volumen mokrenja te boja urina. Pojava crvene boje urina uz zadržavanje prozirnosti ukazuje na akutnu hemolizu. Sljedeći dan nakon transfuzije obavezna je klinička analiza krvi i urina.

U slučaju izvanbolničke transfuzije krvi, primatelj nakon završetka transfuzije mora biti pod nadzorom liječnika najmanje tri sata. Samo u nedostatku bilo kakvih reakcija, postojanju stabilnog krvnog tlaka i pulsa, normalnog mokrenja, pacijent se može otpustiti iz bolnice.

3.5. Registracija rezultata testa kompatibilnosti

Rezultat kontrolnih pretraga uzoraka na kompatibilnost (posebno za svaku vrstu) upisuje se u transfuzijsku karticu kartona bolesnika (vidi Dodatak 2).

3.6. Individualni odabir

Individualni odabir nosača plinova u krvi provodi u krvotvornim ustanovama (SPK ili OPK) liječnik kliničke laboratorijska dijagnostika koji imaju posebnu obuku iz imunohematologije na specijaliziranim ciklusima i na temelju institucija krvne službe Republike Tatarstan.

3.6.1. Indikacije za individualni odabir

pogoršana transfuzijska povijest (povijest posttransfuzijskih reakcija ili komplikacija na prethodne transfuzije, višestruke transfuzije)
otežana opstetrička povijest (prisutnost u anamnezi rođenja djece s HDN-om, mrtvorođenih, pobačaja u kasnijim fazama);
hemolitička bolest novorođenčad;
poteškoće u određivanju skupine i / ili Rh-pripadnosti krvi pacijenta,
pozitivno ili sumnjiv rezultat najmanje jedan od testova individualne kompatibilnosti ili biološki test;
prisutnost izoimunih antieritrocitnih protutijela bilo koje specifičnosti;
višestruke transfuzije.

3.6.2. Zahtjevi za uzorke krvi koji se šalju na individualni odabir

Uzorak krvi za individualni odabir uzima se u dvije epruvete:
1 epruveta - sa konzervansom (3 ml),
2 epruvete - bez konzervansa (5 ml).

Kao konzervans koristi se otopina EDTA ili otopina natrijevog citrata, 5% Omjer ispitivane krvi i konzervansa za natrijev citrat je 10:1, za EDTA - 100:1.

Ako je potreban individualni odabir, novorođenčetu se dodjeljuju dvije epruvete:

1 epruveta - s uzorkom krvi djeteta (najmanje 1,5 ml),

2 epruvete - s uzorkom krvi majke (5 ml).

Obje epruvete moraju biti potpisane (ime i prezime, datum uzimanja uzorka, broj povijesti bolesti).

Smjer se sastavlja u skladu s Dodatkom br. 3.

Individualni odabir nosača krvnih plinova je prethodni postupak. Ako se masa ili suspenzija eritrocita pojedinačno odabire za primatelja u specijaliziranom laboratoriju, liječnik koji provodi transfuziju prije transfuzije utvrđuje krvnu grupu i Rh pripadnost primatelja, krvnu grupu darivatelja i provodi samo jedan test kompatibilnosti u zrakoplovu u sobi. temperaturu i na početku transfuzije - biološki test .

