Kvalitativno određivanje proteina u urinu. Proteini u mokraći, laboratorijske pretrage

Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda odnosi se na polukvantitativne metode za određivanje ukupnog proteina u urinu. Metoda se temelji na Hellerovom prstenastom testu koji se sastoji u tome da na granici dušične kiseline i urina, u prisutnosti proteina, dolazi do koagulacije i pojave bijelog prstena.

Reagensi

50% otopina dušične kiseline odn reagens Larionova.
Priprema Larionova reagensa: pripremite zasićenu otopinu natrijevog klorida (20 - 30 g soli se otopi u 100 ml vode kada se zagrije, ostavi da stoji dok se ne ohladi). Supernatant se iscijedi, filtrira. U 99 ml filtrata dodajte 1 ml koncentrirane dušične kiseline. Umjesto dušične kiseline može se dodati 2 ml koncentrirane klorovodične kiseline.

Napredak definicije

U epruvetu se ulije 1 - 2 ml dušične kiseline (ili Larionskog reagensa), ostavi se da kiselina iscuri sa stijenki epruvete (5 - 8 minuta), inače, kada se proteinski urin naslagi, nastaje zamućenje. zbog miješanja dušične kiseline na stijenkama epruvete s urinom, što sprječava stvaranje izrazitog prstena . Stoga prethodno treba pripremiti niz epruveta s kiselinom. Uz stijenku epruvete pažljivo nanijeti istu količinu filtriranog prozirnog urina pipetom, nastojeći pritom ne protresti tekućinu u epruveti. Pojava tankog bijelog prstena na granici između dvije tekućine između 2. i 3. minute ukazuje na prisutnost proteina u koncentraciji od približno 0,033 g/l. Vrijeme nanošenja slojeva računa se kao četvrt minute.

Ako se prsten pojavi prije 2 minute nakon nanošenja slojeva, potrebno je urin razrijediti vodom i ponoviti nanošenje slojeva već razrijeđenog urina. Stupanj razrjeđivanja urina odabire se ovisno o vrsti prstena, odnosno njegovoj širini, zbijenosti i vremenu pojavljivanja. S filiformnim prstenom koji se pojavio prije 2 minute, urin se razrijedi 2 puta, sa širokim - 4 puta, sa kompaktnim - 8 puta, itd. Razrjeđivanje urina vrši se u epruveti mjerne centrifuge, izlijevajući urin u Oznaka od 1 ml i dodavanjem vode do oznake koliko puta se vrši uzgoj. Sadržaj epruvete temeljito se promiješa Pasteurovom pipetom s balonom. Ako se tijekom razrjeđivanja urina pojavi zamućenje, smjesu je potrebno ponovno filtrirati i samo prozirni filtrat nanijeti na dušičnu kiselinu. Koncentracija proteina se tada izračunava množenjem 0,033 s omjerom razrjeđivanja i izražava u gramima po litri (g/l). Takvo razrjeđenje urina je odabrano tako da kada se slojevito nanese na dušičnu kiselinu, prsten se pojavljuje 2. - 3. minute.

U slučaju da se između 1. i 4. minute s nerazrijeđenim ili razrijeđenim urinom formira prsten, može se koristiti Ehrlich-Althausenova korekcija kako se urin ne bi dodatno razrijedio (ovo štedi vrijeme). Autori su predložili da se odredi vrijeme pojavljivanja filamentoznog prstena i da se ispravi izračun za vrijeme. U ovom slučaju, količina proteina se izračunava množenjem 0,033 g/l sa stupnjem razrjeđenja i korekcijom.

Kada se prsten formira prije isteka 1 minute, potrebno je napraviti jedno frakcijsko razrjeđenje, naime 1,5 puta (dva dijela urina i 1 dio vode). Ovo razrjeđenje također se uzima u obzir pri izračunavanju količine proteina u urinu.

Primjer određivanja ukupnih bjelančevina u urinu metodom Brandberg-Roberts-Stolnikova.

Prilikom nanošenja urina na reagens odmah se formira široki prsten. Urin se razrijedi 4 puta (1 dio urina + 3 dijela vode), slojevito; odmah se dobije filiformni prsten. Potrebno je razrijediti postojeće razrjeđenje još 2 puta; prilikom nanošenja ovog razrjeđenja nakon 1,5 minute nastaje prsten. Ne možete se više razmnožavati.

Izračun proteina: urin je razrijeđen 4 i 2 puta, dakle, 8 puta. Količina proteina je 0,033*8*1 1/4 = 0,33 g/l

Nedostaci Brandberg-Roberts-Stolnikove metode:

• subjektivnost,
• napornost,
• smanjenje točnosti određivanja koncentracije proteina jer se urin razrjeđuje.

Vidi također:

Književnost:

• Priručnik "Metode laboratorijskih istraživanja u klinici", ed. prof. V. V. Menjšikov. - Moskva, "Medicina", 1987
• L. V. Kozlovskaya, A. Yu. Nikolaev. Udžbenik o kliničkim laboratorijskim metodama istraživanja. Moskva, Medicina, 1985
• A. Ya. Althausen, "Klinička laboratorijska dijagnostika" - Moskva, Medgiz, 1959.
• A. Ya. Lyubina, L. P. Ilyicheva i koautori, "Klinička laboratorijska istraživanja", Moskva, "Medicina", 1984.

Proteinurija (proteinurija) - pojava proteina u urinu u koncentracijama koje ga omogućuju identifikaciju kvalitativnim metodama.

razlikovati

• Bubrežna proteinurija i
• Ekstrarenalna (postrenalna) proteinurija

Bubrežna proteinurija

Bubrežna proteinurija uzrokovana je oštećenjem glomerularnog filtra ili disfunkcijom epitela uvijenih tubula.

Razlikovati selektivnu i neselektivnu proteinuriju ovisno o odnosu pojedinih proteina plazme i urina, njihovoj molekularnoj masi i naboju.

Selektivna proteinurija

Selektivna proteinurija javlja se s minimalnim (često reverzibilnim) kršenjem glomerularnog filtra, predstavljenog proteinima niske molekularne težine (molekulska težina ne prelazi 68 000) - albumin, ceruloplazmin, transferin.

Neselektivna proteinurija

Neselektivna proteinurija je češća kod ozbiljnijih oštećenja filtera, kada se počinju gubiti veliki molekularni proteini. Selektivnost proteinurije važna je dijagnostička i prognostička značajka.

Bubrežna proteinurija može biti:

• organski i
• funkcionalni (fiziološki).

Organska bubrežna proteinurija

Organska bubrežna proteinurija javlja se kod organskog oštećenja nefrona. Ovisno o prevladavajućem mehanizmu nastanka, razlikuju se određene vrste organske proteinurije.

