შარდში ცილის ხარისხობრივი განსაზღვრა. ჩამოტვირთეთ წიგნი "კლინიკური ლაბორატორიული ტესტები" (2.84 Mb) ჰელერის ტესტის ჩასატარებლად გამოიყენეთ

მეთოდის პრინციპი:

შარდის ფარდობითი სიმკვრივე ჩვეულებრივ არის 1,015-1,025 გ/სმ3. შარდის ფარდობითი სიმკვრივე განისაზღვრება სპეციალური მცირე ჰიდრომეტრების გამოყენებით, რომელსაც ეწოდება ურომეტრები. ურომეტრები ორგვარია: პირველი - დაბალი და ნორმალური ფარდობითი სიმკვრივის შარდისთვის (1000-დან 1030 გ/სმ3-მდე დაყოფით), მეორე - მაღალი ფარდობითი სიმკვრივის შარდისთვის (1030-დან 1060 გ/სმ3-მდე დაყოფით).

პროგრესი

პატარა ცილინდრში ისეთი დიამეტრით, რომ მასში ურომეტრი თავისუფლად ცურავს, დაასხით ტესტის შარდი კედლის გასწვრივ და ფრთხილად ჩაყარეთ მასში ურომეტრი. ჩვენება ხდება ურომეტრის შკალაზე ხაზის აღებით, რომელიც შეესაბამება სითხის ქვედა მენისკუსს. ყველა განსაზღვრა ხდება 20 0 C ტემპერატურაზე, ვინაიდან ურომეტრის სკალა დაკალიბრებულია ამ ტემპერატურის შესაბამისად. თუ შარდს აქვს განსხვავებული ტემპერატურა, მაშინ ამ ტემპერატურის ზემოთ ყოველ 3 0 C-ზე თქვენ უნდა დაამატოთ, ხოლო ყოველ 3 0 C-ზე ქვემოთ - 0,001 გამოაკლოთ ურომეტრის სკალის მაჩვენებელს.

შარდის პათოლოგიური კომპონენტების გამოვლენა

1. შარდში ცილის გამოვლენის თვისებრივი რეაქციები - ა) ჰელერის ტესტი კონცენტრირებული აზოტის მჟავით

მეთოდის პრინციპი:

კონცენტრირებული მინერალური მჟავა HNO 3 იწვევს ცილის დენატურაციას და მჟავასთან ერთად ცილის კომპლექსურ მარილებს ქმნის. სითხეების ორი ფენის საზღვარზე წარმოიქმნება ნალექი პატარა თეთრი რგოლის სახით.

პროგრესი

1 მლ კონცენტრირებული HNO 3 ასხამენ სინჯარაში, სინჯარას ახვევენ 45 0 კუთხით და 1 მლ შარდს ფრთხილად აფენენ კედლის გასწვრივ პიპეტით.

ბ) ნიმუში კონცენტრირებული სულფოსალიცილის მჟავით

მეთოდის პრინციპი:

კონცენტრირებული ორგანული სულფოსალიცილის მჟავა იწვევს ცილის დენატურაციას. ცილის ნალექის ან სიმღვრივის სახით დალექვა დაკავშირებულია ცილის ნაწილაკების გაუწყლოებასთან და მჟავებთან ცილის რთული მარილების წარმოქმნასთან.

პროგრესი

1 მლ შარდს დაამატეთ 3 წვეთი 20% სულფოსალიცილის მჟავა. როდესაც ცილა არის შარდში, იქმნება თეთრი ნალექი.

2. შარდში ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრა გამოყენებით

ტესტი - ალბუფანის ზოლები.

მეთოდის პრინციპი:

ტესტი ეფუძნება "ცილის შეცდომის ინდიკატორის" პრინციპს. რეაქტიული ზონა შეიცავს ჟანგბადის ბუფერს და სპეციალურ ინდიკატორს, რომელიც ცილების თანდასწრებით იცვლის ფერს ყვითელიდან მწვანედან ლურჯამდე.

ტესტი ძალიან მგრძნობიარეა ალბუმინის მიმართ და რეაგირებს მის არსებობაზე შარდში 0,10-0,15 გ/ლ კონცენტრაციით. მაღალი მოლეკულური წონის ცილები, როგორიცაა იმუნოგლობულინები, უფრო ნაკლები მგრძნობელობით იზომება, ვიდრე ალბუმინები. დაბალი მოლეკულური წონის ცილები, როგორიცაა ბეტა-2 მიკროგლობულინი და ბენს ჯონსის ცილა პრაქტიკულად არ არის გამოვლენილი ამ ტესტით.

ტესტის შეფასება: ტესტი დადებითად ითვლება, თუ რეაქტიული ზონის ფერი იცვლება. შარდში ალბუმინის კონცენტრაციიდან გამომდინარე, რეაქტიული ზონა შეიძლება გამოჩნდეს მწვანედან ლურჯამდე. ეს ჩრდილები შედარებულია ფერის მასშტაბთან, რომლის ზონები შეესაბამება ცილის კონცენტრაციას 0,3, 1, 3, 10 გ/ლ.

პროგრესი

რეაქტიულ ზონას ხელებით შეხების გარეშე ჩაუშვით ტესტის ზოლი შარდში 1-2 წამით ისე, რომ ზონა დასველდეს. შემდეგ ამოიღეთ ზედმეტი შარდი ზოლიდან და დაახლოებით 1 წუთის შემდეგ შეადარეთ საჩვენებელი ზონის ფერი ნაკრების ფერთა სკალასთან და განსაზღვრეთ ცილის რაოდენობა, რომელიც გამოხატულია გ/ლ-ში.

