Acasă › Horoscop › Determinarea calitativă a proteinei în urină. Descărcați cartea „Clinic Laboratory Research” (2.84Mb)

Determinarea calitativă a proteinei în urină. Descărcați cartea „Clinic Laboratory Research” (2.84Mb)

Principiul metodei:

Densitatea relativă a urinei este în mod normal 1,015-1,025 g/cm3. Determinarea densității relative a urinei se realizează cu ajutorul unor hidrometre mici speciale numite urometre. Urometrele sunt de două tipuri: primul este pentru urina cu densitate relativă scăzută și normală (cu diviziuni de la 1.000 la 1.030 g / cm 3), al doilea - pentru urina cu densitate relativă mare (cu diviziuni de la 1.030 la 1.060 g / cm 3 ). ).

PROGRESUL

Într-un cilindru mic cu un astfel de diametru încât urometrul plutește liber în el, urina de testat este turnată de-a lungul peretelui și urometrul este scufundat cu grijă în el. Citirea se face luând linia de pe scara urometrului, care corespunde meniscului inferior al lichidului. Toate determinările se fac la o temperatură de 20 0 C, deoarece scara urometrului este gradată în conformitate cu această temperatură. Dacă urina are o temperatură diferită, atunci pentru fiecare 3 0 C peste această temperatură trebuie să adăugați, iar pentru fiecare 3 0 C de mai jos - scădeți 0,001 din citirea scalei urometrului.

Detectarea componentelor patologice ale urinei

1. Reacții calitative pentru depistarea proteinelor în urină - a) Testul Geller cu acid azotic concentrat

Principiul metodei:

Acidul mineral concentrat HNO 3 determină denaturarea proteinelor și formează săruri complexe de proteine cu acidul. La limita a două straturi de lichide se formează un precipitat sub forma unui mic inel alb.

Progres

În eprubetă se toarnă 1 ml de HNO 3 concentrat, eprubeta este înclinată la un unghi de 45 0 și 1 ml de urină este stratificat cu grijă de-a lungul peretelui cu o pipetă.

b) test cu acid sulfosalicilic concentrat

Principiul metodei:

Acidul sulfosalicilic organic concentrat provoacă denaturarea proteinelor. Precipitarea proteinei sub formă de precipitat sau turbiditate este asociată cu deshidratarea particulelor de proteine și formarea de săruri complexe ale proteinei cu acizi.

Progres

La 1 ml de urină se toarnă 3 picături de acid sulfosalicilic 20%. În prezența proteinelor în urină, se formează un precipitat alb.

2. Determinarea cantitativă a proteinei în urină folosind

test - benzi "Albufan".

Principiul metodei:

Testul se bazează pe principiul „indicatorului de eroare a proteinei”. Zona reactivă conține un tampon de oxigen și un indicator special care își schimbă culoarea de la galben prin verde la albastru în prezența proteinelor.

Testul este foarte sensibil la albumină și reacționează la prezența acesteia în urină la o concentrație de 0,10-0,15 g/l. Proteinele cu greutate moleculară mare, cum ar fi imunoglobulinele, sunt măsurate cu o sensibilitate mai mică decât albuminele. Proteinele cu greutate moleculară mică, cum ar fi beta-2 microglobulina, proteina Bence-Jones, practic nu sunt detectate de acest test.

Evaluarea testului: se consideră un test pozitiv dacă culoarea zonei reactive se modifică. În funcție de concentrația de albumină din urină, zona reactivă poate lua o nuanță de la verde la albastru. Aceste nuanțe sunt comparate cu o scară de culori, ale cărei zone corespund unor concentrații de proteine de 0,3, 1, 3, 10 g/l.

PROGRESUL

Fără a atinge zona reactivă cu mâinile, coborâți banda de testare timp de 1-2 secunde în urina de testare, astfel încât zona să fie umezită. Apoi îndepărtați excesul de urină din bandă și, după aproximativ 1 minut, comparați culoarea zonei de indicație cu scala de culori de pe trusă și determinați cantitatea de proteină, care este exprimată în g/l.