Glomerularna proteinurija

Glomerularna proteinurija - zbog oštećenja glomerularnog filtra, javlja se kod glomerulonefritisa i nefropatije povezane s metaboličkim ili vaskularnim bolestima. (glomerulonefritis, hipertenzija, infektivni i alergijski faktori, srčana dekompenzacija)

tubularna proteinurija

Tubularna proteinurija – povezana s nesposobnošću tubula da reapsorbiraju proteine ​​niske molekularne mase plazme koji su prošli kroz nepromijenjeni glomerularni filter. (amiloidoza, akutna tubularna nekroza, intersticijski nefritis, Fanconijev sindrom)

Prerenalna proteinurija

Prerenalna proteinurija (pretjerana) - razvija se u prisutnosti neuobičajeno visoke koncentracije proteina niske molekularne težine u plazmi, koji se filtrira normalnim glomerulima u količini koja premašuje fiziološku sposobnost reapsorpcije tubula. (multipli mijelom, nekroza mišićnog tkiva, hemoliza eritrocita)

Funkcionalna bubrežna proteinurija

Funkcionalna bubrežna proteinurija nije povezana s bolešću bubrega i ne zahtijeva liječenje.

Funkcionalna proteinurija uključuje:

• marširanje,
• emotivan
• hladno,
• intoksikacija,
• ortostatski (samo u djece i samo u stojećem položaju).

Ekstrarenalna (postrenalna) proteinurija

S ekstrarenalnom (postrenalnom) proteinurijom, protein može ući u urin iz urinarnog i genitalnog trakta (s kolpitisom i vaginitisom - s nepravilno prikupljenim urinom). U ovom slučaju, to nije ništa drugo nego primjesa upalnog eksudata.

Ekstrarenalna proteinurija obično ne prelazi 1 g/dan i često je prolazna.

U dijagnozi ekstrarenalne proteinurije pomaže test s tri čaše i urološki pregled.

Postrenalna proteinurija javlja se kod cistitisa, uretritisa.

Metode određivanja proteina u mokraći

Preduvjet za provođenje studija o prisutnosti proteina je apsolutna transparentnost urina.

Kvalitetni uzorci

Uzorak sa sulfosalicilnom kiselinom

U dvije epruvete ulije se 3-4 ml filtriranog urina. U pokusnu epruvetu dodajte 6-8 kapi 20% otopine sulfosalicilne kiseline. Druga cijev je kontrolna. Na tamnoj podlozi usporedite kontrolnu epruvetu s pokusnom. U prisutnosti proteina u uzorcima urina pojavljuje se opalescentno zamućenje.

Rezultat je prikazan na sljedeći način:

• reakcija je slabo pozitivna (+),
• pozitivan (++),
• oštro pozitivan (+++).

Uzorak je vrlo osjetljiv.

Također možete koristiti suhi test, kada se u nekoliko mililitara urina doda nekoliko kristala sulfosalicilne kiseline ili filtar papir prethodno natopljen otopinom te kiseline.

Lažno pozitivni rezultati može biti posljedica uzimanja jodnih pripravaka, sulfanilamidnih lijekova, velikih doza penicilina i prisutnosti visokih koncentracija mokraćne kiseline u mokraći.

Test dušične kiseline (Gellerov test)

U epruvetu se ulije 1-2 ml 50%-tne otopine dušične kiseline, zatim se na kiselinu nasloži jednaka količina urina. U prisutnosti proteina, bijeli prsten se pojavljuje na granici između dvije tekućine. Ponekad se crvenkasto-ljubičasti prsten formira malo iznad granice između tekućina zbog prisutnosti urata. Uratni prsten, za razliku od proteinskog, otapa se blagim zagrijavanjem.

Svijetli uzorak

Bright boil test i testovi probira proteinurije (suhi kolorimetrijski uzorci) ne zahtijevaju gotovo nikakve reagense.

Kada se urin koji sadrži bjelančevine kuha, on denaturira, stvarajući mutni talog ili pahuljice koje se ne otapaju u 6% octenoj kiselini, za razliku od fosfatnih soli. Testovi probira temelje se na sposobnosti proteina (albumina) da promijeni boju papira obloženog indikatorom (obično bromofenol plavim) i puferom. Izravan odnos između intenziteta boje indikatorskog papira (Albufan, Albutest - Češka; Labstix, Multistix - SAD; Comburtest - Njemačka) i količine proteina omogućuje grubu procjenu količine proteinurije. Međutim, trenutno korišteni testovi probira nisu bez nedostataka. Konkretno, bromofenol plavo ne otkriva Bence-Jones protein.

Kvantitativne metode

Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda

Metoda se temelji na kvalitativnom uzorku s dušičnom kiselinom. Tijek testa je gore opisan. Pojava tankog prstena na granici dviju tekućina između 2. i 3. minute nakon raslojavanja ukazuje na prisutnost 0,033 g/l proteina u urinu (koncentracija proteina u urinu obično se izražava u ppm, tj. u gramima po litri ). Ako se prsten pojavi prije nego nakon 2 minute, urin treba razrijediti vodom. Takvo razrjeđenje urina je odabrano tako da kada se nanese na dušičnu kiselinu, prsten se pojavi u 2-3 minuti. Stupanj razrjeđenja ovisi o širini i zbijenosti prstena te vremenu njegovog pojavljivanja.

Koncentracija proteina izračunava se množenjem 0,033 g/l sa stupnjem razrjeđenja urina (Tablica 8).

Roberts-Stolnikova metoda razrjeđivanja ima niz nedostataka: subjektivna je, dugotrajna, točnost određivanja koncentracije proteina opada kako se urin razrjeđuje.

Najprikladnije i najtočnije su nefelometrijske i biuretske metode.

Nefelometrijska metoda

Temelji se na svojstvu proteina da sulfosalicilnom kiselinom daje zamućenje, čiji je intenzitet proporcionalan koncentraciji proteina. 1,25 ml filtriranog urina ulije se u graduiranu epruvetu i doda se 3% otopina sulfosalicilne kiseline do volumena od 5 ml, dobro promiješa. Nakon 5 minuta mjeri se ekstinkcija na FEK-M (ili bilo kojem drugom fotometru) na valnoj duljini od 590-650 nm (narančasti ili crveni svjetlosni filter) u odnosu na kontrolu u kiveti s debljinom sloja od 0,5 cm. Za kontrolu , koristi se 1,25 ml filtriranog urina (isto), kojemu se dodaje izotonična otopina natrijevog klorida do volumena od 5 ml.

Preliminarno se gradi kalibracijska krivulja ovisno o vrijednosti ekstinkcije na koncentraciju proteina. Standardna otopina albumina (iz ljudskog ili goveđeg seruma) koristi se za pripremu različitih koncentracija proteina. Ispunite radni list.

Biuretska metoda

Temelji se na sposobnosti proteina da s bakrenim sulfatom i kaustičnim alkalijama stvara ljubičasti biuret kompleks, čiji je intenzitet boje izravno proporcionalan količini proteina. U 2 ml urina dodajte 2 ml otopine trikloroctene kiseline za taloženje proteina i centrifugirajte. Supernatant se baci. Talogu (proteinu) dodati 4 ml 3% otopine NaOH i 0,1 ml 20% otopine bakrenog sulfata, promiješati i centrifugirati. Ljubičasti supernatant se fotometrira na valnoj duljini od 540 nm (zeleni svjetlosni filter) prema destiliranoj vodi u kiveti s debljinom sloja od 1,0 cm. Koncentracija proteina se određuje iz tablice dobivene empirijskim putem (kalibracijska krivulja se gradi kao u prethodnoj metoda).