შენ არ ხარ მონა!
დახურული საგანმანათლებლო კურსი ელიტის ბავშვებისთვის: "მსოფლიოს ნამდვილი მოწყობა".
http://noslave.org

მასალა ვიკიპედიიდან - თავისუფალი ენციკლოპედიიდან

ჰელერის ტესტიავსტრიის სახელობის პათოლოგი I.F Heller, საერთო სახელი ხარისხობრივი რეაქცია on ცილა შარდში. ნიმუშს აქვს მგრძნობელობა 0,033 გ/ლ და გამოიყენება კლინიკური დიაგნოსტიკა პროტეინურია. ცილის გამოვლენის პრინციპი ემყარება მის დენატურაციას დენატურაციის ფაქტორის გავლენის ქვეშ - კონცენტრირებული აზოტის მჟავაან ლარიონოვას რეაგენტი.

აღსანიშნავია, რომ პროტეინის გარკვეული რაოდენობა ყოველთვის არის შარდში, მაგრამ, როგორც წესი, მისი კონცენტრაცია ჯანმრთელი ადამიანის შარდში ხარისხობრივი რეაქციის მგრძნობელობის ზღურბლზე დაბალია და მარტივი მეთოდებით არ ვლინდება. ნიმუში არ არის შესაფერისი ცილის 0,033 გ/ლ-ზე მეტი რაოდენობით. უფრო მაღალი კონცენტრაციის დროს აუცილებელია შარდის განზავება ან ესბახის ალბუმინომეტრის გამოყენება.

შარდში მთლიანი ცილის ოდენობის დასადგენად გამოიყენება ჰელერის ტესტის საფუძველზე დაფუძნებული მეთოდი - ბრანდბერგ-რობერტს-სტოლნიკოვის მეთოდი (W. Roberts, 1830-1899, ინგლისელი თერაპევტი). ტექნიკა მოიცავს შარდის განზავებას სინჯის მგრძნობელობის ქვედა ზღვარამდე (0,033 გ/ლ) და რგოლის ფორმირების დრო 2-3 წუთი.

ანალიზის პროგრესი

რეაგენტები: კონცენტრირებული (დამწვარი) აზოტის მჟავა ან ლარიონოვას რეაგენტი. შემოწმებული შარდი უნდა იყოს გამჭვირვალე და მჟავე.

ლარიონოვას რეაგენტის მომზადება

მოამზადეთ ნატრიუმის ქლორიდის გაჯერებული ხსნარი (20-30 გრ მარილი იხსნება 100 მლ თბილ წყალში, გააჩერეთ გაციებამდე). სუპერნატანტის სითხე გაჟღენთილია და გაფილტრულია. 99 მლ ფილტრატს დაამატეთ 1 მლ კონცენტრირებული აზოტის მჟავა (შეგიძლიათ შეცვალოთ 2 მლ მარილმჟავას).

კვლევის ტექნიკა

დაახლოებით იგივე რაოდენობის შარდი საგულდაგულოდ ფენა კედლის გასწვრივ სინჯარაში 1-2 მლ რეაგენტით. ცილის თანდასწრებით, დაახლოებით 2-3 წუთის შემდეგ, სითხეებს შორის ინტერფეისზე შეინიშნება სიმღვრივე - დენატურირებული ცილის თეთრი რგოლი.

ცრუ დადებითი შედეგი შეიძლება მოხდეს აზოტის მჟავას გამოყენებისას ნუკლეოალბუმინის ან ურატის მარილების მაღალი კონცენტრაციის გამო. პირველ შემთხვევაში ის ქრება სინჯარის ოდნავ შერყევისას, ხოლო მეორეში რგოლი განლაგებულია მედიას შორის ინტერფეისის საგრძნობლად ზემოთ და გაცხელებისას ქრება; განზავებული შარდით ტესტის გამეორებისას რგოლი არ იქმნება. ზოგჯერ მოყავისფრო პიგმენტური რგოლიც ჩნდება უროქრომის აზოტის მჟავით დაჟანგვის შედეგად.

ლარიონოვას რეაგენტის გამოყენებას, აზოტის მჟავისგან განსხვავებით, აქვს მთელი რიგი უპირატესობები: არ იქმნება პიგმენტური რგოლები შრეების საზღვარზე და დადებითი შედეგი იძლევა უფრო მკაფიო ცილოვან რგოლებს.

იხილეთ ასევე

დაწერეთ მიმოხილვა სტატიაზე "გელერის ტესტი"

ბმულები

ლიტერატურა

[[K:ვიკიპედია:სტატიები სურათების გარეშე (ქვეყანა: Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. )]][[K:Wikipedia:სტატიები სურათების გარეშე (ქვეყანა: Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. )]]Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი Lua შეცდომა: callParserFunction: ფუნქცია "#property" ვერ მოიძებნა. ჰელერის ტესტი

