Kokybinis baltymo nustatymas šlapime. Baltymai šlapime, laboratoriniai tyrimai

Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodas reiškia pusiau kiekybinius bendro baltymo kiekio šlapime nustatymo metodus. Metodas pagrįstas Helerio žiedo testu, kuris susideda iš to, kad esant azoto rūgšties ir šlapimo ribai, esant baltymui, jis koaguliuoja ir atsiranda baltas žiedas.

Reagentai

50 % azoto rūgšties tirpalo arba reagentas Larionova.
Larionovos reagento paruošimas: paruoškite prisotintą natrio chlorido tirpalą (kaitinant 20 - 30 g druskos ištirpinama 100 ml vandens, leidžiama pastovėti, kol atvės). Supernatantas nusausinamas, filtruojamas. Į 99 ml filtrato įpilama 1 ml koncentruotos azoto rūgšties. Vietoj azoto rūgšties galima įpilti 2 ml koncentruotos druskos rūgšties.

Apibrėžimo pažanga

Į mėgintuvėlį įpilama 1 - 2 ml azoto rūgšties (arba Larioninio reagento), leidžiama rūgščiai nutekėti iš mėgintuvėlio sienelių (5 - 8 min.), kitu atveju, kai baltyminis šlapimas sluoksniuojasi, susidaro drumstumas. dėl azoto rūgšties susimaišymo ant mėgintuvėlio sienelių su šlapimu, o tai neleidžia susidaryti atskiram žiedui . Todėl iš anksto reikia paruošti keletą mėgintuvėlių su rūgštimi. Pipete atsargiai išsluoksniuokite tiek pat filtruoto skaidraus šlapimo išilgai mėgintuvėlio sienelės, stengdamiesi nesupurtyti mėgintuvėlyje esančio skysčio. Plono balto žiedo atsiradimas sąsajoje tarp dviejų skysčių tarp 2 ir 3 minučių rodo, kad baltymų koncentracija yra maždaug 0,033 g/l. Sluoksniavimo laikas skaičiuojamas kaip ketvirtis minutės.

Jei žiedas atsiranda anksčiau nei po 2 minučių po sluoksniavimo, šlapimą reikia atskiesti vandeniu ir pakartotinai sluoksniuoti jau praskiestą šlapimą. Šlapimo praskiedimo laipsnis parenkamas atsižvelgiant į žiedo tipą, t.y. jo plotį, kompaktiškumą ir atsiradimo laiką. Su siūliniu žiedu, atsiradusiu prieš 2 minutes, šlapimas skiedžiamas 2 kartus, platus - 4 kartus, kompaktiškas - 8 kartus ir tt Šlapimas skiedžiamas matavimo centrifugos mėgintuvėlyje, pilant šlapimą į 1 ml žymės ir įpylus vandens iki žymės, kiek kartų veisimas atliekamas. Mėgintuvėlio turinys kruopščiai sumaišomas Pasteur pipete su balionu. Jei skiedžiant šlapimą atsiranda drumzlių, mišinį reikia dar kartą filtruoti ir tik permatomą filtratą sluoksniuoti ant azoto rūgšties. Tada baltymų koncentracija apskaičiuojama 0,033 padauginus iš praskiedimo santykio ir išreiškiama gramais litre (g/l). Toks šlapimo praskiedimas parenkamas taip, kad jį sluoksniuojant ant azoto rūgšties žiedas atsirastų 2-3 minutę.

Tuo atveju, jei tarp 1 ir 4 minučių susidaro žiedas su neskiestu arba praskiestu šlapimu, galima naudoti Ehrlich-Althausen korekciją, kad šlapimas dar labiau nepraskiestų (taupo laiko). Autoriai pasiūlė nustatyti siūlinio žiedo atsiradimo laiką ir pakoreguoti laiko skaičiavimą. Šiuo atveju baltymų kiekis apskaičiuojamas 0,033 g/l padauginus iš praskiedimo laipsnio ir iš pataisos.

Kai žiedas susidaro nepasibaigus 1 minutei, reikia atlikti vieną dalinį praskiedimą, ty 1,5 karto (dvi dalys šlapimo ir 1 dalis vandens). Į šį praskiedimą taip pat atsižvelgiama apskaičiuojant baltymų kiekį šlapime.

Bendro baltymų kiekio šlapime nustatymo Brandberg-Roberts-Stolnikov metodu pavyzdys.

Sluoksniuojant šlapimą ant reagento, iš karto susidaro platus žiedas. Šlapimas skiedžiamas 4 kartus (1 dalis šlapimo + 3 dalys vandens), sluoksniuotas; iš karto gaunamas siūliškas žiedas. Būtina praskiesti esamą skiedimą dar 2 kartus; sluoksniuojant šį praskiedimą, žiedelis susidaro po 1,5 min. Jūs nebegalite veisti.

Baltymų skaičiavimas: šlapimas skiedžiamas 4 ir 2 kartus, taigi 8 kartus. Baltymų kiekis 0,033*8*1 1/4 = 0,33 g/l

Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodo trūkumai:

• subjektyvumas,
• darbštumas,
• sumažėjęs baltymų koncentracijos nustatymo tikslumas, kai šlapimas skiedžiamas.

Taip pat žiūrėkite:

Literatūra:

• Vadovėlis „Laboratorinių tyrimų metodai klinikoje“, red. prof. V. V. Menšikovas. - Maskva, „Medicina“, 1987 m
• L. V. Kozlovskaja, A. Yu. Nikolajevas. Klinikinių laboratorinių tyrimų metodų vadovėlis. Maskva, Medicina, 1985 m
• A. Ya. Althausen, „Klinikinė laboratorinė diagnostika“ – Maskva, Medgizas, 1959 m.
• A. Ya. Lyubina, L. P. Iljičeva ir bendraautoriai, „Klinikiniai laboratoriniai tyrimai“, Maskva, „Medicina“, 1984 m.

Proteinurija (proteinurija) - baltymų atsiradimas šlapime tokiomis koncentracijomis, kurios leidžia jį nustatyti kokybiniais metodais.

Išskirti

• Inkstų proteinurija ir
• Ekstrarenalinė (postrenalinė) proteinurija

Inkstų proteinurija

Inkstų proteinurija atsiranda dėl glomerulų filtro pažeidimo arba vingiuotų kanalėlių epitelio disfunkcijos.

Atskirkite selektyvią ir neselektyvią proteinuriją priklausomai nuo tam tikrų plazmos ir šlapimo baltymų santykio, jų molekulinės masės ir krūvio.

Selektyvi proteinurija

Selektyvi proteinurija atsiranda su minimaliu (dažnai grįžtamu) glomerulų filtro pažeidimu, kurį sudaro mažos molekulinės masės baltymai (molekulinė masė ne didesnė kaip 68 000) - albuminas, ceruloplazminas, transferinas.

Neselektyvinė proteinurija

Neselektyvinė proteinurija dažniau pasireiškia esant sunkesniam filtro pažeidimui, kai pradeda nykti stambiamolekuliniai baltymai. Proteinurijos selektyvumas yra svarbus diagnostinis ir prognozinis požymis.

Inkstų proteinurija gali būti:

• ekologiškas ir
• funkcinis (fiziologinis).

Organinė inkstų proteinurija

Organinė inkstų proteinurija atsiranda su organiniu nefrono pažeidimu. Atsižvelgiant į vyraujantį atsiradimo mechanizmą, galima išskirti tam tikrus organinės proteinurijos tipus.

