Determinarea calitativă a proteinei în urină. Proteine ​​în urină, analize de laborator

Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov se referă la metode semi-cantitative pentru determinarea proteinelor totale în urină. Metoda se bazează pe testul inel Heller, care constă în faptul că la limita acidului azotic și urinei, în prezența proteinei, se coagulează și apare un inel alb.

Reactivi

soluție de acid azotic 50% sau reactiv Larionova.
Prepararea reactivului Larionova: se prepară o soluție saturată de clorură de sodiu (20 - 30 g de sare se dizolvă în 100 ml apă la încălzire, se lasă să stea până se răcește). Supernatantul este drenat, filtrat. La 99 ml de filtrat se adaugă 1 ml de acid azotic concentrat. În loc de acid azotic se pot adăuga 2 ml de acid clorhidric concentrat.

Progresul definirii

Se toarnă 1 - 2 ml de acid azotic (sau reactiv larionic) în eprubetă, acidul este lăsat să se scurgă de pe pereții eprubetei (5 - 8 minute), în caz contrar, atunci când urina proteică este stratificată, se formează turbiditate datorită amestecării acidului azotic de pe pereții eprubetei cu urina, ceea ce previne formarea unui inel distinct. Prin urmare, o serie de eprubete cu acid trebuie pregătită în prealabil. Cu o pipetă, așezați cu grijă aceeași cantitate de urină transparentă filtrată de-a lungul peretelui eprubetei, încercând să nu agitați lichidul din eprubetă. Apariția unui inel alb subțire la interfața dintre cele două fluide între minutele 2 și 3 indică prezența proteinei la o concentrație de aproximativ 0,033 g/L. Timpul de stratificare este socotit ca un sfert de minut.

Dacă inelul apare mai devreme de 2 minute după stratificare, urina trebuie diluată cu apă și trebuie efectuată stratificarea repetată a urinei deja diluate. Gradul de diluare a urinei este selectat în funcție de tipul de inel, adică de lățimea, compactitatea și timpul de apariție. Cu un inel filiform care a apărut mai devreme de 2 minute, urina se diluează de 2 ori, cu una largă - de 4 ori, cu una compactă - de 8 ori etc. Diluarea urinei se face într-un tub centrifugă de măsurare, turnând urina în 1 ml marca si adaugand apa pana la semn, de cate ori se face reproducerea. Conținutul eprubetei este bine amestecat cu o pipetă Pasteur cu un balon. Dacă apare turbiditate în timpul diluării urinei, atunci amestecul trebuie filtrat din nou și numai filtratul transparent trebuie să fie stratificat pe acid azotic. Concentrația de proteine ​​este apoi calculată prin înmulțirea cu 0,033 cu raportul de diluție și exprimată în grame pe litru (g/l). O astfel de diluare a urinei este selectată astfel încât, atunci când este stratificată pe acid azotic, inelul să apară în al 2-lea - al 3-lea minut.

În cazul în care se formează un inel între 1 și 4 minute cu urina nediluată sau diluată, se poate folosi corecția Ehrlich-Althausen pentru a nu dilua urina în continuare (acest lucru economisește timp). Autorii au propus să se determine timpul de apariție a inelului filamentos și să se corecteze calculul pentru timp. În acest caz, cantitatea de proteină se calculează prin înmulțirea a 0,033 g/l cu gradul de diluție și prin corecție.

Când se formează un inel înainte de expirarea a 1 minut, este necesar să se facă o diluție fracționată, și anume de 1,5 ori (două părți de urină și 1 parte de apă). Această diluție este luată în considerare și la calcularea cantității de proteine ​​​​din urină.

Un exemplu de determinare a proteinei totale în urină prin metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Când stratificați urina pe reactiv, se formează imediat un inel larg. Urina este diluată de 4 ori (1 parte de urină + 3 părți de apă), stratificată; se obţine imediat un inel filiform. Este necesar să se dilueze diluția existentă de încă 2 ori; la stratificarea acestei diluții, se formează un inel după 1,5 minute. Nu mai poți reproduce.

Calculul proteinelor: urina a fost diluată de 4 și 2 ori, prin urmare, de 8 ori. Cantitatea de proteine ​​este de 0,033*8*1 1/4 = 0,33 g/l

Dezavantajele metodei Brandberg-Roberts-Stolnikov:

• subiectivitate,
• laboriozitate,
• scăderea preciziei determinării concentrației de proteine ​​pe măsură ce urina este diluată.

Vezi si:

Literatură:

• Manual „Metode de cercetare de laborator în clinică”, ed. prof. V. V. Menşikov. - Moscova, „Medicina”, 1987
• L. V. Kozlovskaya, A. Yu. Nikolaev. Manual despre metodele de cercetare clinică de laborator. Moscova, Medicină, 1985
• A. Ya. Althausen, „Diagnoza de laborator clinic” - Moscova, Medgiz, 1959
• A. Ya. Lyubina, L. P. Ilyicheva și coautorii, „Cercetarea de laborator clinic”, Moscova, „Medicina”, 1984

Proteinurie (proteinurie) - apariția proteinelor în urină în concentrații care să permită identificarea acesteia prin metode calitative.

Distinge

• proteinurie renală şi
• proteinurie extrarenală (postrenală).

proteinurie renală

Proteinuria renală este cauzată de deteriorarea filtrului glomerular sau de disfuncția epiteliului tubilor contorți.

Distingeți proteinuria selectivă și neselectivă in functie de raportul dintre anumite proteine ​​plasmatice si urinare, greutatea moleculara si sarcina acestora.

proteinurie selectivă

Proteinuria selectivă apare cu o încălcare minimă (adesea reversibilă) a filtrului glomerular, reprezentată de proteine ​​cu greutate moleculară mică (greutate moleculară care nu depășește 68.000) - albumină, ceruloplasmină, transferină.

proteinurie neselectivă

Proteinuria neselectivă este mai frecventă cu leziuni mai severe ale filtrului, când proteinele moleculare mari încep să se piardă. Selectivitatea proteinuriei este o caracteristică importantă de diagnostic și prognostic.

Proteinuria renală poate fi:

• organice şi
• funcţionale (fiziologice).

Proteinurie renală organică

Proteinuria renală organică apare cu afectarea organică a nefronului. În funcție de mecanismul predominant de apariție, se pot distinge anumite tipuri de proteinurie organică.

proteinurie glomerulară

Proteinuria glomerulară - din cauza deteriorării filtrului glomerular, apare cu glomerulonefrita și nefropatia asociată cu boli metabolice sau vasculare. (glomerulonefrită, hipertensiune arterială, factori infecțioși și alergici, decompensare cardiacă)

proteinurie tubulară

Proteinuria tubulară - asociată cu incapacitatea tubilor de a reabsorbi proteinele plasmatice cu greutate moleculară mică care au trecut printr-un filtru glomerular nemodificat. (amiloidoza, necroza tubulara acuta, nefrita interstitiala, sindromul Fanconi)

proteinurie prerenală

Proteinurie prerenală (excesivă) - se dezvoltă în prezența unei concentrații plasmatice neobișnuit de mare a unei proteine ​​cu greutate moleculară mică, care este filtrată de glomeruli normali într-o cantitate care depășește capacitatea fiziologică a tubilor de a reabsorbi. (mielom multiplu, necroză a țesutului muscular, hemoliza eritrocitară)

Proteinurie renală funcțională

Proteinuria funcțională renală nu este asociată cu boala renală și nu necesită tratament.