Ortostatski test

Indiciran za sumnju na ortostatsku proteinuriju i nefroptozu. Nakon potpunog pražnjenja mokraćnog mjehura, ispitanik ostaje u vodoravnom položaju 2 sata, a zatim, bez ustajanja, ispušta jednu (kontrolnu) porciju urina. Tijekom sljedeća 2 sata ispitanik kontinuirano hoda zadržavajući položaj maksimalne lumbalne lordoze (drži štap iza donjeg dijela leđa), nakon čega ispušta drugu porciju urina. U oba dijela urina određuje se koncentracija proteina i sadržaj proteina u gramima, au slučaju nefroptoze broj crvenih krvnih stanica u 1 ml. S ortostatskom proteinurijom, proteinurija ili 2-3 puta povećanje početnog sadržaja proteina u gramima otkriva se u drugom obroku. Pojava hematurije, često u kombinaciji s proteinurijom u tragovima u drugom dijelu, karakteristična je za nefroptozu.

Određivanje Bence-Jones uroproteina

Bence-Jonesovi proteini su termolabilni paraproteini niske molekularne težine (relativna molekularna težina 20 000-45 000) koji se uglavnom nalaze u multiplom mijelomu i Waldenströmovoj makroglobulinemiji. Oni su laki L-lanci imunoglobulina. Zbog svoje male molekularne težine, L-lanci lako prolaze iz krvi kroz intaktni bubrežni filtar u urin i tamo se mogu odrediti reakcijom termoprecipitacije. Studiju je preporučljivo provoditi samo s pozitivnim testom na sulfosalicilnu kiselinu. Definicija se provodi na sljedeći način. U 10 ml urina dodajte 3-4 kapi 10% otopine octene kiseline i 2 ml zasićene otopine natrijevog klorida, lagano zagrijavajte u vodenoj kupelji, postupno povećavajući temperaturu. Ako u urinu postoje Bence-Jones proteini, tada se na temperaturi od 45–60 ° C pojavljuje difuzna zamućenost ili se formira gusti bijeli talog. Daljnjim zagrijavanjem do vrenja talog se otapa, a hlađenjem se ponovno pojavljuje. Ovaj uzorak nije dovoljno osjetljiv i mora se provjeriti elektroforezom i imunoelektroforezom.

Cilj- Određivanje proteina u urinu.

Indikacije- hipertenzivna stanja tijekom trudnoće, bolesti bubrega u trudnica

Kontraindikacije- Ne.

Moguće komplikacije- Ne

Resursi- posuda, sterilna staklenka, epruvete, 30% sulfosalicilna ili 3% octena kiselina, pipeta, alkoholni plamenik.

Algoritam akcije:

1. Objasnite trudnicu o potrebi određivanja proteina u mokraći.

2. Zamolite trudnicu da skupi urin u sterilnu staklenku.

3. Test sa sulfosalicilnom kiselinom: u epruvetu uliti 4-5 ml urina, dodati 6-10 kapi kiseline. Ako u mokraći ima proteina, nastaje talog ili zamućenje.

4. Uzorak s 3% octenom kiselinom: u epruvetu uliti 8-10 ml urina, prokuhati na alkoholnom plameniku, ako urin sadrži bjelančevine, zamutiti će se. U zamućenu mokraću dodajte nekoliko kapi 3% otopine octene kiseline. Ako zamućenje nestane u mokraći, test je negativan.

BILJEŠKE Određuje se u prijemnom odjelu opstetričke ustanove.

Standard "Određivanje datuma očekivanog datuma rođenja."

Cilj: procijeniti praktičnu sposobnost diplomanta u određivanju datuma očekivanog poroda

Indikacije- svaki dolazak trudnice u rodilište.

Kontraindikacije- Ne

Moguće komplikacije- Ne

Resursi- stol, dvije stolice, kalendar, opstetrički kalendar, pisani podaci o datumu prvog dana zadnje menstruacije, prvi pregled u trudnoći, datum ultrazvuka sa zaključkom, datum odlaska na trudnoću

Algoritam akcije:

1. Predstavite se, objasnite ženi značenje izračuna predviđenog termina poroda.
2. Saznajte prvi dan zadnje menstruacije od trudnice, dodajte 280 dana ovom datumu ili, koristeći Negeleovu formulu, dodajte 7 dana 1 danu zadnje menstruacije i oduzmite 3 mjeseca, dobiveni datum je termin poroda za menstruaciju.
3. Saznajte datum prvog pokreta fetusa, ovom danu dodajte 140 dana za prvorotke i 154 dana za višerotke, dobiveni datum je rok za pokretanje fetusa.
4. Prema menstrualnom ciklusu odredite na koji dan je bila zadnja ovulacija i od prvog dana zadnje menstruacije odbrojite tri mjeseca unazad i zbrojite broj dana prije ovulacije, dobijete datum rođenja.
5. Izračunajte termin poroda na prvom pojavljivanju u antenatalnoj klinici. Pogreška će biti minimalna ako je trudnica otišla liječniku u prvih 12 tjedana trudnoće.
6. Odredite datum poroda prema datumu prenatalnog dopusta. Razdoblje predporođajnog dopusta počinje u 30. tjednu trudnoće. Dodaje 10 tjedana ovom datumu, dobiva datum rođenja.
7. Izračunajte rok isporuke ultrazvukom koji se izvodi u antenatalnoj klinici.

Standard "Pregled vanjskih genitalija"

Cilj: vrednovati praktične vještine diplomanta pri pregledu vanjskog spolovila trudnice

Indikacije- početna žalba na opstetričku ustanovu trudnice, prijem u bolnicu s redovnom radnom aktivnošću.

Kontraindikacije- Ne

Moguće komplikacije- Ne

Resursi– ženski fantom, kauč, jednokratno donje rublje za kauč

Algoritam akcije:

1. Predstavite se, objasnite ženi važnost pregleda vanjskih spolnih organa, faze njegove provedbe, zatražite njezin pristanak

2. Izvršiti higijensku dezinfekciju ruku

3. Stavite sterilne rukavice na obje ruke.

4. Pregledajte vanjske spolne organe: procijenite vrstu dlakavosti, strukturu velikih i malih usana, klitoris, stanje perineuma.

5. Palcem i kažiprstom obje ruke raširiti velike usne, ispitati stanje vanjskog otvora mokraćne cijevi, predvorje rodnice, palpirati područje Bartholinovih žlijezda (donja trećina velikih usana).

6. Skinite rukavice za jednokratnu upotrebu i stavite ih u kutiju za sigurno odlaganje.

7. Operite ruke sapunom.

8. Pružiti trudnici podatke o stanju vanjskih spolnih organa.

9. Napravite bilješku u dokumentaciji.

BILJEŠKA Pregled se obavlja povjerljivo, bez ponižavanja dostojanstva žene.