Glomerulinė proteinurija

Glomerulinė proteinurija – dėl glomerulų filtro pažeidimo, atsiranda sergant glomerulonefritu ir nefropatija, susijusia su medžiagų apykaitos ar kraujagyslių ligomis. (glomerulonefritas, hipertenzija, infekciniai ir alerginiai veiksniai, širdies dekompensacija)

kanalėlių proteinurija

Vamzdinė proteinurija – susijusi su kanalėlių nesugebėjimu reabsorbuoti plazmos mažos molekulinės masės baltymus, kurie praėjo per nepakitusią glomerulų filtrą. (amiloidozė, ūminė kanalėlių nekrozė, intersticinis nefritas, Fanconi sindromas)

Prerenalinė proteinurija

Prerenalinė proteinurija (pernelyg didelė) - išsivysto esant neįprastai didelei mažos molekulinės masės baltymo koncentracijai plazmoje, kuri filtruojama normalių glomerulų kiekiu, viršijančiu fiziologinį kanalėlių gebėjimą reabsorbuotis. (išsėtinė mieloma, raumenų audinio nekrozė, eritrocitų hemolizė)

Funkcinė inkstų proteinurija

Funkcinė inkstų proteinurija nėra susijusi su inkstų liga ir gydymo nereikia.

Funkcinė proteinurija apima:

• žygiavimas,
• emocingas
• šalta,
• apsvaigimas,
• ortostatinis (tik vaikams ir tik stovint).

Ekstrarenalinė (postrenalinė) proteinurija

Esant ekstrarenalinei (postrenalinei) proteinurijai, baltymai gali patekti į šlapimą iš šlapimo ir lytinių takų (su kolpitu ir vaginitu – su netinkamai surinktu šlapimu). Šiuo atveju tai yra ne kas kita, kaip uždegiminio eksudato mišinys.

Ekstrarenalinė proteinurija paprastai neviršija 1 g per parą ir dažnai būna laikina.

Ekstrarenalinę proteinuriją diagnozuoti padeda trijų puodelių testas ir urologinis tyrimas.

Postrenalinė proteinurija pasireiškia su cistitu, uretritu.

Baltymų kiekio šlapime nustatymo metodai

Būtina sąlyga norint atlikti baltymų buvimo tyrimus yra absoliutus šlapimo skaidrumas.

Kokybiški pavyzdžiai

Mėginys su sulfosalicilo rūgštimi

Į du mėgintuvėlius supilama 3–4 ml filtruoto šlapimo. Į eksperimentinį mėgintuvėlį įlašinkite 6–8 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo. Antrasis vamzdis yra valdiklis. Tamsiame fone palyginkite kontrolinį mėgintuvėlį su eksperimentiniu. Jei šlapimo mėginiuose yra baltymų, atsiranda opalinis drumstumas.

Rezultatas nurodomas taip:

• reakcija yra silpnai teigiama (+),
• teigiamas (++),
• smarkiai teigiamas (+++).

Mėginys yra labai jautrus.

Taip pat galite naudoti sausą testą, kai į kelis mililitrus šlapimo pridedami keli sulfosalicilo rūgšties kristalai arba filtravimo popierius, iš anksto suvilgytas šios rūgšties tirpalu.

Klaidingai teigiami rezultatai gali atsirasti dėl jodo preparatų, sulfatinių vaistų, didelių penicilino dozių ir didelės šlapimo rūgšties koncentracijos šlapime.

Azoto rūgšties testas (Gellerio testas)

Į mėgintuvėlį supilama 1–2 ml 50 % azoto rūgšties tirpalo, po to ant rūgšties sluoksniuojame tiek pat šlapimo. Esant baltymui, dviejų skysčių sąsajoje atsiranda baltas žiedas. Kartais dėl uratų buvimo šiek tiek virš skysčių ribos susidaro rausvai violetinis žiedas. Uratų žiedas, skirtingai nei baltymų žiedas, ištirpsta šiek tiek kaitinant.

Ryškus pavyzdys

Atliekant Bright virimo testą ir proteinurijos atrankos testus (sausus kolorimetrinius mėginius) praktiškai nereikia reagentų.

Kai šlapimas, kuriame yra baltymų, virinamas, jis denatūruojasi ir susidaro drumstos nuosėdos arba dribsniai, kurie netirpsta 6% acto rūgštyje, skirtingai nei fosfatinės druskos. Atrankos testai yra pagrįsti baltymo (albumino) gebėjimu pakeisti popieriaus, padengto indikatoriumi (dažniausiai bromfenolio mėlynu) ir buferiu, spalvą. Tiesioginis ryšys tarp indikatorinio popieriaus spalvos intensyvumo (Albufan, Albutest – Čekija; Labstix, Multistix – JAV; Comburtest – Vokietija) ir baltymų kiekio leidžia apytiksliai įvertinti proteinurijos kiekį. Tačiau šiuo metu naudojami atrankos testai nėra be trūkumų. Visų pirma, bromfenolio mėlynasis neaptinka Bence-Jones baltymo.

Kiekybiniai metodai

Brandbergo-Roberto-Stolnikovo metodas

Metodas pagrįstas kokybiniu mėginiu su azoto rūgštimi. Testo eiga aprašyta aukščiau. Plono žiedo atsiradimas prie dviejų skysčių ribos 2–3 minutes po sluoksniavimo rodo, kad šlapime yra 0,033 g/l baltymų (baltymų koncentracija šlapime paprastai išreiškiama ppm, t. y. gramais litre ). Jei žiedas pasirodo anksčiau nei po 2 minučių, šlapimą reikia praskiesti vandeniu. Toks šlapimo skiedimas parenkamas taip, kad jį susluoksniavus ant azoto rūgšties žiedelis atsirastų 2-3 minutę. Skiedimo laipsnis priklauso nuo žiedo pločio ir kompaktiškumo bei jo atsiradimo laiko.

Baltymų koncentracija apskaičiuojama 0,033 g/l padauginus iš šlapimo praskiedimo laipsnio (8 lentelė).

Robertso-Stolnikovo skiedimo metodas turi nemažai trūkumų: jis yra subjektyvus, reikalaujantis daug laiko, baltymų koncentracijos nustatymo tikslumas mažėja skiedžiant šlapimą.

Patogiausi ir tiksliausi yra nefelometriniai ir biuretiniai metodai.

Nefelometrinis metodas

Jis pagrįstas baltymo savybe sulfosalicilo rūgštimi suteikti drumstumo, kurio intensyvumas yra proporcingas baltymo koncentracijai. Į graduotą mėgintuvėlį supilama 1,25 ml filtruoto šlapimo ir iki 5 ml tūrio įpilama 3% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, gerai išmaišoma. Po 5 minučių ekstinkcija matuojama FEK-M (arba bet kuriuo kitu fotometru) esant 590–650 nm bangos ilgiui (oranžinės arba raudonos šviesos filtras), lyginant su kontroline medžiaga kiuvetėje, kurios sluoksnio storis 0,5 cm. , naudojamas 1,25 ml filtruoto šlapimo (tas pats), į kurį įpilama izotoninio natrio chlorido tirpalo iki 5 ml tūrio.

Kalibravimo kreivė preliminariai sudaroma atsižvelgiant į baltymų koncentracijos išnykimo vertę. Albumino standartinis tirpalas (iš žmogaus ar galvijų serumo) naudojamas įvairių koncentracijų baltymų paruošimui. Užpildykite darbalapį.

Biureto metodas

Jis pagrįstas baltymo savybe su vario sulfatu ir šarminiu šarmu suteikti violetinį biureto kompleksą, kurio spalvos intensyvumas yra tiesiogiai proporcingas baltymo kiekiui. Į 2 ml šlapimo įpilkite 2 ml trichloracto rūgšties tirpalo, kad baltymas nusodintų, ir centrifuguokite. Supernatantas išmetamas. Į nuosėdas (baltymus) įpilkite 4 ml 3% NaOH tirpalo ir 0,1 ml 20% vario sulfato tirpalo, išmaišykite ir centrifuguokite. Violetinis supernatantas fotometuojamas 540 nm bangos ilgiu (žalios šviesos filtras) prieš distiliuotą vandenį kiuvetėje, kurios sluoksnio storis 1,0 cm. Baltymų koncentracija nustatoma iš lentelės, gautos empiriškai (kalibravimo kreivė sudaryta kaip ankstesnėje metodas).