ჰელერის ტესტის დამახასიათებელი ამონარიდი

წარმოუდგენლად მტკივნეული და სევდიანი ვიყავი მათთვის, საკუთარი თავისთვის და ყველასთვის, ვინც იბრძოდა, მაგრამ მაინც მჯეროდა, რომ მათ შეეძლოთ რაიმეს შეცვლა... მართლა შეეძლოთ? ომი?..
უცებ ჩემს წინ კიდევ ერთი სურათი გამოჩნდა...
იმავე პატარა ქვის "საკანში", სადაც მაგდალინელის სისხლიანი სხეული ჯერ კიდევ იატაკზე ეგდო, მის ირგვლივ, მუხლმოდრეკილი იდგნენ მისი ტაძრის რაინდები... ყველა მათგანი უჩვეულოდ იყო გამოწყობილი თეთრ - თოვლივით თეთრ გრძელ სამოსში. იდგნენ მაგდალინელის ირგვლივ, ქედმაღლობდნენ თავებს და ცრემლები სდიოდა მათ მკაცრ, გაქვავებულ სახეებზე... პირველი ადგა მოგვი, რომლის მეგობარი იოანე ოდესღაც იყო. ფრთხილად, თითქოს ზიანის ეშინოდა, თითები ჭრილობაში ჩასჭიდა და სისხლიანი ხელით მკერდზე სისხლიანი ჯვრის მსგავსი რამ დახატა... მეორეც ასე მოიქცა. ასე ადგნენ სათითაოდ, პატივმოყვარეობით ჩაუშვეს ხელები წმინდა სისხლში, დახატეს წითელი ჯვრები თოვლივით თეთრ ტანსაცმელზე... ვიგრძენი, რომ თმა აწია. რაღაც საშინელ წმინდა რიტუალს მოგვაგონებდა, რომელიც ჯერ კიდევ ვერ გავიგე...
- რატომ აკეთებენ ამას, სევერ?... - ვკითხე ჩუმად, თითქოს მეშინოდა, რომ მომესმენდნენ.
- ეს არის ფიცი, ისიდორა. მარადიული შურისძიების ფიცი... მაგდალინელის სისხლით - მათთვის ყველაზე წმინდა სისხლით დაიფიცეს, რომ შური იძიონ მის სიკვდილზე. მას შემდეგ ტაძრის რაინდებს ეცვათ თეთრი მოსასხამები წითელი ჯვრებით. მხოლოდ თითქმის არცერთმა აუტსაიდერმა არ იცოდა მათი ნამდვილი მნიშვნელობა... და რატომღაც ყველას ძალიან სწრაფად „დაავიწყდა“, რომ მაგდალინელის გარდაცვალებამდე ტაძრის რაინდები ეცვათ უბრალო მუქი ყავისფერი სამოსით, არავითარი ჯვრებით „მორთული“. ტამპლიერებს, ისევე როგორც კათარებს, სძულდათ ჯვარი იმ გაგებით, რომლითაც ქრისტიანული ეკლესია მას „თაყვანს სცემს“. ისინი მას ბოროტ და ბოროტ მკვლელობის იარაღად, სიკვდილის იარაღად თვლიდნენ. და ის, რაც მათ მკერდზე მაგდალინელის სისხლით დახატეს, სულ სხვა მნიშვნელობა ჰქონდა. უბრალოდ, ეკლესიამ მთლიანად „გადაფორმა“ ტამპლიერთა რაინდთა მნიშვნელობა მის საჭიროებებზე, ისევე როგორც ყველაფერი, რაც ეხება რადომირსა და მაგდალინელს...
ანალოგიურად, სიკვდილის შემდეგ მან საჯაროდ გამოაცხადა გარდაცვლილი მაგდალინელი ქუჩის ქალად...
- ასევე უარყო ქრისტეს შვილები და მისი ქორწინება მაგდალინელთან...
- ასევე გაანადგურა ორივე „ქრისტეს რწმენის სახელით“, რომელთანაც ორივე სასტიკად იბრძოდა მთელი ცხოვრება...
- ასევე გაანადგურა ყატარი, ქრისტეს სახელის გამოყენებით... იმ ადამიანის სახელი, რომლის რწმენა და ცოდნა ასწავლეს...
- მან ასევე გაანადგურა ტამპლიერები (ტაძრის რაინდები), გამოაცხადა ისინი ეშმაკის მომხრეებად, ცილისწამება და ცილისწამება მათ ქმედებებზე და ვულგარულად ატეხა თავი ბატონს, რომელიც იყო რადომირის და მაგდალინელის პირდაპირი შთამომავალი...
განთავისუფლდა ყველასგან, ვისაც შეეძლო როგორღაც აღენიშნა რომის "უწმინდესი" ეშმაკების სისულელე და სისულელე, ქრისტიანულმა ეკლესიამ შექმნა ლეგენდა, რომელიც საიმედოდ დადასტურდა "უდავო მტკიცებულებებით", რომელიც არავის შეუმოწმებია რაიმე მიზეზით. და არავის უფიქრია, რომ ვიფიქრო იმაზე, რაც ხდება.

შარდში ცილის დასადგენად სამუშაო ადგილის შემადგენლობა მოიცავს შემდეგ ელემენტებს:

1. ქიმიური საცდელი მილები, აგლუტინაციის საცდელი მილები.
2. გრადუირებული პიპეტების ნაკრები.
3. პიპეტები ვიწრო დახატული ბოლოებით.
4. ალკოჰოლური ნათურები ან გაზის სანთურა.
5. შავი ქაღალდი.
6. ყინულის ძმარმჟავა.
7. სულფოსალიცილის მჟავა.
8. კონცენტრირებული აზოტის მჟავა.
9. Გამოხდილი წყალი.

შარდში ცილის განსაზღვრის მეთოდები

შარდში ცილის ხარისხობრივი განსაზღვრისთვის გამოყენებული ყველა მეთოდი ეფუძნება ცილის კოაგულაციას. ცილის კოაგულაცია ვლინდება სხვადასხვა ხარისხით სიმღვრივეობით (ოპალესცენტიდან მძიმე სიმღვრივემდე) ან ფანტელების დაკარგვით.

შარდში ცილის ხარისხობრივი განსაზღვრა შეიძლება განხორციელდეს ერთ-ერთი შემდეგი გზით:

1. დუღილი 10% ძმარმჟავას ხსნარით;
2. რეაქცია სულფოსალიცილის მჟავას 20%-იანი ხსნარით;
3. რეაქცია აზოტის მჟავას 50%-იანი ხსნარით (გელერის ტესტი);
4. რეაქცია აზოტის მჟავას 1%-იანი ხსნარით სუფრის მარილის გაჯერებულ ხსნარში (შეცვლილი ჰელერის ტესტი ლარიონოვას მიხედვით).