Standard "Pružanje hitne pomoći za eklampsiju"

Cilj: procijeniti praktične vještine diplomanta koji pruža hitnu skrb za eklampsiju

Indikacije- Napadaji kod eklampsije

Kontraindikacije- Ne

Moguće komplikacije- ponavljani napadaji, eklamptična koma.

Resursi– model žene, 25% otopina magnezijevog sulfata, lopatica, držač za jezik, štrcaljka od 20 ml, fiziološka otopina od 500 ml, sustav za intravensku infuziju, alkohol, vata, podvez

Algoritam akcije:

1. U slučaju napadaja pozvati svo slobodno osoblje i tim za reanimaciju bez napuštanja pacijenta.

2. Učinite sljedeće u isto vrijeme:

· osloboditi dišne ​​putove otvaranjem usta lopaticom ili žličicom omotanom gazom, izvući jezik držačem za jezik.

Uklonite slinu iz usne šupljine, čim dođe do udisaja, osigurajte slobodan pristup zraku.

Nakon zaustavljanja napadaja intravenozno unesite početnu dozu magnezijevog sulfata - 25% -20 ml 10-15 minuta.

3. Započnite intravenoznu infuziju 320 ml fiziološke otopine s 80 ml - 25% otopine magnezijevog sulfata

4. Uz kontrolu krvnog tlaka i kontinuiranu terapiju magnezijem, pacijenticu prenijeti na nosila i transportirati u jedinicu intenzivnog liječenja najbližeg rodilišta.

BILJEŠKA

S eklampsijom, isporuka bi se trebala dogoditi nakon stabilizacije stanja pacijentice, ali najkasnije 12 sati od početka napadaja.

Standard "Hitna pomoć za tešku preeklampsiju".

Cilj: procijeniti praktične vještine diplomanta u pružanju hitne pomoći kod teške preeklampsije

Indikacije- teška preeklampsija

Kontraindikacije- tijekom napadaja

Moguće komplikacije- Napadaji, eklamptična koma.

Resursi– model žene, 25% otopina magnezijevog sulfata, štrcaljka od 20 ml, fiziološka otopina od 500 ml, sustav za intravensku infuziju, alkohol, vata, podvez

Algoritam akcije:

1. Dijagnoza: "Teška preeklampsija" ako je prisutan jedan od ovih simptoma: glavobolja, bol u epigastričnoj regiji, smetnje vida, mušice pred očima, mučnina, povraćanje, na pozadini arterijske hipertenzije (140/90 mm Hg i više). ) i proteinurija.

2. Pozvati svo slobodno osoblje i tim za reanimaciju bez napuštanja pacijenta.

3. Učinite sljedeće u isto vrijeme:

Položite trudnicu na ravnu površinu, izbjegavajući oštećenje i okrenite glavu pacijenta na jednu stranu.

Intravenozno unesite početnu dozu magnezijevog sulfata - 25% -20 ml 10-15 minuta.

4. Započnite intravensku infuziju 320 ml fiziološke otopine s 80 ml 25% otopine magnezijevog sulfata.

5. Kada je krvni tlak jednak ili viši od 160/100 mm Hg. regulirati krvni tlak propisivanjem 10 mg nifedipina sublingvalno, ponovno nakon 30 minuta 10 mg uz kontrolu krvnog tlaka (održavati krvni tlak na 130/90-140/95 mm Hg).

6. Uz kontrolu krvnog tlaka i kontinuiranu terapiju magnezijem, pacijenticu prebaciti na nosila i transportirati u jedinicu intenzivnog liječenja najbližeg rodilišta.

BILJEŠKA Ako se pojave znakovi predoziranja magnezijevim sulfatom, ubrizgajte 10 ml 10% otopine Ca glukonata intravenozno tijekom 10 minuta.

Standard amniotomije.

Cilj- otvaranje fetalnog mjehura.

Indikacije- prije indukcije porođaja, stimulacije porođaja, slabosti porođaja Kontraindikacije- prijeteća stanja majke ili fetusa

Moguće komplikacije- prolaps malih dijelova ploda, uzlazna infekcija, ozljeda krvnih žila fetalnog mjehura, odljuštenje normalno smještene posteljice

Resursi- ginekološku stolicu, individualnu pelenu, sterilne rukavice, antiseptik za liječenje vanjskih genitalija žene, ogranak pincete.

Algoritam akcije:

1. Predstavite se.

2. Objasnite ženi potrebu za ovom operacijom.

3. Uzmite informirani pristanak pacijenta za postupak

4. Položite ženu na ginekološku stolicu s krevetom za jednokratnu upotrebu ispod nje.

5. Tretirajte vanjske spolne organe žene antiseptičkom otopinom, stavite sterilnu pelenu na želudac.

6. Izvršiti higijensku dezinfekciju ruku.

7. Nosite jednokratne rukavice na obje ruke.

8. Raširite stidne usne prstima lijeve ruke, uzastopno umetnite u vaginu

kažiprst, zatim srednji prst desne ruke.

9. Unesite granu kliješta u vaginu između indeksa i sredine

prstima.

10. Probušiti amnionsku vrećicu.

11. Unesite kažiprst, a zatim srednji prst u rupu u fetalnom mjehuru, postupno proširite rupu, uklonite membrane s glave. Polako, pod kontrolom prstiju, ispuštati amnionsku tekućinu (prevencija prolapsa sitnih dijelova, odljuštenja normalno smještene posteljice).

13. Izvucite prste.

14. Skinite rukavice i stavite ih u kutiju za sigurno odlaganje.

15. Perite ruke sapunom.

16. Zapišite podatke u povijest poroda.

BILJEŠKA.

Kod polihidramnija se napravi mala rupica i voda se polako ispušta. Potrebno je kontrolirati brzinu istjecanja vode, jer s njihovim brzim i oštrim istjecanjem mali dijelovi fetusa mogu ispasti. Nakon što vodenjak pukne, ženi se preporučuje da leži 30 minuta.

Uputa

Kvalitativne metode za određivanje proteina u urin: Hellerova metoda, test 20% sulfosalicilne kiseline, test kuhanjem itd. Polukvantitativne metode: upotreba dijagnostičkih test traka za određivanje proteina u urin, Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda. Kvantitativne metode: turbidimetrijske i kolorimetrijske.

Određivanje dnevnih proteina urin u koncentraciji od 0,033 g/litri ili više je patologija. U pravilu, u jutarnjem dijelu urina koncentracija proteina ne prelazi 0,002 g / l, au dnevnom urin koncentracija proteina nije veća od 50-150 mg proteina.

Izvori:

• određivanje proteina u urinu

Urin je proizvod ljudskog metabolizma. Nastaje tijekom filtracije krvi u bubrezima, zbog čega sastav urina daje jasan opis stanja ljudskog tijela.

Urin je složena otopina više od 150 spojeva. Neke specifične tvari, na primjer, aceton, žučne kiseline, proteini, glukoza, mogu biti prisutne samo kod određenih bolesti.