Ortostatinis testas

Skirtas esant įtariamai ortostatinei proteinurijai ir nefroptozei. Visiškai ištuštėjus šlapimo pūslei tiriamasis 2 valandas išlaiko horizontalią padėtį, po to neatsistodamas išleidžia vieną (kontrolinę) šlapimo porciją. Per kitas 2 valandas tiriamasis nepertraukiamai vaikšto, išlaikydamas maksimalią juosmens lordozės padėtį (laiko lazdelę už apatinės nugaros dalies), po to išleidžia antrąją šlapimo porciją. Abiejose šlapimo porcijose nustatoma baltymų koncentracija ir baltymų kiekis gramais, o sergant nefroptoze – raudonųjų kraujo kūnelių skaičius 1 ml. Sergant ortostatine proteinurija, antroje porcijoje nustatoma proteinurija arba 2–3 kartus padidėjęs pradinis baltymų kiekis gramais. Hematurijos atsiradimas, dažnai kartu su pėdsakų proteinurija antroje dalyje, būdingas nefroptozei.

Bence-Jones uroproteinų nustatymas

Bence-Jones baltymai yra termolabilūs mažos molekulinės masės paraproteinai (santykinė molekulinė masė 20 000–45 000), daugiausia randami sergant daugybine mieloma ir Waldenströmo makroglobulinemija. Jie yra lengvos imunoglobulinų L grandinės. Dėl mažos molekulinės masės L grandinės lengvai patenka iš kraujo per nepažeistą inkstų filtrą į šlapimą ir ten gali būti nustatomos naudojant termoprecipitacijos reakciją. Tyrimą patartina atlikti tik su teigiamu sulfosalicilo rūgšties tyrimu. Apibrėžimas atliekamas taip. Į 10 ml šlapimo įlašinti 3–4 lašus 10% acto rūgšties tirpalo ir 2 ml sočiojo natrio chlorido tirpalo, švelniai pakaitinti vandens vonioje, palaipsniui didinant temperatūrą. Jei šlapime yra Bence-Jones baltymų, tada 45–60 ° C temperatūroje atsiranda difuzinis drumstumas arba susidaro tankios baltos nuosėdos. Toliau kaitinant iki virimo, nuosėdos ištirpsta, o aušinant vėl atsiranda. Šis mėginys nėra pakankamai jautrus ir turi būti patikrintas elektroforezės ir imunoelektroforezės būdu.

Tikslas- Baltymų nustatymas šlapime.

Indikacijos- hipertenzinės būklės nėštumo metu, inkstų ligos nėščioms moterims

Kontraindikacijos– Ne.

Galimos komplikacijos– Ne

Ištekliai- indas, sterilus stiklainis, mėgintuvėliai, 30% sulfosalicilo arba 3% acto rūgšties, pipetė, alkoholio degiklis.

Veiksmo algoritmas:

1. Paaiškinkite nėščiajai apie būtinybę nustatyti baltymą šlapime.

2. Paprašykite nėščiosios surinkti šlapimą į sterilų indelį.

3. Tyrimas su sulfosalicilo rūgštimi: į mėgintuvėlį supilkite 4-5 ml šlapimo, įlašinkite 6-10 lašų rūgšties. Jei šlapime yra baltymų, susidaro nuosėdos arba drumstumas.

4. Mėginys su 3% acto rūgštimi: 8-10 ml šlapimo supilkite į mėgintuvėlį, virkite ant spiritinio degiklio, jei šlapime bus baltymų, jis drumstės. Į drumstą šlapimą įlašinkite kelis lašus 3% acto rūgšties tirpalo. Jei šlapime išnyksta drumstumas, testas yra neigiamas.

PASTABOS Jis nustatomas akušerijos priėmimo skyriuje.

Standartas „Numatomos gimimo datos nustatymas“.

Tikslas:įvertinti praktinius absolvento gebėjimus nustatant numatomos gimdymo datą

Indikacijos- kiekvienas apsilankymas nėščiosios gimdymo įstaigoje.

Kontraindikacijos– Ne

Galimos komplikacijos– Ne

Ištekliai- stalas, dvi kėdės, kalendorius, akušerinis kalendorius, rašytinė informacija apie pirmosios paskutinių menstruacijų dienos datą, pirmą atvykimą į gimdymo kliniką, ultragarso su išvada datą, nėštumo atostogų datą

Veiksmo algoritmas:

1. Prisistatykite, paaiškinkite moteriai numatomo gimdymo termino skaičiavimo prasmę.
2. Iš nėščiosios sužinokite pirmąją paskutinių mėnesinių dieną, prie šios datos pridėkite 280 dienų arba, naudodami Negele formulę, prie 1 paskutinių menstruacijų dienos pridėkite 7 dienas ir atimkite 3 mėnesius, gauta data yra gimdymo data. dėl menstruacijų.
3. Išsiaiškinkite pirmojo vaisiaus judėjimo datą, pridėkite 140 dienų iki šios dienos pirmagimiui ir 154 dienas daugiavaisiui, gauta data yra vaisiaus judėjimo terminas.
4. Pagal menstruacinį ciklą nustatykite, kurią dieną įvyko paskutinė ovuliacija ir nuo pirmosios paskutinių menstruacijų dienos skaičiuokite tris mėnesius atgal ir pridėkite dienų skaičių iki ovuliacijos, gaukite gimimo datą.
5. Apskaičiuokite gimdymo terminą pirmą kartą pasirodžius gimdymo klinikoje. Paklaida bus minimali, jei nėščioji pas gydytoją kreipėsi per pirmąsias 12 nėštumo savaičių.
6. Nustatykite terminą pagal prenatalinių atostogų datą. Prenatalinių atostogų laikotarpis prasideda 30 nėštumo savaitę. Prie šios datos prideda 10 savaičių, gaunama gimimo data.
7. Apskaičiuokite gimdymo terminą ultragarsu, atliktu nėščiųjų klinikoje.

Standartas „Išorinių lytinių organų tyrimas“

Tikslas:įvertinti abiturientės praktinius įgūdžius tiriant nėščios moters išorinius lytinius organus

Indikacijos- pirminis kreipimasis į nėščios moters akušerijos įstaigą, priėmimas į ligoninę su reguliaria gimdymo veikla.

Kontraindikacijos– Ne

Galimos komplikacijos– Ne

Ištekliai– moteriškas fantomas, sofa, vienkartiniai apatiniai kušetei

Veiksmo algoritmas:

1. Prisistatykite, paaiškinkite moteriai išorinių lytinių organų tyrimo svarbą, jo atlikimo etapus, gaukite jos sutikimą

2. Atlikti higieninę rankų dezinfekciją

3. Ant abiejų rankų užsimaukite sterilias pirštines.

4. Ištirkite išorinius lytinius organus: įvertinkite plaukuotumo tipą, didžiųjų ir mažųjų lytinių lūpų sandarą, klitorį, tarpvietės būklę.

5. Abiejų rankų nykščiu ir smiliumi išskleiskite didžiąsias lytines lūpas, apžiūrėkite išorinės šlaplės angos būklę, makšties prieangį, palpuokite Bartolino liaukų sritį (apatinį didžiųjų lytines lūpų trečdalį).

6. Nuimkite vienkartines pirštines ir sudėkite į saugią atliekų dėžę.

7. Nusiplauk rankas su muilu.

8. Suteikti nėščiajai informaciją apie išorinių lytinių organų būklę.

9. Padarykite pastabą dokumentacijoje.

PASTABA Apžiūra atliekama konfidencialiai, nežeminant moters orumo.

