การหาคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะ โปรตีนในปัสสาวะ การทดสอบในห้องปฏิบัติการ

วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov หมายถึงวิธีกึ่งปริมาณสำหรับกำหนดโปรตีนทั้งหมดในปัสสาวะ วิธีนี้ใช้การทดสอบแหวนเฮลเลอร์ ซึ่งประกอบด้วยกรดไนตริกและปัสสาวะ เมื่อมีโปรตีนจะจับตัวเป็นก้อนและมีวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้น

รีเอเจนต์

สารละลายกรดไนตริก 50% หรือ น้ำยา Larionova.
การเตรียมน้ำยา Larionova: เตรียมสารละลายอิ่มตัวของโซเดียมคลอไรด์ (เกลือ 20-30 กรัมละลายในน้ำ 100 มล. เมื่อถูกความร้อนปล่อยให้ยืนจนเย็น) ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกระบายออก กรองแล้ว ในการกรอง 99 มล. ให้เติมกรดไนตริกเข้มข้น 1 มล. สามารถเติมกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น 2 มล. แทนกรดไนตริกได้

คำจำกัดความความคืบหน้า

1 - 2 มล. ของกรดไนตริก (หรือน้ำยา Laionic) เทลงในหลอดทดลอง กรดสามารถระบายออกจากผนังของหลอดทดลอง (5 - 8 นาที) มิฉะนั้นเมื่อชั้นโปรตีนปัสสาวะจะเกิดความขุ่น เนื่องจากการผสมของกรดไนตริกบนผนังของหลอดทดลองกับปัสสาวะซึ่งป้องกันการก่อตัวของวงแหวนที่ชัดเจน . ดังนั้นควรเตรียมชุดหลอดทดลองที่มีกรดไว้ล่วงหน้า เมื่อใช้ปิเปต ให้ค่อยๆ เทปัสสาวะใสที่กรองแล้วจำนวนเท่ากันไปตามผนังของหลอดทดลอง พยายามอย่าเขย่าของเหลวในหลอดทดลอง การปรากฏตัวของวงแหวนสีขาวบาง ๆ ที่ส่วนต่อประสานระหว่างของเหลวทั้งสองระหว่างนาทีที่ 2 และ 3 บ่งชี้ว่ามีโปรตีนอยู่ที่ความเข้มข้นประมาณ 0.033 กรัม/ลิตร เวลาในการแบ่งชั้นจะนับเป็นหนึ่งในสี่ของนาที

หากแหวนปรากฏขึ้นเร็วกว่า 2 นาทีหลังจากฝังรากลึก ปัสสาวะควรเจือจางด้วยน้ำ และควรทำปัสสาวะที่เจือจางแล้วซ้ำแล้วซ้ำอีก ระดับการเจือจางของปัสสาวะจะถูกเลือกขึ้นอยู่กับชนิดของแหวน เช่น ความกว้าง ความแน่น และเวลาที่ปรากฏ ด้วยวงแหวน filiform ที่ปรากฏก่อน 2 นาทีปัสสาวะจะเจือจาง 2 ครั้งโดยกว้าง 1 - 4 ครั้งมีขนาดกะทัดรัด - 8 ครั้งเป็นต้น การเจือจางของปัสสาวะจะทำในหลอดวัดการหมุนเหวี่ยงเทปัสสาวะไปที่ มาร์ค 1 มล. และเติมน้ำให้ครบตามจำนวนครั้งที่ผสมพันธุ์ เนื้อหาของหลอดทดลองจะถูกผสมอย่างทั่วถึงด้วยปิเปตปาสเตอร์กับบอลลูน หากความขุ่นปรากฏขึ้นในระหว่างการเจือจางของปัสสาวะ จะต้องกรองส่วนผสมอีกครั้งและกรองเฉพาะชั้นกรองที่โปร่งใสบนกรดไนตริกเท่านั้น จากนั้นคำนวณความเข้มข้นของโปรตีนโดยการคูณ 0.033 ด้วยอัตราส่วนการเจือจางและแสดงเป็นกรัมต่อลิตร (g/l) การเลือกเจือจางปัสสาวะดังกล่าวจะถูกเลือกเพื่อให้เมื่อทากรดไนตริกเป็นชั้น ๆ แหวนจะปรากฏขึ้นในนาทีที่ 2 - 3

ในกรณีที่วงแหวนก่อตัวขึ้นระหว่างนาทีที่ 1 และ 4 ด้วยปัสสาวะที่ไม่เจือปนหรือเจือจาง สามารถใช้การแก้ไข Ehrlich-Althausen เพื่อไม่ให้ปัสสาวะเจือจางอีก (ซึ่งจะช่วยประหยัดเวลา) ผู้เขียนเสนอให้กำหนดเวลาที่ปรากฏของวงแหวนเส้นใยและแก้ไขการคำนวณเวลา ในกรณีนี้ ปริมาณโปรตีนคำนวณโดยการคูณ 0.033 g/l ด้วยระดับการเจือจางและโดยการแก้ไข

เมื่อแหวนถูกสร้างขึ้นก่อนหมดอายุ 1 นาทีต้องทำการเจือจางเศษส่วนหนึ่งส่วนคือ 1.5 ครั้ง (ปัสสาวะสองส่วนและน้ำ 1 ส่วน) การเจือจางนี้ถูกนำมาพิจารณาด้วยเมื่อคำนวณปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ

ตัวอย่างการหาปริมาณโปรตีนทั้งหมดในปัสสาวะโดยวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov

เมื่อวางปัสสาวะบนรีเอเจนต์จะเกิดวงแหวนกว้างขึ้นทันที ปัสสาวะเจือจาง 4 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 3 ส่วน) เป็นชั้น จะได้รับแหวน filiform ทันที จำเป็นต้องเจือจางการเจือจางที่มีอยู่อีก 2 ครั้ง เมื่อแบ่งชั้นการเจือจางนี้ แหวนจะเกิดขึ้นหลังจาก 1.5 นาที คุณไม่สามารถผสมพันธุ์ได้อีกต่อไป

การคำนวณโปรตีน: ปัสสาวะเจือจาง 4 และ 2 ครั้ง ดังนั้น 8 ครั้ง ปริมาณโปรตีน 0.033*8*1 1/4 = 0.33 g/l

ข้อเสียของวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov:

• อัตวิสัย,
• ความลำบาก,
• ความแม่นยำในการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนลดลงเมื่อปัสสาวะเจือจาง

ดูสิ่งนี้ด้วย:

วรรณกรรม:

• คู่มือ "วิธีการวิจัยในห้องปฏิบัติการในคลินิก", ed. ศ. วี.วี.เมนชิคอฟ. - มอสโก "ยา", 2530
• L.V. Kozlovskaya, A. Yu. Nikolaev. ตำราวิธีการวิจัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก มอสโก, แพทยศาสตร์, 1985
• A. Ya. Althausen "การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก" - Moscow, Medgiz, 1959
• A. Ya. Lyubina, L. P. Ilyicheva และผู้เขียนร่วม "การวิจัยในห้องปฏิบัติการทางคลินิก", มอสโก, "ยา", 1984

โปรตีนในปัสสาวะ (proteinuria) - การปรากฏตัวของโปรตีนในปัสสาวะในระดับความเข้มข้นที่ทำให้สามารถระบุได้ด้วยวิธีการเชิงคุณภาพ

แยกแยะ

• โปรตีนในไตและ
• โปรตีนในปัสสาวะนอกไต (หลังไต)

โปรตีนในไต

โปรตีนในไตเกิดจากความเสียหายต่อตัวกรองไตหรือความผิดปกติของเยื่อบุผิวของท่อที่โค้งงอ

แยกแยะระหว่างโปรตีนที่คัดเลือกและไม่คัดเลือกขึ้นอยู่กับอัตราส่วนของพลาสมาและโปรตีนในปัสสาวะบางชนิด น้ำหนักโมเลกุลและประจุ

โปรตีนที่เลือกได้

โปรตีนที่คัดเลือกเกิดขึ้นโดยมีการละเมิดตัวกรองไตน้อยที่สุด (มักจะย้อนกลับได้) ซึ่งแสดงโดยโปรตีนน้ำหนักโมเลกุลต่ำ (น้ำหนักโมเลกุลไม่เกิน 68,000) - อัลบูมิน, เซรูโลพลาสมิน, ทรานเฟอร์ริน

โปรตีนที่ไม่ผ่านการคัดเลือก

โปรตีนในปัสสาวะที่ไม่ผ่านการคัดเลือกพบได้บ่อยกว่าโดยมีความเสียหายของตัวกรองรุนแรงกว่า เมื่อโปรตีนโมเลกุลขนาดใหญ่เริ่มสูญเสียไป การคัดเลือกโปรตีนในปัสสาวะเป็นคุณลักษณะการวินิจฉัยและการพยากรณ์โรคที่สำคัญ

โปรตีนในไตสามารถ:

• อินทรีย์และ
• การทำงาน (สรีรวิทยา)

โปรตีนในไตอินทรีย์

โปรตีนในไตอินทรีย์เกิดขึ้นกับความเสียหายอินทรีย์ต่อไต ขึ้นอยู่กับกลไกการเกิดขึ้นที่โดดเด่น โปรตีนอินทรีย์บางชนิดสามารถแยกแยะได้

โปรตีนในไต

โปรตีนในไต - เนื่องจากความเสียหายต่อตัวกรองไต, เกิดขึ้นกับ glomerulonephritis และโรคไตที่เกี่ยวข้องกับโรคเมตาบอลิซึมหรือหลอดเลือด (glomerulonephritis, ความดันโลหิตสูง, ปัจจัยติดเชื้อและภูมิแพ้, การชดเชยการเต้นของหัวใจ)

โปรตีนในท่อปัสสาวะ

โปรตีนในท่อปัสสาวะ - เกี่ยวข้องกับการที่ท่อไม่สามารถดูดซับโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำในพลาสมากลับคืนมาได้ซึ่งผ่านตัวกรองไตที่ไม่เปลี่ยนแปลง (โรคอะไมลอยด์, เนื้อร้ายท่อเฉียบพลัน, โรคไตอักเสบคั่นระหว่างหน้า, กลุ่มอาการแฟนโคนี)