Nu ești un sclav!
Curs educațional închis pentru copiii de elită: „Adevărata aranjare a lumii”.
http://noslave.org

De la Wikipedia, enciclopedia liberă

Testul Geller, numit după austriac patolog J.F. Heller, nume comun reacție calitativă pe proteine în urină. Proba are o sensibilitate de 0,033 g/l și este utilizată în diagnosticul clinic proteinurie. Principiul detectării proteinelor se bazează pe denaturarea acesteia sub influența unui factor denaturant - concentrat acid azotic sau reactiv Larionova.

Trebuie remarcat faptul că o anumită cantitate de proteine este întotdeauna prezentă în urină, dar, de regulă, concentrația acesteia în urina unei persoane sănătoase este sub pragul de sensibilitate al unei reacții calitative și nu este detectată prin metode simple. Pentru cantități de proteine mai mari de 0,033 g/l, proba nu este adecvată. La concentrații mai mari diluați urina sau utilizați un albuminometru Esbach.

Pentru a determina cantitatea totală de proteine din urină, se utilizează o metodă bazată pe testul Geller - metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov (W. Roberts, 1830-1899, terapeut englez). Tehnica presupune diluarea urinei până la limita inferioară de sensibilitate a probei (0,033 g/l) și timpul de formare a inelului de 2-3 minute.

Progresul analizei

Reactivi: acid azotic concentrat (fuming) sau reactiv Larionova. Urina de testat trebuie să fie limpede și acidă.

Prepararea reactivului Larionova

Se prepară o soluție saturată de clorură de sodiu (20-30 g de sare se dizolvă în 100 ml apă caldă, se lasă să stea până se răcește). Supernatantul este aruncat și filtrat. La 99 ml de filtrat adăugați 1 ml de acid azotic concentrat (puteți înlocui 2 ml de acid clorhidric).

Tehnica cercetării

Aproximativ aceeași cantitate de urină este stratificată cu grijă de-a lungul peretelui într-o eprubetă cu 1-2 ml de reactiv. În prezența proteinelor, după aproximativ 2-3 minute, se observă turbiditate la interfața dintre lichide - un inel alb de proteină denaturată.

Un rezultat fals pozitiv poate apărea la utilizarea acidului azotic, din cauza concentrației mari de nucleoalbumină sau săruri de urat. În primul caz, acesta dispare când tubul este ușor agitat, iar în al doilea caz, inelul este situat mult mai sus decât interfața dintre medii și dispare la încălzire; la repetarea testului cu urină diluată, inelul nu se formează. Uneori apare și un inel pigmentat maroniu din oxidarea urocromului cu acid azotic.

Utilizarea reactivului larionic, spre deosebire de acidul azotic, are o serie de avantaje: inelele pigmentare nu se formează la limita straturilor, iar un rezultat pozitiv dă inele proteice mai clare.

Vezi si

Scrieți o recenzie la articolul „Testul lui Geller”