შარდში ცილის ხარისხობრივ განსაზღვრამდე ტარდება შემდეგი მოსამზადებელი სამუშაოები:
1. მოღრუბლული შარდი იფილტრება ქაღალდის ფილტრის მეშვეობით. თუ შეუძლებელია გამჭვირვალე ფილტრის მიღება, კვლავ გაფილტრეთ იგი იმავე ფილტრით, ან შეურიეთ შარდი მცირე რაოდენობით ინფუზიურ ნიადაგს ან ტალკს, რის შემდეგაც იგი გაფილტრულია.
2. თუ შარდი ტუტეა, მას ამჟავებენ 10%-იანი ძმარმჟავას ხსნარით ოდნავ მჟავე რეაქციამდე ლაკმუსის ან უნივერსალური ინდიკატორის ქაღალდის კონტროლით.
3. მარილის დაბალი შემცველობით (ღია ყვითელი ან ღია ყვითელი შარდი დაბალი სპეციფიკური სიმძიმით) თითოეულში
ნიმუშს დაამატეთ სუფრის მარილის გაჯერებული ხსნარის რამდენიმე წვეთი, რადგან მარილების ნაკლებობა იწვევს ცილების კოაგულაციას.
4. სიმღვრივის ხარისხი შეინიშნება შავი ფონის გამოყენებით. ფოტოგრაფიაში გამოყენებული შავი მუყაო ან შავი ქაღალდი გამოიყენება ფონად. შავ ფონზე რეაქციის გათვალისწინება საშუალებას გაძლევთ ამოიცნოთ ოდნავი სიმღვრივე.

დანომრილი საცდელი მილები მოთავსებულია ცალკე თაროში. ისინი ასრულებენ ქვემოთ აღწერილ ერთ-ერთ რეაქციას.

1. გამოცადეთ ადუღებით 10% ძმარმჟავას ხსნარით. ამ ტესტის ჩასატარებლად საჭიროა ძმარმჟავას 10%-იანი ხსნარი, რომელიც მზადდება შემდეგნაირად: 10 მლ გამყინვარებული ძმარმჟავა მოთავსებულია ცილინდრში და ავსებენ გამოხდილ წყალს 100 მლ ნიშნულამდე.

ცილის განსაზღვრის ტექნიკა. ქიმიურ სინჯარაში მოთავსებულია ოდნავ მჟავე რეაქციის 10-12 მლ გაფილტრული შარდი. შემდეგ სინჯარის ზედა ნაწილს შარდთან ერთად ფრთხილად აცხელებენ ადუღებამდე და მას უმატებენ 8-10 წვეთ ძმარმჟავას 10%-იან ხსნარს. შარდის სინჯარას ათვალიერებენ შავ ფონზე გადაცემულ შუქზე. შარდში ცილის არსებობისას ჩნდება სხვადასხვა ხარისხის სიმღვრივე (ოპალესცენტიდან მძიმე სიმღვრივემდე) ან ჩნდება ფანტელები. საცდელი მილის ქვედა ნაწილი, რომელიც არ იყო გაცხელებული, საკონტროლო ფუნქციას ასრულებს. ეს ტესტი ადგენს ცილის რაოდენობას 0.015%o-დან (%o - promille) დაწყებული.

2. რეაქცია სულფოსალიცილის მჟავას 20%-იან ხსნართან. სულფოსალიცილის მჟავას 20%-იან ხსნარს ამზადებენ შემდეგნაირად: 20გრ სულფოსალიცილის მჟავას ხსნიან 70-80მლ გამოხდილ წყალში, გადააქვთ 100მლ ცილინდრში და ზემოდან ავსებენ გამოხდილ წყალს ნიშნულამდე. მომზადებული რეაგენტი ინახება მუქი შუშის კონტეინერში.

ცილის განსაზღვრის ტექნიკა. სუსტად მჟავე რეაქციის 2-3 მლ გაფილტრული შარდი მოთავსებულია იმავე დიამეტრის ორ სინჯარაში, ერთ-ერთ სინჯარაში ემატება 20%-იანი სულფოსალიცილის მჟავას ხსნარის 3-4 წვეთი, მეორე სინჯარის ფუნქციას ასრულებს. კონტროლი. თუ სინჯარაში არის ცილა რეაგენტთან ერთად, ჩნდება სიმღვრივე ან იშლება შედედებული ცილის ფანტელები. საკონტროლო მილში სითხე რჩება გამჭვირვალე. სულფოსალიცილის მჟავა შრატის ცილებთან ერთად აგროვებს ალბომოზებს (პეპტიდებს), რომლებიც წარმოადგენენ ცილის დაშლის პროდუქტს. შარდის დაბინდვის მიზეზის გასარკვევად, შარდთან ერთად სინჯარას აცხელებენ. შრატის ცილების წარმოქმნით გამოწვეული სიმღვრივე იზრდება, ხოლო ალბუმოზის არსებობით გამოწვეული სიმღვრივე ქრება. ამ ტესტს აქვს იგივე მგრძნობელობა, როგორც წინა.

3. რეაქცია აზოტმჟავას 50%-იან ხსნართან (გელერის ტესტი). აზოტის მჟავას 50%-იან ხსნარს ამზადებენ შემდეგნაირად: 50 მლ აზოტმჟავას უმატებენ 50 მლ გამოხდილ წყალს (განზავება 1:1) 1,2-1,4 ხვედრითი სიმძიმის.