Za kontrolu ljudskog zdravlja, prije svega, potrebno je odrediti količinu urina. Norma je stvaranje 1-1,8 litara urina dnevno. Kada se izluči više od 2 litre urina, to je znak mogućeg poremećaja u radu bubrega, dijabetes melitusa i niza drugih bolesti. Ako se dnevno stvara manje od 0,5 litara urina, radi se o začepljenju uretera ili mokraćnog mjehura.

boja urina

Boja izlučenog urina ovisi o mnogim čimbenicima, pa može varirati, od svijetložute do narančaste. Na prisutnost određenih nijansi može utjecati određena hrana, kao i lijekovi koje osoba uzima.

Nakon uzimanja lijekova, urin može postati obojen i dobiti crvenkastu nijansu. Ako se osoba aktivno kreće, dok oslobađa veliku količinu znoja, urin će imati intenzivnu žutu boju, kao kod uzimanja lijekova kao što su Nitroxoline ili Biomycin.

Ako osoba nije uzimala nikakve boje i lijekove, ali je boja urina drugačija od uobičajene, može se posumnjati na prisutnost bolesti u tijelu. Na primjer, kod bolesti jetre, urin će imati tamnožutu ili zelenkastu boju.

Prisutnost krvi u izlučenoj mokraći jasno ukazuje na prisutnost kamenca ili bubrežnog krvarenja, ako se primjećuje i bol.

Ako je mokrenje otežano, to može ukazivati ​​na upalni proces uzrokovan infekcijom u mjehuru. Ali prljava i mutna mokraća ukazuje na tešku bolest bubrega.

Protein u mokraći

U krvi osobe nema bjelančevina ili je njihova količina toliko mala da se ne može utvrditi pomoću laboratorijskih testova. Ako se otkrije protein u urinu, potrebno je provesti ponovljene testove, jer može biti prisutan kada se osoba probudi ujutro, kao i nakon teškog fizičkog rada ili vježbe kod sportaša.

Vizualno odrediti je li protein prisutan u mokraći ili ne je 100% nemoguće. Može se samo nagađati kada je velika količina bjelkastih pahuljica u mokraći.

Ako se bjelančevine u mokraći opetovano otkrivaju, to ukazuje na prisutnost neke vrste bolesti bubrega. Upalni procesi koji se javljaju u njima izazivaju blagi porast količine proteina. Ako se mokraćom izluči više od 2 grama, to je znak za uzbunu.

Pijelonefritis je upalna bolest koja zahvaća bubrežnu zdjelicu, čašice i parenhim. U većini slučajeva upalu uzrokuje bakterijska infekcija. Potpuni oporavak moguć je samo uz pravovremenu dijagnozu, stoga, kada se pojave simptomi, potrebno je temeljito ispitivanje.

Male količine proteina nalaze se u dnevnoj mokraći zdravih osoba. Međutim, tako male koncentracije ne mogu se otkriti konvencionalnim metodama istraživanja. Izlučivanje veće količine bjelančevina, pri čemu uobičajeni kvalitativni testovi na bjelančevine u mokraći postanu pozitivni, nazivamo proteinurija. Razlikuju se renalna (prava) i ekstrarenalna (lažna) proteinurija. Kod bubrežne proteinurije, protein ulazi u urin izravno iz krvi zbog povećanja njegove filtracije u glomerulima bubrega ili smanjenja tubularne reapsorpcije.

Bubrežna (prava) proteinurija

Bubrežna (prava) proteinurija je funkcionalna i organska. Među funkcionalnom bubrežnom proteinurijom najčešće se opažaju sljedeće vrste:

Fiziološka proteinurija novorođenčadi, koja nestaje 4. - 10. dana nakon rođenja, a kod nedonoščadi nešto kasnije;
- ortostatska albuminurija, koja je tipična za djecu od 7-18 godina i pojavljuje se samo u uspravnom položaju tijela;
- prolazna (moždana) albuminurija, koja može biti uzrokovana raznim bolestima probavnog sustava, teškom anemijom, opeklinama, ozljedama ili fiziološkim čimbenicima: teškim fizičkim naporom, hipotermijom, jakim emocijama, obilnom hranom bogatom proteinima i dr.

Organska (renalna) proteinurija uočena je zbog prolaska proteina iz krvi kroz oštećena područja endotela bubrežnih glomerula kod bolesti bubrega (glomerulonefritis, nefroza, nefroskleroza, amiloidoza, nefropatija trudnoće), poremećaja bubrežne hemodinamike (renalna venska hipertenzija, hipoksija), trofičke i toksične (uključujući i ljekovite) učinke na stijenke glomerularnih kapilara.

Ekstrarenalna (lažna) proteinurija

Ekstrarenalna (lažna) proteinurija, u kojoj je izvor proteina u urinu primjesa leukocita, eritrocita, bakterija, urotelnih stanica. opaženo u urološkim bolestima (urolitijaza, tuberkuloza bubrega, tumori bubrega i mokraćnog trakta itd.).

Određivanje proteina u urinu

Većina kvalitativnih i kvantitativnih metoda za određivanje proteina u urinu temelji se na njegovoj koagulaciji u volumenu urina ili na granici medija (urin i kiselina).

Od kvalitativnih metoda za određivanje bedke u mokraći najviše se koriste unificirani test sa sulfosalicilnom kiselinom i Hellerov prstenasti test.

Standardizirani uzorak sa sulfasalicilnom kiselinom provodi se na sljedeći način. 3 ml filtriranog urina se ulije u 2 epruvete. U jednu od njih dodajte 6-8 kapi 20% otopine sulfasalicilne kiseline. Obje cijevi se uspoređuju na tamnoj pozadini. Zamućenost urina u epruveti sa sulfasalicilnom kiselinom ukazuje na prisutnost proteina. Prije studije potrebno je odrediti reakciju urina, a ako je alkalna, zakiseliti s 2-3 kapi 10% otopine octene kiseline.

Gellerov test temelji se na činjenici da u prisutnosti bjelančevina u urinu na granici dušične kiseline i urina dolazi do njegove koagulacije i pojave bijelog prstena. U epruvetu se ulije 1-2 ml 30%-tne otopine dušične kiseline i točno ista količina procijeđenog urina pažljivo se slojevito rasporedi po stijenci epruvete. Pojava bijelog prstena na granici između dvije tekućine ukazuje na prisutnost proteina u urinu. Treba imati na umu da se ponekad bijeli prsten formira u prisutnosti velike količine urata, ali za razliku od proteinskog prstena, on se pojavljuje malo iznad granice između dvije tekućine i otapa se kada se zagrije [Pletneva N.G., 1987].

Najčešće korištene kvantitativne metode su:

1) jedinstvena Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda, koja se temelji na Hellerovom prstenastom testu;
2) fotoelektrokolorimetrijska metoda za kvantitativno određivanje bjelančevina u mokraći zamućenjem koje nastaje dodatkom sulfasalicilne kiseline;
3) biuretska metoda.