โปรตีนในปัสสาวะก่อนไต

โปรตีนในปัสสาวะก่อนไต (มากเกินไป) - พัฒนาเมื่อมีความเข้มข้นในพลาสมาสูงผิดปกติของโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำซึ่งถูกกรองโดยโกลเมอรูไลปกติในปริมาณที่เกินความสามารถทางสรีรวิทยาของทูบูลในการดูดซับกลับ (หลาย myeloma, เนื้อร้ายเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ, เม็ดเลือดแดงแตก)

โปรตีนในไตทำงาน

โปรตีนในไตทำงานไม่สัมพันธ์กับโรคไตและไม่ต้องการการรักษา

โปรตีนที่ทำหน้าที่รวมถึง:

• เดินขบวน
• ทางอารมณ์
• เย็น,
• มึนเมา
• orthostatic (เฉพาะในเด็กและในท่ายืนเท่านั้น)

โปรตีนในปัสสาวะนอกไต (หลังไต)

ด้วยโปรตีนในปัสสาวะนอกไต (หลังไต) โปรตีนสามารถเข้าสู่ปัสสาวะจากทางเดินปัสสาวะและอวัยวะเพศ ในกรณีนี้ ไม่มีอะไรมากไปกว่าส่วนผสมของสารหลั่งจากการอักเสบ

โปรตีนในปัสสาวะจากภายนอกมักไม่เกิน 1 กรัม/วัน และมักเกิดขึ้นชั่วคราว

การวินิจฉัยภาวะโปรตีนในปัสสาวะนอกไตช่วยโดยการทดสอบสามถ้วยและการตรวจระบบทางเดินปัสสาวะ

โปรตีนในปัสสาวะหลังเกิดกับกระเพาะปัสสาวะอักเสบ, ท่อปัสสาวะอักเสบ

วิธีการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ

ข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับการมีอยู่ของโปรตีนคือความโปร่งใสของปัสสาวะอย่างแท้จริง

ตัวอย่างคุณภาพ

ตัวอย่างด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก

เทปัสสาวะที่กรองแล้ว 3-4 มล. ลงในหลอดทดลองสองหลอด เติมสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% 6–8 หยดลงในหลอดทดลองทดลอง หลอดที่สองคือตัวควบคุม บนพื้นหลังสีเข้ม ให้เปรียบเทียบหลอดควบคุมกับหลอดทดลอง เมื่อมีโปรตีนในตัวอย่างปัสสาวะจะมีความขุ่นขุ่นปรากฏขึ้น

ผลลัพธ์ถูกระบุดังนี้:

• ปฏิกิริยาเป็นบวกเล็กน้อย (+)
• บวก (++),
• บวกอย่างรวดเร็ว (+++)

ตัวอย่างมีความไวสูง

คุณยังสามารถใช้การทดสอบแบบแห้งได้เมื่อมีการเติมกรดซัลโฟซาลิไซลิกสองสามคริสตัลหรือกระดาษกรองล่วงหน้าด้วยสารละลายของกรดนี้ลงในปัสสาวะหลายมิลลิลิตร

ผลลัพธ์ที่เป็นเท็จอาจเกิดจากการได้รับสารไอโอดีน ยาซัลฟา เพนนิซิลลินปริมาณมาก และกรดยูริกในปัสสาวะมีความเข้มข้นสูง

การทดสอบกรดไนตริก (การทดสอบเกลเลอร์)

เทสารละลายกรดไนตริก 50% 1-2 มล. ลงในหลอดทดลอง จากนั้นปัสสาวะในปริมาณที่เท่ากันบนกรด ในที่ที่มีโปรตีน จะมีวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้นที่ส่วนต่อประสานระหว่างของเหลวสองชนิด บางครั้งวงแหวนสีม่วงแดงจะก่อตัวขึ้นเหนือขอบเขตระหว่างของเหลวเล็กน้อยจากการปรากฏตัวของยูเรต วงแหวนยูเรตซึ่งแตกต่างจากวงแหวนโปรตีนจะละลายด้วยความร้อนเล็กน้อย

ตัวอย่างสดใส

การทดสอบ Bright Boil และการตรวจคัดกรองโปรตีนในปัสสาวะ (ตัวอย่างสีแบบแห้ง) แทบไม่ต้องใช้รีเอเจนต์เลย

เมื่อต้มปัสสาวะที่มีโปรตีน จะทำให้เสียสภาพ กลายเป็นตะกอนขุ่นหรือเป็นสะเก็ดที่ไม่ละลายในกรดอะซิติก 6% ซึ่งแตกต่างจากเกลือฟอสเฟต การทดสอบคัดกรองขึ้นอยู่กับความสามารถของโปรตีน (อัลบูมิน) ในการเปลี่ยนสีของกระดาษที่เคลือบด้วยตัวบ่งชี้ (โดยปกติคือสีน้ำเงินโบรโมฟีนอล) และบัฟเฟอร์ ความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างความเข้มของสีของกระดาษบ่งชี้ (Albufan, Albutest - สาธารณรัฐเช็ก; Labstix, Multistix - USA; Comburtest - เยอรมนี) กับปริมาณโปรตีนทำให้สามารถประมาณปริมาณโปรตีนในปัสสาวะได้คร่าวๆ อย่างไรก็ตาม การตรวจคัดกรองที่ใช้อยู่ในปัจจุบันไม่มีข้อเสีย โดยเฉพาะอย่างยิ่ง bromophenol blue ตรวจไม่พบโปรตีน Bence-Jones

วิธีการเชิงปริมาณ

วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov

วิธีการนี้ใช้ตัวอย่างเชิงคุณภาพด้วยกรดไนตริก หลักสูตรของการทดสอบได้อธิบายไว้ข้างต้น การปรากฏตัวของวงแหวนบาง ๆ ที่เส้นขอบของของเหลวสองชนิดระหว่างนาทีที่ 2 และ 3 หลังจากการแบ่งชั้นแสดงว่ามีโปรตีน 0.033 g / l ในปัสสาวะ (ความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะมักจะแสดงเป็น ppm เช่นในหน่วยกรัมต่อลิตร ). หากแหวนปรากฏขึ้นเร็วกว่า 2 นาที ปัสสาวะควรเจือจางด้วยน้ำ การเลือกเจือจางของปัสสาวะดังกล่าวจะถูกเลือกเพื่อให้เมื่ออยู่บนกรดไนตริกแหวนจะปรากฏขึ้นในนาทีที่ 2-3 ระดับการเจือจางขึ้นอยู่กับความกว้างและความแน่นของแหวนและเวลาที่มีลักษณะ

ความเข้มข้นของโปรตีนคำนวณโดยการคูณ 0.033 g/l ด้วยระดับการเจือจางของปัสสาวะ (ตารางที่ 8)

วิธีการเจือจางของ Roberts-Stolnikov มีข้อเสียหลายประการ: เป็นการเฉพาะบุคคล ใช้เวลานาน ความแม่นยำในการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนลดลงเมื่อปัสสาวะเจือจาง

วิธีที่สะดวกและแม่นยำที่สุดคือวิธีนีเฟโลเมตริกและไบยูเรต

วิธีเนฟีโลเมตริก

มันขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของโปรตีนเพื่อให้มีความขุ่นกับกรดซัลโฟซาลิไซลิกซึ่งความเข้มของมันเป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของโปรตีน ปัสสาวะที่กรองแล้ว 1.25 มล. เทลงในหลอดทดลองที่สำเร็จการศึกษาและเติมสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 3% ลงในปริมาตร 5 มล. ผสมให้ละเอียด หลังจากผ่านไป 5 นาที การสูญพันธุ์จะถูกวัดบน FEK-M (หรือโฟโตมิเตอร์อื่นๆ) ที่ความยาวคลื่น 590–650 นาโนเมตร (ตัวกรองแสงสีส้มหรือสีแดง) เทียบกับตัวควบคุมในคิวเวตต์ที่มีความหนาของชั้น 0.5 ซม. สำหรับการควบคุม , ใช้ปัสสาวะกรอง 1.25 มล. (เหมือนกัน) ซึ่งเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ไอโซโทนิกลงในปริมาตร 5 มล.

กราฟการปรับเทียบถูกสร้างขึ้นในเบื้องต้นโดยขึ้นอยู่กับค่าการสูญพันธุ์ของความเข้มข้นของโปรตีน สารละลายมาตรฐานของอัลบูมิน (จากซีรั่มของมนุษย์หรือวัว) ใช้เพื่อเตรียมความเข้มข้นของโปรตีนต่างๆ กรอกใบงาน

วิธีไบยูเรต

มันขึ้นอยู่กับความสามารถของโปรตีนในการให้คอปเปอร์ซัลเฟตและโซดาไฟอัลคาไลคอมเพล็กซ์ไวโอเล็ต ความเข้มของสีซึ่งเป็นสัดส่วนโดยตรงกับปริมาณของโปรตีน ในปัสสาวะ 2 มล. ให้เติมสารละลายกรดไตรคลอโรอะซิติก 2 มล. เพื่อให้โปรตีนตกตะกอนและปั่นแยก ส่วนเหนือตะกอนจะถูกละทิ้ง ลงในตะกอน (โปรตีน) เติมสารละลาย NaOH 3% 4 มล. และสารละลายคอปเปอร์ซัลเฟต 20% 0.1 มล. คนให้เข้ากันและปั่นแยก ส่วนเหนือตะกอนสีม่วงถูกวัดด้วยโฟโตมิเตอร์ที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตร (ตัวกรองแสงสีเขียว) เทียบกับน้ำกลั่นในคิวเวตต์ที่มีความหนาของชั้น 1.0 ซม. ความเข้มข้นของโปรตีนจะถูกกำหนดจากตารางที่ได้จากการทดลอง กระบวนการ).