Legături

Literatură

Un fragment care caracterizează testul Geller

Eram sălbatic rănit și întristat pentru ei, pentru mine și pentru toți cei care au luptat, încă mai crezând că pot schimba ceva... Dar ar putea? .. Dacă toți cei care au luptat doar ar muri, ar face Ce rost are un astfel de război?
Dintr-o dată a apărut o altă imagine chiar în fața mea...
În aceeași „celulă” mică de piatră, unde corpul însângerat al Magdalenei încă zăcea pe podea, cavalerii templului ei stăteau în jurul ei, îngenunchiați... Toți erau îmbrăcați neobișnuit în haine lungi albe – albe ca zăpada. . Stăteau în jurul Magdalenei, coborându-și capetele mândru, iar lacrimile curgeau în șuvoiale pe fețele lor aspre și pietrificate... Primul care s-a ridicat a fost Magul, al cărui prieten fusese cândva Ioan. Cu grijă, de parcă s-ar fi teamă să nu se rănească, și-a înfipt degetele în rană și, cu o mână însângerată, a tras pe piept ceva ce semăna cu o cruce însângerată... Al doilea făcu la fel. Așa că s-au ridicat pe rând și, cu evlavie, își scufundă mâinile în sângele sfânt, și-au desenat cruci roșii pe hainele lor albe ca zăpada... Am simțit că îmi începe părul să se ridice pe cap. Era ca un fel de ritual ciudat, pe care încă nu l-am putut înțelege...
„De ce fac asta, Sever?...” am întrebat în liniște, de parcă mi-ar fi teamă că mă vor auzi.
„Este un jurământ, Isidora. Un jurământ de răzbunare veșnică... Au jurat pe sângele Magdalenei - sângele cel mai sfânt pentru ei - să-i răzbune moartea. De atunci înainte cavalerii templului purtau mantii albe cu cruci roșii. Numai că aproape niciunul dintre cei din afară nu și-a știut vreodată adevărata semnificație... Și dintr-un motiv oarecare, toată lumea a „uitat” foarte repede că cavalerii templului înainte de moartea Magdalenei s-au îmbrăcat în salopete simple maro închis, nu „decorate” cu nicio cruci. . Cavalerii Templului, ca și catarii, urau crucea în sensul în care biserica creștină o „cinstește”. Ei îl considerau un instrument rău și rău al crimei, un instrument al morții. Iar ceea ce au pictat pe piept cu sângele Magdalenei avea un cu totul alt sens. Doar că biserica a „redesenat” complet sensul Cavalerilor Templului pentru a se potrivi nevoilor sale, la fel ca orice altceva legat de Radomir și Magdalena...
În același mod, după moartea ei, ea a anunțat-o public pe Magdalena decedată ca femeie de stradă...
- a negat, de asemenea, copiii lui Hristos și căsătoria lui cu Magdalena...
- i-a distrus și pe amândoi „în numele credinței lui Hristos”, cu care amândoi au luptat cu înverșunare toată viața...
- a distrus și Qatarul, folosind numele lui Hristos... numele persoanei căreia i-au predat Credința și Cunoașterea...
- i-a distrus și pe Templieri (Cavalerii Templului), declarându-i slujitori ai diavolului, defăimând și aruncând noroi la faptele lor și vulgarizându-l pe Însuși Maestrul, care era un descendent direct al lui Radomir și Magdalena...
După ce a scăpat de toți cei care puteau să sublinieze cumva josnicia și răutatea celor „prea sfinți” diavoli ai Romei, biserica creștină a creat o legendă care a fost confirmată în mod sigur de „dovezi incontestabile”, pe care nimeni nu a verificat-o vreodată dintr-un motiv oarecare, și nimănui nu i-a trecut niciodată prin cap să se gândească la ceea ce se întâmplă.

Compoziția locului de muncă pentru determinarea proteinelor în urină include următoarele elemente:

Eprubete chimice, aglutinare.
Un set de pipete gradate.
Pipete cu un capăt trasat îngust.
Lămpi cu alcool sau arzător cu gaz.
Foaie neagra.
Acid acetic glacial.
acid sulfosalicilic.
Acid azotic concentrat.
Apa distilata.

Metode pentru determinarea proteinelor în urină

Toate metodele utilizate pentru determinarea calitativă a proteinei în urină se bazează pe coagularea proteinelor. Coagularea proteinelor se manifestă prin turbiditate exprimată în grade diferite (de la opalescență la turbiditate ridicată) sau descuamare.

Determinarea calitativă a proteinei în urină poate fi efectuată în unul dintre următoarele moduri:

fierbere cu soluție de acid acetic 10%;
reacție cu o soluție 20% de acid sulfosalicilic;
reacție cu soluție de acid azotic 50% (testul Geller);
reacție cu o soluție 1% de acid azotic într-o soluție saturată de sare comună (testul Geller modificat conform Larionova).