Standartas „Skubios pagalbos teikimas sergant eklampsija“

Tikslas:įvertinti abituriento, teikiančio skubią pagalbą sergant eklampsija, praktinius įgūdžius

Indikacijos- Priepuoliai sergant eklampsija

Kontraindikacijos– Ne

Galimos komplikacijos- pasikartojantys traukuliai, eklampsinė koma.

Ištekliai– moters modelis, 25 % magnio sulfato tirpalas, mentelė, liežuvio laikiklis, 20 ml švirkštas, 500 ml fiziologinis tirpalas, intraveninė infuzijos sistema, alkoholis, vata, turniketas

Veiksmo algoritmas:

1. Ištikus priepuoliams, iškviesti visą laisvą personalą ir reanimacijos komandą nepalikdami paciento.

2. Tuo pačiu metu atlikite šiuos veiksmus:

· išlaisvinkite kvėpavimo takus atidarydami burną mentele ar šaukštu, apvyniotu marle, ištraukite liežuvį su liežuvio laikikliu.

Pašalinkite seiles iš burnos ertmės, kai tik įkvėpsite, užtikrinkite laisvą oro patekimą.

Sustabdžius traukulius į veną, įvedama pradinė magnio sulfato dozė - 25% -20 ml 10-15 minučių.

3. Pradėkite 320 ml fiziologinio tirpalo infuziją į veną su 80 ml – 25 % magnio sulfato tirpalu.

4. Kontroliuojant kraujospūdį ir tęsiant magnio terapiją, pacientą perkelti į neštuvus ir transportuoti į artimiausios gimdymo ligoninės reanimacijos skyrių.

PASTABA

Sergant eklampsija, gimdymas turi įvykti stabilizavus paciento būklę, bet ne vėliau kaip per 12 valandų nuo traukulių pradžios.

Standartas „Skubi pagalba sunkios preeklampsijos atveju“.

Tikslas:įvertinti praktinius absolvento įgūdžius teikiant skubią pagalbą esant sunkiai preeklampsijai

Indikacijos- sunki preeklampsija

Kontraindikacijos- priepuolio metu

Galimos komplikacijos- Traukuliai, eklampsinė koma.

Ištekliai– moters modelis, 25 % magnio sulfato tirpalas, 20 ml švirkštas, 500 ml fiziologinis tirpalas, intraveninė infuzijos sistema, alkoholis, vata, turniketas

Veiksmo algoritmas:

1. Diagnozė: „Sunki preeklampsija“, jei yra vienas iš šių simptomų: galvos skausmas, skausmas epigastriniame regione, regos sutrikimai, musės prieš akis, pykinimas, vėmimas, esant arterinei hipertenzijai (140/90 mm Hg ir daugiau). ) ir proteinurija.

2. Iškvieskite visą laisvą personalą ir gaivinimo komandą nepalikdami paciento.

3. Vienu metu atlikite šiuos veiksmus:

Nėščiąją paguldykite ant lygaus paviršiaus, nepažeisdami ir pasukite pacientės galvą į vieną pusę.

Į veną įvedama pradinė magnio sulfato dozė - 25% -20 ml 10-15 minučių.

4. Pradėkite 320 ml įprasto fiziologinio tirpalo su 80 ml 25 % magnio sulfato tirpalo infuziją į veną.

5. Kai kraujospūdis lygus 160/100 mm Hg arba didesnis. reguliuoti kraujospūdį skiriant po liežuviu 10 mg nifedipino, po 30 minučių vėl po 10 mg kontroliuojant kraujospūdį (kraujospūdį palaikyti 130/90-140/95 mm Hg).

6. Kontroliuojant kraujospūdį ir tęsiant magnio terapiją, pacientą perkelti į neštuvus ir vežti į artimiausios gimdymo ligoninės reanimacijos skyrių.

PASTABA Jei atsiranda magnio sulfato perdozavimo požymių, per 10 minučių į veną sušvirkškite 10 ml 10% Ca gliukonato tirpalo.

Amniotomijos standartas.

Tikslas- vaisiaus šlapimo pūslės atidarymas.

Indikacijos- prieš gimdymo sužadinimą, gimdymo stimuliavimą, gimdymo silpnumą Kontraindikacijos- grėsmingos motinos ar vaisiaus būklės

Galimos komplikacijos- mažų vaisiaus dalių prolapsas, kylanti infekcija, vaisiaus šlapimo pūslės kraujagyslių pažeidimas, normalios placentos atsiskyrimas

Ištekliai- ginekologinė kėdutė, individuali sauskelnė, sterilios pirštinės, antiseptikas moters išoriniams lytiniams organams gydyti, kulkų žnyplių šakelė.

Veiksmo algoritmas:

1. Prisistatykite.

2. Paaiškinkite moteriai šios operacijos būtinybę.

3. Paimkite informuotą paciento sutikimą procedūrai

4. Paguldykite moterį ant ginekologinės kėdės su vienkartine lova po ja.

5. Moters išorinius lytinius organus apdorokite antiseptiniu tirpalu, ant moters skrandžio uždėkite sterilų vystyklą.

6. Atlikti higieninę rankų dezinfekciją.

7. Ant abiejų rankų mūvėkite vienkartines pirštines.

8. Kairiosios rankos pirštais paskleiskite lytines lūpas, nuosekliai įkiškite į makštį

smilius, tada vidurinis dešinės rankos pirštas.

9. Įveskite kulkos žnyplės atšaką į makštį tarp rodyklės ir vidurio

pirštai.

10. Pradurkite vaisiaus vandenų maišelį.

11. Įveskite rodomąjį pirštą, o po to vidurinįjį pirštą į vaisiaus šlapimo pūslės angą, palaipsniui išplėskite angą, pašalinkite plėveles nuo galvos. Lėtai, kontroliuojant pirštus, išleiskite vaisiaus vandenis (smulkių dalių prolapso prevencija, normaliai išsidėsčiusios placentos atsiskyrimas).

13. Ištraukite pirštus.

14. Nuimkite pirštines ir sudėkite į saugią atliekų dėžę.

15. Nusiplauk rankas su muilu.

16. Užsirašykite duomenis gimdymo istorijoje.

PASTABA.

Su polihidramnionu padaroma nedidelė skylutė ir lėtai išleidžiamas vanduo. Būtina kontroliuoti vandens nutekėjimo greitį, nes greitai ir staigiai nutekėjus, mažos vaisiaus dalys gali iškristi. Nutrūkus vandeniui, moteriai rekomenduojama pagulėti 30 minučių.

Instrukcija

Kokybiniai baltymų nustatymo metodai šlapimas: Helerio metodas, 20 % sulfosalicilo rūgšties testas, virimo testas ir kt. Pusiau kiekybiniai metodai: diagnostinių bandymo juostelių naudojimas baltymams nustatyti šlapimas, Brandberg-Roberts-Stolnikovo metodas. Kiekybiniai metodai: turbidimetrinis ir kolorimetrinis.

Baltymų nustatymas per dieną šlapimas kai koncentracija 0,033 g/l ir daugiau yra patologija. Paprastai rytinėje šlapimo porcijoje baltymų koncentracija neviršija 0,002 g / l, o paros. šlapimas baltymų koncentracija yra ne didesnė kaip 50-150 mg baltymų.

Šaltiniai:

• baltymų kiekio šlapime nustatymas

Šlapimas yra žmogaus metabolizmo produktas. Jis susidaro filtruojant kraują inkstuose, todėl šlapimo sudėtis aiškiai apibūdina žmogaus kūno būklę.