Detekcija proteina u urinu pojednostavljenom ubrzanom metodom provodi se kolorimetrijskom metodom pomoću indikatorskog papira proizvođača Lachema (Slovačka), Albuphan, Ames (Engleska), Albustix, Boehringer (Njemačka), Comburtest i dr. Metoda se sastoji od uranjanje posebne papirnate trake impregnirane tetrabromfenol plavim i citratnim puferom u mokraću, koja mijenja boju od žute do plave ovisno o sadržaju proteina u mokraći. Uvjetno se koncentracija proteina u ispitivanom urinu određuje pomoću standardne ljestvice. Za dobivanje ispravnih rezultata moraju biti ispunjeni sljedeći uvjeti. pH urina treba biti u rasponu od 3,0-3,5; previše alkalan urin (pH 6,5) dat će lažno pozitivan rezultat, a previše kiseli urin (pH 3,0) lažno negativan.

Papir ne smije biti u kontaktu s testnim urinom dulje nego što je navedeno u uputama, inače će test dati lažno pozitivnu reakciju. Potonji se također opaža kada postoji velika količina sluzi u urinu. Osjetljivost različitih vrsta i serija papira može biti različita, pa kvantitativnu procjenu proteina u urinu ovom metodom treba tretirati s oprezom. Određivanje njegove količine u dnevnoj mokraći pomoću indikatorskog papira je nemoguće (Pletneva N.G., 1987.)

Definicija dnevne proteinurije

Postoji nekoliko načina za određivanje količine proteina izlučenih u urinu dnevno. Najjednostavnija je Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda.

Metodologija. U epruvetu se ulije 5-10 ml temeljito promiješanog dnevnog urina i uz njezine stijenke pažljivo se doda 30% otopina dušične kiseline. U prisustvu proteina u urinu u količini od 0,033% (tj. 33 mg na 1 litru urina), nakon 2-3 minute pojavljuje se tanak, ali jasno vidljiv bijeli prsten. Kod niže koncentracije test je negativan. S većim sadržajem bjelančevina u urinu, njegova se količina određuje ponovljenim razrjeđivanjem urina destiliranom vodom sve dok se prsten ne prestane stvarati. U posljednjoj epruveti u kojoj je prsten još vidljiv koncentracija proteina bit će 0,033%. Množenjem 0,033 sa stupnjem razrjeđenja urina odredite sadržaj proteina u 1 litri nerazrijeđenog urina u gramima. Tada se sadržaj proteina u dnevnom urinu izračunava formulom:

K \u003d (x V) / 1000

Gdje je K količina proteina u dnevnoj mokraći (g); x je količina proteina u 1 litri urina (g); V je količina izlučenog urina po danu (ml).

Normalno se tijekom dana mokraćom izluči od 27 do 150 mg (prosječno 40-80 mg) bjelančevina.

Ovaj test vam omogućuje da odredite u urinu samo fine proteine ​​(albumin). Preciznije kvantitativne metode (kolorimetrijska Kjeldahl metoda i dr.) dosta su složene i zahtijevaju posebnu opremu.

S bubrežnom proteinurijom, ne samo albumini, već i druge vrste proteina izlučuju se urinom. Normalan proteinogram (prema Seitzu i sur., 1953.) ima sljedeći postotak: albumini - 20%, α 1 -globulini - 12%, α 2 -globulini - 17%, γ-globulini - 43% i β-globulini - 8% . Omjer albumina i globulina mijenja se s različitim bolestima bubrega, t.j. narušen je kvantitativni odnos između frakcija proteina.

Najčešće metode frakcioniranja uroproteina su: isoljavanje neutralnim solima, elektroforetska frakcionacija, imunološke metode (radijalna imunodifuzijska reakcija po Manciniju, imunoelektroforetska analiza, precipitacijska imunoelektroforeza), kromatografija, gel filtracija i ultracentrifugiranje.

U vezi s uvođenjem metoda frakcioniranja uroproteina na temelju proučavanja elektroforetske pokretljivosti, varijabilnosti molekularne težine, veličine i oblika molekula uroproteina, postalo je moguće izolirati tipove proteinurije karakteristične za određenu bolest, proučavati klirense pojedinačnih proteina plazme. Do danas je u urinu identificirano više od 40 proteina plazme, uključujući 31 protein plazme u normalnom urinu.

Selektivna proteinurija

Posljednjih godina pojavio se koncept selektivnosti proteinurije. Godine 1955. Hardwicke i Squire formulirali su koncept "selektivne" i "neselektivne" proteinurije, utvrdivši da filtracija proteina plazme u urinu slijedi određeni obrazac: što je veća molekularna težina proteina izlučenog urinom, manji mu je klirens i niža koncentracija u mokraći.konačni urin. Proteinurija, koja odgovara ovom uzorku, je selektivna, za razliku od neselektivne, za koju je karakteristična perverzija dobivenog uzorka.

Otkrivanje proteina s relativno velikom molekularnom težinom u urinu ukazuje na odsutnost selektivnosti bubrežnog filtra i njegovu izraženu štetu. U tim slučajevima se govori o niskoj selektivnosti proteinurije. Stoga je trenutno određivanje proteinskih frakcija urina metodama elektroforeze u škrobnim i poliakrilamidnim gelovima postalo široko rasprostranjeno. Na temelju rezultata ovih istraživačkih metoda može se suditi o selektivnosti proteinurije.

Prema V. S. Makhlini (1975), najopravdanije je određivanje selektivnosti proteinurije usporedbom klirensa 6-7 pojedinačnih proteina krvne plazme (albumin, traneferin, α 2 - makroglobulin, IgA, IgG, IgM) pomoću točnih i specifične kvantitativne imunološke metode reakcije radijalne imunodifuzije po Manciniju, imunoelektroforetska analiza i precipitacijska imunoelektroforeza. Stupanj selektivnosti proteinurije određen je indeksom selektivnosti, koji je omjer uspoređenih i referentnih proteina (albumina).

Proučavanje klirensa pojedinačnih proteina plazme omogućuje dobivanje pouzdanih informacija o stanju filtracijskih bazalnih membrana glomerula bubrega. Odnos između prirode proteina izlučenih u urinu i promjena u bazalnim membranama glomerula toliko je izražen i stalan da se uroproteinogramom može neizravno prosuditi o patofiziološkim promjenama u glomerulima bubrega. Normalno, prosječna veličina pora glomerularne bazalne membrane je 2,9-4 A ° NM, koja može proći proteine ​​molekularne težine do 10 4 (mioglobulin, kiselina α 1 - glikoprotein, laki lanci imunoglobulina, Fc i Fab - IgG fragmenti, albumin i transferin).

S glomerulonefritisom, nefrotskim sindromom, povećavaju se veličine pora u bazalnim membranama glomerula, pa stoga bazalna membrana postaje propusna za proteinske molekule velike veličine i mase (ceruloplazmin, haptoglobin, IgG, IgA, itd.). S ekstremnim stupnjem oštećenja glomerula bubrega, u urinu se pojavljuju divovske molekule proteina krvne plazme (α 2 -makroglobulin, IgM i β 2 -lipoprotein).