Înainte de determinarea calitativă a proteinei în urină, se efectuează următoarele lucrări pregătitoare:
1. Urina tulbure este filtrată printr-un filtru de hârtie. Daca nu se poate obtine un filtrat transparent se realizeaza refiltrarea prin acelasi filtru, sau se amesteca urina cu o cantitate mica de pamant de diatomee sau talc, dupa care se filtreaza.
2. Dacă urina are o reacție alcalină, se acidifică cu o soluție 10% de acid acetic până la o reacție ușor acidă sub controlul turnesolului sau hârtiei indicator universal.
3. Cu un conținut scăzut de sare (urină galben deschis sau galben pal cu o greutate specifică scăzută) la fiecare
se adaugă câteva picături dintr-o soluție saturată de clorură de sodiu în probă, deoarece lipsa sărurilor determină coagularea proteinei.
4. Gradul de turbiditate se observă folosind un fond negru. Fundalul este carton negru sau hârtie neagră folosită în fotografie. Contabilizarea reacției pe un fundal negru vă permite să identificați cel mai mic grad de turbiditate.

Eprubetele numerotate sunt plasate într-un suport separat. Ele produc una dintre următoarele reacții.

1. Test de fierbere cu soluție de acid acetic 10%. Acest test necesită o soluție 10% de acid acetic, care se prepară după cum urmează: 10 ml de acid acetic glacial se pun într-un cilindru și se completează cu apă distilată până la marcajul de 100 ml.

Tehnica de determinare a proteinelor. 10-12 ml de urină filtrată cu reacție ușor acidă se pun într-o eprubetă chimică. Apoi partea superioară a eprubetei cu urină este încălzită ușor până la fierbere și se adaugă 8-10 picături dintr-o soluție 10% de acid acetic. O eprubetă cu urină este privită pe un fundal negru în lumină transmisă. În prezența proteinelor în urină, apare turbiditate în diferite grade (de la opalescență la turbiditate mare) sau cad fulgi. Controlul este partea inferioară a eprubetei, nesupusă la încălzire. Acest test detectează cantitatea de proteine, începând de la 0,015% o (% o - promille).

2. Reacție cu soluție de acid sulfosalicilic 20%. O soluție de acid sulfosalicilic 20% se prepară după cum urmează: 20 g de acid sulfosalicilic se dizolvă în 70-80 ml apă distilată, se transferă într-un cilindru de 100 ml și se completează cu apă distilată până la semn. Reactivul preparat este depozitat într-un recipient de sticlă închisă la culoare.

Tehnica de determinare a proteinelor. În două tuburi de același diametru, se pun 2-3 ml de urină filtrată dintr-o reacție slab acidă, se adaugă 3-4 picături dintr-o soluție de acid sulfosalicilic 20% într-unul dintre tuburi în urină, celălalt tub servește ca un control. Dacă proteina este prezentă în tubul de reactiv, vor apărea turbiditate sau fulgi de proteină coagulată. În tubul de control, lichidul rămâne limpede. Acidul sulfosalicilic, împreună cu proteina serică, precipită albumoze (peptide), care sunt un produs al descompunerii proteinelor. Pentru a clarifica cauza urinei tulburi, se încălzește eprubeta cu urină. Turbiditatea cauzată de proteinele serice este sporită, în timp ce turbiditatea datorată prezenței albumozei dispare. Acest test are aceeași sensibilitate ca și cel precedent.

3. Reacția cu soluție de acid azotic 50% (testul Geller). O soluție 50% de acid azotic se prepară după cum urmează: 50 ml de apă distilată (diluție 1:1) se adaugă la 50 ml de acid azotic cu o greutate specifică de 1,2-1,4.