ცილის განსაზღვრის ტექნიკა. 1 მლ 50% აზოტის მჟავას ასხამენ ვიწრო პატარა სინჯარაში (აგლუტინაციის ტალახი). 1 მლ გაფილტრული საგამოცდო შარდი მიიღება ვიწრო დაგრძელებული ბოლოთი პიპეტში, ფენა რეაგენტზე და სინჯარა გადადის ვერტიკალურ მდგომარეობაში. როდესაც პროტეინი იმყოფება, თეთრი რგოლი ჩნდება თხევადი ინტერფეისზე. რგოლის გამოჩენის დრო და მისი თვისებები დამოკიდებულია ცილის რაოდენობაზე: თუ ცოტა ცილაა, რგოლი მაშინვე არ ჩნდება, ამიტომ მის გარეგნობას აკვირდებიან 2,5-3 წუთის განმავლობაში. ამ მეთოდით განსაზღვრული ცილის მინიმალური რაოდენობაა 0,033°/oo. შარდში ცილის დაბალი შემცველობით, რგოლი არ იქმნება. რეაქციის შედეგები ჩაიწერება შავ ფონზე გადაცემული შუქით.

4. რეაქცია აზოტის მჟავას 1%-იან ხსნართან სუფრის მარილის გაჯერებულ ხსნარში - შეცვლილი ჰელერის ტესტი (ლარიონოვას მიხედვით).ტესტის ჩასატარებლად გამოიყენეთ აზოტის მჟავას 1%-იანი ხსნარი, რომელიც მომზადებულია სუფრის მარილის გაჯერებულ ხსნარში (ლარიონოვას რეაგენტი). 35 გრ სუფრის მარილს ხსნიან 100 მლ გამოხდილ წყალში, ხსნარს ფილტრავენ, სუფრის მარილის მომზადებულ გაჯერებულ ხსნარს უმატებენ 1 მლ კონცენტრირებულ აზოტმჟავას 1,2-1,4 ხვედრითი წონა.

ცილის განსაზღვრის ტექნიკა ისევე, როგორც 50%-იან აზოტმჟავას ხსნართან რეაქციაში (გელერის ტესტი), მაგრამ 1 მლ 50%-იანი აზოტის ხსნარის ნაცვლად სინჯარაში ასხამენ 1 მლ ლარიონოვას რეაგენტს და ფენას აფენენ 1 მლ შარდს. ის. თეთრი რგოლის გამოჩენა სითხეების ინტერფეისზე მიუთითებს ტესტის შარდში ცილის არსებობაზე. ლარიონოვას ტესტი ისეთივე მგრძნობიარეა, როგორც ჰელერის ტესტი.

5. კოლორიმეტრული (მშრალი) ტესტი ცილის ხარისხობრივი განსაზღვრისათვის. შარდში ცილის ხარისხობრივი განსაზღვრის კოლორიმეტრიული (მშრალი) ტესტი ეფუძნება იმ ეფექტს, რომელსაც ცილა აქვს ინდიკატორის ფერზე ბუფერულ ხსნარში.

ცილის განსაზღვრის ტექნიკა. ინდიკატორის ქაღალდის ნაჭერი, რომელიც შექმნილია ცილის დასადგენად, მცირე ხნით ჩაეფლო შარდში. ტესტი დადებითად ითვლება, თუ ქაღალდის ნაჭერი ლურჯ-მწვანე გახდება.

შარდში ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრა

შარდში ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრა ემყარება იმ ფაქტს, რომ პროტეინის შემცველი შარდის ფენით აზოტმჟავას 50%-იანი ხსნარით ან ლარიონოვას რეაგენტით, ორი სითხის საზღვარზე წარმოიქმნება თეთრი რგოლი და თუ ჩნდება გამჭვირვალე თეთრი რგოლი. 3 წუთის განმავლობაში, მაშინ ცილის შემცველობა არის 0,033% o ან 33 მგ 1000 მლ შარდში. 3 წუთზე ადრე ბეჭდის გამოჩენა მიუთითებს შარდში ცილის მაღალ შემცველობაზე.
შარდში ცილის რაოდენობრივი გაზომვისას დაცულია შემდეგი წესები:

1. ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრა ხორციელდება მხოლოდ შარდის იმ ნაწილში, სადაც ის ხარისხობრივად იქნა გამოვლენილი.
2. განსაზღვრა ხდება ფრთხილად გაფილტრული შარდით.
3. მკაცრად დაცულია საცდელი შარდის 50%-იანი ხსნარით აზოტის მჟავას ან ლარიონოვას რეაგენტის დაფენის ტექნიკა შარდისა და რეაგენტის თანაფარდობით (1:1).
4. ბეჭდის გამოჩენის დრო დგინდება წამზომის გამოყენებით: ცილის ოდენობის საბოლოო გაანგარიშებისას მხედველობაში მიიღება შარდის აზოტის მჟავაზე დაფენის დრო, რომელიც შეადგენს 15 წამს.
5. შარდის განზავება ხორციელდება ბეჭდის თვისებების საფუძველზე. ამ შემთხვევაში, შარდის ყოველი შემდგომი განზავება მზადდება წინადან.
6. ბეჭდები იდენტიფიცირებულია შავ ფონზე.

ყველაზე გავრცელებულია შარდში ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრის ორი მეთოდი: რობერტს-სტოლნიკოვ-ბრანდბერგის მეთოდი და S. L. Ehrlich და A. Ya.