การทดสอบ Orthostatic

บ่งชี้ว่าสงสัยว่ามีโปรตีนในปัสสาวะมีพยาธิสภาพและไตอักเสบ หลังจากถ่ายจากกระเพาะปัสสาวะเสร็จเรียบร้อยแล้ว ผู้ทดลองจะรักษาตำแหน่งในแนวนอนไว้เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นโดยไม่ลุกขึ้น เขาผ่านปัสสาวะส่วนหนึ่ง (ควบคุม) ในอีก 2 ชั่วโมงข้างหน้า วัตถุจะเดินอย่างต่อเนื่องโดยรักษาตำแหน่งลอร์ดโอซิสที่เอวสูงสุด (ถือไม้เท้าไว้ด้านหลังส่วนล่าง) หลังจากนั้นเขาก็ผ่านปัสสาวะส่วนที่สอง ในปัสสาวะทั้งสองส่วน จะมีการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนและปริมาณโปรตีนเป็นกรัม และในกรณีของโรคไตอักเสบ จำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดงใน 1 มล. ด้วยโปรตีนออร์โธสแตติกในปัสสาวะ โปรตีนในปัสสาวะหรือปริมาณโปรตีนเริ่มต้นเพิ่มขึ้น 2-3 เท่าในหน่วยกรัมจะถูกตรวจพบในการเสิร์ฟครั้งที่สอง การปรากฏตัวของภาวะโลหิตจางซึ่งมักร่วมกับปริมาณโปรตีนในปัสสาวะในส่วนที่สองเป็นลักษณะเฉพาะของโรคไต

ความมุ่งมั่นของ Bence-Jones uroproteins

โปรตีน Bence-Jones เป็น paraproteins ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำที่ทนความร้อนได้ (น้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์ 20,000–45,000) ซึ่งพบส่วนใหญ่ใน multiple myeloma และ macroglobulinemia ของ Waldenström พวกมันคือสาย L แบบเบาของอิมมูโนโกลบูลิน เนื่องจากมีน้ำหนักโมเลกุลที่น้อย โซ่ L จึงสามารถผ่านจากเลือดผ่านตัวกรองไตที่ไม่บุบสลายเข้าสู่ปัสสาวะได้อย่างง่ายดาย และสามารถระบุได้ที่นั่นโดยใช้ปฏิกิริยาการตกตะกอนด้วยอุณหภูมิ แนะนำให้ทำการศึกษาเฉพาะกับการทดสอบเชิงบวกกับกรดซัลโฟซาลิไซลิกเท่านั้น คำจำกัดความจะดำเนินการดังนี้ ในปัสสาวะ 10 มล. เติมสารละลายกรดอะซิติก 10% 3-4 หยดและสารละลายโซเดียมคลอไรด์อิ่มตัว 2 มล. ค่อยๆ ให้ความร้อนในอ่างน้ำ ค่อยๆ เพิ่มอุณหภูมิ หากมีโปรตีน Bence-Jones ในปัสสาวะจากนั้นที่อุณหภูมิ 45–60 ° C ความขุ่นแบบกระจายจะปรากฏขึ้นหรือรูปแบบการตกตะกอนสีขาวหนาแน่น เมื่อให้ความร้อนจนถึงเดือด ตะกอนจะละลายและเมื่อเย็นตัวลงจะปรากฏขึ้นอีกครั้ง ตัวอย่างนี้มีความไวไม่เพียงพอและต้องตรวจสอบโดยอิเล็กโตรโฟรีซิสและอิมมูโนอิเล็กโตรโฟรีซิส

เป้า- การหาโปรตีนในปัสสาวะ

ตัวชี้วัด- ภาวะความดันโลหิตสูงระหว่างตั้งครรภ์ โรคไตในสตรีมีครรภ์

ข้อห้าม- ไม่.

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- ไม่

ทรัพยากร- ภาชนะ โถหมัน หลอดทดลอง 30% ซัลโฟซาลิไซลิกหรือกรดอะซิติก 3% ปิเปต เตาแอลกอฮอล์

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. อธิบายให้หญิงตั้งครรภ์ทราบถึงความจำเป็นในการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ

2. ขอให้หญิงตั้งครรภ์เก็บปัสสาวะในขวดที่ปลอดเชื้อ

3. ทดสอบด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก: เทปัสสาวะ 4-5 มล. ลงในหลอดทดลอง เติมกรด 6-10 หยด หากมีโปรตีนในปัสสาวะ จะเกิดตะกอนหรือความขุ่น

4. ตัวอย่างที่มีกรดอะซิติก 3%: เทปัสสาวะ 8-10 มล. ลงในหลอดทดลองต้มบนเตาแอลกอฮอล์หากปัสสาวะมีโปรตีนจะกลายเป็นขุ่น เติมสารละลายกรดอะซิติก 3% สองสามหยดลงในปัสสาวะขุ่น หากความขุ่นหายไปในปัสสาวะ การทดสอบจะเป็นลบ

หมายเหตุมันถูกกำหนดในแผนกการรับเข้าของสถาบันสูติศาสตร์

มาตรฐาน "การกำหนดวันเดือนปีเกิดที่คาดหวัง"

เป้า:ประเมินความสามารถในทางปฏิบัติของบัณฑิตในการกำหนดวันครบกำหนดที่คาดหวัง

ตัวชี้วัด- การเยี่ยมชมสถานที่คลอดบุตรสำหรับสตรีมีครรภ์แต่ละครั้ง

ข้อห้าม- ไม่

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- ไม่

ทรัพยากร- โต๊ะ, เก้าอี้สองตัว, ปฏิทิน, ปฏิทินสูติกรรม, ข้อมูลที่เป็นลายลักษณ์อักษรเกี่ยวกับวันแรกของการมีประจำเดือนครั้งสุดท้าย, การปรากฏตัวครั้งแรกที่คลินิกฝากครรภ์, วันที่ของอัลตราซาวนด์พร้อมข้อสรุป, วันที่ลาก่อนคลอด

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. แนะนำตัวเองอธิบายให้ผู้หญิงฟังถึงความหมายของการคำนวณวันที่ครบกำหนดโดยประมาณ
2. หาวันแรกของการมีประจำเดือนครั้งสุดท้ายจากหญิงตั้งครรภ์เพิ่ม 280 วันถึงวันที่นี้หรือใช้สูตร Negele เพิ่ม 7 วันเป็น 1 วันของการมีประจำเดือนครั้งสุดท้ายและลบ 3 เดือนวันที่ผลลัพธ์คือวันครบกำหนด สำหรับการมีประจำเดือน
3. ค้นหาวันที่ของการเคลื่อนไหวของทารกในครรภ์ครั้งแรก เพิ่ม 140 วันจนถึงวันนี้สำหรับ primiparous และ 154 วันสำหรับ multiparous วันที่ผลลัพธ์คือวันที่ครบกำหนดสำหรับการเคลื่อนไหวของทารกในครรภ์
4. ตามรอบประจำเดือน ให้กำหนดวันที่การตกไข่ครั้งสุดท้ายเกิดขึ้นและจากวันแรกของการมีประจำเดือนครั้งสุดท้าย นับถอยหลังสามเดือนแล้วบวกจำนวนวันก่อนตกไข่ หาวันเดือนปีเกิด
5. คำนวณระยะเวลาการคลอดบุตรในการปรากฏตัวครั้งแรกที่คลินิกฝากครรภ์ ข้อผิดพลาดจะน้อยที่สุดหากหญิงตั้งครรภ์ไปพบแพทย์ในช่วง 12 สัปดาห์แรกของการตั้งครรภ์
6. กำหนดวันครบกำหนดตามวันที่ลาก่อนคลอด ระยะเวลาลาก่อนคลอดเริ่มต้นที่ 30 สัปดาห์ของการตั้งครรภ์ บวก 10 สัปดาห์ถึงวันที่นี้ รับวันเดือนปีเกิด
7. คำนวณระยะเวลาการคลอดโดยอัลตราซาวนด์ที่ทำในคลินิกฝากครรภ์

มาตรฐาน "การตรวจอวัยวะสืบพันธุ์ภายนอก"

เป้า:ประเมินทักษะการปฏิบัติของผู้สำเร็จการศึกษาเมื่อตรวจอวัยวะเพศภายนอกของหญิงตั้งครรภ์

ตัวชี้วัด- การอุทธรณ์เบื้องต้นไปยังสถาบันสูติกรรมของหญิงตั้งครรภ์เข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลด้วยกิจกรรมการใช้แรงงานปกติ

ข้อห้าม- ไม่

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- ไม่

ทรัพยากร– ผีผู้หญิง, โซฟา, ชุดชั้นในแบบใช้แล้วทิ้งสำหรับโซฟา

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. แนะนำตัวเองอธิบายให้ผู้หญิงฟังถึงความสำคัญของการตรวจสอบอวัยวะเพศภายนอกขั้นตอนของการดำเนินการขอความยินยอมจากเธอ

2. ทำการฆ่าเชื้อที่มืออย่างถูกสุขลักษณะ

3. สวมถุงมือฆ่าเชื้อที่มือทั้งสองข้าง

4. ตรวจสอบอวัยวะสืบพันธุ์ภายนอก: ประเมินประเภทของการเจริญเติบโตของเส้นผม, โครงสร้างของริมฝีปากขนาดใหญ่และขนาดเล็ก, อวัยวะเพศหญิง, สภาพของ perineum

5. ใช้นิ้วโป้งและนิ้วชี้ของมือทั้งสองข้างกางริมฝีปากออกตรวจสอบสภาพของการเปิดท่อปัสสาวะภายนอกส่วนหน้าของช่องคลอดคลำบริเวณต่อม Bartholin (ส่วนล่างที่สามของริมฝีปาก Majora)

6. ถอดถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งและวางในกล่องทิ้งที่ปลอดภัย

7. ล้างมือด้วยสบู่

8. ให้ข้อมูลเกี่ยวกับสภาพของอวัยวะเพศภายนอกแก่หญิงตั้งครรภ์

9. จดบันทึกในเอกสารประกอบ

บันทึกการตรวจสอบจะดำเนินการอย่างเป็นความลับโดยไม่ทำให้เสียศักดิ์ศรีของผู้หญิง

มาตรฐาน "ให้การดูแลฉุกเฉินสำหรับ eclampsia"

เป้า:ประเมินทักษะการปฏิบัติของผู้สำเร็จการศึกษาที่ให้การดูแลฉุกเฉินสำหรับ eclampsia

ตัวชี้วัด- อาการชักในครรภ์เป็นพิษ

ข้อห้าม- ไม่

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- อาการชักซ้ำ อาการโคม่า

ทรัพยากร– หุ่นนางแบบ สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต 25% ไม้พาย ที่ใส่ลิ้น เข็มฉีดยา 20 มล. น้ำเกลือ 500 มล. การให้ทางหลอดเลือดดำ แอลกอฮอล์ สำลี สายรัด