Šlapimas yra sudėtingas daugiau nei 150 junginių tirpalas. Kai kurios specifinės medžiagos, pavyzdžiui, acetonas, tulžies rūgštys, baltymai, gliukozė, gali būti tik sergant tam tikromis ligomis.

Norint kontroliuoti žmogaus sveikatą, visų pirma, būtina nustatyti šlapimo kiekį. Norma yra 1-1,8 litro šlapimo susidarymas per dieną. Kai išsiskiria daugiau nei 2 litrai šlapimo, tai yra galimo inkstų veiklos sutrikimo, cukrinio diabeto ir daugelio kitų ligų požymis. Jei per dieną susidaro mažiau nei 0,5 litro šlapimo, yra šlapimtakio ar šlapimo pūslės užsikimšimas.

šlapimo spalva

Išskiriamo šlapimo spalva priklauso nuo daugelio veiksnių, todėl ji gali skirtis – nuo ​​šviesiai geltonos iki oranžinės. Tam tikrų atspalvių buvimą gali paveikti tam tikri maisto produktai, taip pat žmogaus vartojami vaistai.

Išgėrus vaistus, šlapimas gali nusidažyti ir įgauti rausvą atspalvį. Jei žmogus aktyviai juda ir išskiria daug prakaito, šlapimas bus intensyviai geltonos spalvos, kaip ir vartojant tokius vaistus kaip nitroksolinas ar biomicinas.

Jei žmogus nevartojo dažančių maisto produktų ir vaistų, tačiau jo šlapimo spalva skiriasi nuo įprastos, galima įtarti, kad organizme yra liga. Pavyzdžiui, sergant kepenų ligomis, šlapimas bus tamsiai geltonos arba žalsvos spalvos.

Kraujo buvimas išskiriamame šlapime aiškiai rodo akmenų buvimą arba kraujavimą iš inkstų, jei taip pat pastebimas skausmas.

Jei šlapinimasis sunkus, tai gali reikšti uždegiminį procesą, kurį sukelia šlapimo pūslės infekcija. Tačiau nešvarus ir drumstas šlapimas rodo sunkią inkstų ligą.

Baltymai šlapime

Žmogaus kraujyje baltymų nėra arba jų kiekis toks mažas, kad jo negalima nustatyti laboratoriniais tyrimais. Jei šlapime aptinkamas baltymas, būtina atlikti pakartotinius tyrimus, nes jo gali būti atsibundant ryte, taip pat po sunkaus fizinio darbo ar sportininkų mankštos.

Vizualiai nustatyti, ar šlapime yra baltymų, ar ne, 100% neįmanoma. Galima tik spėlioti, kada šlapime yra daug balkšvų dribsnių.

Jei baltymas šlapime aptinkamas pakartotinai, tai rodo, kad yra kokia nors inkstų liga. Juose vykstantys uždegiminiai procesai išprovokuoja nežymų baltymų kiekio padidėjimą. Jei su šlapimu išsiskiria daugiau nei 2 gramai, tai yra pavojaus signalas.

Pielonefritas yra uždegiminė liga, pažeidžianti inkstų dubenį, taureles ir parenchimą. Daugeliu atvejų uždegimą sukelia bakterinė infekcija. Visiškas pasveikimas įmanomas tik laiku diagnozavus, todėl, atsiradus simptomams, būtina atlikti išsamų tyrimą.

Nedidelis baltymų kiekis randamas sveikų žmonių kasdieniniame šlapime. Tačiau tokių mažų koncentracijų neįmanoma nustatyti naudojant įprastus tyrimo metodus. Didesnių baltymų kiekių išsiskyrimas, kai įprasti kokybiniai baltymo tyrimai šlapime tampa teigiami, vadinamas proteinurija. Yra inkstų (tikroji) ir ekstrarenalinė (klaidinga) proteinurija. Sergant inkstų proteinurija, baltymai į šlapimą patenka tiesiai iš kraujo, nes padidėja jo filtracija inkstų glomeruluose arba sumažėja reabsorbcija kanalėliuose.

Inkstų (tikroji) proteinurija

Inkstų (tikroji) proteinurija yra funkcinė ir organinė. Tarp funkcinės inkstų proteinurijos dažniausiai pastebimi šie tipai:

Naujagimių fiziologinė proteinurija, kuri išnyksta 4 – 10 dieną po gimimo, o neišnešiotiems – kiek vėliau;
- ortostatinė albuminurija, būdinga 7-18 metų vaikams ir pasireiškianti tik vertikalioje padėtyje;
- trumpalaikė (insulto) albuminurija, kurią gali sukelti įvairios virškinimo sistemos ligos, sunki mažakraujystė, nudegimai, traumos ar fiziologiniai veiksniai: didelis fizinis krūvis, hipotermija, stiprios emocijos, gausus, baltymų turintis maistas ir kt.

Organinė (inkstų) proteinurija stebima dėl baltymų patekimo iš kraujo per pažeistas inkstų glomerulų endotelio vietas sergant inkstų ligomis (glomerulonefritu, nefroze, nefroskleroze, amiloidoze, nėštumo nefropatija), inkstų hemodinamikos sutrikimais (inkstų vena). hipertenzija, hipoksija), trofinis ir toksinis (įskaitant medicininį) poveikį glomerulų kapiliarų sienelėms.

Ekstrarenalinė (klaidinga) proteinurija

Ekstrarenalinė (klaidinga) proteinurija, kai baltymų šaltinis šlapime yra leukocitų, eritrocitų, bakterijų, urotelio ląstelių mišinys. stebimas sergant urologinėmis ligomis (urolitiazė, inkstų tuberkuliozė, inkstų ir šlapimo takų navikai ir kt.).

Baltymų nustatymas šlapime

Dauguma kokybinių ir kiekybinių baltymų kiekio šlapime nustatymo metodų yra pagrįsti jo krešėjimu šlapimo tūryje arba terpės (šlapimo ir rūgšties) sąsajoje.

Tarp kokybinių bedka šlapime nustatymo metodų plačiausiai naudojamas vieningas testas su sulfosalicilo rūgštimi ir Helerio žiedo testas.

Standartizuotas mėginys su sulfasalicilo rūgštimi imamas taip. 3 ml filtruoto šlapimo supilama į 2 mėgintuvėlius. Į vieną iš jų įlašinkite 6-8 lašus 20% sulfasalicilo rūgšties tirpalo. Abu vamzdžiai lyginami tamsiame fone. Šlapimo drumstumas mėgintuvėlyje su sulfasalicilo rūgštimi rodo baltymo buvimą. Prieš tyrimą būtina nustatyti šlapimo reakciją, o jei ji šarminė, parūgštinti 2-3 lašais 10% acto rūgšties tirpalo.

Geller testas pagrįstas tuo, kad esant baltymui šlapime ties azoto rūgšties ir šlapimo riba, jis koaguliuoja ir atsiranda baltas žiedas. Į mėgintuvėlį supilama 1-2 ml 30 % azoto rūgšties tirpalo ir lygiai tiek pat išfiltruoto šlapimo atsargiai sluoksniuojama išilgai mėgintuvėlio sienelės. Balto žiedo atsiradimas dviejų skysčių sąsajoje rodo baltymo buvimą šlapime. Reikėtų atsiminti, kad kartais baltas žiedas susidaro esant dideliam uratų kiekiui, tačiau skirtingai nei baltyminis, jis atrodo šiek tiek virš dviejų skysčių ribos ir kaitinant ištirpsta [Pletneva N.G., 1987].

Dažniausiai naudojami kiekybiniai metodai:

1) unifikuotas Brandberg-Roberts-Stolnikov metodas, pagrįstas Helerio žiedo testu;
2) fotoelektrokolorimetrinis metodas, skirtas kiekybiniam baltymo šlapime nustatymui pagal drumstumą, susidariusį pridedant sulfasalicilo rūgšties;
3) biureto metodas.