Tehnica de determinare a proteinelor. Se toarnă 1 ml de acid azotic 50% într-o eprubetă mică îngustă (exsutură de aglutinare). 1 ml de urină de testare filtrată este colectat într-o pipetă cu un capăt trasat îngust, stratificat pe reactiv, iar tubul este transferat în poziție verticală. În prezența proteinelor, la interfața lichidelor apare un inel alb. Momentul apariției inelului, proprietățile sale depind de cantitatea de proteine: dacă proteina este scăzută, atunci inelul nu apare imediat, prin urmare, aspectul său este monitorizat timp de 2,5-3 minute. Cantitatea minimă de proteine determinată prin această metodă este de 0,033°/oo. Cu un conținut mai mic de proteine în urină, inelul nu se formează. Contabilizarea rezultatelor reacției produse pe un fundal negru în lumină transmisă.

4. Reacția cu o soluție de acid azotic 1% într-o soluție saturată de sare comună este un test Geller modificat (conform lui Larionova). Pentru test, se folosește o soluție de acid azotic 1%, preparată într-o soluție saturată de sare comună (reactivul Larionova). 35 g de sare comună se dizolvă în 100 ml apă distilată, soluția este filtrată, 99 ml de soluție saturată de clorură de sodiu preparată se adaugă la 1 ml de acid azotic concentrat cu o greutate specifică de 1,2-1,4.

Tehnica de determinare a proteinelor la fel ca în reacția cu o soluție 50% de acid azotic (testul Geller), dar în loc de 1 ml dintr-o soluție 50% de acid azotic, se toarnă 1 ml de reactiv Larionova într-o eprubetă și se toarnă 1 ml de urină. stratificat pe el. Apariția unui inel alb la limita lichidelor indică prezența proteinelor în urina testată. Testul Larionova este la fel de sensibil ca și testul Heller.

5. Test colorimetric (uscat) pentru determinarea calitativă a proteinei. Testul colorimetric (uscat) pentru determinarea calitativă a proteinei în urină se bazează pe efectul pe care îl are proteina asupra culorii indicatorului dintr-o soluție tampon.

Tehnica de determinare a proteinelor. O bucată de hârtie indicator concepută pentru a determina proteina este scufundată în urină pentru o perioadă scurtă de timp. Proba este considerată pozitivă dacă hârtia devine albastru-verde.

Cuantificarea proteinelor în urină

Determinarea cantitativă a proteinei în urină se bazează pe faptul că, atunci când urina care conține proteine este stratificată pe o soluție de 50% de acid azotic sau reactiv Larionova, la marginea a două lichide se formează un inel alb, iar dacă apare un inel alb clar. cu 3 minute, apoi conținutul de proteine este de aproximativ 0,033% sau 33 mg în 1000 ml de urină. Apariția inelului mai devreme de 3 minute indică un conținut mai mare de proteine în urină.
La cuantificarea proteinelor în urină, se respectă următoarele reguli:

Determinarea cantitativă a proteinei se efectuează numai în acele porțiuni de urină în care a fost detectată calitativ.
Determinarea se face cu urina filtrata cu grija.
Urmați cu exactitate tehnica de stratificare a urinei de testat pe o soluție de acid azotic 50% sau reactiv Larionova în raportul dintre reactiv și urină (1:1).
Timpul de apariție a inelului este determinat de un cronometru: în calculul final al cantității de proteine, se ia în considerare timpul de stratificare a urinei pe acid azotic, care este de 15 secunde.
Urina este diluată pe baza proprietăților inelului. În acest caz, fiecare diluție ulterioară de urină este pregătită din cea anterioară.
Inelele sunt identificate pe un fundal negru.

Cele mai comune sunt două metode pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină: metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg și metoda lui S. L. Erlich și A. Ya. Althausen.

Metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg. Conform acestei metode, cantitatea de proteină din urină se determină prin diluarea acesteia până când, cu următorul strat de urină pe o soluție 50% de acid azotic sau reactiv Larionov, inelul apare exact cu 3 minute. Cantitatea de proteine se calculează prin înmulțirea a 0,033% cu gradul de diluare a urinei. Rezultatul obţinut exprimă cantitatea de proteine în miligrame la 1000 ml de urină, adică în ppm (% o).
Metoda lui S. L. Erlich și A. Ya. Althausen. Un număr de tuburi de aglutinare sunt plasate într-un suport, în care se toarnă mai întâi 1 ml dintr-o soluție 50% de acid azotic sau reactiv Larionova. Urina de testat se prelevează cu o pipetă separată, curată, uscată, cu un capăt îngust extras și se așează pe reactiv, după care cronometrul este pornit. Timpul de apariție a inelului este monitorizat prin plasarea eprubetei pe un fundal negru. Când apare inelul, cronometrul este oprit.