Utvrđivanjem proteinskog spektra urina može se zaključiti da su pretežno zahvaćeni pojedini dijelovi nefrona. Za glomerulonefritis s pretežnom lezijom bazalnih membrana glomerula, karakteristična je prisutnost proteina velike i srednje molekularne težine u urinu. Za pijelonefritis s pretežnom lezijom bazalnih membrana tubula karakteristična je odsutnost velikih molekularnih proteina i prisutnost povećane količine proteina srednje i niske molekularne težine.

β 2 -Mikroglobulin

Osim dobro poznatih proteina kao što su albumini, imunoglobulini, lipoproteini. fibrinogen, transferin, urin sadrži mikroproteinske proteine ​​plazme, među kojima je od kliničkog interesa β 2 -mikroglobulin, koji su otkrili Berggard i Bearn 1968. Ima malu molekulsku masu (relativna molekularna masa 1800), slobodno prolazi kroz glomerule bubrega. i reapsorbira se u proksimalnim tubulima. To omogućuje kvantitativno određivanje β 2 -mikroglobulina u krvi i urinu kako bi se odredila glomerularna filtracija i sposobnost bubrega da resorbiraju proteine ​​u proksimalnim tubulima.

Koncentracija ovog proteina u krvnoj plazmi i urinu određena je radioimunotestom pomoću standardnog pribora "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Švedska). Krvni serum zdravih ljudi sadrži prosječno 1,7 mg / l (raspon od 0,6 do 3 mg / l), u urinu - prosječno 81 μg / l (maksimalno 250 μg / l) β 2 -mikroglobulina. Njegov višak u mokraći iznad 1000 mcg/l je patološka pojava. Sadržaj β2-mikroglobulina u krvi povećava se kod bolesti praćenih oštećenjem glomerularne filtracije, osobito kod akutnog i kroničnog glomerulonefritisa, policistične bolesti bubrega, nefroskleroze, dijabetičke nefropatije, akutnog zatajenja bubrega.

Koncentracija β 2 -mikroglobulina u urinu povećava se s bolestima popraćenim kršenjem reapsorpcijske funkcije tubula, što dovodi do povećanja njegovog izlučivanja u urinu za 10-50 puta, osobito s pijelonefritisom, kroničnim bubrežnim neuspjeh, gnojna intoksikacija, itd. Karakteristično je da kod cistitisa, za razliku od pijelonefritisa, nema povećanja koncentracije β 2 -mikroglobulina u mokraći, što se može koristiti za diferencijalnu dijagnozu ovih bolesti. Međutim, pri tumačenju rezultata studije mora se uzeti u obzir da je svako povećanje temperature uvijek popraćeno povećanjem izlučivanja β 2 -mikroglobulina u urinu.

Prosječne molekule krvi i urina

Srednje molekule (SM), inače zvane proteinski toksini, tvari su molekulske mase 500-5000 daltona. Njihova fizička struktura je nepoznata. Sastav SM uključuje najmanje 30 peptida: oksitocin, vazopresin, angiotenzin, glukagon, adrenokortikotropni hormon (ACTH) itd. Prekomjerno nakupljanje SM uočeno je s smanjenjem funkcije bubrega i velikom količinom deformiranih proteina i njihovih metabolita u krv. Imaju niz bioloških učinaka i neurotoksični su, uzrokuju sekundarnu imunosupresiju, sekundarnu anemiju, inhibiraju biosintezu proteina i eritropoezu, inhibiraju aktivnost mnogih enzima i remete faze upalnog procesa.

Razina SM u krvi i urinu određuje se testom probira, kao i spektrofotometrijom u ultraljubičastoj zoni na valnoj duljini 254 i 280 mm na spektrofotometru DI-8B, te dinamičkom spektrofotometrijom s računalnom obradom u valnoj duljini. rasponu od 220-335 nm na istom Beckman spektrometru. Sadržaj SM u krvi uzima se kao norma, jednaka 0,24 ± 0,02 arb. jedinica, au urinu - 0,312 ± 0,09 arb. jedinice
Budući da su normalni otpadni proizvodi tijela, noću se iz njega uklanjaju glomerularnom filtracijom za 0,5%; 5% ih se zbrinjava na drugi način. Sve frakcije SM podliježu tubularnoj reapsorpciji.

Neplazmatski (tkivni) uroproteini

Osim bjelančevina krvne plazme, u mokraći mogu biti i bjelančevine neplazme (tkiva). Prema Buxbaumu i Franklinu (1970.), neplazmatski proteini čine približno 2/3 svih urinarnih biokoloida i značajan udio uroproteina u patološkoj proteinuriji. Tkivni proteini ulaze u mokraću izravno iz bubrega ili organa koji su anatomski povezani s mokraćnim traktom ili ulaze u krv iz drugih organa i tkiva, a iz nje kroz bazalne membrane glomerula bubrega u mokraću. U potonjem slučaju, izlučivanje tkivnih bjelančevina u mokraću događa se slično izlučivanju bjelančevina plazme različite molekularne težine. Sastav uroproteina izvan plazme izuzetno je raznolik. Među njima su glikoproteini, hormoni, antigeni, enzimi (enzimi).

Tkivne bjelančevine u mokraći detektiraju se konvencionalnim metodama kemije proteina (ultracentrifugiranje, gel kromatografija, razne vrste elektroforeze), specifičnim reakcijama na enzime i hormone te imunološkim metodama. Potonji također omogućuju određivanje koncentracije uroproteina koji nije u plazmi u urinu i, u nekim slučajevima, određivanje struktura tkiva koje su postale izvor njegovog izgleda. Glavna metoda za otkrivanje proteina koji nisu plazma u urinu je imunodifuzijska analiza s antiserumom dobivenim imunizacijom pokusnih životinja ljudskim urinom i naknadno osiromašenim (adsorbiranim) proteinima krvne plazme.

Ispitivanje enzima u krvi i urinu

U patološkom procesu opažaju se duboki poremećaji vitalne aktivnosti stanica, popraćeni oslobađanjem intracelularnih enzima u tekuće medije tijela. Enzimodijagnostika se temelji na određivanju niza enzima koji se oslobađaju iz stanica zahvaćenih organa i nisu karakteristični za krvni serum.
Istraživanja ljudskog i životinjskog nefrona pokazala su da u njegovim pojedinačnim dijelovima postoji visoka enzimska diferencijacija, usko povezana s funkcijama koje svaki odjel obavlja. Glomeruli bubrega sadrže relativno male količine različitih enzima.

Stanice bubrežnih tubula, osobito proksimalnih, sadrže maksimalnu količinu enzima. Njihova visoka aktivnost opažena je u Henleovoj petlji, izravnim tubulima i sabirnim kanalima. Promjene u aktivnosti pojedinih enzima kod različitih bolesti bubrega ovise o prirodi, težini i lokalizaciji procesa. Oni se promatraju prije pojave morfoloških promjena u bubrezima. Budući da je sadržaj različitih enzima jasno lokaliziran u nefronu, određivanje jednog ili drugog enzima u mokraći može pridonijeti topikalnoj dijagnozi patološkog procesa u bubrezima (glomeruli, tubuli, korteks ili medula), diferencijalnoj dijagnozi bubrežne bolesti i utvrđivanje dinamike (slabljenje i pogoršanje) procesa u bubrežnom parenhimu.