Baltymų nustatymas šlapime supaprastintu pagreitintu metodu atliekamas kolorimetriniu metodu, naudojant indikatorinį popierių, kurį gamina Lachema (Slovakija), Albuphan, Ames (Anglija), Albustix, Boehringer (Vokietija), Comburtest ir kt. panardinant į šlapimą specialią popierinę juostelę, impregnuotą tetrabromfenolio mėlynuoju ir citratiniu buferiu, kuri, priklausomai nuo baltymų kiekio šlapime, keičia savo spalvą iš geltonos į mėlyną. Preliminariai baltymų koncentracija tiriamajame šlapime nustatoma naudojant standartinę skalę. Norint gauti teisingus rezultatus, turi būti įvykdytos šios sąlygos. šlapimo pH turi būti 3,0-3,5 intervale; per šarminis šlapimas (pH 6,5) duos klaidingai teigiamą rezultatą, o per rūgštus šlapimas (pH 3,0) – klaidingai neigiamą.

Popierius neturi liestis su tiriamuoju šlapimu ilgiau, nei nurodyta instrukcijose, kitaip testas duos klaidingai teigiamą reakciją. Pastarasis stebimas ir tada, kai šlapime yra daug gleivių. Įvairių tipų ir serijų popieriaus jautrumas gali būti skirtingas, todėl kiekybinį baltymų kiekį šlapime šiuo metodu reikia vertinti atsargiai. Nustatyti jo kiekį paros šlapime naudojant indikatorinį popierių neįmanoma [Pletneva N.G., 1987]

Dienos proteinurijos apibrėžimas

Yra keletas būdų, kaip nustatyti baltymų kiekį, išsiskiriantį su šlapimu per dieną. Paprasčiausias yra Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodas.

Metodika.Į mėgintuvėlį supilama 5-10 ml kruopščiai sumaišyto paros šlapimo ir išilgai jo sienelių atsargiai įpilama 30% azoto rūgšties tirpalo. Jei šlapime yra 0,033% baltymų (t. y. 33 mg 1 litre šlapimo), po 2-3 minučių atsiranda plonas, bet aiškiai matomas baltas žiedas. Esant mažesnei koncentracijai, testas yra neigiamas. Esant didesniam baltymų kiekiui šlapime, jo kiekis nustatomas pakartotinai skiedžiant šlapimą distiliuotu vandeniu, kol žiedas nustoja formuotis. Paskutiniame mėgintuvėlyje, kuriame žiedas vis dar matomas, baltymų koncentracija bus 0,033%. Padauginus iš 0,033 iš šlapimo praskiedimo laipsnio, nustatomas baltymų kiekis 1 litre neskiesto šlapimo gramais. Tada baltymų kiekis paros šlapime apskaičiuojamas pagal formulę:

K \u003d (x V) / 1000

kur K – baltymų kiekis paros šlapime (g); x – baltymų kiekis 1 litre šlapimo (g); V – per parą išskiriamo šlapimo kiekis (ml).

Paprastai per dieną su šlapimu išsiskiria nuo 27 iki 150 mg (vidutiniškai 40-80 mg) baltymų.

Šis tyrimas leidžia šlapime nustatyti tik smulkius baltymus (albuminą). Tikslesni kiekybiniai metodai (kolorimetrinis Kjeldahl metodas ir kt.) yra gana sudėtingi ir reikalauja specialios įrangos.

Sergant inkstų proteinurija, su šlapimu išsiskiria ne tik albuminai, bet ir kitų rūšių baltymai. Normalioje proteinogramoje (pagal Seitz ir kt., 1953) yra toks procentas: albuminai - 20%, α 1 -globulinai - 12%, α 2 -globulinai - 17%, γ-globulinai - 43% ir β-globulinai - 8 %. Albuminų ir globulinų santykis kinta sergant įvairiomis inkstų ligomis, t.y. kiekybinis santykis tarp baltymų frakcijų yra pažeistas.

Labiausiai paplitę uroproteinų frakcionavimo būdai yra šie: sūdymas neutraliomis druskomis, elektroforetinis frakcionavimas, imunologiniai metodai (radialinė imunodifuzijos reakcija pagal Mancini, imunoelektroforetinė analizė, nusodinimo imunoelektroforezė), chromatografija, gelio filtravimas ir ultracentrifugavimas.

Pradėjus taikyti uroproteinų frakcionavimo metodus, pagrįstus elektroforetinio mobilumo, molekulinės masės kintamumu, uroproteinų molekulių dydžio ir formos kintamumu, atsirado galimybė išskirti konkrečiai ligai būdingus proteinurijos tipus, ištirti kraujo plazmos klirensą. atskirų plazmos baltymų. Iki šiol šlapime nustatyta daugiau nei 40 plazmos baltymų, įskaitant 31 plazmos baltymą normaliame šlapime.

Selektyvi proteinurija

Pastaraisiais metais atsirado proteinurijos selektyvumo samprata. 1955 m. Hardwicke'as ir Squire'as suformulavo „selektyvios“ ir „neselektyvios“ proteinurijos sąvokas, nustatę, kad plazmos baltymų filtracija į šlapimą vyksta tam tikru būdu: kuo didesnė su šlapimu išsiskiriančio baltymo molekulinė masė, kuo mažesnis jo klirensas ir mažesnė koncentracija šlapime.galutinis šlapimas. Proteinurija, atitinkanti šį modelį, yra selektyvi, priešingai nei neselektyvinė, kuriai būdingas išvestinio modelio iškrypimas.

Baltymų, turinčių santykinai didelę molekulinę masę, aptikimas šlapime rodo inkstų filtro selektyvumo nebuvimą ir ryškų jo pažeidimą. Tokiais atvejais kalbama apie mažą proteinurijos selektyvumą. Todėl šiuo metu plačiai paplitęs šlapimo baltymų frakcijų nustatymas elektroforezės metodais krakmolo ir poliakrilamido gelyje. Remiantis šių tyrimo metodų rezultatais, galima spręsti apie proteinurijos selektyvumą.

V.S.Makhlinos (1975) teigimu, labiausiai pasiteisina proteinurijos selektyvumo nustatymas, lyginant 6-7 atskirų kraujo plazmos baltymų (albumino, traneferino, α 2 - makroglobulino, IgA, IgG, IgM) klirensus, naudojant tikslius ir specifiniai kiekybiniai imunologiniai radialinės imunodifuzijos reakcijos pagal Mancini metodai, imunoelektroforetinė analizė ir kritulių imunoelektroforezė. Proteinurijos selektyvumo laipsnis nustatomas pagal selektyvumo indeksą, kuris yra lyginamųjų ir etaloninių baltymų (albumino) santykis.

Atskirų plazmos baltymų klirensų tyrimas leidžia gauti patikimos informacijos apie inkstų glomerulų filtravimo bazinių membranų būklę. Ryšys tarp baltymų, išsiskiriančių su šlapimu, pobūdžio ir glomerulų bazinių membranų pokyčių yra toks ryškus ir pastovus, kad uroproteinograma gali netiesiogiai spręsti apie patofiziologinius inkstų glomerulų pokyčius. Paprastai vidutinis glomerulų pamatinės membranos porų dydis yra 2,9–4 A ° NM, kuris gali praleisti baltymus, kurių molekulinė masė yra iki 10 4 (mioglobulinas, rūgštis α 1 - glikoproteinas, imunoglobulino lengvosios grandinės, Fc ir Fab - IgG fragmentai, albuminas ir transferinas).

Sergant glomerulonefritu, nefroziniu sindromu, glomerulų bazinėse membranose padidėja porų dydis, todėl bazinė membrana tampa pralaidi didelio dydžio ir masės baltymų molekulėms (ceruloplazminui, haptoglobinui, IgG, IgA ir kt.). Esant labai dideliam inkstų glomerulų pažeidimui, šlapime atsiranda milžiniškų kraujo plazmos baltymų (α 2 -makroglobulino, IgM ir β 2 -lipoproteino) molekulių.

Nustačius šlapimo baltymų spektrą, galima daryti išvadą, kad daugiausia pažeidžiamos tam tikros nefrono dalys. Sergant glomerulonefritu su vyraujančiu glomerulų bazinių membranų pažeidimu, šlapime būdingas didelės ir vidutinės molekulinės masės baltymų buvimas. Pielonefritui su vyraujančiu kanalėlių bazinių membranų pažeidimu būdingas didelių molekulinių baltymų nebuvimas ir padidėjęs vidutinės ir mažos molekulinės masės baltymų kiekis.

β2 -mikroglobulinas

Be gerai žinomų baltymų, tokių kaip albuminas, imunoglobulinai, lipoproteinai. fibrinogenas, transferinas, šlapime yra plazmos mikrobaltymų baltymų, tarp kurių klinikinės reikšmės turi 1968 m. Berggard ir Bearn atrastas β 2 -mikroglobulinas, kuris, turėdamas mažą molekulinę masę (santykinė molekulinė masė 1800), laisvai praeina pro inkstų glomerulus. ir reabsorbuojamas proksimaliniuose kanalėliuose. Tai leidžia kiekybiškai nustatyti β 2 -mikroglobulino kiekį kraujyje ir šlapime, siekiant nustatyti glomerulų filtraciją ir inkstų gebėjimą rezorbuoti baltymus proksimaliniuose kanalėliuose.

Šio baltymo koncentracija kraujo plazmoje ir šlapime nustatoma radioimuniniu tyrimu, naudojant standartinį rinkinį "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Švedija). Sveikų žmonių kraujo serume yra vidutiniškai 1,7 mg / l (svyruoja nuo 0,6 iki 3 mg / l), šlapime - vidutiniškai 81 μg / l (daugiausia 250 μg / l) β 2 -mikroglobulino. Jo perteklius šlapime virš 1000 mcg/l yra patologinis reiškinys. β 2 -mikroglobulino kiekis kraujyje padidėja sergant ligomis, kurias lydi sutrikusi glomerulų filtracija, ypač sergant ūminiu ir lėtiniu glomerulonefritu, policistine inkstų liga, nefroskleroze, diabetine nefropatija, ūminiu inkstų nepakankamumu.

β 2 -mikroglobulino koncentracija šlapime didėja sergant ligomis, kurias lydi kanalėlių reabsorbcijos funkcijos pažeidimas, dėl kurio jo išsiskyrimas su šlapimu padidėja 10–50 kartų, ypač sergant pielonefritu, lėtiniu inkstų uždegimu. nepakankamumas, pūlinga intoksikacija ir kt. Būdinga tai, kad sergant cistitu, skirtingai nei sergant pielonefritu, šlapime nepadidėja β 2 -mikroglobulino koncentracija, kuri gali būti naudojama šių ligų diferencinei diagnostikai. Tačiau aiškinant tyrimo rezultatus reikia atsižvelgti į tai, kad bet koks temperatūros padidėjimas visada yra kartu su padidėjusiu β 2 -mikroglobulino išsiskyrimu su šlapimu.

Vidutinės kraujo ir šlapimo molekulės

Vidutinės molekulės (SM), kitaip vadinamos baltymų toksinais, yra medžiagos, kurių molekulinė masė yra 500-5000 daltonų. Jų fizinė struktūra nežinoma. SM sudėtyje yra ne mažiau kaip 30 peptidų: oksitocino, vazopresino, angiotenzino, gliukagono, adrenokortikotropinio hormono (AKTH) ir kt. Per didelis SM kaupimasis stebimas sumažėjus inkstų funkcijai ir daugybei deformuotų baltymų bei jų metabolitų. kraujo. Jie turi įvairų biologinį poveikį ir yra neurotoksiški, sukelia antrinę imunosupresiją, antrinę anemiją, slopina baltymų biosintezę ir eritropoezę, slopina daugelio fermentų veiklą, sutrikdo uždegiminio proceso fazes.

SM lygis kraujyje ir šlapime nustatomas atrankos testu, taip pat spektrofotometrija ultravioletinėje zonoje, kai bangos ilgis 254 ir 280 mm, spektrofotometru DI-8B, taip pat dinamine spektrofotometrija su kompiuteriniu apdorojimu bangos ilgiu. 220–335 nm diapazonas tuo pačiu Beckmano spektrometru. SM kiekis kraujyje laikomas norma, lygiu 0,24 ± 0,02 arb. vienetų, o šlapime - 0,312 ± 0,09 arb. vienetų
Būdami įprasti organizmo atliekos, jos paprastai naktį iš jo pašalinamos glomerulų filtracijos būdu 0,5 %; 5% jų sutvarkoma kitu būdu. Visos SM frakcijos reabsorbuojamos vamzdelėje.

Ne plazminiai (audinių) uroproteinai

Be kraujo plazmos baltymų, šlapime gali būti ir ne plazmos (audinių) baltymų. Buxbaum ir Franklin (1970) teigimu, ne plazmos baltymai sudaro maždaug 2/3 visų šlapimo biokoloidų ir didelę uroproteinų dalį patologinės proteinurijos atveju. Audinių baltymai į šlapimą patenka tiesiai iš inkstų arba organų, anatomiškai susijusių su šlapimo takais, arba į kraują patenka iš kitų organų ir audinių, o iš jo per pagrindines inkstų glomerulų membranas į šlapimą. Pastaruoju atveju audinių baltymų išskyrimas į šlapimą vyksta panašiai kaip įvairios molekulinės masės plazmos baltymų išskyrimas. Ne plazmos uroproteinų sudėtis yra labai įvairi. Tarp jų yra glikoproteinai, hormonai, antigenai, fermentai (fermentai).

Audinių baltymai šlapime nustatomi naudojant įprastinius baltymų chemijos metodus (ultracentrifugavimą, gelio chromatografiją, įvairių tipų elektroforezę), specifines reakcijas į fermentus ir hormonus bei imunologinius metodus. Pastarieji taip pat leidžia nustatyti neplazminio uroproteino koncentraciją šlapime, o kai kuriais atvejais – ir audinių struktūras, kurios tapo jo atsiradimo šaltiniu. Pagrindinis neplazmos baltymo nustatymo šlapime metodas yra imunodifuzijos analizė su antiserumu, gautu imunizuojant eksperimentinius gyvūnus žmogaus šlapimu ir vėliau išeikvojus (adsorbuotai) kraujo plazmos baltymais.

Fermentų tyrimas kraujyje ir šlapime

Patologinio proceso metu pastebimi gilūs ląstelių gyvybinės veiklos sutrikimai, kartu su tarpląstelinių fermentų išsiskyrimu į skystą organizmo terpę. Enzimodiagnostika pagrįsta daugelio fermentų, išsiskiriančių iš paveiktų organų ląstelių ir nebūdingų kraujo serumui, nustatymu.
Žmogaus ir gyvūno nefrono tyrimai parodė, kad atskirose jo dalyse yra didelė fermentinė diferenciacija, glaudžiai susijusi su kiekvieno skyriaus atliekamomis funkcijomis. Inkstų glomeruluose yra palyginti nedidelis įvairių fermentų kiekis.