La stratificarea urinei, în funcție de cantitatea de proteine, poate apărea un inel compact, lat sau filiforme. Un inel compact, larg apare imediat după stratificarea urinei pe reactiv. Inelul sub formă de fir poate apărea imediat, înainte de expirarea unui minut, sau în intervalul de la unu la 4 minute.

Când apare un inel filiform în decurs de una până la 4 minute, nu este necesar să se dilueze urina!
Pentru a calcula cantitatea de proteine în acest caz, este suficient să folosiți planul de masă propus de autori (Tabelul 1).

Exemplul 1 La stratificarea urinei pe reactiv, după 2 minute s-a format un inel filiform. Dacă inelul s-ar fi format în 3 minute, atunci cantitatea de proteină ar fi de 0,033%.

În acest caz, inelul s-a format mai devreme. Corecția corespunzătoare, conform tabelului de plan, pentru un timp de 2 minute este 1 + 1/8. Aceasta înseamnă că proteina din această porțiune de urină va fi de 1 + 1/8 ori mai mare decât 0,033 ° / oo, adică 0,033% o X (1 + 1/8) \u003d 0,037 ° / oo.

Când apare un inel filiform până la 1 minut, adică după 40-60 de secunde, se face o diluție de urină de 1,5 ori (2 părți de urină + 1 parte de apă), apoi urina diluată este din nou stratificată pe reactiv. iar aspectul inelului este înregistrat. La calcularea rezultatelor, se ține cont de faptul că urina a fost diluată de 1,5 ori.

Exemplul 2 După stratificarea urinei diluate de 1,5 ori, a apărut un inel filiform cu 2 minute. Dacă inelul ar apărea cu 3 minute, atunci proteina ar fi de 0,033%. Modificarea corespunzătoare conform planului-tabel, pentru un timp de 2 minute este 1 + 1/8. Proteina din urină conține 0,033% oX1,5X (1 + 1/8) \u003d 0,056% o.

Dacă inelul filiform apare imediat, urina este diluată de 2 ori (1 parte urină + 1 parte apă). Urina diluată este din nou stratificată pe reactiv și aspectul inelului se notează după 1 minut.

Exemplul 3 La stratificarea urinei diluate de 2 ori pe reactiv, a apărut un inel filiform după 1 minut și 15 secunde. Apoi, cantitatea de proteină din urină studiată, prin analogie cu calculele anterioare, va fi egală cu
0,033% oX2X (1 + 3/8) \u003d 0,091%.
Dacă apare un inel larg, urina este diluată de 4 ori (1 parte urină + 3 părți apă).
Odată cu stratificarea ulterioară a urinei diluate, se poate forma un inel filiform atât înainte, cât și după un minut. În astfel de cazuri, calculul cantității de proteină se efectuează prin analogie cu exemplele anterioare, adică 0,033% o este înmulțit cu gradul de diluție și cu corecția corespunzătoare.

Exemplul 1 Inelul după diluarea urinei de 4 ori a apărut imediat. Urina este diluată de 2 ori. După stratificarea urinei diluate de 8 ori (4X2), după 1,5 minute s-a format un inel filiform. În acest caz, cantitatea de proteine este de 0,033% oX8X1,25 \u003d 0,33% o etc.
Când apare un inel compact, urina este diluată de 8 ori (1 parte urină + 7 părți apă). La stratificarea ulterioară a urinei diluate pe reactiv, se poate forma fie un inel compact, fie lat, fie filiform.