1. რობერტს-სტოლნიკოვ-ბრანდბერგის მეთოდი.ამ მეთოდის მიხედვით, შარდში ცილის რაოდენობა განისაზღვრება მისი განზავებით, სანამ შარდის შემდგომი ფენა აზოტის მჟავას ან ლარიონის რეაგენტის 50%-იანი ხსნარით, რგოლი ზუსტად 3 წუთში გამოჩნდება. ცილის რაოდენობა გამოითვლება შარდის განზავების ხარისხზე 0,033%-ის გამრავლებით. მიღებული შედეგი გამოხატავს ცილის რაოდენობას მილიგრამებში 1000 მლ შარდში, ანუ პრომილში (%o).
2. S. L. Ehrlich და A. Ya Althauzen-ის მეთოდი.სადგამში მოთავსებულია აგლუტინაციის მილების სერია, რომელშიც ჯერ ასხამენ 1 მლ აზოტის მჟავას 50%-იან ხსნარს ან ლარიონოვას რეაგენტს. საცდელი შარდი იღება ცალკე, სუფთა, მშრალი პიპეტით, ვიწრო, გამოყვანილი ბოლოთი და ფენით ფენა რეაგენტზე, რის შემდეგაც წამზომი ირთვება. ბეჭდის გამოჩენის დრო კონტროლდება სინჯარის შავ ფონზე მოთავსებით. როდესაც რგოლი გამოჩნდება, წამზომი გამორთულია.

შარდის ფენების დაფენისას, ცილის ოდენობიდან გამომდინარე, შეიძლება გამოჩნდეს კომპაქტური, განიერი ან ძაფის მსგავსი რგოლი. კომპაქტური, ფართო რგოლი ჩნდება რეაგენტზე შარდის ფენის დადებისთანავე. ძაფის მსგავსი რგოლი შეიძლება გამოჩნდეს დაუყოვნებლივ, ერთი წუთის გასვლამდე, ან ერთიდან ოთხ წუთში.

თუ ძაფის მსგავსი რგოლი ერთიდან 4 წუთში გამოჩნდება, არ არის საჭირო შარდის განზავება!
ამ შემთხვევაში ცილის რაოდენობის გამოსათვლელად საკმარისია ავტორების მიერ შემოთავაზებული ცხრილის გეგმის გამოყენება (ცხრილი 1).

მაგალითი 1.როდესაც შარდი იყო ფენით რეაგენტზე, ძაფის მსგავსი რგოლი წარმოიქმნა 2 წუთში. რგოლი რომ ჩამოყალიბებულიყო 3 წუთში, ცილის რაოდენობა იქნებოდა 0,033%.

ამ შემთხვევაში ბეჭედი ადრე ჩამოყალიბდა. შესაბამისი შესწორება, გეგმის ცხრილის მიხედვით, 2 წუთის განმავლობაში უდრის 1+1/8-ს. ეს ნიშნავს, რომ შარდის მოცემულ ნაწილში ცილა იქნება 1+1/8-ჯერ მეტი 0,033°/oo, ანუ 0,033%o X(1+1/8) = 0,037°/oo.

როდესაც ძაფის მსგავსი რგოლი გამოჩნდება 1 წუთში, ანუ 40-60 წამის შემდეგ, გააკეთეთ შარდის 1,5-ჯერ განზავება (2 წილი შარდი + 1 წილი წყალი) და შემდეგ განზავებული შარდი კვლავ გადაიტანეთ რეაგენტზე და ჩაიწერეთ გარეგნობა. ბეჭდის. შედეგების გაანგარიშებისას მხედველობაში მიიღება, რომ შარდი განზავებულია 1,5-ჯერ.

მაგალითი 2. 1,5-ჯერ განზავებული შარდის დაფენის შემდეგ, ძაფის მსგავსი რგოლი გაჩნდა 2 წუთში. რგოლი 3 წუთში რომ გამოჩენილიყო, ცილა იქნებოდა 0,033%. შესაბამისი ცვლილება გეგმის ცხრილის მიხედვით 2 წუთის განმავლობაში არის 1+1/8. შარდში ცილა შეიცავს 0,033%oX1,5X(1+1/8) = 0,056%o.

თუ ძაფის მსგავსი რგოლი მაშინვე გაჩნდება, შარდს აზავებენ 2-ჯერ (1 წილი შარდი + 1 წილი წყალი). განზავებული შარდი კვლავ ფენა ხდება რეაგენტზე და რგოლის გამოჩენა აღინიშნება 1 წუთის შემდეგ.

მაგალითი 3. 2-ჯერ განზავებული შარდის რეაგენტზე ფენის დატანისას, ძაფის მსგავსი რგოლი გაჩნდა 1 წუთის და 15 წამის შემდეგ. მაშინ პროტეინის რაოდენობა შემოწმებულ შარდში, წინა გამოთვლების ანალოგიით, ტოლი იქნება
0.033%оХ2Х(1+3/8) = 0.091%.
თუ ფართო რგოლი გამოჩნდება, შარდს 4-ჯერ აზავებენ (შარდის 1 წილი + 3 წილი წყალი).
განზავებული შარდის შემდგომი ფენით, ძაფის მსგავსი რგოლი შეიძლება ჩამოყალიბდეს ერთი წუთის წინ ან მის შემდეგ. ასეთ შემთხვევებში ცილის რაოდენობა გამოითვლება წინა მაგალითების ანალოგიით, ანუ 0,033% o მრავლდება განზავების ხარისხზე და შესაბამის კორექტირებაზე.

მაგალითი 1.შარდის 4-ჯერ განზავების შემდეგ ბეჭედი მაშინვე გამოჩნდა. შარდი განზავებულია 2-ჯერ. 8-ჯერ (4X2) განზავებული შარდის დაფენის შემდეგ 1,5 წუთში წარმოიქმნება ძაფის მსგავსი რგოლი. ამ შემთხვევაში ცილის რაოდენობაა 0,033%oX8X1,25 = 0,33%o და ა.შ.
კომპაქტური რგოლის გამოჩენისას შარდი 8-ჯერ განზავებულია (შარდის 1 წილი + 7 წილი წყალი). როდესაც განზავებული შარდი შემდგომში გადადის რეაგენტზე, შეიძლება ჩამოყალიბდეს კომპაქტური, ფართო ან ძაფის მსგავსი რგოლი.