Proteinuria funcțională include:

• marș,
• emoţional
• rece,
• intoxicaţie,
• ortostatic (numai la copii și numai în poziție în picioare).

proteinurie extrarenală (postrenală).

Cu proteinurie extrarenală (postrenală), proteinele pot pătrunde în urină din tractul urinar și genital (cu colpită și vaginită - cu urină colectată incorect). În acest caz, acesta nu este altceva decât un amestec de exsudat inflamator.

Proteinuria extrarenală de obicei nu depășește 1 g/zi și este adesea tranzitorie.

Diagnosticul proteinuriei extrarenale este ajutat de un test cu trei cani și de examen urologic.

Proteinuria postrenală apare cu cistita, uretrita.

Metode pentru determinarea proteinelor în urină

O condiție prealabilă pentru efectuarea studiilor privind prezența proteinelor este transparența absolută a urinei.

Mostre de calitate

Probă cu acid sulfosalicilic

3–4 ml de urină filtrată se toarnă în două eprubete. Adăugați 6-8 picături dintr-o soluție 20% de acid sulfosalicilic într-o eprubetă experimentală. Al doilea tub este controlul. Pe un fundal întunecat, comparați tubul de control cu ​​cel experimental. În prezența proteinelor în probele de urină, apare o turbiditate opalescentă.

Rezultatul este indicat după cum urmează:

• reacția este slab pozitivă (+),
• pozitiv (++),
• puternic pozitiv (+++).

Proba este foarte sensibilă.

Puteți folosi și un test uscat, atunci când la câțiva mililitri de urină se adaugă câteva cristale de acid sulfosalicilic sau o hârtie de filtru preînmuiată cu o soluție din acest acid.

Rezultate fals pozitive se poate datora aportului de preparate cu iod, medicamente sulfa, doze mari de penicilină și prezența unor concentrații mari de acid uric în urină.

Testul acidului azotic (testul Geller)

Într-o eprubetă se toarnă 1-2 ml dintr-o soluție de acid azotic 50%, apoi se adaugă o cantitate egală de urină pe acid. În prezența proteinelor, la interfața dintre două lichide apare un inel alb. Uneori, un inel roșcat-violet se formează ușor deasupra limitei dintre lichide din prezența uraților. Inelul urat, spre deosebire de inelul proteic, se dizolvă cu o ușoară încălzire.

Eșantion Bright

Testul de fierbere luminos și testele de screening pentru proteinurie (probe colorimetrice uscate) nu necesită practic reactiv.

Când urina care conține proteine ​​este fiartă, se denaturează, formând un precipitat tulbure sau fulgi care nu se dizolvă în acid acetic 6%, spre deosebire de sărurile de fosfat. Testele de screening se bazează pe capacitatea unei proteine ​​(albumină) de a schimba culoarea hârtiei acoperite cu un indicator (de obicei albastru de bromofenol) și un tampon. O relație directă între intensitatea culorii hârtiei indicator (Albufan, Albutest - Republica Cehă; Labstix, Multistix - SUA; Comburtest - Germania) și cantitatea de proteine ​​face posibilă estimarea aproximativă a cantității de proteinurie. Cu toate acestea, testele de screening utilizate în prezent nu sunt lipsite de dezavantaje. În special, albastrul de bromofenol nu detectează proteina Bence-Jones.

Metode cantitative

Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov

Metoda se bazează pe o probă calitativă cu acid azotic. Cursul testului este descris mai sus. Apariția unui inel subțire la marginea a două lichide între al 2-lea și al 3-lea minute după stratificare indică prezența a 0,033 g/l de proteine ​​în urină (concentrația de proteine ​​​​în urină este de obicei exprimată în ppm, adică în grame per litru). ). Dacă inelul apare mai devreme decât după 2 minute, urina trebuie diluată cu apă. O astfel de diluare a urinei este selectată astfel încât, atunci când este stratificată pe acid azotic, inelul să apară în al 2-3-lea minut. Gradul de diluție depinde de lățimea și compactitatea inelului și de momentul apariției acestuia.

Concentrația proteinei se calculează prin înmulțirea a 0,033 g/l cu gradul de diluare a urinei (Tabelul 8).

Metoda de diluare Roberts-Stolnikov are o serie de dezavantaje: este subiectivă, consumatoare de timp, precizia determinării concentrației de proteine ​​scade pe măsură ce urina este diluată.

Cele mai convenabile și precise sunt metodele nefelometrice și biuret.

Metoda nefelometrică

Se bazează pe proprietatea proteinei de a da turbiditate cu acid sulfosalicilic, a cărui intensitate este proporțională cu concentrația proteinei. Se toarnă 1,25 ml de urină filtrată într-o eprubetă gradată și se adaugă o soluție de acid sulfosalicilic 3% la un volum de 5 ml, bine amestecată. După 5 minute, stingerea este măsurată pe FEK-M (sau orice alt fotometru) la o lungime de undă de 590–650 nm (filtru portocaliu sau roșu) față de control într-o cuvă cu o grosime a stratului de 0,5 cm. Se folosesc 1,25 ml de urină filtrată (la fel), la care se adaugă o soluție izotonică de clorură de sodiu la un volum de 5 ml.

O curbă de calibrare este construită preliminar în funcție de valoarea de extincție a concentrației de proteine. Soluția standard de albumină (din ser uman sau bovin) este utilizată pentru a prepara diferite concentrații de proteine. Completați fișa de lucru.

Metoda biuretului

Se bazează pe capacitatea proteinei de a da cu sulfat de cupru și alcalii caustice un complex de biuret violet, a cărui intensitate a culorii este direct proporțională cu cantitatea de proteine. La 2 ml de urină, se adaugă 2 ml soluție de acid tricloracetic pentru a precipita proteina și se centrifughează. Supernatantul este aruncat. La sediment (proteină) se adaugă 4 ml de soluție de NaOH 3% și 0,1 ml de soluție de sulfat de cupru 20%, se agită și se centrifughează. Supernatantul violet este fotometrat la o lungime de undă de 540 nm (filtru de lumină verde) față de apă distilată într-o cuvă cu grosimea stratului de 1,0 cm.Concentrația de proteine ​​se determină dintr-un tabel obținut empiric (curba de calibrare este construită ca în precedenta). metodă).

Testul ortostatic

Indicat pentru suspiciunea de proteinurie ortostatică și nefroptoză. După golirea completă a vezicii urinare, subiectul menține poziția orizontală timp de 2 ore, apoi, fără să se ridice, trece o porție (de control) de urină. În următoarele 2 ore, subiectul merge continuu, menținând poziția de maximă lordoză lombară (ține un băț în spatele spatelui), după care trece a doua porție de urină. În ambele porțiuni de urină se determină concentrația de proteine ​​și conținutul de proteine ​​​​în grame, iar în caz de nefroptoză, numărul de globule roșii în 1 ml. Cu proteinuria ortostatică, proteinuria sau o creștere de 2-3 ori a conținutului inițial de proteine ​​​​în grame este detectată în a doua porție. Apariția hematuriei, adesea în combinație cu urme de proteinurie în a doua porțiune, este caracteristică nefroptozei.

Determinarea uroproteinelor Bence-Jones

Proteinele Bence-Jones sunt paraproteine ​​termolabile cu greutate moleculară mică (greutate moleculară relativă 20.000–45.000) găsite în principal în mielomul multiplu și macroglobulinemia Waldenström. Sunt lanțuri L ușoare ale imunoglobulinelor. Datorită greutății lor moleculare mici, lanțurile L trec ușor din sânge printr-un filtru renal intact în urină și pot fi determinate acolo folosind reacția de termoprecipitare. Studiul este recomandabil să se efectueze numai cu un test pozitiv cu acid sulfosalicilic. Definiția se realizează după cum urmează. La 10 ml de urină, adăugați 3-4 picături dintr-o soluție 10% de acid acetic și 2 ml de soluție saturată de clorură de sodiu, încălziți ușor într-o baie de apă, crescând treptat temperatura. Dacă în urină există proteine ​​Bence-Jones, atunci la o temperatură de 45-60 ° C apare o turbiditate difuză sau se formează un precipitat alb dens. La încălzirea ulterioară până la fierbere, precipitatul se dizolvă, iar la răcire reapare. Această probă nu este suficient de sensibilă și trebuie verificată prin electroforeză și imunoelectroforeză.

Ţintă- Determinarea proteinelor în urină.

Indicatii- afectiuni hipertensive in timpul sarcinii, afectiuni renale la gravide

Contraindicatii- Nu.

Posibile complicații- Nu

Resurse- vas, borcan steril, eprubete, acid sulfosalicilic 30% sau acetic 3%, pipeta, arzator de alcool.

Algoritm de acțiune:

1. Explicați gravidei despre necesitatea determinării proteinei din urină.

2. Cereți femeii însărcinate să colecteze urina într-un borcan steril.

3. Testați cu acid sulfosalicilic: turnați 4-5 ml de urină într-o eprubetă, adăugați 6-10 picături de acid. Dacă există proteine ​​în urină, se formează un precipitat sau turbiditate.

4. Proba cu acid acetic 3%: se toarnă 8-10 ml de urină într-o eprubetă, se fierbe pe un arzător cu alcool, dacă urina conține proteine, va deveni tulbure. Adăugați câteva picături de soluție de acid acetic 3% în urina tulbure. Dacă turbiditatea dispare în urină, testul este negativ.

NOTE Se stabilește în secția de admitere a instituției de obstetrică.

Standard „Determinarea datei datei preconizate a nașterii”.

Ţintă: să evalueze capacitatea practică a unui absolvent de a determina data scadenței așteptate

Indicatii- fiecare vizită la o maternitate pentru o femeie însărcinată.

Contraindicatii- Nu

Posibile complicații- Nu

Resurse- o masă, două scaune, un calendar, un calendar obstetric, informații scrise despre data primei zile a ultimei menstruații, prima apariție la clinica antenatală, data ecografiei cu încheiere, data concediului prenatal

Algoritm de acțiune:

1. Prezintă-te, explică-i femeii sensul calculării scadenței estimate.
2. Aflați prima zi a ultimei menstruații de la gravidă, adăugați 280 de zile la această dată sau, folosind formula Negele, adăugați 7 zile la 1 zi din ultima menstruație și scădeți 3 luni, data rezultată este data scadenței pentru menstruație.
3. Aflați data primei mișcări fetale, adăugați până la această zi 140 de zile pentru primipare și 154 de zile pentru multipare, data rezultată este data scadentă pentru mișcarea fetală.
4. În funcție de ciclul menstrual, determinați în ce zi a avut loc ultima ovulație și din prima zi a ultimei menstruații, numărați înapoi trei luni și adăugați numărul de zile înainte de ovulație, obțineți data nașterii.
5. Calculați termenul de naștere la prima apariție la clinica prenatală. Eroarea va fi minimă dacă gravida a mers la medic în primele 12 săptămâni de sarcină.
6. Stabiliți data scadenței după data concediului prenatal. Perioada concediului prenatal începe la 30 de săptămâni de sarcină. Adaugă 10 săptămâni la această dată, primește data nașterii.
7. Calculați termenul de naștere prin ecografie efectuată în clinica prenatală.

Standard „Examinarea organelor genitale externe”

Ţintă: evaluează abilitățile practice ale absolventului atunci când examinează organele genitale externe ale unei femei însărcinate

Indicatii- apelul iniţial la instituţia de obstetrică a gravidei, internare în spital cu activitate regulată de muncă.

Contraindicatii- Nu

Posibile complicații- Nu

Resurse– fantomă femeie, canapea, lenjerie intimă de unică folosință pentru canapea

Algoritm de acțiune:

1. Prezentați-vă, explicați-i femeii importanța examinării organelor genitale externe, etapele implementării acesteia, obțineți-i acordul

2. Efectuați dezinfecția igienică a mâinilor

3. Puneți mănuși sterile la ambele mâini.

4. Examinați organele genitale externe: evaluați tipul de creștere a părului, structura labiilor mari și mici, clitorisul, starea perineului.

5. Cu degetul mare și arătătorul ambelor mâini, întindeți labiile mari, examinați starea deschiderii externe a uretrei, vestibulul vaginului, palpați regiunea glandelor Bartholin (treimea inferioară a labiilor mari).

6. Scoateți mănușile de unică folosință și puneți-le într-o cutie de depozitare sigură.

7. Spălați-vă mâinile cu săpun.

8. Furnizați femeii însărcinate informații despre starea organelor genitale externe.

9. Notați în documentație.

NOTĂ Examinarea se desfășoară în mod confidențial, fără a umili demnitatea unei femei.

Standard „Oferirea de îngrijiri de urgență pentru eclampsie”

Ţintă: evaluează abilitățile practice ale absolventului care oferă îngrijiri de urgență pentru eclampsie

Indicatii- Convulsii în eclampsie

Contraindicatii- Nu

Posibile complicații- convulsii repetate, coma eclamptica.

Resurse– model de femeie, soluție de sulfat de magneziu 25%, spatulă, suport pentru limbă, seringă 20 ml, soluție salină 500 ml, sistem de perfuzie intravenoasă, alcool, vată, garou

Algoritm de acțiune:

1. În caz de convulsii, sunați tot personalul liber și echipa de resuscitare fără a părăsi pacientul.

2. Faceți următoarele în același timp:

· eliberați căile respiratorii prin deschiderea gurii cu o spatulă sau o lingură învelită în tifon, trageți limba cu suportul pentru limbă.

Îndepărtați saliva din cavitatea bucală, de îndată ce apare o inhalare, asigurați accesul liber al aerului.

După oprirea crizelor intravenoase, introduceți doza inițială de sulfat de magneziu - 25% -20 ml timp de 10-15 minute.

3. Începeți o perfuzie intravenoasă de 320 ml ser fiziologic cu 80 ml - soluție de sulfat de magneziu 25%

4. Sub controlul tensiunii arteriale și al terapiei cu magneziu în curs de desfășurare, transferați pacienta pe o targă și transportați la secția de terapie intensivă a celei mai apropiate maternități.

NOTĂ

În cazul eclampsiei, nașterea trebuie să aibă loc după stabilizarea stării pacientului, dar nu mai târziu de 12 ore de la debutul convulsiilor.

Standard „Îngrijire de urgență pentru preeclampsie severă”.

Ţintă: evaluează abilitățile practice ale unui absolvent în furnizarea de îngrijiri de urgență pentru preeclampsia severă

Indicatii- preeclampsie severa

Contraindicatii- în timpul unei convulsii

Posibile complicații- Convulsii, coma eclamptica.

Resurse– model de femeie, soluție de sulfat de magneziu 25%, seringă 20 ml, soluție salină 500 ml, sistem de perfuzie intravenoasă, alcool, vată, garou

Algoritm de acțiune:

1. Faceți un diagnostic: „Preeclampsie severă” dacă este prezent unul dintre aceste simptome: cefalee, durere în regiunea epigastrică, tulburări de vedere, muște în fața ochilor, greață, vărsături, pe fondul hipertensiunii arteriale (140/90 mm Hg). şi mai sus) şi proteinurie.

2. Apelați tot personalul liber și echipa de resuscitare fără a părăsi pacientul.

3. Faceți următoarele în același timp:

Așezați gravida pe o suprafață plană, evitând deteriorarea și întoarceți capul pacientului într-o parte.

Introduceți intravenos doza inițială de sulfat de magneziu - 25% -20 ml timp de 10-15 minute.

4. Începeți o perfuzie intravenoasă de 320 ml de ser fiziologic normal cu 80 ml de soluție de sulfat de magneziu 25%.

5. Când tensiunea arterială este egală sau mai mare de 160/100 mm Hg. reglați tensiunea arterială prin prescrierea de 10 mg de nifedipină sublingual, iar după 30 de minute 10 mg sub controlul tensiunii arteriale (mențineți tensiunea arterială la 130/90-140/95 mm Hg).

6. Sub controlul tensiunii arteriale și al terapiei cu magneziu în curs de desfășurare, transferați pacienta pe o targă și transportați la secția de terapie intensivă a celei mai apropiate maternități.

NOTĂ Dacă apar semne de supradozaj de sulfat de magneziu, injectați 10 ml de soluție de gluconat de Ca 10% intravenos timp de 10 minute.

Amniotomie standard.

Ţintă- deschiderea vezicii fetale.

Indicatii- înainte de inducerea travaliului, stimularea travaliului, slăbiciune a travaliului Contraindicatii- condiții amenințătoare ale mamei sau fătului

Posibile complicații- prolaps de părți mici ale fătului, infecție ascendentă, leziune a vaselor vezicii fetale, desprinderea unei placente situate în mod normal

Resurse- un scaun ginecologic, un scutec individual, mănuși sterile, un antiseptic pentru tratarea organelor genitale externe ale unei femei, o ramură de forceps cu glonț.

Algoritm de acțiune:

1. Prezintă-te.

2. Explicați femeii necesitatea acestei operații.

3. Luați consimțământul informat al pacientului pentru procedură

4. Așezați femeia pe scaunul ginecologic cu un pat de unică folosință sub ea.

5. Tratați organele genitale externe ale femeii cu o soluție antiseptică, puneți un scutec steril pe stomacul femeii.

6. Efectuați dezinfecția igienică a mâinilor.

7. Purtați mănuși de unică folosință la ambele mâini.

8. Întindeți labiile cu degetele mâinii stângi, introduceți secvențial în vagin

degetul arătător, apoi degetul mijlociu al mâinii drepte.

9. Introduceți ramura pensei glonț în vagin între index și mijloc

degete.

10. Perforați sacul amniotic.

11. Introduceți degetul arătător și apoi degetul mijlociu în orificiul vezicii fetale, extindeți treptat orificiul, îndepărtați membranele din cap. Eliberați lichidul amniotic lent, sub controlul degetelor (prevenirea prolapsului de părți mici, desprinderea unei placente situate normal).

13. Mută-ți degetele afară.

14. Scoateți mănușile și puneți-le într-o cutie de depozitare sigură.

15. Spălați-vă mâinile cu săpun.

16. Notează datele din istoria nașterii.

NOTĂ.

Cu polihidramnios, se face o mică gaură și apa este eliberată încet. Este necesar să se controleze rata de ieșire a apei, deoarece cu o ieșire rapidă și ascuțită a acestora, părți mici ale fătului pot cădea. După ce apa se sparge, femeii i se recomandă să se întindă timp de 30 de minute.

Instruire

Metode calitative de determinare a proteinei în urină: metoda Heller, testul acidului sulfosalicilic 20%, testul de fierbere etc. Metode semi-cantitative: folosirea testelor de diagnosticare pentru determinarea proteinelor în urină, metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov. Metode cantitative: turbidimetrice și colorimetrice.

Determinarea proteinelor zilnic urină la o concentrație de 0,033 g/litru sau mai mult este o patologie. De regulă, în porțiunea de dimineață de urină, concentrația de proteine ​​nu depășește 0,002 g / l, iar în fiecare zi urină concentrația de proteine ​​nu este mai mare de 50-150 mg de proteine.

Surse:

• determinarea proteinelor în urină

Urina este un produs al metabolismului uman. Se formează în timpul filtrării sângelui în rinichi, motiv pentru care compoziția urinei oferă o descriere clară a stării corpului uman.

Urina este o soluție complexă de peste 150 de compuși. Unele substanțe specifice, de exemplu, acetona, acizii biliari, proteinele, glucoza, pot fi prezente numai în anumite boli.

Pentru a controla sănătatea umană, în primul rând, este necesar să se determine cantitatea de urină. Norma este formarea a 1-1,8 litri de urină pe zi. Când se excretă mai mult de 2 litri de urină, acesta este un semn al unei posibile perturbări în funcționarea rinichilor, diabet zaharat și o serie de alte boli. Dacă se formează mai puțin de 0,5 litri de urină pe zi, există un blocaj al ureterului sau vezicii urinare.

culoarea urinei

Culoarea urinei excretate depinde de mulți factori, așa că poate varia, variind de la galben deschis la portocaliu. Prezența anumitor nuanțe poate fi afectată de anumite alimente, precum și de medicamentele luate de o persoană.

După administrarea medicamentelor, urina se poate păta și capătă o nuanță roșiatică. Dacă o persoană se mișcă activ, în timp ce eliberează o cantitate mare de transpirație, urina va avea o culoare galben intens, ca atunci când ia medicamente precum Nitroxolina sau Biomicină.

Dacă o persoană nu a luat alimente și medicamente colorante, dar culoarea urinei sale este diferită de cea obișnuită, se poate suspecta prezența unei boli în organism. De exemplu, în bolile ficatului, urina va avea o culoare galben închis sau verzui.

Prezența sângelui în urina excretată indică în mod clar prezența unui calcul sau sângerare renală, dacă se observă și durere.

Dacă urinarea este dificilă, aceasta poate indica un proces inflamator cauzat de o infecție a vezicii urinare. Dar urina murdară și tulbure indică o boală renală severă.

Proteine ​​în urină

Nu există proteine ​​în sângele unei persoane sau cantitatea acesteia este atât de mică încât nu poate fi determinată prin teste de laborator. Dacă o proteină este detectată în urină, este necesar să se efectueze teste repetate, deoarece aceasta poate fi prezentă atunci când o persoană se trezește dimineața, precum și după o muncă fizică grea sau exerciții fizice la sportivi.

Pentru a determina vizual dacă proteina este prezentă în urină sau nu este 100% imposibil. Se poate doar ghici când există o cantitate mare de fulgi albici în urină.

Dacă proteina din urină este detectată în mod repetat, aceasta indică prezența unui fel de boală de rinichi. Procesele inflamatorii care apar în ele provoacă o ușoară creștere a cantității de proteine. Dacă mai mult de 2 grame sunt excretate în urină, acesta este un semnal de alarmă.

Pielonefrita este o boală inflamatorie care afectează pelvisul renal, calicele și parenchimul. În cele mai multe cazuri, inflamația este cauzată de o infecție bacteriană. Recuperarea completă este posibilă numai cu diagnosticarea în timp util, prin urmare, atunci când apar simptome, este necesară o examinare amănunțită.

Cantități mici de proteine ​​se găsesc în urina zilnică a persoanelor sănătoase. Cu toate acestea, astfel de concentrații mici nu pot fi detectate folosind metode de cercetare convenționale. Excreția de cantități mai mari de proteine, la care testele calitative uzuale pentru proteine ​​​​în urină devin pozitive, se numește proteinurie. Există proteinurie renală (adevărată) și extrarenală (falsă). În proteinuria renală, proteinele intră în urină direct din sânge datorită creșterii filtrării sale de către glomerulii rinichiului sau scăderii reabsorbției tubulare.

Proteinurie renală (adevărată).

Proteinuria renală (adevărată) este funcțională și organică. Dintre proteinuria renală funcțională, se observă cel mai adesea următoarele tipuri:

Proteinuria fiziologică a nou-născuților, care dispare în a 4-a - a 10-a zi după naștere, iar la prematuri puțin mai târziu;
- albuminuria ortostatică, care este tipică copiilor cu vârsta cuprinsă între 7-18 ani și apare doar în poziție verticală a corpului;
- albuminurie tranzitorie (accident vascular cerebral), care poate fi cauzata de diverse afectiuni ale aparatului digestiv, anemie severa, arsuri, leziuni sau factori fiziologici: efort fizic intens, hipotermie, emotii puternice, alimente abundente, bogate in proteine ​​etc.

Proteinuria organică (renală) se observă datorită trecerii proteinelor din sânge prin zonele deteriorate ale endoteliului glomerulilor renali în boli renale (glomerulonefrită, nefroză, nefroscleroză, amiloidoză, nefropatie în sarcină), tulburări ale hemodinamicii renale (renală venoasă). hipertensiune arterială, hipoxie), efecte trofice și toxice (inclusiv medicinale) asupra pereților capilarelor glomerulare.

proteinurie extrarenală (falsă).

Proteinurie extrarenală (falsă), în care sursa de proteine ​​din urină este un amestec de leucocite, eritrocite, bacterii, celule uroteliale. observată în boli urologice (urolitiază, tuberculoză renală, tumori ale rinichilor și ale tractului urinar etc.).

Determinarea proteinelor în urină

Cele mai multe metode calitative și cantitative de determinare a proteinei în urină se bazează pe coagularea acesteia în volumul de urină sau la interfața mediilor (urină și acid).

Dintre metodele calitative de determinare a bedka în urină, testul unificat cu acid sulfosalicilic și testul inel Heller sunt cele mai utilizate.

O probă standardizată cu acid sulfasalicilic se efectuează după cum urmează. 3 ml de urină filtrată se toarnă în 2 tuburi. Într-una dintre ele se adaugă 6-8 picături dintr-o soluție 20% de acid sulfasalicilic. Ambele tuburi sunt comparate pe un fundal întunecat. Turbiditatea urinei într-o eprubetă cu acid sulfasalicilic indică prezența proteinei. Înainte de studiu, este necesar să se determine reacția urinei, iar dacă este alcalină, apoi se acidulează cu 2-3 picături dintr-o soluție 10% de acid acetic.

Testul Geller se bazează pe faptul că, în prezența proteinelor în urină la limita acidului azotic și urinei, aceasta se coagulează și apare un inel alb. 1-2 ml dintr-o soluție de acid azotic 30% se toarnă într-o eprubetă și exact aceeași cantitate de urină filtrată este stratificată cu grijă de-a lungul peretelui eprubetei. Apariția unui inel alb la interfața dintre două fluide indică prezența proteinelor în urină. Trebuie amintit că uneori se formează un inel alb în prezența unei cantități mari de urati, dar, spre deosebire de inelul proteic, acesta apare puțin deasupra limitei dintre două lichide și se dizolvă atunci când este încălzit [Pletneva N.G., 1987].

Cele mai frecvent utilizate metode cantitative sunt:

1) metoda unificată Brandberg-Roberts-Stolnikov, care se bazează pe testul inel Heller;
2) metoda fotoelectrocolorimetrică pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină prin turbiditatea formată prin adăugarea de acid sulfasalicilic;
3) metoda biuretului.

Detectarea proteinelor în urină printr-o metodă accelerată simplificată se realizează printr-o metodă colorimetrică folosind hârtie indicator, care este produsă de Lachema (Slovacia), Albuphan, Ames (Anglia), Albustix, Boehringer (Germania), Comburtest și alții. Metoda constă prin imersarea în urină a unei benzi speciale de hârtie impregnată cu albastru tetrabromofenol și tampon citrat, care își schimbă culoarea din galben în albastru în funcție de conținutul de proteine ​​din urină. În mod provizoriu, concentrația de proteine ​​din urina de testat este determinată folosind o scară standard. Pentru a obține rezultate corecte, trebuie îndeplinite următoarele condiții. pH-ul urinei trebuie să fie în intervalul 3,0-3,5; urina prea alcalină (pH 6,5) va da un rezultat fals pozitiv, iar urina prea acidă (pH 3,0) un fals negativ.

Hârtia nu trebuie să fie în contact cu urina de testat mai mult decât este indicat în instrucțiuni, altfel testul va da o reacție fals pozitivă. Acesta din urmă se observă și atunci când există o cantitate mare de mucus în urină. Sensibilitatea diferitelor tipuri și serii de hârtie poate fi diferită, astfel încât evaluarea cantitativă a proteinei din urină prin această metodă trebuie tratată cu prudență. Determinarea cantității sale în urina zilnică folosind hârtie indicatoare este imposibilă [Pletneva N.G., 1987]

Definiția daily proteinuria

Există mai multe moduri de a determina cantitatea de proteine ​​excretată în urină pe zi. Cea mai simplă este metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Metodologie. Se toarnă 5-10 ml de urină zilnic bine amestecată într-o eprubetă și se adaugă cu grijă o soluție de acid azotic 30% de-a lungul pereților acesteia. În prezența proteinelor în urină în cantitate de 0,033% (adică 33 mg per 1 litru de urină), după 2-3 minute apare un inel alb subțire, dar clar vizibil. La o concentrație mai mică, testul este negativ. Cu un conținut mai mare de proteine ​​în urină, cantitatea acesteia este determinată de diluții repetate de urină cu apă distilată până când inelul încetează să se mai formeze. În ultima eprubetă în care inelul este încă vizibil, concentrația de proteine ​​va fi de 0,033%. Înmulțind 0,033 cu gradul de diluare a urinei, determinați conținutul de proteine ​​​​în 1 litru de urină nediluată în grame. Apoi, conținutul de proteine ​​din urina zilnică este calculat prin formula:

K \u003d (x V) / 1000

Unde K este cantitatea de proteine ​​din urina zilnică (g); x este cantitatea de proteine ​​din 1 litru de urină (g); V este cantitatea de urină excretată pe zi (ml).

În mod normal, de la 27 la 150 mg (în medie 40-80 mg) de proteine ​​sunt excretate prin urină în timpul zilei.

Acest test vă permite să determinați în urină doar proteine ​​fine (albumină). Metodele cantitative mai precise (metoda Kjeldahl colorimetrică etc.) sunt destul de complexe și necesită echipamente speciale.

Cu proteinuria renală, nu numai albuminele, ci și alte tipuri de proteine ​​sunt excretate în urină. O proteinogramă normală (conform Seitz et al., 1953) are următorul procent: albumine - 20%, α 1 -globuline - 12%, α 2 -globuline - 17%, γ-globuline - 43% și β-globuline - 8%. Raportul dintre albumine și globuline se modifică cu diferite boli renale, adică raportul cantitativ dintre fracțiile proteice este rupt.

Cele mai comune metode de fracţionare a uroproteinelor sunt următoarele: sărarea cu săruri neutre, fracţionarea electroforetică, metode imunologice (reacţie de imunodifuzie radială conform lui Mancini, analiză imunoelectroforetică, imunoelectroforeză de precipitare), cromatografia, filtrare pe gel şi ultracentrifugare.

În legătură cu introducerea metodelor de fracționare a uroproteinelor bazate pe studiul mobilității electroforetice, variabilitatea greutății moleculare, dimensiunea și forma moleculelor de uroproteine, a devenit posibilă izolarea tipurilor de proteinurie caracteristice unei anumite boli, pentru a studia clearance-urile plasmei individuale. proteine. Până în prezent, în urină au fost identificate peste 40 de proteine ​​plasmatice, inclusiv 31 de proteine ​​plasmatice în urina normală.

proteinurie selectivă

În ultimii ani, a apărut conceptul de selectivitate a proteinuriei. În 1955, Hardwicke și Squire au formulat conceptul de proteinurie „selectivă” și „neselectivă”, după ce au determinat că filtrarea proteinelor plasmatice în urină urmează un anumit model: cu cât greutatea moleculară a proteinei excretate în urină este mai mare, cu cât clearance-ul său este mai mic și concentrația sa în urină mai mică.urină finală. Proteinuria, corespunzătoare acestui tipar, este selectivă, spre deosebire de neselectivă, pentru care este caracteristică perversia modelului derivat.

Detectarea proteinelor cu o greutate moleculară relativ mare în urină indică absența selectivității filtrului renal și deteriorarea lui pronunțată. În aceste cazuri, se vorbește de o selectivitate scăzută a proteinuriei. Prin urmare, în prezent, determinarea fracțiilor proteice din urină folosind metodele de electroforeză în geluri de amidon și poliacrilamidă a devenit larg răspândită. Pe baza rezultatelor acestor metode de cercetare, se poate judeca selectivitatea proteinuriei.

Potrivit lui V.S. Makhlina (1975), cea mai justificată este determinarea selectivității proteinuriei prin compararea clearance-urilor a 6-7 proteine ​​individuale din plasmă sanguină (albumină, traneferină, α 2 - macroglobulină, IgA, IgG, IgM) folosind precise și metode imunologice cantitative specifice de reacție a imunodifuziei radiale după Mancini, analiză imunoelectroforetică și imunoelectroforeză de precipitare. Gradul de selectivitate a proteinuriei este determinat de indicele de selectivitate, care este raportul dintre proteinele comparate și cele de referință (albumină).

Studiul clearance-urilor proteinelor plasmatice individuale permite obținerea de informații fiabile despre starea membranelor bazale de filtrare ale glomerulilor renali. Relația dintre natura proteinelor excretate în urină și modificările membranelor bazale ale glomerulilor este atât de pronunțată și constantă, încât uroproteinograma poate judeca indirect modificările patofiziologice ale glomerulilor rinichilor. În mod normal, dimensiunea medie a porilor membranei bazale glomerulare este de 2,9-4 A ° NM, care pot trece proteine ​​cu o greutate moleculară de până la 10 4 (mioglobulină, acid α 1 - glicoproteină, lanțuri ușoare de imunoglobuline, Fc și Fab - IgG fragmente, albumină și transferină).

Cu glomerulonefrita, sindromul nefrotic, dimensiunile porilor din membranele bazale ale glomerulilor cresc și, prin urmare, membrana bazală devine permeabilă la moleculele proteice de dimensiune și masă mari (ceruloplasmină, haptoglobină, IgG, IgA etc.). Cu un grad extrem de afectare a glomerulilor rinichilor, în urină apar molecule gigantice de proteine ​​din plasma sanguină (α 2 -macroglobulină, IgM și β 2 -lipoproteine).

Determinând spectrul proteic al urinei, se poate concluziona că anumite părți ale nefronului sunt predominant afectate. Pentru glomerulonefrita cu o leziune predominantă a membranelor bazale glomerulare este caracteristică prezența proteinelor cu greutate moleculară mare și medie în urină. Pentru pielonefrita cu o leziune predominantă a membranelor bazale ale tubilor, sunt caracteristice absența proteinelor moleculare mari și prezența unor cantități crescute de proteine ​​cu greutate moleculară medie și mică.

β2-Microglobulina

Pe lângă proteinele binecunoscute precum albumina, imunoglobulinele, lipoproteinele. fibrinogenul, transferrina, urina contine microproteine ​​plasmatice, printre care de interes clinic prezinta β 2 -microglobulina, descoperita de Berggard si Bearn in 1968. Avand o greutate moleculara mica (greutate moleculara relativa de 1800), trece liber prin glomeruli renali. si reabsorbite in tubii proximali. Acest lucru face posibilă utilizarea determinării cantitative a β2-microglobulinei în sânge și urină pentru a determina filtrarea glomerulară și capacitatea rinichilor de a resorbi proteinele în tubii proximali.

Concentrația acestei proteine ​​în plasma sanguină și urină este determinată prin radioimunotest folosind un kit standard "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Suedia). Serul de sânge al persoanelor sănătoase conține în medie 1,7 mg/l (interval de la 0,6 la 3 mg/l), în urină - o medie de 81 μg/l (maximum 250 μg/l) β2-microglobulină. Excesul său în urină peste 1000 mcg/l este un fenomen patologic. Conținutul de β2-microglobuline din sânge crește în bolile însoțite de filtrarea glomerulară afectată, în special în glomerulonefrita acută și cronică, boala polichistică a rinichilor, nefroscleroza, nefropatia diabetică, insuficiența renală acută.

Concentrația de β2-microglobuline în urină crește cu boli însoțite de o încălcare a funcției de reabsorbție a tubilor, ceea ce duce la o creștere a excreției sale în urină de 10-50 de ori, în special cu pielonefrită, CRF, intoxicație purulentă etc. Este caracteristic că, cu cistita în spre deosebire de pielonefrită, nu există o creștere a concentrației de β 2 -microglobuline în urină, care poate fi utilizată pentru diagnosticul diferențial al acestor boli. Cu toate acestea, atunci când se interpretează rezultatele studiului, trebuie să se țină seama de faptul că orice creștere a temperaturii este întotdeauna însoțită de o creștere a excreției de β2-microglobuline în urină.

Molecule medii de sânge și urină

Moleculele medii (SM), denumite altfel toxine proteice, sunt substanțe cu o greutate moleculară de 500-5000 daltoni. Structura lor fizică este necunoscută. Compoziția SM include cel puțin 30 de peptide: oxitocină, vasopresină, angiotensină, glucagon, hormon adrenocorticotrop (ACTH) etc. Se observă acumularea excesivă de SM cu o scădere a funcției renale și o cantitate mare de proteine ​​deformate și metaboliții acestora în sânge. Au o varietate de efecte biologice și sunt neurotoxice, provoacă imunosupresie secundară, anemie secundară, inhibă biosinteza proteinelor și eritropoieza, inhibă activitatea multor enzime și perturbă fazele procesului inflamator.

Nivelul SM în sânge și urină este determinat printr-un test de screening, precum și prin spectrofotometrie în zona ultravioletă la o lungime de undă de 254 și 280 mm pe un spectrofotometru DI-8B, precum și prin spectrofotometrie dinamică cu procesare computerizată în lungime de undă. interval de 220-335 nm pe același spectrometru Beckman. Conținutul de SM din sânge este luat ca normă, egal cu 0,24 ± 0,02 arb. unități, iar în urină - 0,312 ± 0,09 arb. unitati
Fiind deșeuri normale ale organismului, acestea sunt în mod normal îndepărtate din acesta noaptea prin filtrare glomerulară cu 0,5%; 5% dintre ele sunt eliminate în alt mod. Toate fracțiile SM suferă reabsorbție tubulară.

Uroproteine ​​non-plasmatice (tisulare).

În plus față de proteinele plasmatice din sânge, pot exista proteine ​​non-plasmatice (țesuturi) în urină. Potrivit lui Buxbaum și Franklin (1970), proteinele non-plasmatice reprezintă aproximativ 2/3 din toți biocoloizii urinari și o proporție semnificativă de uroproteine ​​în proteinuria patologică. Proteinele tisulare intră în urină direct din rinichi sau din organele asociate anatomic cu tractul urinar, sau pătrund în sânge din alte organe și țesuturi, iar din acesta prin membranele bazale ale glomerulilor rinichiului în urină. În acest din urmă caz, excreția proteinelor tisulare în urină are loc în mod similar cu excreția proteinelor plasmatice de diferite greutăți moleculare. Compoziția uroproteinelor non-plasmatice este extrem de diversă. Printre acestea se numără glicoproteinele, hormonii, antigenii, enzimele (enzimele).

Proteinele tisulare din urină sunt detectate folosind metode convenționale de chimie a proteinelor (ultracentrifugarea, cromatografie pe gel, diferite tipuri de electroforeză), reacții specifice la enzime și hormoni și metode imunologice. Acestea din urmă permit, de asemenea, determinarea concentrației uroproteinei non-plasmatice în urină și, în unele cazuri, determinarea structurilor tisulare care au devenit sursa apariției sale. Principala metodă de detectare a proteinelor non-plasmatice în urină este analiza imunodifuziei cu antiser obținut prin imunizarea animalelor de experiment cu urină umană și ulterior epuizat (adsorbit) de proteinele plasmatice ale sângelui.

Examinarea enzimelor din sânge și urină

În procesul patologic, se observă tulburări profunde ale activității vitale a celulelor, însoțite de eliberarea de enzime intracelulare în mediile lichide ale corpului. Enzimodiagnostica se bazează pe determinarea unui număr de enzime eliberate din celulele organelor afectate și care nu sunt caracteristice serului sanguin.
Studiile asupra nefronului uman și animal au arătat că în părțile sale individuale există o diferențiere enzimatică ridicată, strâns legată de funcțiile pe care le îndeplinește fiecare departament. Glomerulii rinichilor conțin cantități relativ mici de diferite enzime.

Celulele tubilor renali, in special cele proximale, contin cantitatea maxima de enzime. Activitatea lor ridicată se observă în ansa lui Henle, în tubii direcți și în conductele colectoare. Modificările în activitatea enzimelor individuale în diferite boli de rinichi depind de natura, severitatea și localizarea procesului. Ele sunt observate înainte de apariția modificărilor morfologice la nivelul rinichilor. Întrucât conținutul diferitelor enzime este clar localizat în nefron, determinarea uneia sau alteia enzime în urină poate contribui la diagnosticul local al procesului patologic din rinichi (glomeruli, tubuli, cortex sau medular), diagnosticul diferențial al boli renale și determinarea dinamicii (atenuarea și exacerbarea) procesului în parenchimul renal.

Pentru diagnosticul diferențial al bolilor sistemului genito-urinar, se utilizează determinarea activității în sânge și urină a următoarelor enzime: lactat dehidrogenază (LDH), leucină aminopeptidază (LAP), fosfatază acidă (AP), fosfatază alcalină (AP) , β-glucuronidază, glutamin-oxaloacetic transaminaza (GST), aldolază, transamidinază etc. Activitatea enzimelor din serul sanguin și urină se determină prin metode biochimice, spectrofotometrice, cromatografice, fluorimetrice și chemiluminescente.

Enzimuria în bolile de rinichi este mai pronunțată și mai regulată decât enzima. Este deosebit de pronunțată în stadiul acut al bolii (pielonefrită acută, traumatisme, dezintegrare tumorală, infarct renal etc.). În aceste boli, se găsește o activitate ridicată a transamidinazei, LDH, fosfatazei alcaline și CP, hialuronidază, LAP, precum și a unor enzime nespecifice precum GST, catalaza [Polyantseva LR, 1972].

Localizarea selectivă a enzimelor în nefron la detectarea LAP și a fosfatazei alcaline în urină ne permite să vorbim cu încredere despre bolile renale acute și cronice (insuficiență renală acută, necroză tubulară renală, glomerulonefrită cronică) [Shemetov V.D., 1968]. Potrivit A.A. Karelin și L.R. Polyantseva (1965), transamidinaza se găsește numai în două organe - rinichi și pancreas. Este o enzimă mitocondrială a rinichilor și, în mod normal, este absentă în sânge și urină. Cu diferite boli ale rinichilor, transamidinaza apare în sânge și urină și cu leziuni ale pancreasului - numai în sânge.

Testul diferențial în diagnosticul glomerulonefritei și pielonefritei Krotkiewski (1963) ia în considerare activitatea fosfatazei alcaline în urină, a cărei creștere este mai tipică pentru pielonefrita și glomeruloscleroza diabetică decât pentru nefrita acută și cronică. Creșterea dinamicii amilazei cu o scădere simultană a amilazuriei poate indica nefroscleroza și ridurile rinichilor, LAP este cel mai important pentru modificări patologice ale glomeruli și tubilor contorți ai rinichiului, deoarece conținutul său în aceste părți ale nefronului este mai mare. Shepotinovsky V.P. şi colab., 1980]. Pentru diagnosticul nefritei lupice se recomandă determinarea β-glucuronidazei și a FC [Privalenko M.N. şi colab., 1974].

Atunci când se evaluează rolul enzimuriei în diagnosticul bolii renale, trebuie luate în considerare următoarele prevederi. Enzimele, fiind prin natura sa proteine, cu o greutate moleculara mica pot trece prin glomeruli intacti, determinand asa-numita enzima fiziologica. Printre aceste enzime, α-amilaza (greutate moleculară relativă 45.000) și uropepsina (greutatea moleculară relativă 38.000) sunt detectate în mod constant în urină.

Alături de enzimele cu molecularitate scăzută în urina indivizilor sănătoși, mai pot fi găsite și alte enzime în concentrații mici: LDH, aspartat și alanin aminotransferaze, fosfatază alcalină și CP, maltază, aldolază, lipază, diverse proteaze și peptidaze, sulfatază, catalază, ribonuclează, peroxidază.

Enzimele cu moleculare înaltă, cu o greutate moleculară relativă mai mare de 70.000-100.000, conform lui Richterich (1958) și Hess (1962), pot pătrunde în urină numai dacă permeabilitatea filtrului glomerular este afectată. Conținutul normal de enzime în urină nu permite excluderea procesului patologic în rinichi cu ocluzie ureterală. În cazul epimuriei, eliberarea enzimelor este posibilă nu numai din rinichii înșiși, ci și din alte organe parenchimatoase, celule ale membranelor mucoase ale tractului urinar, glandei prostatei, precum și elemente formate de urină cu hematurie sau leucociturie.

Majoritatea enzimelor sunt nespecifice rinichilor, așa că este dificil de determinat de unde provin enzimele găsite în urina persoanelor sănătoase și bolnave. Cu toate acestea, gradul de enzimurie, chiar și pentru enzimele nespecifice în afectarea rinichilor, este mai mare decât cel normal sau cel observat în bolile altor organe. Informații mai valoroase pot fi furnizate printr-un studiu cuprinzător al dinamicii unui număr de enzime, în special a celor specifice unui organ, cum ar fi transaminaza.

În rezolvarea problemei originii renale a enzimei în urină, studiul izoenzimelor ajută la identificarea fracțiilor tipice organului studiat. Izoenzimele sunt enzime care au acțiune izogenă (catalizează aceeași reacție), dar eterogene ca structură chimică și alte proprietăți. Fiecare țesut are propriul spectru de izoenzime. Metodele valoroase pentru separarea izoenzimelor sunt electroforeza în geluri de amidon și poliacrilamidă, precum și cromatografia cu schimb de ioni.

Proteina Bence Jones

Cu mielom multiplu și macroglobulinemie Waldenström, proteina Bence-Jones se găsește în urină. Metoda de detectare a acestei proteine ​​în urină se bazează pe reacția de termoprecipitare. Metodele utilizate anterior care evaluează dizolvarea acestei proteine ​​la o temperatură de 100 ° C și re-precipitarea la răcirea ulterioară sunt nesigure, deoarece nu toate corpurile proteice Bence-Jones au proprietăți adecvate.

Detectarea mai fiabilă a acestei paraproteine ​​prin precipitarea ei la o temperatură de 40-60 °C. Cu toate acestea, chiar și în aceste condiții, precipitațiile pot să nu apară în condiții prea acide (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) urină, cu OPM scăzută și concentrație scăzută de proteine ​​Bence-Jones. Condițiile cele mai favorabile pentru precipitarea acestuia sunt asigurate de metoda propusă de Patnem: 4 ml de urină filtrată se amestecă cu 1 ml de tampon acetat 2 M pH 4,9 și se încălzește timp de 15 minute într-o baie de apă la temperatura de 56 °C. În prezența proteinei Bence-Jones, în primele 2 minute apare un precipitat pronunțat.

La o concentrație de proteină Bence-Jones mai mică de 3 g/l, testul poate fi negativ, dar în practică acest lucru este extrem de rar, deoarece concentrația sa în urină este de obicei mai semnificativă. Nu se poate baza pe deplin probele de fierbere. Cu deplină certitudine, poate fi detectat în urină prin metoda imuno-electroforetică folosind seruri specifice împotriva lanțurilor grele și ușoare de imunoglobuline.