Exemplul 2 Când urina a fost stratificată pe acid azotic, sa format imediat un inel compact. Urina este diluată de 8 ori (1 parte de urină + 7 părți de apă) și din nou este stratificată. Acest lucru a dus din nou la un inel compact. Apoi, urina este diluată încă de 8 ori (pentru aceasta, 1 parte din urină diluată este luată într-un cilindru sau într-o eprubetă și se adaugă 7 părți de apă). După un alt strat de urină diluată, s-a format imediat un inel filiform. Urina se diluează de 2 ori (1 parte urină + 1 parte apă). După următorul strat de urină diluată, se formează un inel filiform de 2 minute. Calculul cantității de proteină dintr-o porțiune dată de urină se efectuează după cum urmează: 0,033,% oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4,8% o.

În plus față de tabelul de plan, există un tabel cu numere de proteine calculate (Tabelul 2). Dacă urina nu este diluată, atunci cantitatea de proteine se găsește în coloana „Urina întregă nediluată”. Când se diluează urina de un număr întreg de ori (8,4,2), se folosește Tabelul 1. 1. Când diluați urina de 1,5 ori, utilizați tabelul. 2.

Tehnica de utilizare a unui tabel pentru determinarea conținutului de proteine din urină

În coloanele corespunzătoare ale tabelului sunt indicate timpul de apariție a inelului și gradul de diluare a urinei.
Numărul situat la intersecția liniilor orizontale și verticale trase din acești doi indicatori indică cantitatea de proteină din urina de testat (% o).

Este posibil ca, cu un test calitativ pozitiv pentru proteine, inelul să nu se formeze atunci când este stratificat pe o soluție de acid azotic 50%. Aceasta înseamnă că cantitatea de proteine din urină este mai mică de 0,033%. În astfel de cazuri, cantitatea de proteină din forma de analiză este denumită „urme”.

Dacă proteina este cuantificată, conținutul de proteine în ppromilă este notat în forma de analiză a urinei, de exemplu, „proteină - 0,66% o”.

Pe lângă determinarea cantitativă a proteinei într-o porțiune separată de urină, se calculează cantitatea sa zilnică în grame. În acest scop, se colectează zilnic urina, se măsoară cantitatea acesteia și se determină conținutul de proteine în ppm. Apoi se face un calcul. De exemplu, cantitatea zilnică de urină este de 1800 ml, proteine - 7 ° / oo. Aceasta înseamnă că proteina din cantitatea zilnică de urină conține: 1,8X7 \u003d 12,6 g.

trebuie filtrată mai întâi.

Probă cu acid sulfosalicilic. Cel mai sensibil și comun este testul cu o soluție de acid sulfosalicilic 20%.

Progresul definirii. Două eprubete chimice sunt marcate: "O" - experiență și "K" - control. În ambele tuburi se toarnă 4-5 ml de urină limpede. Adăugați 4-5 picături dintr-o soluție 20% de acid sulfosalicilic în eprubetă, amestecați bine. Ambele eprubete sunt examinate una lângă alta pe un fundal negru. În prezența proteinelor în eprubetă, se observă turbiditate. Tubul de control este folosit pentru comparație. Sensibilitatea testului cu acid sulfosalicilic este de 0,015 g/l.

Produșii de scindare a proteinelor - albumoza - dau, de asemenea, o reacție pozitivă cu acidul sulfosalicilic. Pentru a determina cauza turbidității, proba este încălzită. În același timp, ceata cauzată de prezența albuminei dispare, iar cea cauzată de prezența proteinei crește.