მაგალითი 2.როდესაც შარდი აზოტის მჟავაზე იყო ფენით, მაშინვე ჩამოყალიბდა კომპაქტური რგოლი. შარდს აზავებენ 8-ჯერ (1 წილი შარდი + 7 წილი წყალი) და ისევ ფენავენ. ამან კვლავ შექმნა კომპაქტური ბეჭედი. შემდეგ შარდს აზავებენ კიდევ 8-ჯერ (ამისთვის გაზავებული შარდის 1 ნაწილი აიღეთ ცილინდრში ან სინჯარაში და დაამატეთ 7 წილი წყალი). განზავებული შარდის მორიგი შრეების შემდეგ, მაშინვე წარმოიქმნება ძაფის მსგავსი რგოლი. შარდი განზავებულია 2-ჯერ (1 წილი შარდი + 1 წილი წყალი). განზავებული შარდის კიდევ ერთი შრეების შემდეგ, ძაფის მსგავსი რგოლი წარმოიქმნება 2 წუთში. ცილის რაოდენობა შარდის მოცემულ ნაწილში გამოითვლება შემდეგნაირად: 0,033.%oX8X8X2X(1+1/8) = 4,8%o.

გეგმის ცხრილის გარდა არის ცხრილი ცილის გამოთვლილი ფიგურებით (ცხრილი 2). თუ შარდი არ არის განზავებული, მაშინ ცილის რაოდენობა გვხვდება სვეტში "მთელი, განუზავებელი შარდი". შარდის განზავებისას მთელი რიცხვით (8,4,2) გამოიყენეთ ცხრილი. 1. შარდის 1,5-ჯერ განზავებისას გამოიყენეთ ცხრილი. 2.

შარდში ცილის შემცველობის დასადგენად ცხრილის გამოყენების ტექნიკა

ცხრილის შესაბამის სვეტებში მიუთითეთ ბეჭდის გამოჩენის დრო და შარდის განზავების ხარისხი.
ამ ორი ინდიკატორიდან გამოყვანილი ჰორიზონტალური და ვერტიკალური ხაზების გადაკვეთის წერტილში მდებარე რიცხვი მიუთითებს ტესტირებულ შარდში ცილის რაოდენობაზე (%o).

შესაძლებელია, რომ ცილის დადებითი თვისებრივი ტესტით, რგოლი არ წარმოიქმნება 50% აზოტის მჟავას ხსნარის ფენით. ეს ნიშნავს, რომ შარდში ცილა 0,033%-ზე ნაკლებია. ასეთ შემთხვევებში, ანალიზის ფორმაში ცილის რაოდენობა აღინიშნება ტერმინით "კვალი".

თუ ცილა რაოდენობრივად არის განსაზღვრული, პრომილეში ცილის შემცველობა აღინიშნება შარდის ანალიზის ფორმაზე, მაგალითად, "ცილა - 0.66%o".

შარდის ცალკეულ ნაწილში ცილის რაოდენობრივი განსაზღვრის გარდა, გამოითვლება მისი დღიური რაოდენობა გრამებში. ამ მიზნით ხდება ყოველდღიური შარდის შეგროვება, მისი რაოდენობის გაზომვა და პრომილში ცილის შემცველობის განსაზღვრა. შემდეგ ხდება გაანგარიშება. მაგალითად, შარდის დღიური რაოდენობაა 1800 მლ, ცილა 7°/ო. ეს ნიშნავს, რომ შარდის დღიური რაოდენობა შეიცავს ცილას: 1,8X7 = 12,6 გ.

წინასწარ უნდა იყოს გაფილტრული.

ტესტი სულფოსალიცილის მჟავით. ყველაზე მგრძნობიარე და გავრცელებულია ტესტი სულფოსალიცილის მჟავას 20%-იანი ხსნარით.

განსაზღვრის პროგრესი. მონიშნულია ორი ქიმიური ტესტი მილაკი: „O“ - ექსპერიმენტი და „K“ - კონტროლი. ორივე სინჯარაში ასხამენ 4-5 მლ გამჭვირვალე შარდს. სინჯარაში დაამატეთ 4-5 წვეთი სულფოსალიცილის მჟავას 20%-იანი ხსნარი და კარგად აურიეთ. ორივე საცდელი მილი განიხილება გვერდიგვერდ შავ ფონზე. თუ სინჯარაში ცილა არის, შეინიშნება სიმღვრივე. საკონტროლო მილი ემსახურება შედარებას. ნიმუშის მგრძნობელობა სულფოსალიცილის მჟავასთან არის 0,015 გ/ლ.

სულფოსალიცილის მჟავასთან დადებით რეაქციას იძლევიან პროტეინის დაშლის პროდუქტები – ალბომოზები. სიმღვრივის მიზეზის დასადგენად, ნიმუში თბება. ამ შემთხვევაში ალბუმინის არსებობით გამოწვეული სიმღვრივე ქრება და ცილის არსებობით გამოწვეული სიმღვრივე ძლიერდება.

ჰელერის ბეჭდის ტესტი. განსაზღვრის პროგრესი. 1 - 1,5 მლ 50% აზოტმჟავას ან ლარიონოვას რეაგენტს ასხამენ ცენტრიფუგის მილში. შემდეგ ფენა

მჟავე შარდის იმავე რაოდენობით, ისე, რომ სითხე არ აირია. თუ თხევადი ინტერფეისზე არის ცილა, ჩნდება თეთრი რგოლი. რეაქცია ფასდება შავ ფონზე და გათვალისწინებულია ძაფის მსგავსი რგოლის გამოჩენის დრო. ნიმუშის მგრძნობელობა არის 0,033 გ/ლ. ამ ცილის შემცველობით, მე-2 და მე-3 წუთებს შორის თხევადი ინტერფეისზე ჩნდება თეთრი ძაფის მსგავსი რგოლი.

ფენების დაყენების ტექნიკა. შარდი ყოველთვის მჟავით არის დაფარული, რადგან შარდის ფარდობითი სიმკვრივე უფრო დაბალია, ვიდრე მჟავა. შრეების დადება ხდება პასტერის პიპეტით ბუშტით, რომლითაც გროვდება მცირე რაოდენობით შარდი. შემდეგ შარდი შეჰყავთ ცენტრიფუგის მილის ვიწრო ნაწილში, უჭირავთ მას დახრილად, ფენით წვეთ-წვეთად, ნელ-ნელა ასწევს შარდს მილის კედლების გასწვრივ.

ნიმუშის მინუსი არის პიგმენტური რგოლის გამოჩენა აზოტის მჟავით უროქრომის დაჟანგვის შედეგად. ურატის შემცველ შარდში ზოგჯერ მოთეთრო რგოლი ჩნდება სითხის საზღვრებს ზემოთ.

ჰელერის ტესტის უფრო ნათელი შედეგი მიიღება, თუ 50% აზოტის მჟავას ხსნარის ნაცვლად გამოიყენება ლარიონოვას რეაგენტი (1% აზოტის მჟავას ხსნარი ნატრიუმის ქლორიდის გაჯერებულ ხსნარში).

რაოდენობრივი

შარდში ცილის რაოდენობა შეიძლება განისაზღვროს ორი გზით: 1) ბრანდბერგ-რობერტს-სტოლნიკოვის მეთოდით შარდის განზავებით; 2) 3% სულფოსალიცილის მჟავას დამატებისას წარმოქმნილი ღრუბლით.

ბრენდბერგ-რობერტს-სტოლნიკოვის მეთოდი. ეს მეთოდი ეფუძნება ჰელერის ბეჭდის ტესტს. ცნობილია, რომ როდესაც შარდში ცილის შემცველობაა 0,033 გ/ლ, ძაფის მსგავსი რგოლი წარმოიქმნება 2-3 წუთში, თუ შარდში ცილა შეიცავს 0,033 გ/ლ-ზე მეტს, მაშინ რგოლი უფრო ადრე ჩნდება , და არა ფართო ძაფის მსგავსი ბეჭედი. ასეთი შარდი უნდა განზავდეს გამოხდილი წყლით და კვლავ აზოტმჟავას ფენით განზავებული შარდით. თუ ფენის დაფენის შემდეგ მე-2 და მე-3 წუთებს შორის ძაფის მსგავსი რგოლი გამოჩნდება, მაშინ განზავება დასრულებულად უნდა ჩაითვალოს. ცილის რაოდენობა ამ შემთხვევაში განისაზღვრება შარდის განზავების ხარისხის 0,033 გ/ლ ნგზე გამრავლებით. შარდის განზავება შეირჩევა თვისებების შემდეგი სავარაუდო შეფასებით! რგოლები: თუ ძაფის მსგავსი რგოლი დაუყოვნებლივ გამოჩნდება, შარდი განზავებულია 2-ჯერ, თუ მაშინვე გაჩნდება კომპაქტური რგოლი, 8 ან 10-ჯერ;

შარდის განზავება ხდება საზომი ცენტრიფუგის მილში, ასხამენ შარდს 1 მლ ნიშნულამდე და უმატებენ წყალს ნიშნულზე რამდენჯერ ხდება განზავების გაკეთება. საცდელი მილის შიგთავსი კარგად არის შერეული პასტერის პიპეტით და ბუშტით.

ზოგჯერ საჭიროა შარდის განზავება რამდენჯერმე. ამ შემთხვევაში ცილის რაოდენობის გაანგარიშებისას მხედველობაში მიიღება ყველა განზავება. მაგალითი. მთლიანი შარდის შრეებისას მაშინვე გამოჩნდა კომპაქტური რგოლი. შარდი განზავდეს საზომი ცენტრიფუგის მილში 10-ჯერ (1 მლ შარდი და 9 მლ წყალი 10 ნიშნულამდე). შარდის ფენა განზავებულია აზოტის მჟავაზე 10-ჯერ. თუ ფართო რგოლი დაუყოვნებლივ გამოჩნდება, მაშინ განმარტება არ არის დასრულებული და უნდა გაგრძელდეს. პირველი 10-ჯერადი განზავებიდან აუცილებელია კიდევ 4-ჯერ განზავების გაკეთება. განზავების საერთო ხარისხი ამ შემთხვევაში იქნება 40 (10x4). 40-ჯერ განზავებული შარდით, კვლავ ტარდება ჰელერის ბეჭდის ტესტი. როდესაც ძაფის მსგავსი რგოლი გამოჩნდება მე-2 და მე-3 წუთებს შორის, განსაზღვრა უნდა ჩაითვალოს დასრულებულად.

მუშაობისას შეგიძლიათ გამოიყენოთ Ehrlich-Althausen-ის კორექცია, თუ ძაფის მსგავსი რგოლი გამოჩნდება მე-2 წუთზე ადრე. იმისათვის, რომ არ განზავდეს შარდი, ავტორებმა შესთავაზეს ძაფის მსგავსი რგოლის გამოჩენის დროის დადგენა და გამოთვლების დროს დროის კორექტირება. ამ შემთხვევაში ცილის რაოდენობა გამოითვლება 0,033 გ/ლ განზავებისა და კორექტირების ხარისხზე გამრავლებით. კორექტირების მნიშვნელობები შეჯამებულია ცხრილში. 3.

ცხრილი 3. კორექტირების მნიშვნელობები ცილის განსაზღვრისთვის

ფორმირების დრო რგოლის კორექცია, წთ ფორმირების დრო რგოლის კორექცია, მინ