3.7. dodatne informacije o značajkama izvođenja testova kompatibilnosti

Tablica 5

Kategorija bolesnika	Individualne karakteristike	Priroda poteškoća	Način rješavanja problema
novorođenčadi	Prisutnost majčinih aloantitijela u krvi novorođenčeta		Na pozitivan rezultat barem jedan od uzoraka, uzorak krvi novorođenčeta i majke šalje se u specijalizirani laboratorij na individualni odabir.
trudna	Prisutnost izoimunih antieritrocitnih protutijela.	Nekompatibilnost u najmanje jednom od uzoraka	Uzorak krvi primateljice (trudnice, rodilje) šalje se u specijalizirani laboratorij na individualnu selekciju.
Bolesnici s hematološkim ili onkološke bolesti, kao i pacijenti s drugim vrstama patologija (opekline, ciroza jetre, sepsa, itd.)	Prisutnost nespecifičnih alo- i/ili autoantitijela	Nekompatibilnost u najmanje jednom od uzoraka	Provođenje pojedinačnih testova kompatibilnosti u gel testu odn
U različitim kategorijama bolesnika	Prisutnost anti-A 1 antitijela (ekstra aglutinin α 1)	Nekompatibilnost ABO sustava	Slanje uzorka krvi primatelja u specijalizirani laboratorij krvne službe na individualni odabir.
	Masivna transfuzija krvi ili transfuzija nekompatibilnih nosača krvnih plinova pomoću ABO sustava i (ili) Rhesus sustava		Slanje uzorka krvi primatelja u specijalizirani laboratorij krvne službe na individualni odabir.
	Intravenska primjena otopina krvnih nadomjestaka.	Sumnjivi rezultati ispitivanja kompatibilnosti	Slanje uzorka krvi primatelja u specijalizirani laboratorij krvne službe na individualni odabir.

Prijave

Prilog 1

Kontrolni datum	Očitavanja termometra		Potpis odgovorne osobe	Poduzete mjere
Kontrolni datum	Jutro	Večer	Potpis odgovorne osobe	Poduzete mjere

Prilog 2

TRANSFUZIJSKA KARTICA br. _______

Datum transfuzije ___________________

Primatelj:

BP____________Ps___________T˚S_____________

Transfuzija indicirana __________________________

(navesti naziv transfuzijskog medija)

Povijest transfuzije _____________________

_________

Opstetrička povijest __________________________

___________________________________________

s ciljem ____________________________________

Rezultat kontrolne provjere krvne grupe

prema ABO ____________ Rhesus __________________

Donator (auto):

(Podcrtajte sve što je primjenjivo)

PUNO IME._____________________________________

Individualni broj __________________________

ABO krvna grupa ________ Rhesus ___________

(prema etiketi)

Nalaz kontrolne provjere krvne grupe davatelja prema ABO ________________________________

Korišteni dijagnostički standardi:

1) Standardni ABO izohemaglutinirajući serumi ili kolikloni (po potrebi podcrtani) sljedećih serija:

__________/____________Prodati po______________

2) Univerzalni reagens anti-rezus Rh 0 (D) ili anti-D super anti-D super (po potrebi podcrtano) sljedeće serije: ________________ vrijedi do _______________

Putovnica transfuzijskog medija	Rezultati testa kompatibilnosti	Transfuzijski medij transfuziran
Proizvođač		Ime
		Ind. vađenje krvi
		Priprema za transfuziju

Datum nabave		Filtriranje
		Resuspenzija
		Metoda i brzina transfuzije
	Biol. probati
		Trajanje transfuzije

Promatranje primatelja

Rano posttransfuzijsko razdoblje			Prvi dan nakon transfuzije
	Tijekom transfuzije	(za vozila hitne pomoći)	Analiza urina od _________	Test krvi od ________	Dnevna diureza
					Dodijeljeno
Objektivno



Prva porcija urina:

Doktor _______________________________________

Mjesto za lijepljenje Mjesto za lijepljenje rezultata

naljepnice transfuzijskog medija za pojedinačno uzimanje krvi

Suglasnost primatelja

za transfuziju krvnih sastojaka

ja, _____________________________________________________________________________

dobio objašnjenje o operaciji transfuzije krvi. Liječnik mi je objasnio svrhu transfuzije, njezinu nužnost, prirodu i značajke postupka, moguće posljedice, u slučaju čijeg razvoja suglasan sam izvršiti sve potrebne medicinske mjere. Obaviješten sam o mogućem tijeku bolesti u slučaju odbijanja transfuzije krvnih sastojaka.

Također sam dobio informacije o alternativne metode liječenje.

Razgovor je vodio liječnik _______________ (potpis liječnika). "___" __________20

Pacijent se složio s predloženim planom liječenja koji je vlastoručno potpisao

______________________________________________ (potpis pacijenta)

ili potpisano ________________________________________________ (potpis, puno ime)

U slučaju kada stanje građanina ne dopušta očitovanje njegove volje, a liječnička intervencija je hitna,

Odluka konzilija liječnika ________________________________

__________________________________

ili potpis dežurnog (dežurnog) liječnika uz obavijest dužnosnici zdravstvena ustanova _________________________________

Upute za popunjavanje transfuzijske kartice

1. Za svaku transfuziju krvnih sastojaka, uključujući autolognu krv, autokomponente, popunjava se transfuzijska kartica na primatelja i u obliku transfuzijske kartice upisuje se u zdravstveni karton stacionarnog (ambulantnog) bolesnika.

2. Na poleđini transfuzijskog kartona upisuje se pristanak primatelja na transfuziju na propisanom obrascu.

3. Broj transfuzijske kartice označava se prema rednom broju transfuzije primatelju.

4. U rubriku "Primatelj" upisuje se rezultat kontrolne provjere prije transfuzije krvne grupe primatelja prema ABO i Rhesus sustavu.

5. U retku "Povijest transfuzije" potrebno je prikazati broj transfuzija i reakcije na njih. U retku "Povijest poroda" - broj trudnoća, poroda, pobačaja, prisutnost spontani pobačaji, mrtvorođenčad, hemolitička bolest novorođenčadi.

6. U rubriku »Darivatelj« upisuje se rezultat kontrolnog ponovnog određivanja krvne grupe darivatelja po ABO sustavu. U slučaju transfuzije korektora hemostaze i fibrinolize, kao i sredstava za korekciju imuniteta, ponovno određivanje krvne grupe davatelja prema ABO sustavu nije potrebno.

7. U odjeljku "Putovnica transfuzijskog medija" s naljepnice transfuzijskog medija prepisuju se podaci o proizvođaču, datumu pripreme. Nakon završetka transfuzije, naljepnica se odlijepi sa posude s krvnim sastojkom i zalijepi na stražnju stranu transfuzijske kartice.

8. U odjeljku "Transfuzijski transfuzijski medij":

- u retku "Naziv" naveden je naziv krvnog sastojka u skladu s oznakom;

- u retku "Individualni odabir krvi" označava laboratorij, ustanovu čiji su stručnjaci izvršili pojedinačni odabir;

- u retku "Priprema za transfuziju" naznačeni su način, temperatura i trajanje pripreme transfuzijskog medija za transfuziju;

- u retku "Filtracija" naveden je tip filtera, njegov proizvođač;

- redak "Resuspenzija" popunjava se kada se u spremnik s krvnim sastojkom prije transfuzije doda 0,9% izotonična otopina natrijevog klorida s naznakom njegovog volumena, broja serije i proizvođača.

- u retku "Volumen" naveden je volumen transfuzijskog medija za transfuziju.

9. Promatranje primatelja provodi se tijekom transfuzije i unutar dva sata nakon transfuzije. Kada se transfuzija provodi ambulantno, trajanje promatranja povećava se na tri sata.

Prilog 3

Smjer do SPK (OPK)

odrediti skupinu i Rh - pribor, individualni odabir

( Podcrtajte sve što je primjenjivo)

Naziv zdravstvene ustanove __________________________ odjel ___________________

PUNO IME. liječnik koji je poslao uzorak krvi

Kontakt broj______________________________________________________

PUNO IME. pacijent ________________________________________________________________

Datum i godina rođenja _______________ Broj zdravstvene iskaznice __________________

Dijagnoza: _________________________________________________________________

Povijest transfuzije (broj transfuzija i reakcije na njih) __________________

__________________________________________________________________________

Opstetrička povijest (broj trudnoća, broj poroda, HDN djece,

pobačaji, mrtvorođenčad, abortusi) _______________________________________

_________________________________________________________________________

Rezultati imunohematološke pretrage krvi dobiveni u zdravstvenoj ustanovi:

ABO krvna grupa _______________________________________

Rhesus - pripadnost ________________________________

Prisutnost antieritrocitnih aloantitijela ________________

Naziv krvnih sastojaka potrebnih za transfuziju ___________________

____________________________________________________________________________

Datum _________________________________ Potpis liječnika _____________________________

Napomena: epruveta s uzorkom krvi mora biti označena (ime i prezime pacijenta, datum vađenja krvi, broj kartona).

Ako je Hb bolesnika ispod 70 g/l, potrebno je uzeti dvije epruvete za određivanje skupine i rezus pripadnosti, za individualni odabir:

1 tuba s konzervansom (3 ml),

2 tube bez konzervansa (5 ml).

Popis kratica

MPU - medicinska i preventivna ustanova

MH RT - Ministarstvo zdravlja Republike Tatarstan

Ministarstvo zdravlja Ruske Federacije - Ministarstvo zdravlja Ruske Federacije

HDN - hemolitička bolest novorođenčadi

OPK - odjel za transfuziju krvi

SPK - stanica za transfuziju krvi

Priručnik pripremila Voditelj Odjela za anesteziologiju-reanimaciju i transfuziologiju Državne obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja KSMA Roszdrava, profesor V.M. E.A. Sidoruk, asistenti odjela R.S. Gadylshina, L.N. Sibgatulina, E.R. Khamidullina, dr. sc. Terehova, T.V. Ivanova.

Recenzenti:

glava Odjel za kirurške bolesti br. 1 s tečajevima onkologije, anesteziologije i reanimacije Državne obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja "KSMU Roszdrav", dr.med., profesor D.M. Krasilnikov;

glava Odjel za kliničku anatomiju i izvanbolničku kirurgiju, Državna obrazovna ustanova DPO "KSMA Roszdrav", profesor V.V. Fattakhov.

Književnost:

1. Donskov S.I., Morokov V.A., Dubinin I.V. Grupni antigeni eritrocita. Koncept kompatibilnosti. - M .: "IP Skorokhodov", 2008. - 172 str.

2. Mineeva N.V. Ljudske krvne grupe. Osnove imunohematologije. - St. Petersburg: LLC "A-print", 2004. - 188 str.

3. Naredba Ministarstva zdravstva Ruske Federacije od 1. rujna 1998. br. 2 "O odobrenju uputa za imunoserologiju".

4. Naredba Ministarstva zdravstva Ruske Federacije od 25. studenog 2002. br. 363 „O odobrenju Uputa za uporabu krvnih komponenti”.

5. Naredba Ministarstva zdravstva Republike Tadžikistan od 13. svibnja 1999. br. 367 „O mjerama za sprječavanje komplikacija tijekom transfuzije komponenti, krvnih pripravaka, krvnih nadomjestaka”.

6. Naredba Ministarstva zdravstva Republike Tadžikistan od 05.08.2004. br. 1135 "O poboljšanju rada na prevenciji posttransfuzijskih komplikacija u zdravstvenim ustanovama Republike Tatarstan"

7. Naredba Ministarstva zdravstva Republike Tadžikistan od 27. travnja 2004. br. 691 „O poboljšanju prije začeća, prenatalne i postnatalne prevencije imunokonfliktne trudnoće u Republici Tatarstan”.

8. Naredba Ministarstva zdravstva Ruske Federacije od 25. prosinca 1997. br. 380 „O stanju i mjerama za poboljšanje laboratorijske podrške za dijagnostiku i liječenje pacijenata u zdravstvenim ustanovama Ruske Federacije”.

9. Naredba Ministarstva zdravstva Republike Tadžikistan od 16. srpnja 2004. br. 1047 „O postupku dobivanja, snimanja i pohranjivanja krvnih komponenti”.

10. Smjernice br. 52001-109 Ministarstva zdravstva Ruske Federacije, RNII hematologije i transfuziologije "Zahtjevi za provođenje imunohematoloških studija davatelja i primatelja u SEC-u iu medicinskim ustanovama", St. Petersburg, 2002. (enciklopedijska natuknica).

12. Metodološko pismo Ministarstva zdravstva i socijalnog razvoja Rusije od 10. listopada 2008. br. 15-4 / 3118-09 „O postupku provođenja imunohematoloških studija u trudnica, trudnica, fetusa i novorođenčadi”.

13. Smjernice "Organizacija imunoseroloških studija (određivanje krvne grupe i Rh - faktora) za pacijente u laboratorijima medicinskih ustanova u Samari i Samarskoj regiji."

14. Upute o postupku provođenja imunohematoloških studija pacijenata u zdravstvenim ustanovama Sankt Peterburga, 2005.