Za diferencijalnu dijagnozu bolesti genitourinarnog sustava koristi se određivanje aktivnosti u krvi i urinu sljedećih enzima: laktat dehidrogenaze (LDH), leucin aminopeptidaze (LAP), kisele fosfataze (AP), alkalne fosfataze (AP) , β-glukuronidaza, glutamin-oksaloacet transaminaza (GST), aldolaza, transamidinaza itd. Aktivnost enzima u krvnom serumu i urinu određuje se biokemijskim, spektrofotometrijskim, kromatografskim, fluorimetrijskim i kemiluminiscentnim metodama.

Enzimurija kod bolesti bubrega je izraženija i pravilnija od enzimemije. Posebno je izražen u akutnom stadiju bolesti (akutni pijelonefritis, trauma, raspad tumora, infarkt bubrega i dr.). Kod ovih bolesti nalazi se visoka aktivnost transamidinaze, LDH, alkalne fosfataze i CP, hijaluronidaze, LAP, kao i takvih nespecifičnih enzima kao što su GST, katalaza [Polyantseva LR, 1972].

Selektivna lokalizacija enzima u nefronu nakon otkrivanja LAP-a i alkalne fosfataze u urinu omogućuje nam da s pouzdanjem govorimo o akutnim i kroničnim bolestima bubrega (akutno zatajenje bubrega, nekroza bubrežnih tubula, kronični glomerulonefritis) [Shemetov V.D., 1968]. Prema A. A. Karelin i L. R. Polyantseva (1965), transamidinaza se nalazi samo u dva organa - bubregu i gušterači. To je mitohondrijski enzim bubrega i normalno ga nema u krvi i urinu. S raznim bolestima bubrega, transamidinaza se pojavljuje u krvi i urinu, a s oštećenjem gušterače - samo u krvi.

Diferencijalni test u dijagnozi glomerulonefritisa i pijelonefritisa Krotkiewski (1963) razmatra aktivnost alkalne fosfataze u urinu, čije je povećanje tipičnije za pijelonefritis i dijabetičku glomerulosklerozu nego za akutni i kronični nefritis. Povećanje dinamike amilasemije uz istodobno smanjenje amilazurije može ukazivati ​​na nefrosklerozu i naboranje bubrega, LAP je najvažniji za patološke promjene u glomerulima i zavijenim tubulima bubrega, budući da je njegov sadržaj u tim dijelovima nefrona veći [Shepotinovsky V.P. i sur., 1980]. Za dijagnozu lupus nefritisa preporučuje se određivanje β-glukuronidaze i CF [Privalenko M.N. i sur., 1974].

Pri procjeni uloge enzimurije u dijagnozi bolesti bubrega treba uzeti u obzir sljedeće odredbe. Enzimi, koji su po svojoj prirodi proteini, s malom molekularnom težinom mogu proći kroz netaknute glomerule, određujući takozvani fiziološki enzim. Među tim enzimima, α-amilaza (relativne molekularne težine 45 000) i uropepsin (relativne molekularne težine 38 000) stalno se otkrivaju u mokraći.

Uz niskomolekularne enzime u urinu zdravih osoba mogu se u malim koncentracijama naći i drugi enzimi: LDH, aspartat i alanin aminotransferaze, alkalna fosfataza i CP, maltaza, aldolaza, lipaza, razne proteaze i peptidaze, sulfataza, katalaza, ribonukleaza, peroksidaza.

Visokomolekularni enzimi s relativnom molekulskom masom većom od 70 000-100 000, prema Richterichu (1958) i Hessu (1962), mogu ući u mokraću samo ako je narušena propusnost glomerularnog filtra. Normalni sadržaj enzima u urinu ne dopušta isključivanje patološkog procesa u bubregu s okluzijom uretera. S epimurijom, oslobađanje enzima moguće je ne samo iz samih bubrega, već i iz drugih parenhimskih organa, stanica sluznice mokraćnog trakta, prostate, kao i formiranih elemenata urina s hematurijom ili leukociturijom.

Većina enzima je nespecifična za bubrege, pa je teško utvrditi odakle potječu enzimi koji se nalaze u urinu zdravih i bolesnih ljudi. Međutim, stupanj enzimurije, čak i za nespecifične enzime kod oštećenja bubrega, veći je od normalnog ili od onog koji se opaža kod bolesti drugih organa. Vrijednije informacije mogu se dati opsežnim proučavanjem dinamike niza enzima, osobito onih specifičnih za organe, poput transaminaze.

U rješavanju pitanja bubrežnog podrijetla enzima u urinu, proučavanje izoenzima pomaže identificirati frakcije tipične za organ koji se proučava. Izoenzimi su enzimi koji su po djelovanju izogeni (kataliziraju istu reakciju), ali heterogeni po kemijskoj strukturi i drugim svojstvima. Svako tkivo ima svoj izoenzimski spektar. Vrijedne metode za razdvajanje izoenzima su elektroforeza u škrobnom i poliakrilamidnom gelu, kao i kromatografija ionske izmjene.

Bence Jones protein

Uz multipli mijelom i Waldenströmovu makroglobulinemiju, protein Bence-Jones nalazi se u urinu. Metoda otkrivanja ovog proteina u mokraći temelji se na reakciji termoprecipitacije. Prethodno korištene metode koje procjenjuju otapanje ovog proteina na temperaturi od 100 ° C i ponovno taloženje nakon naknadnog hlađenja su nepouzdane, jer nemaju sva Bence-Jonesova proteinska tijela odgovarajuća svojstva.

Pouzdanija detekcija ovog paraproteina njegovim taloženjem na temperaturi od 40-60 °C. Međutim, čak i pod tim uvjetima, oborina se možda neće pojaviti u previše kiselim (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) urin, s niskom OPM i niskom koncentracijom Bence-Jones proteina. Najpovoljnije uvjete za njegovo taloženje pruža metoda koju je predložio Patnem: 4 ml filtriranog urina pomiješa se s 1 ml 2 M acetatnog pufera pH 4,9 i zagrijava 15 minuta u vodenoj kupelji na temperaturi od 56 °C. U prisutnosti Bence-Jones proteina, tijekom prve 2 minute pojavljuje se izražen talog.

Pri koncentraciji Bence-Jones proteina manjoj od 3 g / l, test može biti negativan, ali u praksi je to izuzetno rijetko, jer je njegova koncentracija u urinu obično značajnija. Ne može se u potpunosti pouzdati u uzorke vrenja. S potpunom sigurnošću može se dokazati u urinu imunoelektroforetskom metodom pomoću specifičnih seruma protiv teških i lakih lanaca imunoglobulina.