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. กรณีเกิดอาการชัก ให้เรียกบุคลากรอิสระและทีมกู้ชีพทุกคนโดยไม่ทิ้งผู้ป่วย

2. ทำสิ่งต่อไปนี้พร้อมกัน:

· คลายทางเดินหายใจโดยการเปิดปากด้วยไม้พายหรือช้อนที่พันด้วยผ้ากอซดึงลิ้นออกด้วยที่ยึดลิ้น

ขจัดน้ำลายออกจากช่องปากทันทีที่มีการสูดดมเข้าไป ตรวจสอบให้แน่ใจว่าอากาศเข้าได้ฟรี

หลังจากหยุดอาการชักทางหลอดเลือดดำแล้วให้ป้อนขนาดเริ่มต้นของแมกนีเซียมซัลเฟต - 25% -20 มล. เป็นเวลา 10-15 นาที

3. เริ่มการแช่น้ำเกลือ 320 มล. ทางหลอดเลือดดำด้วยสารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต 80 มล. - 25%

4. ภายใต้การควบคุมความดันโลหิตและการบำบัดด้วยแมกนีเซียมอย่างต่อเนื่อง ให้ย้ายผู้ป่วยไปที่เปลหามและนำส่งไปยังหอผู้ป่วยหนักของโรงพยาบาลคลอดบุตรที่ใกล้ที่สุด

บันทึก

ด้วยภาวะครรภ์เป็นพิษ การคลอดควรเกิดขึ้นหลังจากอาการของผู้ป่วยมีเสถียรภาพ แต่ไม่เกิน 12 ชั่วโมงนับจากเริ่มมีอาการชัก

มาตรฐาน "การดูแลฉุกเฉินสำหรับภาวะครรภ์เป็นพิษอย่างรุนแรง"

เป้า:ประเมินทักษะการปฏิบัติของผู้สำเร็จการศึกษาในการดูแลฉุกเฉินสำหรับภาวะครรภ์เป็นพิษอย่างรุนแรง

ตัวชี้วัด- ภาวะครรภ์เป็นพิษรุนแรง

ข้อห้าม- ขณะชัก

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- อาการชัก อาการโคม่า

ทรัพยากร– หุ่นนางแบบ สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต 25% เข็มฉีดยา 20 มล. น้ำเกลือ 500 มล. ระบบการให้ยาทางหลอดเลือดดำ แอลกอฮอล์ สำลี สายรัด

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. วินิจฉัย: "ภาวะครรภ์เป็นพิษรุนแรง" หากมีอาการเหล่านี้: ปวดศีรษะ ปวดบริเวณลิ้นปี่ การมองเห็นผิดปกติ มีแมลงวันต่อหน้า คลื่นไส้ อาเจียน บนพื้นหลังของความดันโลหิตสูง (140/90 มม. ปรอท ขึ้นไป) ) และโปรตีนในปัสสาวะ

2. เรียกบุคลากรอิสระและทีมช่วยชีวิตโดยไม่ทิ้งผู้ป่วย

3. ทำสิ่งต่อไปนี้พร้อมกัน:

วางหญิงตั้งครรภ์บนพื้นผิวเรียบ หลีกเลี่ยงความเสียหายและหันศีรษะของผู้ป่วยไปด้านใดด้านหนึ่ง

ฉีดเข้าเส้นเลือดดำขนาดเริ่มต้นของแมกนีเซียมซัลเฟต - 25% -20 มล. เป็นเวลา 10-15 นาที

4. เริ่มฉีดน้ำเกลือปกติ 320 มล. ทางหลอดเลือดดำด้วยสารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต 25% 80 มล.

5. เมื่อความดันโลหิตมีค่าเท่ากับหรือสูงกว่า 160/100 มม. ปรอท ควบคุมความดันโลหิตโดยกำหนดนิเฟดิพีน 10 มก. อมใต้ลิ้น อีกครั้งหลังจากผ่านไป 30 นาที 10 มก. ภายใต้การควบคุมความดันโลหิต (รักษาความดันโลหิตไว้ที่ 130/90-140/95 มม. ปรอท)

6. ภายใต้การควบคุมความดันโลหิตและการบำบัดด้วยแมกนีเซียมอย่างต่อเนื่อง ให้ย้ายผู้ป่วยไปที่เปลหามและเคลื่อนย้ายไปยังห้องผู้ป่วยหนักของโรงพยาบาลคลอดบุตรที่ใกล้ที่สุด

บันทึกหากมีสัญญาณของการใช้ยาเกินขนาดแมกนีเซียมซัลเฟตฉีด 10 มล. ของสารละลาย Ca gluconate 10% ทางหลอดเลือดดำเป็นเวลา 10 นาที

มาตรฐานการเจาะน้ำคร่ำ

เป้า- การเปิดกระเพาะปัสสาวะของทารกในครรภ์

ตัวชี้วัด- ก่อนการปฐมนิเทศแรงงาน การกระตุ้นแรงงาน ความอ่อนแอของแรงงาน ข้อห้าม- ภาวะคุกคามของมารดาหรือทารกในครรภ์

ภาวะแทรกซ้อนที่เป็นไปได้- อาการห้อยยานของอวัยวะส่วนเล็ก ๆ ของทารกในครรภ์, การติดเชื้อจากน้อยไปมาก, การบาดเจ็บที่หลอดเลือดของกระเพาะปัสสาวะของทารกในครรภ์, การแยกของรกที่อยู่ตามปกติ

ทรัพยากร- เก้าอี้นรีเวช, ผ้าอ้อมส่วนบุคคล, ถุงมือหมัน, น้ำยาฆ่าเชื้อสำหรับรักษาอวัยวะเพศภายนอกของผู้หญิง, แขนงหนึ่งของคีมกระสุน

อัลกอริทึมการดำเนินการ:

1. แนะนำตัวเอง

2. อธิบายให้ผู้หญิงฟังถึงความจำเป็นในการผ่าตัดนี้

3. รับความยินยอมของผู้ป่วยสำหรับขั้นตอน

4. วางผู้หญิงบนเก้าอี้นรีเวชโดยวางเตียงที่ใช้แล้วทิ้งอยู่ข้างใต้

5. รักษาอวัยวะสืบพันธุ์ภายนอกของผู้หญิงด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อ ใส่ผ้าอ้อมหมันบนท้องของผู้หญิง

6. ล้างมือให้สะอาดถูกสุขลักษณะ

7. สวมถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งทั้งสองมือ

8. เกลี่ยริมฝีปากด้วยมือซ้าย สอดเข้าไปในช่องคลอดตามลำดับ

นิ้วชี้ แล้วก็นิ้วกลางของมือขวา

9. ป้อนสาขาของคีมกระสุนเข้าไปในช่องคลอดระหว่างดัชนีและตรงกลาง

นิ้ว.

10. เจาะถุงน้ำคร่ำ

11. ใส่นิ้วชี้แล้วใช้นิ้วกลางเข้าไปในรูในกระเพาะปัสสาวะของทารกในครรภ์ ค่อยๆ ขยายรู เอาเยื่อออกจากศีรษะ ปล่อยน้ำคร่ำอย่างช้าๆ ภายใต้การควบคุมของนิ้วมือ (ป้องกันการย้อยของชิ้นส่วนเล็กๆ

13. ดึงนิ้วออก

14. ถอดถุงมือและวางในกล่องทิ้งที่ปลอดภัย

15. ล้างมือด้วยสบู่

16. เขียนข้อมูลในประวัติการคลอดบุตร

บันทึก.

polyhydramnios ทำให้เกิดรูเล็กๆ และน้ำจะค่อยๆ ปล่อยออกมา มีความจำเป็นต้องควบคุมอัตราการไหลออกของน้ำเนื่องจากการไหลออกอย่างรวดเร็วและคมชัดอาจทำให้ส่วนเล็ก ๆ ของทารกในครรภ์หลุดออกมาได้ หลังจากน้ำแตกแนะนำให้ผู้หญิงนอนลงเป็นเวลา 30 นาที

คำแนะนำ

วิธีการเชิงคุณภาพสำหรับการตรวจวัดโปรตีนใน ปัสสาวะ: วิธีเฮลเลอร์, การทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20%, การทดสอบการเดือด ฯลฯ วิธีกึ่งเชิงปริมาณ: การใช้แผ่นตรวจวินิจฉัยเพื่อหาโปรตีนใน ปัสสาวะ, วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov วิธีการเชิงปริมาณ: ความขุ่นและสี

การหาโปรตีนในแต่ละวัน ปัสสาวะที่ความเข้มข้น 0.033 กรัม/ลิตร ขึ้นไปเป็นพยาธิสภาพ ตามกฎแล้วในตอนเช้าของปัสสาวะความเข้มข้นของโปรตีนไม่เกิน 0.002 g / l และในแต่ละวัน ปัสสาวะความเข้มข้นของโปรตีนไม่เกิน 50-150 มก. ของโปรตีน

ที่มา:

• การตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ

ปัสสาวะเป็นผลจากการเผาผลาญของมนุษย์ มันถูกสร้างขึ้นในระหว่างการกรองเลือดในไตซึ่งเป็นสาเหตุที่องค์ประกอบของปัสสาวะให้คำอธิบายที่ชัดเจนเกี่ยวกับสถานะของร่างกายมนุษย์

ปัสสาวะเป็นสารละลายที่ซับซ้อนของสารประกอบมากกว่า 150 ชนิด สารเฉพาะบางอย่าง เช่น อะซิโตน กรดน้ำดี โปรตีน กลูโคส อาจมีอยู่ในโรคบางชนิดเท่านั้น

เพื่อควบคุมสุขภาพของมนุษย์ ก่อนอื่น จำเป็นต้องกำหนดปริมาณของปัสสาวะ บรรทัดฐานคือการก่อตัวของปัสสาวะ 1-1.8 ลิตรต่อวัน เมื่อขับปัสสาวะมากกว่า 2 ลิตร อาจเป็นสัญญาณบ่งชี้ถึงการหยุดชะงักในการทำงานของไต เบาหวาน และโรคอื่นๆ อีกจำนวนหนึ่ง หากปัสสาวะน้อยกว่า 0.5 ลิตรต่อวัน แสดงว่ามีการอุดตันของท่อไตหรือกระเพาะปัสสาวะ

สีปัสสาวะ

สีของปัสสาวะที่ขับออกมานั้นขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย ดังนั้นจึงอาจแตกต่างกันไป ตั้งแต่สีเหลืองอ่อนไปจนถึงสีส้ม การปรากฏตัวของเฉดสีบางอย่างอาจได้รับผลกระทบจากอาหารบางชนิดรวมถึงยาที่บุคคลใช้

หลังจากรับประทานยาแล้ว ปัสสาวะอาจเปื้อนและกลายเป็นสีแดง หากบุคคลมีการเคลื่อนไหวอย่างแข็งขันในขณะที่ปล่อยเหงื่อออกจำนวนมากปัสสาวะจะมีสีเหลืองเข้มเช่นเมื่อทานยาเช่น Nitroxoline หรือ Biomycin

หากบุคคลใดไม่ได้รับประทานอาหารและยาที่มีสี แต่สีของปัสสาวะของเขาแตกต่างจากปกติ อาจสงสัยว่ามีโรคอยู่ในร่างกาย ตัวอย่างเช่น ในโรคของตับ ปัสสาวะจะมีสีเหลืองเข้มหรือสีเขียว

การปรากฏตัวของเลือดในปัสสาวะที่ขับออกมาแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่ามีนิ่วในไตหรือมีเลือดออกในไตหากสังเกตความเจ็บปวด

หากปัสสาวะลำบาก อาจบ่งบอกถึงกระบวนการอักเสบที่เกิดจากการติดเชื้อในกระเพาะปัสสาวะ แต่ปัสสาวะสกปรกและมีเมฆมากบ่งชี้ว่าเป็นโรคไตอย่างรุนแรง

โปรตีนในปัสสาวะ

ไม่มีโปรตีนในเลือดของบุคคลหรือในปริมาณที่น้อยจนไม่สามารถระบุได้โดยการทดสอบในห้องปฏิบัติการ หากตรวจพบโปรตีนในปัสสาวะ จำเป็นต้องทำการทดสอบซ้ำ เนื่องจากอาจมีอยู่เมื่อคนตื่นนอนตอนเช้า เช่นเดียวกับหลังจากออกกำลังกายอย่างหนักหรือออกกำลังกายในนักกีฬา

การตรวจสอบด้วยสายตาว่าโปรตีนมีอยู่ในปัสสาวะหรือไม่นั้นเป็นไปไม่ได้ 100% เราสามารถเดาได้เมื่อมีเกล็ดสีขาวจำนวนมากในปัสสาวะ

หากตรวจพบโปรตีนในปัสสาวะซ้ำ ๆ แสดงว่ามีโรคไตบางชนิด กระบวนการอักเสบที่เกิดขึ้นในนั้นกระตุ้นให้ปริมาณโปรตีนเพิ่มขึ้นเล็กน้อย หากขับออกทางปัสสาวะมากกว่า 2 กรัม นี่เป็นสัญญาณเตือน

pyelonephritis เป็นโรคที่เกิดจากการอักเสบที่ส่งผลต่อกระดูกเชิงกรานของไต calyces และ parenchyma ในกรณีส่วนใหญ่ การอักเสบเกิดจากการติดเชื้อแบคทีเรีย การฟื้นตัวอย่างสมบูรณ์ทำได้เฉพาะกับการวินิจฉัยที่ทันท่วงทีเท่านั้น ดังนั้นเมื่อมีอาการปรากฏขึ้น จำเป็นต้องตรวจอย่างละเอียดถี่ถ้วน

พบโปรตีนจำนวนเล็กน้อยในปัสสาวะประจำวันของบุคคลที่มีสุขภาพดี อย่างไรก็ตาม ไม่สามารถตรวจพบความเข้มข้นขนาดเล็กดังกล่าวได้โดยใช้วิธีการวิจัยแบบเดิม การขับโปรตีนจำนวนมากออกไปซึ่งการทดสอบคุณภาพตามปกติสำหรับโปรตีนในปัสสาวะกลายเป็นผลบวกเรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะ มีโปรตีนในไต (จริง) และไต (เท็จ) นอกไต ในโปรตีนในไตโปรตีนจะเข้าสู่ปัสสาวะโดยตรงจากเลือดเนื่องจากการกรองที่เพิ่มขึ้นโดย glomeruli ของไตหรือการลดลงของ reabsorption ของท่อ

โปรตีนในไต (จริง) ของไต

โปรตีนในไต (จริง) ของไตนั้นมีประโยชน์และเป็นสารอินทรีย์ ในบรรดาโปรตีนในไตที่ทำงานได้มักพบประเภทต่อไปนี้:

โปรตีนในปัสสาวะทางสรีรวิทยาของทารกแรกเกิดซึ่งจะหายไปในวันที่ 4 - 10 หลังคลอดและในทารกที่คลอดก่อนกำหนดเพียงเล็กน้อยในภายหลัง
- อัลบูมินูเรียมีพยาธิสภาพซึ่งเป็นเรื่องปกติสำหรับเด็กอายุ 7-18 ปีและปรากฏเฉพาะในตำแหน่งตั้งตรงของร่างกาย
- อัลบูมินูเรียชั่วคราว (จังหวะ) ซึ่งอาจเกิดจากโรคต่าง ๆ ของระบบย่อยอาหาร, โรคโลหิตจางรุนแรง, แผลไฟไหม้, การบาดเจ็บหรือปัจจัยทางสรีรวิทยา: การออกแรงอย่างหนัก, ภาวะอุณหภูมิต่ำ, อารมณ์รุนแรง, ความอุดมสมบูรณ์, อาหารที่อุดมด้วยโปรตีน ฯลฯ

โปรตีนในปัสสาวะอินทรีย์ (ไต) สังเกตได้เนื่องจากการผ่านโปรตีนจากเลือดผ่านบริเวณที่เสียหายของ endothelium ของ glomeruli ของไตในโรคไต ความดันโลหิตสูง, ขาดออกซิเจน), ผลกระทบทางโภชนาการและเป็นพิษ (รวมถึงยา) ที่ผนังของเส้นเลือดฝอยไต

โปรตีนในปัสสาวะจากภายนอก (เท็จ)

โปรตีนในปัสสาวะนอกไต (เท็จ) ซึ่งแหล่งที่มาของโปรตีนในปัสสาวะเป็นส่วนผสมของเม็ดเลือดขาว, เม็ดเลือดแดง, แบคทีเรีย, เซลล์ปัสสาวะ พบในโรคระบบทางเดินปัสสาวะ (urolithiasis, วัณโรคไต, เนื้องอกของไตและทางเดินปัสสาวะ, ฯลฯ )

การหาโปรตีนในปัสสาวะ

วิธีการเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณส่วนใหญ่ในการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะนั้นขึ้นอยู่กับการแข็งตัวของเลือดในปริมาตรของปัสสาวะหรือที่ส่วนต่อประสานของตัวกลาง (ปัสสาวะและกรด)

ในบรรดาวิธีการเชิงคุณภาพสำหรับกำหนดเบดก้าในปัสสาวะนั้น การทดสอบแบบรวมศูนย์ด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิกและการทดสอบวงแหวนเฮลเลอร์นั้นใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุด

ตัวอย่างมาตรฐานที่มีกรดซัลฟาซาลิไซลิกดำเนินการดังนี้ เทปัสสาวะที่กรองแล้ว 3 มล. ลงใน 2 หลอด หนึ่งในนั้นเพิ่ม 6-8 หยดของสารละลาย 20% ของกรดซัลฟาซาลิไซลิก เปรียบเทียบหลอดทั้งสองกับพื้นหลังสีเข้ม ความขุ่นของปัสสาวะในหลอดทดลองที่มีกรดซัลฟาซาลิไซลิกบ่งชี้ว่ามีโปรตีนอยู่ ก่อนการศึกษา จำเป็นต้องตรวจสอบปฏิกิริยาของปัสสาวะ และหากเป็นด่าง ให้ทำกรดด้วยสารละลายกรดอะซิติก 10% 2-3 หยด

การทดสอบ Geller ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าเมื่อมีโปรตีนในปัสสาวะที่ขอบของกรดไนตริกและปัสสาวะจะจับตัวเป็นก้อนและมีวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้น 1-2 มล. ของสารละลายกรดไนตริก 30% ถูกเทลงในหลอดทดลองและปัสสาวะที่กรองแล้วในปริมาณที่เท่ากันทุกประการจะถูกจัดชั้นอย่างระมัดระวังตามผนังของหลอดทดลอง การปรากฏตัวของวงแหวนสีขาวที่ส่วนติดต่อระหว่างของเหลวสองชนิดบ่งชี้ว่ามีโปรตีนในปัสสาวะ ควรจำไว้ว่าบางครั้งวงแหวนสีขาวจะก่อตัวขึ้นเมื่อมีกรดยูริกในปริมาณมาก แต่ต่างจากวงแหวนโปรตีนที่ปรากฏขึ้นเหนือขอบเขตระหว่างของเหลวสองชนิดเล็กน้อยและละลายเมื่อถูกความร้อน [Pletneva N.G., 1987]

วิธีการเชิงปริมาณที่ใช้บ่อยที่สุดคือ:

1) วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov แบบครบวงจรซึ่งอิงตามการทดสอบ Heller ring
2) วิธี photoelectrocolorimetric สำหรับการกำหนดปริมาณของโปรตีนในปัสสาวะโดยความขุ่นที่เกิดขึ้นจากการเติมกรดซัลฟาซาลิไซลิก
3) วิธีไบยูเรต

การตรวจจับโปรตีนในปัสสาวะโดยวิธีเร่งแบบง่ายนั้นดำเนินการโดยวิธีคัลเลอริเมตริกโดยใช้กระดาษบ่งชี้ซึ่งผลิตโดย Lachema (สโลวาเกีย), Albuphan, Ames (อังกฤษ), Albustix, Boehringer (เยอรมนี), Comburtest เป็นต้น วิธีการประกอบด้วย จุ่มแถบกระดาษพิเศษที่ชุบด้วย tetrabromophenol blue และ citrate buffer ลงในปัสสาวะ ซึ่งจะเปลี่ยนสีจากสีเหลืองเป็นสีน้ำเงินขึ้นอยู่กับปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ ในเบื้องต้น ความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะทดสอบจะถูกกำหนดโดยใช้มาตราส่วนมาตรฐาน เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ถูกต้อง ต้องเป็นไปตามเงื่อนไขต่อไปนี้ pH ของปัสสาวะควรอยู่ในช่วง 3.0-3.5; ปัสสาวะที่เป็นด่างมากเกินไป (pH 6.5) จะให้ผลบวกที่ผิดพลาด และปัสสาวะที่เป็นกรดเกินไป (pH 3.0) จะให้ผลลบที่ผิดพลาด

กระดาษไม่ควรสัมผัสกับปัสสาวะทดสอบนานกว่าที่ระบุไว้ในคำแนะนำ มิฉะนั้น การทดสอบจะทำให้เกิดปฏิกิริยาบวกที่ผิดพลาด หลังถูกสังเกตเมื่อมีเมือกจำนวนมากในปัสสาวะ ความไวของกระดาษประเภทต่างๆและชุดกระดาษอาจแตกต่างกัน ดังนั้นการประเมินปริมาณโปรตีนในปัสสาวะด้วยวิธีนี้จึงควรได้รับการปฏิบัติด้วยความระมัดระวัง การกำหนดปริมาณในปัสสาวะทุกวันโดยใช้กระดาษบ่งชี้เป็นไปไม่ได้ [Pletneva N.G., 1987]

คำจำกัดความของโปรตีนในปัสสาวะทุกวัน

มีหลายวิธีในการกำหนดปริมาณโปรตีนที่ขับออกทางปัสสาวะต่อวัน วิธีที่ง่ายที่สุดคือวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov

ระเบียบวิธีปัสสาวะผสมอย่างทั่วถึง 5-10 มล. ลงในหลอดทดลองทุกวันและเติมสารละลายกรดไนตริก 30% อย่างระมัดระวังตามผนัง เมื่อมีโปรตีนในปัสสาวะในปริมาณ 0.033% (เช่น 33 มก. ต่อปัสสาวะ 1 ลิตร) วงแหวนสีขาวบาง ๆ แต่มองเห็นได้ชัดเจนจะปรากฏขึ้นหลังจากผ่านไป 2-3 นาที ที่ความเข้มข้นต่ำกว่า การทดสอบจะเป็นลบ ด้วยปริมาณโปรตีนในปัสสาวะที่สูงขึ้น ปริมาณจะถูกกำหนดโดยการเจือจางปัสสาวะซ้ำๆ ด้วยน้ำกลั่นจนกว่าวงแหวนจะหยุดก่อตัว ในหลอดทดลองสุดท้ายที่ยังคงมองเห็นวงแหวน ความเข้มข้นของโปรตีนจะเท่ากับ 0.033% คูณ 0.033 ด้วยระดับการเจือจางของปัสสาวะ กำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะที่ไม่เจือปน 1 ลิตรในหน่วยกรัม จากนั้นคำนวณปริมาณโปรตีนในปัสสาวะทุกวันโดยสูตร:

K \u003d (x V) / 1,000

โดยที่ K คือปริมาณโปรตีนในปัสสาวะทุกวัน (g); x คือปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ 1 ลิตร (g); V คือปริมาณปัสสาวะที่ขับออกมาต่อวัน (มล.)

โดยปกติ 27 ถึง 150 มก. (เฉลี่ย 40-80 มก.) ของโปรตีนจะถูกขับออกทางปัสสาวะในระหว่างวัน

การทดสอบนี้ช่วยให้คุณกำหนดโปรตีนที่ดี (อัลบูมิน) ในปัสสาวะเท่านั้น วิธีการเชิงปริมาณที่แม่นยำยิ่งขึ้น (วิธีเจลดาห์ลสี ฯลฯ) ค่อนข้างซับซ้อนและต้องใช้อุปกรณ์พิเศษ

ในโปรตีนในไตโปรตีนอัลบูมินไม่เพียงถูกขับออกทางปัสสาวะ แต่ยังรวมถึงโปรตีนประเภทอื่นด้วย โปรตีนแกรมปกติ (ตาม Seitz et al., 1953) มีเปอร์เซ็นต์ดังต่อไปนี้: อัลบูมิน - 20%, α 1 -โกลบูลิน - 12%, α 2 -โกลบูลิน - 17%, γ-โกลบูลิน - 43% และ β-โกลบูลิน - 8% . อัตราส่วนของอัลบูมินต่อโกลบูลินเปลี่ยนแปลงตามโรคไตต่างๆ เช่น อัตราส่วนเชิงปริมาณระหว่างเศษส่วนของโปรตีนถูกทำลาย

วิธีการทั่วไปในการแยกส่วน uroproteins มีดังต่อไปนี้: การแยกเกลือออกด้วยเกลือที่เป็นกลาง, การแยกส่วนอิเล็กโตรโฟรีติก, วิธีการทางภูมิคุ้มกัน (ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันในแนวรัศมีตาม Mancini, การวิเคราะห์ทางอิมมูโนอิเล็กโทรโฟเรติก, การตกตะกอนอิมมูโนอิเล็กโทรโฟรีซิส), โครมาโตกราฟี, การกรองเจล และการหมุนเหวี่ยงด้วยคลื่นความถี่สูง

ในการเชื่อมต่อกับการแนะนำวิธีการแยกส่วน uroproteins ตามการศึกษาการเคลื่อนที่ของอิเล็กโตรโฟเรติกความแปรปรวนของน้ำหนักโมเลกุลขนาดและรูปร่างของโมเลกุล uroprotein ทำให้สามารถแยกประเภทของโปรตีนในปัสสาวะที่มีลักษณะเฉพาะของโรคเฉพาะเพื่อศึกษาระยะห่างของ โปรตีนในพลาสมาแต่ละตัว จนถึงปัจจุบัน มีการระบุโปรตีนในพลาสมามากกว่า 40 รายการในปัสสาวะ รวมถึงโปรตีนในพลาสมา 31 รายการในปัสสาวะปกติ

โปรตีนที่เลือกได้

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา แนวคิดเรื่องการเลือกโปรตีนในปัสสาวะได้เกิดขึ้น ในปี ค.ศ. 1955 Hardwicke และ Squire ได้กำหนดแนวคิดของโปรตีนในปัสสาวะ "selective" และ "non-selective" โดยพิจารณาแล้วว่าการกรองโปรตีนในพลาสมาในปัสสาวะเป็นไปตามรูปแบบที่กำหนด ยิ่งน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนที่ขับออกทางปัสสาวะมากขึ้น การกวาดล้างที่ต่ำกว่าและความเข้มข้นในปัสสาวะที่ต่ำลง ปัสสาวะสุดท้าย โปรตีนในปัสสาวะซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบนี้เป็นแบบเฉพาะเจาะจง ตรงกันข้ามกับแบบไม่คัดเลือก ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของการบิดเบือนของรูปแบบที่ได้รับ

การตรวจหาโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลค่อนข้างมากในปัสสาวะบ่งชี้ว่าไม่มีการคัดเลือกของตัวกรองไตและความเสียหายที่เด่นชัด ในกรณีเหล่านี้ เราพูดถึงการเลือกโปรตีนในปัสสาวะต่ำ ดังนั้นในปัจจุบันนี้ การหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้วิธีการอิเล็กโตรโฟรีซิสในเจลแป้งและพอลิอะคริลาไมด์จึงแพร่หลาย จากผลของวิธีการวิจัยเหล่านี้ เราสามารถตัดสินการเลือกโปรตีนในปัสสาวะได้

ตามคำกล่าวของ V.S. Makhlina (1975) การพิจารณาที่สมเหตุสมผลที่สุดคือการกำหนดการเลือกโปรตีนในปัสสาวะโดยเปรียบเทียบการเว้นระยะห่างของโปรตีนในพลาสมาในเลือดแต่ละชนิด 6-7 ชนิด (อัลบูมิน, ทรานเฟอร์ริน, α 2 - macroglobulin, IgA, IgG, IgM) โดยใช้ความแม่นยำและ วิธีการทางภูมิคุ้มกันเชิงปริมาณเฉพาะของปฏิกิริยาของภูมิคุ้มกันในแนวรัศมีตาม Mancini การวิเคราะห์อิมมูโนอิเล็กโทรโฟเรติกและการตกตะกอนอิมมูโนอิเล็กโตรโฟรีซิส ระดับของการคัดเลือกโปรตีนในปัสสาวะถูกกำหนดโดยดัชนีการคัดเลือกซึ่งเป็นอัตราส่วนของโปรตีนเปรียบเทียบและโปรตีนอ้างอิง (อัลบูมิน)

การศึกษาช่องว่างของโปรตีนในพลาสมาแต่ละตัวช่วยให้ได้รับข้อมูลที่เชื่อถือได้เกี่ยวกับสถานะของเยื่อกรองชั้นใต้ดินของ glomeruli ของไต ความสัมพันธ์ระหว่างธรรมชาติของโปรตีนที่ถูกขับออกทางปัสสาวะและการเปลี่ยนแปลงในเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของโกลเมอรูลีนั้นเด่นชัดและคงที่มากจน uroproteinogram สามารถตัดสินการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสรีรวิทยาของไตในไตได้ โดยปกติขนาดรูพรุนเฉลี่ยของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของไตคือ 2.9-4 A ° NM ซึ่งสามารถส่งผ่านโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงถึง 10 4 (myoglobulin, กรดα 1 - ไกลโคโปรตีน, สายเบาอิมมูโนโกลบูลิน, Fc และ Fab - IgG เศษอัลบูมินและทรานเฟอร์ริน)

ด้วย glomerulonephritis, nephrotic syndrome, ขนาดรูพรุนในเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของ glomeruli เพิ่มขึ้นดังนั้นเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินจึงสามารถซึมผ่านไปยังโมเลกุลโปรตีนขนาดใหญ่และมวล (ceruloplasmin, haptoglobin, IgG, IgA เป็นต้น) ด้วยระดับความเสียหายที่รุนแรงต่อ glomeruli ของไต โมเลกุลขนาดใหญ่ของโปรตีนในพลาสมาในเลือด (α 2 -macroglobulin, IgM และ β 2 -lipoprotein) ปรากฏในปัสสาวะ

การกำหนดสเปกตรัมโปรตีนของปัสสาวะสามารถสรุปได้ว่าบางส่วนของ nephron ได้รับผลกระทบอย่างเด่นชัด สำหรับ glomerulonephritis ที่มีแผลเด่นของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของ glomerular การปรากฏตัวของโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาดใหญ่และปานกลางในปัสสาวะเป็นลักษณะเฉพาะ สำหรับ pyelonephritis ที่มีแผลเด่นของเยื่อหุ้มฐานของ tubules การไม่มีโปรตีนโมเลกุลขนาดใหญ่และการมีอยู่ของโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลปานกลางและน้ำหนักต่ำเพิ่มขึ้น

β 2 -ไมโครโกลบูลิน

นอกจากโปรตีนที่รู้จักกันดี เช่น อัลบูมิน อิมมูโนโกลบูลิน ไลโปโปรตีน ไฟบริโนเจน, ทรานเฟอร์ริน, ปัสสาวะประกอบด้วยโปรตีนไมโครโปรตีนในพลาสมา ซึ่ง ไมโครโกลบูลิน β 2 ที่ค้นพบโดยแบร์กการ์ดและแบร์นในปี 2511 มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำ (น้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์เท่ากับ 1800) จึงสามารถไหลผ่านไตโกลเมอรูลีได้อย่างอิสระ และดูดกลับเข้าไปในท่อใกล้เคียง วิธีนี้ช่วยให้สามารถกำหนดปริมาณของ β 2 -microglobulin ในเลือดและปัสสาวะเพื่อตรวจสอบการกรองของไตและความสามารถของไตในการดูดซับโปรตีนในท่อใกล้เคียง

ความเข้มข้นของโปรตีนในเลือดและปัสสาวะถูกกำหนดโดย radioimmunoassay โดยใช้ชุดมาตรฐาน "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Sweden) เซรั่มในเลือดของคนที่มีสุขภาพดีมีค่าเฉลี่ย 1.7 มก. / ล. (ตั้งแต่ 0.6 ถึง 3 มก. / ล.) ในปัสสาวะ - เฉลี่ย 81 ไมโครกรัม / ลิตร (สูงสุด 250 ไมโครกรัม / ลิตร) β 2 -ไมโครโกลบูลิน ส่วนเกินในปัสสาวะมากกว่า 1,000 ไมโครกรัม/ลิตรเป็นปรากฏการณ์ทางพยาธิวิทยา เนื้อหาของβ 2 -microglobulin ในเลือดเพิ่มขึ้นในโรคที่มาพร้อมกับการกรองไตบกพร่องโดยเฉพาะอย่างยิ่งในไตอักเสบเฉียบพลันและเรื้อรังโรคไต polycystic ไต โรคไตโรคเบาหวานไตวายเฉียบพลัน

ความเข้มข้นของβ 2 -microglobulin ในปัสสาวะเพิ่มขึ้นพร้อมกับโรคที่มาพร้อมกับการละเมิดฟังก์ชั่นการดูดซึมซ้ำของ tubules ซึ่งนำไปสู่การขับถ่ายในปัสสาวะเพิ่มขึ้น 10-50 เท่าโดยเฉพาะอย่างยิ่งกับ pyelonephritis ไตเรื้อรัง ความล้มเหลวมึนเมาเป็นหนอง ฯลฯ เป็นลักษณะที่กระเพาะปัสสาวะอักเสบซึ่งแตกต่างจาก pyelonephritis ความเข้มข้นของ β 2 -microglobulin ในปัสสาวะจะไม่เพิ่มขึ้นซึ่งสามารถใช้ในการวินิจฉัยแยกโรคของโรคเหล่านี้ได้ อย่างไรก็ตาม เมื่อแปลผลการศึกษา ต้องคำนึงว่าอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นจะมาพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของการขับ β 2 -microglobulin ในปัสสาวะเสมอ

โมเลกุลเลือดและปัสสาวะโดยเฉลี่ย

โมเลกุลขนาดกลาง (SM) หรือที่เรียกว่าโปรตีนทอกซิน เป็นสารที่มีน้ำหนักโมเลกุล 500-5000 ดาลตัน โครงสร้างทางกายภาพของพวกเขาไม่เป็นที่รู้จัก องค์ประกอบของ SM ประกอบด้วยเปปไทด์อย่างน้อย 30 ตัว ได้แก่ ออกซิโทซิน วาโซเพรสซิน แองจิโอเทนซิน กลูคากอน ฮอร์โมนอะดรีโนคอร์ติโคโทรปิก (ACTH) เป็นต้น พบว่ามีการสะสมของ SM มากเกินไปด้วยการทำงานของไตลดลง และโปรตีนที่ผิดรูปจำนวนมากและสารเมตาโบไลต์ใน เลือด. พวกมันมีผลทางชีวภาพที่หลากหลายและเป็นพิษต่อระบบประสาท ทำให้เกิดการกดภูมิคุ้มกันรอง โลหิตจางทุติยภูมิ ยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีนและการสร้างเม็ดเลือดแดง ยับยั้งการทำงานของเอนไซม์หลายชนิด และขัดขวางขั้นตอนของกระบวนการอักเสบ

ระดับ SM ในเลือดและปัสสาวะถูกกำหนดโดยการตรวจคัดกรอง เช่นเดียวกับการวัดสเปกโตรโฟโตเมตรีในเขตรังสีอัลตราไวโอเลตที่ความยาวคลื่น 254 และ 280 มม. บนเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ DI-8B เช่นเดียวกับไดนามิกสเปกโตรโฟโตเมตรีด้วยการประมวลผลด้วยคอมพิวเตอร์ในความยาวคลื่น ช่วง 220-335 นาโนเมตรบนสเปกโตรมิเตอร์ Beckman เดียวกัน เนื้อหาของ SM ในเลือดถือเป็นบรรทัดฐานเท่ากับ 0.24 ± 0.02 arb หน่วยและในปัสสาวะ - 0.312 ± 0.09 arb หน่วย
เป็นของเสียปกติของร่างกายพวกเขามักจะถูกกำจัดออกจากมันในเวลากลางคืนโดยการกรองของไต 0.5%; 5% ของพวกเขาถูกกำจัดด้วยวิธีอื่น เศษส่วน SM ทั้งหมดได้รับการดูดกลับแบบท่อ

โปรตีนที่ไม่ใช่พลาสมา (เนื้อเยื่อ) uroproteins

นอกจากโปรตีนในพลาสมาในเลือดแล้ว ปัสสาวะอาจมีโปรตีนที่ไม่ใช่พลาสมา (เนื้อเยื่อ) ตามรายงานของ Buxbaum และ Franklin (1970) โปรตีนที่ไม่ใช่พลาสมามีสัดส่วนประมาณ 2/3 ของไบโอคอลลอยด์ในปัสสาวะทั้งหมดและสัดส่วนที่สำคัญของ uroproteins ในโปรตีนในปัสสาวะทางพยาธิวิทยา โปรตีนจากเนื้อเยื่อจะเข้าสู่ปัสสาวะโดยตรงจากไตหรืออวัยวะที่สัมพันธ์ทางกายวิภาคกับทางเดินปัสสาวะ หรือเข้าสู่กระแสเลือดจากอวัยวะและเนื้อเยื่ออื่น ๆ และจากนั้นผ่านเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของกลูเมรูไลของไตเข้าสู่ปัสสาวะ ในกรณีหลัง การขับโปรตีนเนื้อเยื่อออกในปัสสาวะเกิดขึ้นในลักษณะเดียวกับการขับโปรตีนในพลาสมาที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่างๆ องค์ประกอบของ uroproteins ที่ไม่ใช่พลาสมานั้นมีความหลากหลายอย่างมาก ในหมู่พวกเขามีไกลโคโปรตีน, ฮอร์โมน, แอนติเจน, เอนไซม์ (เอนไซม์)

ตรวจพบโปรตีนเนื้อเยื่อในปัสสาวะโดยใช้วิธีการทั่วไปของเคมีโปรตีน (ultracentrifugation, เจลโครมาโตกราฟี, อิเล็กโตรโฟรีซิสประเภทต่างๆ) ปฏิกิริยาจำเพาะต่อเอนไซม์และฮอร์โมน และวิธีการทางภูมิคุ้มกัน หลังยังช่วยให้สามารถระบุความเข้มข้นของ uroprotein ที่ไม่ใช่พลาสมาในปัสสาวะและในบางกรณีเพื่อกำหนดโครงสร้างเนื้อเยื่อที่กลายเป็นแหล่งที่มาของการปรากฏตัวของมัน วิธีการหลักในการตรวจหาโปรตีนที่ไม่ใช่พลาสมาในปัสสาวะคือการวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันด้วย antiserum ที่ได้จากการสร้างภูมิคุ้มกันให้กับสัตว์ทดลองด้วยปัสสาวะของมนุษย์ และต่อมาหมด (ดูดซับ) โดยโปรตีนในพลาสมาในเลือด

ตรวจเอ็นไซม์ในเลือดและปัสสาวะ

ในกระบวนการทางพยาธิวิทยาจะสังเกตเห็นการรบกวนอย่างลึกซึ้งในกิจกรรมที่สำคัญของเซลล์พร้อมกับการปล่อยเอนไซม์ภายในเซลล์สู่สื่อของเหลวของร่างกาย Enzymodiagnostics ขึ้นอยู่กับการกำหนดเอนไซม์จำนวนหนึ่งที่ปล่อยออกมาจากเซลล์ของอวัยวะที่ได้รับผลกระทบและไม่ใช่ลักษณะของซีรั่มในเลือด
การศึกษาของเนฟรอนของมนุษย์และสัตว์แสดงให้เห็นว่าในแต่ละส่วนมีความแตกต่างของเอนไซม์สูง ซึ่งสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับหน้าที่ที่แต่ละแผนกดำเนินการ glomeruli ของไตมีเอ็นไซม์หลายชนิดค่อนข้างน้อย

เซลล์ของท่อไตโดยเฉพาะเซลล์ที่อยู่ใกล้เคียงมีเอ็นไซม์ในปริมาณสูงสุด กิจกรรมระดับสูงของพวกมันถูกสังเกตในลูปของ Henle ท่อตรงและท่อรวบรวม การเปลี่ยนแปลงในการทำงานของเอนไซม์แต่ละตัวในโรคไตต่างๆ ขึ้นอยู่กับลักษณะ ความรุนแรง และการแปลเป็นภาษาท้องถิ่นของกระบวนการ พวกมันถูกสังเกตก่อนการปรากฏตัวของการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาในไต เนื่องจากเนื้อหาของเอ็นไซม์ต่างๆ ถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นอย่างชัดเจนใน nephron การกำหนดเอนไซม์หนึ่งหรืออย่างอื่นในปัสสาวะสามารถนำไปสู่การวินิจฉัยเฉพาะที่ของกระบวนการทางพยาธิวิทยาในไต (glomeruli, tubules, cortex หรือ medulla) การวินิจฉัยแยกโรคของ โรคไตและการกำหนดการเปลี่ยนแปลง (การลดทอนและการกำเริบ) ของกระบวนการในเนื้อเยื่อของไต

สำหรับการวินิจฉัยแยกโรคของระบบทางเดินปัสสาวะ จะใช้การกำหนดกิจกรรมในเลือดและปัสสาวะของเอนไซม์ต่อไปนี้: lactate dehydrogenase (LDH), leucine aminopeptidase (LAP), กรดฟอสฟาเตส (AP), อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (AP) , β-glucuronidase, glutamine-oxaloacetic transaminase (GST) , aldolase, transamidinase เป็นต้น กิจกรรมของเอนไซม์ในเลือดและปัสสาวะถูกกำหนดโดยใช้วิธีทางชีวเคมี

เอนไซม์ในโรคไตมีความเด่นชัดและสม่ำเสมอกว่าเอนไซม์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในระยะเฉียบพลันของโรค (pyelonephritis เฉียบพลัน, การบาดเจ็บ, การสลายตัวของเนื้องอก, ภาวะไตวาย ฯลฯ ) ในโรคเหล่านี้พบกิจกรรมสูงของ transamidinase, LDH, alkaline phosphatase และ CP, hyaluronidase, LAP รวมถึงเอนไซม์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงเช่น GST, catalase [Polyantseva LR, 1972]

การคัดเลือกเอ็นไซม์ในเนฟรอนแบบเฉพาะเจาะจงเมื่อตรวจพบ LAP และอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสในปัสสาวะทำให้เราพูดได้อย่างมั่นใจเกี่ยวกับโรคไตเฉียบพลันและเรื้อรัง (ภาวะไตวายเฉียบพลัน, เนื้อร้ายท่อไต, โรคไตวายเรื้อรัง) [Shemetov V.D., 1968] จากข้อมูลของ A.A. Karelin และ L.R. Polyantseva (1965) พบว่า transamidinase พบได้ในสองอวัยวะเท่านั้น - ไตและตับอ่อน เป็นเอ็นไซม์ไมโตคอนเดรียของไตและมักไม่อยู่ในเลือดและปัสสาวะ สำหรับโรคต่างๆ ของไต ทรานส์อะมิดิเนสจะปรากฏในเลือดและปัสสาวะ และตับอ่อนเสียหาย - เฉพาะในเลือดเท่านั้น

การทดสอบความแตกต่างในการวินิจฉัย glomerulonephritis และ pyelonephritis Krotkiewski (1963) พิจารณาการทำงานของอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสในปัสสาวะ ซึ่งการเพิ่มขึ้นนี้เป็นเรื่องปกติสำหรับ pyelonephritis และ glomerulosclerosis ของเบาหวานมากกว่าโรคไตอักเสบเฉียบพลันและเรื้อรัง การเพิ่มขึ้นของ amylasemia แบบไดนามิกพร้อมกับการลดลงของ amylasuria พร้อมกันอาจบ่งบอกถึงภาวะไตวายและการย่นของไต LAP เป็นสิ่งสำคัญที่สุดสำหรับการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาใน glomeruli และ tubules ของไตที่ซับซ้อนเนื่องจากเนื้อหาในส่วนเหล่านี้ของ nephron นั้นสูงกว่า [Shepotinovsky V.P. และคณะ, 1980]. สำหรับการวินิจฉัยโรคไตอักเสบลูปัส แนะนำให้ใช้การกำหนด β-glucuronidase และ CF [Privalenko M.N. et al., 1974.

เมื่อประเมินบทบาทของเอนไซม์ในการวินิจฉัยโรคไต ควรคำนึงถึงบทบัญญัติต่อไปนี้ด้วย เอนไซม์โดยธรรมชาติของโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาดเล็กสามารถผ่านโกลเมอรูไลที่ไม่บุบสลายซึ่งเป็นตัวกำหนดสิ่งที่เรียกว่าเอ็นไซม์ทางสรีรวิทยา ในบรรดาเอนไซม์เหล่านี้ α-amylase (น้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์ 45,000) และ uropepsin (น้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์ 38,000) จะถูกตรวจพบในปัสสาวะอย่างต่อเนื่อง

นอกจากเอ็นไซม์โมเลกุลต่ำในปัสสาวะของบุคคลที่มีสุขภาพดีแล้ว เอ็นไซม์อื่นๆ ยังสามารถพบได้ในระดับความเข้มข้นเล็กน้อย: LDH, แอสปาเทตและอะลานีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, อัลคาไลน์ฟอสฟาเตสและซีพี, มอลเทส, อัลโดเลส, ไลเปส, โปรตีเอสและเปปติเดสต่างๆ, ซัลฟาเทส, คาตาเลส, ไรโบนิวคลีเอส, เปอร์ออกซิเดส

เอนไซม์โมเลกุลสูงที่มีน้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์มากกว่า 70,000-100,000 ตาม Richterich (1958) และ Hess (1962) สามารถเข้าสู่ปัสสาวะได้ก็ต่อเมื่อการซึมผ่านของตัวกรองไตบกพร่อง เนื้อหาปกติของเอนไซม์ในปัสสาวะไม่อนุญาตให้แยกกระบวนการทางพยาธิวิทยาในไตด้วยการอุดท่อไต ด้วย epimuria การปลดปล่อยเอนไซม์เป็นไปได้ไม่เพียง แต่จากไตเท่านั้น แต่ยังมาจากอวัยวะอื่น ๆ ของเนื้อเยื่อเซลล์ของเยื่อเมือกของทางเดินปัสสาวะต่อมลูกหมากรวมถึงองค์ประกอบของปัสสาวะที่มีปัสสาวะเป็นเลือดหรือเม็ดเลือดขาว

เอ็นไซม์ส่วนใหญ่ไม่จำเพาะต่อไต ดังนั้นจึงเป็นการยากที่จะระบุได้ว่าเอ็นไซม์ที่พบในปัสสาวะของคนที่มีสุขภาพดีและคนป่วยมาจากไหน อย่างไรก็ตาม ระดับของเอ็นไซมูเรีย แม้กระทั่งสำหรับเอ็นไซม์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงในความเสียหายของไต ก็สูงกว่าปกติหรือที่พบในโรคของอวัยวะอื่นๆ สามารถให้ข้อมูลที่มีค่ามากขึ้นได้จากการศึกษาที่ครอบคลุมเกี่ยวกับพลวัตของเอนไซม์จำนวนหนึ่ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งเอนไซม์ที่จำเพาะต่ออวัยวะ เช่น ทรานสอะมิเนส

ในการแก้ปัญหาเกี่ยวกับที่มาของไตของเอนไซม์ในปัสสาวะ การศึกษาไอโซไซม์ช่วยในการระบุเศษส่วนตามแบบฉบับของอวัยวะที่กำลังศึกษาอยู่ ไอโซไซม์เป็นเอ็นไซม์ที่มีปฏิกิริยาไอโซเจนิก (กระตุ้นปฏิกิริยาเดียวกัน) แต่ต่างกันในโครงสร้างทางเคมีและคุณสมบัติอื่นๆ เนื้อเยื่อแต่ละส่วนมีสเปกตรัมไอโซไซม์ของตัวเอง วิธีการที่มีค่าสำหรับการแยกไอโซไซม์คืออิเล็กโตรโฟรีซิสในเจลแป้งและโพลีอะคริลาไมด์ เช่นเดียวกับโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน

โปรตีนเบนซ์โจนส์

ด้วย multiple myeloma และ macroglobulinemia ของ Waldenström โปรตีน Bence-Jones จะพบในปัสสาวะ วิธีการตรวจหาโปรตีนนี้ในปัสสาวะขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาการตกตะกอนด้วยอุณหภูมิ วิธีการที่ใช้ก่อนหน้านี้ซึ่งประเมินการละลายของโปรตีนนี้ที่อุณหภูมิ 100 ° C และการตกตะกอนซ้ำเมื่อเย็นลงในภายหลังนั้นไม่น่าเชื่อถือ เนื่องจากร่างกายโปรตีนของ Bence-Jones ไม่ใช่ทั้งหมดมีคุณสมบัติที่เหมาะสม

การตรวจจับพาราโปรตีนนี้เชื่อถือได้มากขึ้นโดยการตกตะกอนที่อุณหภูมิ 40-60 °C อย่างไรก็ตาม แม้ภายใต้สภาวะเหล่านี้ ฝนอาจไม่เกิดขึ้นในสภาพที่เป็นกรดมากเกินไป (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) ปัสสาวะที่มี OPM ต่ำและความเข้มข้นของโปรตีน Bence-Jones ต่ำ เงื่อนไขที่ดีที่สุดสำหรับการตกตะกอนนั้นมาจากวิธีการที่เสนอโดย Patnem: ปัสสาวะที่กรองแล้ว 4 มล. ผสมกับบัฟเฟอร์อะซิเตท 2 M 1 มล. pH 4.9 และให้ความร้อนเป็นเวลา 15 นาทีในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 56 ° C ในการปรากฏตัวของโปรตีน Bence-Jones การตกตะกอนเด่นชัดจะปรากฏขึ้นในช่วง 2 นาทีแรก

ที่ความเข้มข้นของโปรตีน Bence-Jones น้อยกว่า 3 g / l การทดสอบอาจเป็นลบ แต่ในทางปฏิบัติสิ่งนี้หายากมากเนื่องจากความเข้มข้นในปัสสาวะมักจะมีความสำคัญมากกว่า ไม่สามารถพึ่งพาตัวอย่างต้มได้อย่างเต็มที่ ด้วยความมั่นใจอย่างสมบูรณ์ มันสามารถตรวจพบในปัสสาวะโดยวิธีอิมมูโนอิเล็กโทรโฟเรติกโดยใช้ซีรั่มเฉพาะเจาะจงกับอิมมูโนโกลบูลินที่หนักและเบา