Inkstų kanalėlių ląstelėse, ypač proksimalinėse, yra didžiausias fermentų kiekis. Didelis jų aktyvumas stebimas Henlės kilpoje, tiesioginiuose kanalėliuose ir surinkimo kanaluose. Atskirų fermentų aktyvumo pokyčiai sergant įvairiomis inkstų ligomis priklauso nuo proceso pobūdžio, sunkumo ir lokalizacijos. Jie stebimi prieš atsirandant morfologiniams pokyčiams inkstuose. Kadangi įvairių fermentų kiekis yra aiškiai lokalizuotas nefrone, vieno ar kito fermento nustatymas šlapime gali padėti lokaliai diagnozuoti patologinį procesą inkstuose (glomeruluose, kanalėliuose, žievėje ar smegenyse), atlikti diferencinę diagnozę. inkstų ligos ir proceso dinamikos (silpnėjimo ir paūmėjimo) nustatymas inkstų parenchimoje.

Urogenitalinės sistemos ligų diferencinei diagnostikai naudojamas šių fermentų aktyvumo nustatymas kraujyje ir šlapime: laktato dehidrogenazės (LDH), leucino aminopeptidazės (LAP), rūgštinės fosfatazės (AP), šarminės fosfatazės (AP). , β-gliukuronidazė, glutamino-oksaloacto transaminazė (GST) , aldolazė, transamidinazė ir kt. Kraujo serume ir šlapime esančių fermentų aktyvumas nustatomas biocheminiais, spektrofotometriniais, chromatografiniais, fluorimetriniais ir chemiliuminescenciniais metodais.

Enzimurija sergant inkstų ligomis yra ryškesnė ir reguliaresnė nei fermentija. Jis ypač ryškus ūminėje ligos stadijoje (ūminis pielonefritas, trauma, naviko irimas, inkstų infarktas ir kt.). Sergant šiomis ligomis, nustatomas didelis transamidinazės, LDH, šarminės fosfatazės ir CP, hialuronidazės, LAP, taip pat tokių nespecifinių fermentų kaip GST, katalazė aktyvumas [Polyantseva LR, 1972].

Selektyvus fermentų lokalizavimas nefrone, aptikus LAP ir šarminę fosfatazę šlapime, leidžia drąsiai kalbėti apie ūmias ir lėtines inkstų ligas (ūminį inkstų nepakankamumą, inkstų kanalėlių nekrozę, lėtinį glomerulonefritą) [Shemetov V.D., 1968]. Pasak A.A.Karelin ir L.R.Polyantseva (1965), transamidinazė randama tik dviejuose organuose – inkstuose ir kasoje. Tai yra inkstų mitochondrijų fermentas, kurio kraujyje ir šlapime paprastai nėra. Sergant įvairiomis inkstų ligomis, transamidinazės atsiranda kraujyje ir šlapime, o pažeidžiant kasą – tik kraujyje.

Diferenciniame glomerulonefrito ir pielonefrito diagnostikos teste Krotkiewski (1963) atsižvelgia į šarminės fosfatazės aktyvumą šlapime, kurio padidėjimas labiau būdingas pielonefritui ir diabetinei glomerulosklerozei nei ūminiam ir lėtiniam nefritui. Didėjanti amilazemijos dinamika, kartu sumažėjus amilazurijai, gali rodyti nefrosklerozę ir inkstų raukšlėjimąsi, LAP yra svarbiausia patologiniams inkstų glomerulų ir vingiuotų kanalėlių pokyčiams, nes jos kiekis šiose nefrono dalyse yra didesnis [Shepotinovsky V.P. ir kt., 1980]. Norint diagnozuoti vilkligės nefritą, rekomenduojama nustatyti β-gliukuronidazę ir CF [Privalenko M.N. ir kt., 1974].

Vertinant fermentų vaidmenį diagnozuojant inkstų ligas, reikia atsižvelgti į šias nuostatas. Fermentai, iš prigimties baltymai, turintys mažą molekulinę masę, gali prasiskverbti pro nepažeistus glomerulus, nustatydami vadinamąjį fiziologinį fermentą. Iš šių fermentų šlapime nuolat aptinkama α-amilazė (santykinė molekulinė masė 45 000) ir uropepsinas (santykinė molekulinė masė 38 000).

Be mažos molekulinės masės fermentų sveikų žmonių šlapime, nedidelėmis koncentracijomis galima rasti ir kitų fermentų: LDH, aspartato ir alanino aminotransferazės, šarminės fosfatazės ir CP, maltazės, aldolazės, lipazės, įvairios proteazės ir peptidazės, sulfatazės, katalazės, ribonukleazė, peroksidazė.

Didelės molekulinės masės fermentai, kurių santykinė molekulinė masė didesnė kaip 70 000-100 000, pasak Richterich (1958) ir Hess (1962), gali patekti į šlapimą tik tuo atveju, jei yra sutrikęs glomerulų filtro pralaidumas. Normalus fermentų kiekis šlapime neleidžia atmesti patologinio proceso inkstuose su šlapimtakio okliuzija. Sergant epimurija, fermentų išsiskyrimas galimas ne tik iš pačių inkstų, bet ir iš kitų parenchiminių organų, šlapimo takų gleivinių ląstelių, prostatos liaukos, taip pat susidariusių šlapimo elementų su hematurija ar leukociturija.

Dauguma fermentų yra nespecifiniai inkstams, todėl sunku nustatyti, iš kur atsiranda sveikų ir sergančių žmonių šlapime esantys fermentai. Tačiau fermentų laipsnis, net ir nespecifinių fermentų inkstų pažeidimo atveju, yra didesnis nei įprastas arba stebimas sergant kitų organų ligomis. Vertingesnės informacijos gali suteikti išsamus daugelio fermentų, ypač specifinių organams, pavyzdžiui, transaminazių, dinamikos tyrimas.

Sprendžiant klausimą dėl fermento inksto kilmės šlapime, izofermentų tyrimas padeda nustatyti tiriamam organui būdingas frakcijas. Izofermentai yra fermentai, kurie veikia izogeniškai (katalizuoja tą pačią reakciją), bet yra nevienalytės cheminės struktūros ir kitų savybių. Kiekvienas audinys turi savo izofermentų spektrą. Vertingi izofermentų atskyrimo metodai yra elektroforezė krakmolo ir poliakrilamido gelyje, taip pat jonų mainų chromatografija.

Bence Jones baltymas

Sergant daugybine mieloma ir Waldenströmo makroglobulinemija, Bence-Jones baltymas randamas šlapime. Šio baltymo aptikimo šlapime metodas pagrįstas termoprecipitacijos reakcija. Anksčiau naudoti metodai, įvertinantys šio baltymo ištirpimą 100 ° C temperatūroje ir pakartotinį nusodinimą vėliau atvėsus, yra nepatikimi, nes ne visi Bence-Jones baltymų kūnai turi tinkamų savybių.

Patikimesnis šio paraproteino aptikimas jo nusodinimu 40-60 °C temperatūroje. Tačiau net ir tokiomis sąlygomis kritulių gali nebūti esant per daug rūgščiai (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) šlapimas su mažu OPM ir maža Bence-Jones baltymų koncentracija. Palankiausias sąlygas jo nusodinimui sudaro Patnem siūlomas metodas: 4 ml filtruoto šlapimo sumaišoma su 1 ml 2 M acetatinio buferio pH 4,9 ir 15 minučių kaitinama 56 °C temperatūros vandens vonelėje. Esant Bence-Jones baltymui, per pirmąsias 2 minutes susidaro ryškios nuosėdos.

Kai Bence-Jones baltymų koncentracija yra mažesnė nei 3 g / l, testas gali būti neigiamas, tačiau praktikoje tai yra labai reta, nes jo koncentracija šlapime paprastai yra reikšmingesnė. Virimo mėginiais negalima visiškai pasikliauti. Visiškai patikimai jį galima aptikti šlapime imunoelektroforeziniu metodu, naudojant specifinius serumus prieš sunkiąsias ir lengvas imunoglobulinų grandines.