Testul inelului Heller. Progresul definirii. Se toarnă 1 - 1,5 ml de acid azotic 50% sau reactiv Larionova într-un tub de centrifugă. Apoi stratificați

acidulează aceeași cantitate de urină, astfel încât lichidul să nu se amestece. În prezența proteinei la limita lichidului, apare un inel alb. Reacția se evaluează pe fond negru și se ține cont de momentul apariției inelului filiform.Sensibilitatea probei este de 0,033 g/l. Cu acest conținut de proteine, la interfața lichidelor apare un inel alb sub formă de fir între al 2-lea și al 3-lea minute.

tehnica de stratificare. Urina este întotdeauna suprapusă acidului, deoarece greutatea specifică a urinei este mai mică decât cea a acizilor. Stratificarea se face cu o pipetă Pasteur cu un balon, care colectează o cantitate mică de urină. Apoi, urina este introdusă în partea îngustă a tubului de centrifugare, ținând-o în unghi, stratificată picătură cu picătură, coborând încet urina de-a lungul pereților tubului.

Dezavantajul probei este apariția unui inel pigmentar de la oxidarea urocromului cu acid azotic.Acest inel maroniu poate interfera cu determinarea. În urina care conține urat, un inel albicios apare uneori deasupra limitei fluidului.

Un rezultat mai clar al testului Heller se obține dacă în loc de o soluție 50% de acid azotic se folosește reactivul Larionova (soluție 1% de acid azotic într-o soluție saturată de clorură de sodiu).

cuantificarea

Cantitatea de proteine din urină poate fi determinată în două moduri: 1) prin metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov cu diluarea urinei; 2) în funcție de turbiditatea formată prin adăugarea de acid sulfosalicilic 3%.

Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov. Această metodă se bazează pe testul inel Heller. Se știe că atunci când conținutul de proteine din urină este de 0,033 g/l, se formează un inel filamentos în minutul 2-3. Dacă proteina din urină conține mai mult de 0,033 g/l, atunci inelul apare mai devreme și nu filamentos lat. O astfel de urină trebuie diluată cu apă distilată și stratificată din nou cu acid azotic cu urină diluată. Dacă, după stratificare, apare un inel filiform între al 2-lea și al 3-lea minute, atunci diluția trebuie considerată completă. Cantitatea de proteine în acest caz se determină prin înmulțirea cu 0,033 g/l ng a gradului de diluție a urinei. Diluția urinei este selectată folosind următoarea evaluare aproximativă a proprietăților! inele: dacă imediat după stratificare apare un inel filiform, urina este diluată de 2 ori, dacă apare imediat un inel larg, de 4 ori, dacă apare imediat un inel compact, de 8 sau 10 ori.

Diluarea urinei se face intr-un tub de centrifuga de masurare, turnand urina pana la semnul de 1 ml si adaugand apa la semn, de cate ori se face dilutia. Conținutul eprubetei este bine amestecat cu o pipetă Pasteur cu un balon.

Uneori trebuie să diluați urina de mai multe ori. În acest caz, la calcularea cantității de proteine, se iau în considerare toate diluțiile. Exemplu. La stratificarea întregii urine, a apărut imediat un inel compact. Urina se diluează de 10 ori într-un tub de centrifugă de măsurare (1 ml urină și 9 ml apă până la marcarea 10). Strat diluat de 10 ori urina pe acid azotic. Dacă apare imediat un inel larg, atunci determinarea nu este finalizată, ar trebui continuată. De la prima diluare de 10 ori, este necesar să se facă o altă diluție de 4 ori. Rata totală de diluare în acest caz va fi de 40 (10x4). Cu urina diluată de 40 de ori, se pune din nou testul inel Heller. Când apare un inel filiform între al 2-lea și al 3-lea minute, determinarea trebuie considerată completă.

Când lucrați, puteți utiliza corecția Erlich-Althausen, dacă inelul filiform apare înainte de al 2-lea minut. Pentru a nu mai dilua urina, autorii au propus să se determine momentul apariției inelului filiform și să se corecteze calculul pentru timp. În acest caz, cantitatea de proteină se calculează prin înmulțirea a 0,033 g/l cu gradul de diluție și prin corecție. Valorile amendamentelor sunt rezumate în tabel. 3.

Tabelul 3. Valori de corecție pentru determinarea proteinelor

Timp de formare" Corecție inel, min Timp de formare Corecție inel, min

Popular în categorie: