Šlapimo baltymas (proteinurija). Baltymų nustatymas šlapime

Klinikai svarbus ir kokybinis, ir kiekybinis baltymo nustatymas šlapime.

Kokybiniai baltymo šlapime nustatymo tyrimai
Buvo pasiūlyta daugiau nei 100 reakcijų, skirtų kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti. Dauguma jų yra pagrįsti baltymų nusodinimu fizinėmis (kaitinimo) arba cheminėmis priemonėmis. Baltymų buvimą įrodo drumstumas.

Taip pat domina kolorimetriniai sausi mėginiai.

Toliau bus aprašyti tik svarbiausi praktikos pavyzdžiai.

Mėginys su sulfosalicilo rūgštimi. Į kelis mililitrus šlapimo įlašinkite 2-4 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo. Esant teigiamai reakcijai, atsiranda drumstumas. Rezultatas žymimas terminais: opalescencija, silpnai teigiama, teigiama arba stipriai teigiama reakcija. Sulfosalicilo rūgšties testas yra vienas iš jautriausių baltymų kiekio šlapime nustatymo testų. Jis nustato net nereikšmingiausią patologinį baltymų padidėjimą šlapime. Dėl paprastos technikos šis testas buvo plačiai pritaikytas.

Aseptolio testas. Aseptolis yra sulfosalicilo rūgšties pakaitalas. Jis gali būti paruoštas iš bet kurioje laboratorijoje prieinamų medžiagų (fenolio ir sieros rūgšties). Kaip reagentas naudojamas 20% aseptolio tirpalas. Tyrimas atliekamas taip: mėgintuvėlyje, kuriame yra 2-3 ml šlapimo, į dugną įpilama 0,5-1 ml aseptolio tirpalo. Jei tarp dviejų skysčių susiformuoja baltas koaguliuoto baltymo žiedas, testas yra teigiamas.

Gelerio testas. Po kelis mililitrus šlapimo įpilkite 1-2 ml 30% azoto rūgšties (sp. masė 1,20). Jei abiejų skysčių sąsajoje atsiranda baltas žiedas, mėginys yra teigiamas. Reakcija tampa teigiama, jei baltymo yra daugiau nei 3,3 mg%. Kartais baltas žiedas gaunamas esant dideliam uratų kiekiui. Skirtingai nuo baltymų žiedo, uratų žiedas neatsiranda ties abiejų skysčių riba, o šiek tiek aukščiau. Larionova siūlo vietoj 30 % azoto rūgšties kaip reagentą naudoti 1 % azoto rūgšties tirpalą sočiame valgomosios druskos tirpale; tai leidžia labai sutaupyti azoto rūgšties.

Bandymas su geležies kaliu ir acto rūgštimi. Ši reakcija leidžia atskirti serumo baltymus nuo nukleoalbuminų.

Į du mėgintuvėlius pilamas vienodas šlapimo kiekis. Į vieną iš jų įlašinami keli lašai 30% acto rūgšties tirpalo. Jei, palyginti su kontroliniu mėgintuvėliu, yra miglotas, šlapime yra nukleoalbumino. Jei drumstumas neatsiranda, abiejų mėgintuvėlių turinys sumaišomas ir vėl padalijamas į dvi dalis. Į vieną iš dviejų mėgintuvėlių įlašinkite kelis lašus (perteklius teigiamą mėginį gali paversti neigiamu) 10 % geltonosios kraujo druskos (kalio fericianido) tirpalo. Esant išrūgų baltymams, susidaro drumstumas.

Koncentruotame šlapime, kuriame yra daug šlapimo rūgšties ir uratų, reikia atlikti tyrimą su kalio fericianidu ir acto rūgštimi, prieš tai atskiedus šlapimą (2–3 kartus) vandeniu. Priešingu atveju gali atsirasti drumstumas, kurį sukelia nusistovėjusi šlapimo rūgštis.

Tai ypač svarbu tiriant kūdikių šlapimą, kuriame yra daug šlapimo rūgšties ir uratų.

Iš kitų kokybinių baltymų šlapime tyrimų, pagrįstų baltymų nusodinimu, buvo naudojami: virimo testas, Esbacho, Purdy, Robertso, Almeno, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann testai. -Suzanne, Jollet, Exton, Kamlet, Kobuladze, Liliendal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya ir kt.

Gaminant kokybiškus šlapimo baltymų mėginius, pagrįstus baltymų nusodinimu, reikia laikytis šių bendrųjų taisyklių, kurių pažeidimas lemia reikšmingas analizės klaidas.

1. Tiriamas šlapimas turi būti rūgštus. Šarminės reakcijos metu šlapimas šiek tiek parūgštinamas acto rūgštimi. Gaminant šarminį šlapimo mėginį, kai rūgštis naudojama kaip reagentas, rūgštis gali neutralizuotis ir gauti neigiamą rezultatą, jei jis yra teigiamas. Tai ypač pasakytina apie sulfosalicilo rūgšties mėginį, nes rūgštis pridedama labai mažais kiekiais ir gali būti lengvai neutralizuojama.

2. Tiriamas šlapimas turi būti skaidrus.

3. Baltymų kiekiui šlapime nustatyti mėginiai visada turi būti imami dviejuose mėgintuvėliuose, iš kurių vienas naudojamas kaip kontrolė. Be kontrolinio vamzdelio reakcijose galite nepastebėti nedidelio drumstumo.

4. Įdėtos rūgšties kiekis mėginiuose neturi būti per didelis. Didelis rūgšties kiekis gali sukelti tirpių rūgštinių albuminų susidarymą ir teigiamo mėginio transformaciją į neigiamą.

Dėl paprastos technikos, kolorimetriniai sausi mėginiai nusipelno didelio dėmesio. Šie testai naudoja baltymo įtaką buferinio tirpalo indikatoriaus spalvai (vadinamoji indikatoriaus baltymo klaida). Filtravimo popieriaus juostelė, impregnuota rūgštiniu citratiniu buferiu ir bromfenolio mėlynu kaip indikatoriumi, trumpam panardinama į šlapimą. Jei gaunama mėlynai žalia spalva, testas yra teigiamas. Lyginant spalvų intensyvumą su spalvoto popieriaus standartais, taip pat galima padaryti preliminarias ir kiekybines išvadas. Indikatoriniai popieriai parduodami atitinkamų spalvų standartų pluoštais, panašūs į universalius indikatorinius popierius.

Baltymų kiekio šlapime kiekybinio nustatymo metodai
Buvo pasiūlyta daug metodų kiekybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti. Tikslūs kiekybiniai baltymų nustatymo metodai biologinėje medžiagoje nebuvo plačiai pritaikyti nustatant baltymą šlapime dėl sudėtingų ir daug laiko reikalaujančių metodų. Plačiai naudojami tūriniai metodai, ypač Esbacho metodas. Jie labai paprasti, bet, deja, nelabai tikslūs. Brandberg-Stolnikov grupės metodai taip pat yra patogūs klinikai, duodantys tikslesnius rezultatus nei tūriniai metodai, naudojant gana paprastą techniką. Esant fotometrui ar nefelometrui, patogūs ir nefelometriniai metodai.

Esbacho metodas. 1874 m. jį pasiūlė Paryžiaus gydytojas Esbachas. Šlapimas ir reagentas pilamas į specialų mėgintuvėlį (Esbacho albuminometrą). Mėgintuvėlis užkemšamas guminiu kamščiu, gerai išmaišomas (neplakant!) ir paliekamas vertikalioje padėtyje iki kitos dienos. Jie praneša apie padalijimą, kurį pasiekia baltymų nuosėdų stulpelis. Rastas skaičius rodo baltymų kiekį. Esbacho metodu labai svarbu, kad šlapimas būtų rūgštus. Šarminis šlapimas gali neutralizuoti rūgštines reagento sudedamąsias dalis ir užkirsti kelią baltymų nusodinimui.

Metodo privalumai: jis paprastas ir patogus praktiškai.

Trūkumai: metodas netikslus, rezultatas gaunamas po 24 - 48 val.

Brandbergo-Stolnikovo metodas. Jis pagrįstas kokybiniu Geller testu. Helerio testą galima naudoti kiekybiniam įvertinimui, nes jis duoda teigiamą rezultatą, viršijantį 3,3 mg% baltymų. Tai yra ribinė baltymų koncentracija, žemiau kurios mėginys tampa neigiamas.

Erlicho ir Althauseno modifikacija. Sovietų mokslininkai S. L. Erlikhas ir A. Ya. Althausenas modifikavo Brandbergo-Stolnikovo metodą, nurodydami galimybę supaprastinti tyrimą ir sutaupyti laiko jį gaminant.

Pirmasis supaprastinimas susijęs su žiedo atsiradimo laiku. Tikslus jo atsiradimo laikas nustatomas, nebūtinai laikantis 2 ir 3 minučių.

Antrasis supaprastinimas leidžia nustatyti, koks turi būti skiedimas. Autoriai įrodė, kad reikiamą praskiedimą galima apytiksliai nustatyti pagal gauto žiedo tipą. Jie išskiria filiforminius, plačius
ir kompaktiškas žiedas.

Iš nefelometrinių metodų verta paminėti Kingsberry ir Clark metodas. 2,5 ml filtruoto šlapimo supilama į mažą graduotą cilindrą, papildytą 3% vandeniniu sulfosalicilo rūgšties tirpalu iki 10 ml. Kruopščiai išmaišykite ir po 5 minučių fotometru 1 cm kiuvetėje su geltonu filtru, naudodami vandenį kaip kompensacinį skystį. Pulfricho fotometru rastas išnykimas, padaugintas iš 2,5, suteikia baltymų kiekį %o. Tuo atveju, kai ekstinkcijos indeksas yra didesnis nei 1,0, šlapimas iš anksto skiedžiamas 2 kartus, 4 kartus ar net daugiau.

Norint aiškiai suvokti su šlapimu išskiriamų baltymų kiekį, būtina nustatyti ne tik jų koncentraciją atskiroje šlapimo porcijoje, bet ir bendrą paros kiekį. Norėdami tai padaryti, 24 valandas rinkite paciento šlapimą, išmatuokite jo tūrį mililitrais ir nustatykite baltymų koncentraciją paros šlapimo porcijoje g%. Per 24 valandas su šlapimu išsiskiriančių baltymų kiekis nustatomas priklausomai nuo paros šlapimo kiekio gramais.

Klinikinė baltymų reikšmė šlapime

Žmogaus šlapime paprastai yra minimalus baltymų kiekis, kurio neįmanoma nustatyti atliekant įprastinius kokybinius šlapimo baltymų tyrimus. Didelio kiekio baltymų išsiskyrimas, kai įprastiniai kokybiniai baltymų šlapimo tyrimai tampa teigiami, yra nenormalus reiškinys, vadinamas proteinurija. Proteinurija yra fiziologinė tik naujagimiui, pirmąsias 4-10 dienų po gimimo. Dažniausiai vartojamas pavadinimas albuminurija yra neteisingas, nes su šlapimu išsiskiria ne tik albuminai, bet ir kitų rūšių baltymai (globulinai ir kt.).

Proteinuriją, kaip diagnostinį simptomą, 1770 m. atrado Cotugno.

Svarbiausios funkcinės inkstų proteinurija vaikams yra šios:

1. Fiziologinė naujagimio proteinurija. Tai pasireiškia daugeliui naujagimių ir neturi jokios neigiamos reikšmės. Tai paaiškinama silpnu inkstų filtru, pažeidimu gimimo metu arba skysčių netekimu pirmosiomis gyvenimo dienomis. Fiziologinė proteinurija išnyksta 4-10 dieną po gimimo (vėliau neišnešiotiems kūdikiams). Baltymų kiekis mažas. Tai nukleoalbuminas.

Ilgalaikė naujagimių albuminurija gali būti įgimto lueso simptomas.

2. Insulto albuminurija. Jas sukelia viršijus normalaus inkstų filtro dirglumo slenkstį dėl reikšmingų mechaninių, terminių, cheminių, psichinių ir kitų dirginimų – kūdikių skysčių netekimo (dehidratacinė proteinurija), maudynės šaltoje vonioje, gausaus, baltymų turinčio maisto (maisto proteinurija) , inksto palpacija (palpatorinė albuminurija), fizinis pervargimas, baimė ir kt.

Insulto albuminurija vaikams ankstyvame amžiuje pasireiškia lengviau nei vyresniems ir suaugusiems, nes kūdikio ir mažo vaiko inkstai yra lengviau dirginami. Dehidratacijos albuminurija (netinkama mityba, hidrolabilumas, toksikozė, viduriavimas, vėmimas) ypač dažnai stebima kūdikiams.

Insulto albuminurija yra gerybinė. Pašalinus jas sukeliančias priežastis, jos iš karto išnyksta. Nuosėdose kartais yra pavienių leukocitų, cilindrų ir eritrocitų. Baltymas dažniausiai yra nukleoalbuminas.

3. Ortostatinė proteinurija. Ši būklė būdinga ikimokyklinio ir mokyklinio amžiaus vaikams. Jis atsiranda dėl vazomotorinių inkstų aprūpinimo krauju sutrikimų. Ortostatinei albuminurijai (taigi ir jos pavadinimas) būdinga tai, kad ji atsiranda tik vaikui stovint, kai stuburas yra lordotinėje padėtyje. Gulint, jis išnyksta. Išsiskiria nukleoalbuminas. Abejotinais atvejais galite griebtis ortostatinės patirties, kuri yra tokia: vakare, valandą prieš miegą, vaikas ištuština šlapimo pūslę; ryto, išlipęs iš lovos, vėl šlapinasi. Šiame šlapime nėra baltymų. Tada vaikas 15-30 minučių paguldomas ant kelių su lazda už nugaros, tarp sulenktų abiejų rankų alkūnių. Sukuriama lordozės padėtis, dėl kurios baltymai išsiskiria be nuosėdų pokyčių.

Sergant ortostatine albuminurija, per dieną gali išsiskirti 8-10 g baltymų.

Tarp visų proteinurijų svarbiausia klinikinė reikšmė yra organinė inkstų proteinurija. Jas sukelia organinės inkstų ligos (nefritas, nefrozė, nefrosklerozė). Proteinurija yra vienas iš svarbiausių ir geriausiai žinomų organinės inkstų ligos simptomų.

1. Sergant ūminiu ir lėtiniu glomerulonefritu, proteinurija pasireiškia reguliariai. Baltymų kiekis yra vidutinis ir nėra paralelės tarp proteinurijos laipsnio ir ligos sunkumo. Priešingai, lėtinis ir sunkesnis nefritas dažnai pasireiškia su mažiau baltymų nei ūminis. Po ūminio nefrito, kartais ilgą laiką (metus), šlapime nustatomi nedideli baltymų kiekiai, kurie neturi patologinės reikšmės („liekamoji albuminurija“). Nereikia pamiršti, kad gali pasireikšti ir „nefritas be proteinurijos“. Kartais baltymas randamas vienoje šlapimo dalyje, bet ne kitoje. Albuminų ir globulinų santykis sergant ūminiu nefritu yra mažas, o sergant lėtiniu – didesnis.

2. Sergant nefroskleroze, baltymų kiekis šlapime būna labai mažas, dažnai būna ligos formų be baltymo šlapime.

3. Iš visų inkstų ligų nefrozė pasireiškia su ryškiausia proteinurija.

4. Esant infekcinėms ir toksinėms sąlygoms, atsiranda vadinamoji febrili ir toksinė proteinurija. Tai ūminės nefrozės, kuriose baltymų kiekis mažas. Šiai grupei taip pat priklauso proteinurija esant traukuliams (traukuliai), hipertiroidizmas, gelta, invaginacija, enterokolitas, nudegimai, sunki anemija ir kt. Ši albuminurija yra gerybinė ir greitai praeina (trumpalaikė albuminurija).

5. Sustingus kraujui inkstuose, atsiranda vadinamoji stazinė albuminurija, būdinga širdies ligoniams dekompensacijos stadijoje. Jis taip pat randamas esant ascitui ir pilvo navikams.

Sergant febrilia, toksine ir stazine albuminurija, ypač ryškus padidėjęs inkstų filtro pralaidumas. Kai kurių autorių teigimu, daugelis šių proteinurijų atsiranda be organinių inkstų parenchimos pažeidimo.

Ekstrarenalinė albuminurija dažniausiai sukelia baltyminės priemaišos (išskyros, suirusios ląstelės), kurias išskiria sergantys šlapimo takai ir lytiniai organai. Ekstrarenaline albuminurija dažniau susergama dėl cistopielito (piurijos), rečiau dėl vulvovaginito, akmenų ir šlapimo takų navikų.

Esant ekstrarenalinei albuminurijai, nuosėdose randama daug leukocitų ir bakterijų. Inkstų elementai beveik niekada nerandami. Baltymų kiekis mažas. Filtruotame arba centrifuguotame šlapime baltymų testas paprastai nėra teigiamas.

Pasveikusiems nuo pyelito albuminurija išnyksta po bakteriurijos ir piurijos.

Kaip būdingą reiškinį reikia pabrėžti, kad organinės inkstų ligos ankstyvoje vaikystėje pasireiškia itin retai, todėl organinė proteinurija taip pat reta. Iš jų daugiausia karščiuojančių ir toksiškų. Priešingai nei organinė proteinurija, insulto albuminurija labai dažna vaikams ankstyvame amžiuje.

Vyresniems vaikams organinė proteinurija dažniau būna funkcinė. Apskritai su amžiumi funkcinė proteinurija pasitaiko rečiau, o organinė – dažniau.

Baltymų šlapime elektroforetiniai tyrimai

Nemažai autorių naudoja elektroforezės metodą baltymams šlapime (uroproteinams) tirti. Iš gautų elektroforegramų matyti, kad jų kokybinė sudėtis tokia pati kaip ir plazmos baltymų. Tai rodo, kad baltymai šlapime yra gauti iš plazmos baltymų.

52 puslapis iš 76

Sveiko vaiko šlapime baltymų yra nežymiai ir įprastais kokybės tyrimais jis neaptinkamas. Baltymų kiekis šlapime (proteinurija) didėja sergant inkstų ligomis, toksikoze, leukemija, žalinga mažakraujyste, inkstų perkrova, po inkstų palpacijos (palpacijos albuminurija) ir fizinio pervargimo, esant emocinei perkrovai, karščiuojant, esant hipotermijai ir kitoms būklėms. .
Kokybinis baltymo nustatymas šlapime. Kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti plačiausiai naudojamas testas su sulfosalicilo rūgštimi, Helerio testas su azoto rūgštimi, virimo testas ir kt. Naudojant mėginius, pagrįstus baltymų nusodinimu, svarbu laikytis kai kurių bendrųjų taisyklių. kad būtų išvengta klaidų.

  1. Šlapimas turi būti rūgštus. Jei tiriamasis šlapimas yra šarminis, jis šiek tiek parūgštinamas pridedant acto rūgšties. Tačiau rūgšties kiekis neturėtų būti didelis, kad neištirptų albuminas.
  2. Šlapimas turi būti skaidrus. Jei yra drumstumo, jį reikia pašalinti nesukeliant baltymų nuosėdų.
  3. Mėginys turi būti daromas dviejuose mėgintuvėliuose – eksperimentiniame ir kontroliniame. Jei nėra kontrolės, galite nepastebėti nedidelio šlapimo drumstumo eksperimentiniame mėgintuvėlyje.

Sulfosalicilo rūgšties testas yra vienas jautriausių baltymų buvimui šlapime. Į mėgintuvėlį įpilama 3-5 ml šlapimo ir įpilama 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo 2 lašais 1 ml šlapimo.
Kitoje modifikacijoje mėginiui nustatyti į mėgintuvėlį įpilama 1 ml šlapimo ir į jį įpilama 3 ml 1% sulfosalicilo rūgšties tirpalo.

Pirmuoju ir antruoju atveju, kai šlapime yra baltymų, įpylus sulfosalicilo rūgšties, atsiranda drumstumas. Į rezultatą atsižvelgiama pagal drumstumo intensyvumą: silpnai teigiamą reakciją (opalescenciją) rodo (trumpas +), teigiamą (+), ryškiai teigiamą.
Helerio testas atliekamas taip: keli mililitrai šlapimo atsargiai (nemaišant) sluoksniuojami ant 1-2 ml 30% azoto rūgšties tirpalo, kurio santykinis tankis yra 1,20. Jei šlapime baltymų yra 0,033 g/l ir daugiau, prie abiejų skysčių ribos susidaro baltas žiedas, kuris vertinamas kaip teigiamas testas. Esant dideliam uratų kiekiui šlapime, taip pat gali susidaryti baltas žiedas, tačiau jis yra tiesiai virš skysčių ribos. Šiek tiek kaitinant uratų žiedas išnyksta.
Virimo testas duoda patikimus rezultatus, tačiau tik tuo atveju, jei šlapimo pH yra 5,6. Šį testą geriausia atlikti naudojant Ruppert modifikaciją su Bange acetatiniu buferiu, kuriame yra 56,5 ml ledinės acto rūgšties, 118 g kristalinio natrio acetato, ištirpinto 1 litre vandens. Į 1-2 ml Bange buferio įpilkite 5 ml šlapimo ir virkite 1/2 min. Esant baltymui šlapime, susidaro drumstumas.
Baltymų kiekio šlapime kiekybinis nustatymas. Kiekybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti dažniausiai naudojamas Esbacho metodas, Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodas, Sols biureto metodas ir kt.
Brandberg - Roberts - Stolnikov metodas pagrįstas kokybiniu Geller testu ir leidžia nustatyti baltymų buvimą šlapime nuo 0,033 g / l ir daugiau. Paruošiama nemažai mėgintuvėlių. Šlapimas, kuriame yra baltymų, skiedžiamas fiziologiniu tirpalu arba vandeniu, kol skysčių (Roberts-Stolnikov reagento ir šlapimo) ribose nustoja formuotis baltas žiedas. Žiedas ties dviejų skysčių riba tarp antros ir trečios minutės pasirodo, kai baltymų kiekis yra 0,033 g/l. Jei žiedas pasirodo anksčiau nei po kelių minučių, šlapimas skiedžiamas vandeniu. Didžiausio skiedimo šlapime, kuriame susidaro žiedas, yra 0,033 g/l baltymų. Paskutiniame mėgintuvėlyje šlapimo praskiedimo laipsnis dauginamas iš 0,033 g/l ir gaunama baltymų koncentracija visame šlapime.

Proteinurija. Sergant inkstų ligomis, taip yra dėl padidėjusio inkstų filtro pralaidumo. Baltymai į šlapimą gali patekti kitu būdu (iš šlapimo takų, makšties, prostatos ir kt. gleivinės) – ekstrarenaline proteinurija. Inkstų proteinurija skirstoma į organinę ir funkcinę. Organinė proteinurija susijusi su inkstų parenchimos pažeidimu, funkcinė – su vazomotoriniais sutrikimais. Viena iš funkcinės proteinurijos rūšių yra ortostatinė (lordotinė, protarpinė, posturalinė, ciklinė) albuminurija. Daroma prielaida, kad esant ryškiai lordozei, susidaro padėtis, kai apatinė tuščioji vena yra prispaudžiama prie stuburo kepenų, o tai sukelia stagnaciją inkstų venose ir stazinę albuminuriją. Elektroninių mikroskopinių tyrimų metu nustatyta, kad ortostatinė albuminurija turi morfologinių uždegiminio proceso požymių inkstų glomeruluose.

Mūsų ilgalaikiai stebėjimai rodo, kad ortostatinę albuminuriją dažnai sukelia inkstų anomalijos ar nenormali jų vieta, todėl rekomenduojame naudoti ortostatinį testą kaip atrankos testą. Šiuo tyrimu nustatę ortostatinę albuminuriją, dažniausiai atliekame ekskrecinę urografiją, kad būtų atmesti šlapimo sistemos vystymosi sutrikimai.
Ortostatinis testas. Tyrimo išvakarėse, vakare, maždaug valandą prieš miegą, vaikas turi ištuštinti šlapimo pūslę. Ryte, išlipęs iš lovos, iš karto nusišlapina, o šis šlapimas surenkamas į atskirą dubenį, pažymint jį kaip porciją prieš krūvį. Tada vaikui pasiūloma atsiklaupti ant pusiau minkštos kėdės su lazda už nugaros, suspaudžiant alkūnėmis. Šioje padėtyje vaikas turi būti 15-20 minučių, po kurio jis ištuština šlapimo pūslę, o surinktas šlapimas pažymimas kaip porcija po pratimo. Baltymai tiriami šlapimo dalimis, gautomis prieš ir po treniruotės. Baltymų kiekio aptikimas arba padidėjimas 2–3 ar daugiau kartų antroje porcijoje (gautas po fizinio krūvio), palyginti su pirmąja porcija, vertinamas kaip teigiamas ortostatinis testas.
Baltymų frakcijų nustatymas šlapime. Atliekami braižyti elementai. Sergant glomerulonefritu, tuberkulioze, policistine inkstų liga, inkstų navikais, hemoraginiu vaskulitu, kolagenozėmis, šlapimo pūslės uždegimu ir kitomis ligomis, kai šlapime yra raudonųjų kraujo kūnelių, gali būti nemažas kiekis. Yra makro- ir mikrohematurija. Esant didelei hematurijai, jau galima makroskopiškai pastebėti, kad pasikeitė šlapimo spalva. Dėl to, kad šlapime yra daug raudonųjų kraujo kūnelių, jis tampa raudonas arba „mėsos šlaitų spalva“. Sergant mikrohematurija, eritrocitai nustatomi tik mikroskopuojant nuosėdas.
Eritrocitų prasiskverbimas į šlapimą glomerulonefrito, intoksikacijos metu atsiranda dėl padidėjusio glomerulų kapiliarų pralaidumo ir jų plyšimų. Sergant uždegiminėmis šlapimo takų ligomis, iš pažeistų gleivinių į šlapimą patenka dubens, šlapimtakių, šlapimo pūslės akmenys, eritrocitai. Surinkus šlapimą porcijomis (dviejų ir trijų stiklų mėginius) vieno šlapinimosi metu, su didele tikimybe galima išsiaiškinti, iš kurio šlapimo sistemos segmento atsiranda hematurija. Taigi, esant hematurijai iš šlaplės, pirmoje šlapimo dalyje gali būti kraujo krešulių. Jei hematurija atsirado dėl ūmaus gleivinės uždegimo, akmenligės ar kitos šlapimo pūslės ligos, paskutine šlapimo srove bus išlieta daugiau kraujo. Esant hematurijai, susijusiai su šlapimtakio pažeidimu, kartais randami fibrino gipsai, kurie savo forma atitinka šlapimtakio spindį. Sergant difuzine inkstų liga, hematurija išskiriamą šlapimą nudažo tolygiai.
Leukocitai. Sveiko vaiko šlapime jie gali būti pavieniai regėjimo lauke. 5-7 leukocitų aptikimas kiekviename regėjimo lauke rodo uždegiminį procesą šlapimo takuose. Tačiau visada reikia atmesti galimybę, kad leukocitai į šlapimą nepatektų iš išorinių lytinių organų, o tai atsitinka sergant fimoze, balanitu ir balanopostitu berniukams ir vulvovaginitu mergaitėms. Leukociturijai gydyti plačiai naudojami dviejų ir trijų stiklų mėginiai.
cilindrai. Šlapime jie gali būti hialininių, granulių, epitelio ir vaško pavidalo. Visi jie gali susidaryti patologinėmis sąlygomis inkstuose. Cilindrai sveikų vaikų šlapime yra reti. Dažnai jie randami kiekybiniuose šlapimo nuosėdų tyrimo metoduose. Paprastai tai yra hialino cilindrai, kurių baltymai koaguliuojami kanalėlių spindyje. Epitelio gipsai rodo inkstų parenchimos pažeidimą ir susideda iš prilipusių inkstų kanalėlių epitelio ląstelių. Esant ryškesniam distrofiniam procesui, inkstuose atsiranda granuliuoti ir vaškiniai cilindrai. Tai yra kanalėlių epitelio, kuris patyrė riebalinę degeneraciją, suplėšytų ląstelių atliejai. Be to, šlapimo nuosėdose galite rasti cilindrų, susidariusių iš suformuotų elementų, hemoglobino, kraujo methemoglobino. Tokių cilindrų pagrindas paprastai yra baltymai, ant kurių dedami kiti elementai.
Cilindroidai – tai dariniai, panašūs į hialininius cilindrus, susidedantys iš amonio uratų druskų, gleivių, leukocitų, bakterijų kristalų. Cilindroidai randami ūminio glomerulonefrito atsigavimo fazėje. Jie skiriasi nuo hialininių cilindrų savo struktūros nevienalytiškumu.
neorganinės liekanos. Vaikų neorganinėse nuosėdose dažniau yra uratų, oksalatų, fosfatų ir šlapimo rūgšties kristalų. Pernelyg didelis jų išsiskyrimas su šlapimu gali sukelti akmenų susidarymą šlapimo takuose.
Uraturija - padidėjęs šlapimo rūgšties druskų išsiskyrimas su šlapimu. Tai pastebima pirmosiomis naujagimių gyvenimo dienomis. Dėl didelio uratų kiekio naujagimių šlapimas gali būti plytų raudonos spalvos. Didelis ląstelių elementų skilimas naujagimiams dažnai sukelia šlapimo rūgšties infarktą, kuris išnyksta iki pirmosios gyvenimo savaitės pabaigos, nes uratų druskos pašalinamos didėjant diurezei. Uraturija vyresniems vaikams gali būti susijusi su valgymu dideliu mėsos kiekiu, raumenų nuovargiu, karščiavimu. Hiperuraturija gali atsirasti dėl paveldimos hiperurikemijos, kuri ypač ryški Lesch-Nyhan sindromo atveju.
Oksalaturija – padidėjęs kalcio oksalato išsiskyrimas su šlapimu, gali būti susijęs su valgymu, kuriame gausu oksalo rūgšties. Tokios rūšies produktai yra rūgštynės, špinatai, pomidorai, žalieji žirneliai, pupelės, ridikai, arbata, kava ir kt. Oksalaturijos priežastis taip pat yra patologinis procesas vaiko organizme, lydimas audinių irimo (distrofija, tuberkuliozė, diabetas, bronchektazės). , leukemija ir kt.). Oksalaturija taip pat žinoma kaip paveldima liga, kurią dažnai komplikuoja inkstų akmenligė ir lėtinis pielonefritas. Sergant sunkia oksalaturija, oksalatų kiekis paros šlapime yra 3–4 kartus ar daugiau didesnis už leistiną vertę (norma yra 8–10 mg%).
Fosfaturija – padidėjęs fosfatų druskų, kurios nusėda šarminiame šlapime, išsiskyrimas su šlapimu. Pastebima valgant augalinius produktus (daržoves, vaisius ir kt.), taip pat esant uždegiminiam šlapimo takų gleivinės procesui, kai vyksta bakterinė fermentacija ir šlapimo šarminimas. Fosfaturija gali sukelti šlapimo pūslės akmenų susidarymą.

Daugelis ligų atsiranda be ryškių klinikinių apraiškų, todėl baltymų kiekio šlapime nustatymas, siekiant laiku nustatyti ir gydyti patologinę būklę, yra svarbus praktinės medicinos dalykas.

Baltymų kiekį šlapime galima nustatyti kokybiniais ir kiekybiniais metodais.

Kokybiniai metodai

Šiuo metu žinoma apie 100 kokybinių reakcijų į baltymą. Jie susideda iš baltymų nusodinimo fizinio ar cheminio poveikio būdu. Esant teigiamai reakcijai, atsiranda drumstumas.

Informatyviausi yra pavyzdžiai:

  1. Su sulfosalicilo rūgštimi. Jis laikomas jautriausiu ir jo pagalba galima nustatyti net mažiausius baltymų kūnelių kiekius šlapime. Rezultato aprašymas, kai yra baltymų pėdsakų, nurodomas terminu „opalescencija“, o esant didesniam kiekiui - „silpnai teigiamas“, „teigiamas“ ir su dideliu baltymų praradimu šlapime – „stipriai teigiama reakcija“. .
  2. Su rūgšties pakaitalu - aseptoliu. Į šlapimą įpilama medžiagos tirpalo, o kai prie tirpalų ribos susidaro žiedas, sakoma, kad mėginys teigiamas.
  3. Geller. Pagaminta naudojant azoto rūgšties tirpalą. Elgesio rezultatas interpretuojamas panašiai kaip ir su aseptoliu. Kartais žiedas gali būti, kai tiriamajame skystyje yra uratų.
  4. Su acto rūgštimi, pridedant selezistosinerodistinio kalio. Esant didelei šlapimo koncentracijai tokio tyrimo metu, jis praskiedžiamas, kitaip gali būti gautas klaidingas teigiamas rezultatas, nes reakcija bus į uratus ir šlapimo rūgštį.

Neteisingai atliekant tokį tyrimą naujagimiams dažnai gali būti neteisingas rezultatas, nes jie gamina šlapimą, kuriame yra daug šlapimo rūgšties.

Pagrindinės mėginių ėmimo taisyklės yra tokios - būtina, kad tiriamas šlapimas būtų skaidrus, turi šiek tiek rūgščią aplinką (tam kartais įpilama nedidelio kiekio acto rūgšties), turi būti du mėgintuvėliai kontrolė.

kiekybinis įvertinimas

Kai atliekamas šlapimo tyrimas, bendras baltymas nustatomas ir kiekybiniais metodais. Jų yra daug, tačiau dažniausiai naudojami šie:

  1. Esbacho metodas. Naudojamas nuo XIX a. Norėdami tai padaryti, į tam tikrą mėgintuvėlį pilamas šlapimas ir reagentas. Tada mišinys šiek tiek pakratomas ir paliekamas uždarytas 24-48 valandas. Susidariusios nuosėdos skaičiuojamos pagal pasidalijimą mėgintuvėlyje. Teisingą išvadą galima padaryti tik su rūgštiniu šlapimu. Ši technika yra gana paprasta, tačiau ji nepasižymi dideliu tikslumu ir užima daug laiko.
  2. Brandbergo-Stolnikovo metodas. Remiantis Hellerio testu, kuris leidžia gauti rezultatą, kai baltymų koncentracija yra didesnė nei 3,3 mg%. Vėliau šis metodas buvo modifikuotas ir supaprastintas.
  3. Plačiai naudojami nefelometriniai baltymų kiekio nustatymo metodai.

Norint visiškai suprasti baltymų kiekį, geriausia naudoti šlapimo tyrimą kasdieniniam baltymui nustatyti.

Norint gauti teisingą rezultatą, pirmoji rytinė porcija išpilama, rinkimas prasideda nuo antros porcijos viename inde, kurią rekomenduojama laikyti šaldytuve.

Paskutinė dalis surenkama ryte. Po to reikia išmatuoti tūrį, tada gerai išmaišyti ir supilti ne didesnę kaip 50 ml porciją į stiklainį. Šią talpyklą reikia nuvežti į laboratoriją. Specialioje formoje reikia nurodyti viso paros šlapimo kiekio rezultatus, taip pat paciento ūgį ir svorį.

Bandymo juostelių uždėjimas

Šlapimo baltymų tyrimas veikia rodiklių principu. Specialios juostelės gali keisti spalvą priklausomai nuo baltymų koncentracijos. Jie yra patogūs nustatant pokyčius, atsirandančius skirtingu metu, ir naudojami tiek namuose, tiek bet kuriose medicinos ir profilaktikos įstaigose.

Šlapimo tyrimo juostelės naudojamos, kai reikia anksti nustatyti ir sekti gydymo rezultatus sergant urogenitalinėmis patologijomis. Šis diagnostikos metodas yra jautrus ir reaguoja į albuminą, kurio koncentracija yra nuo 0,1 g / l, ir leidžia nustatyti kokybinius ir pusiau kiekybinius baltymų kiekio pokyčius šlapime.

Remiantis šios diagnozės rezultatais, galima stebėti gydymo veiksmingumą, jį koreguoti, paskirti reikiamą dietą.

26.02.2009

Kurilyak O.A., mokslų daktaras

Paprastai baltymai išsiskiria su šlapimu palyginti nedideliu kiekiu, paprastai ne daugiau kaip 100-150 mg per parą.

Sveiko žmogaus paros diurezė yra 1000–1500 ml per dieną; taigi baltymų koncentracija fiziologinėmis sąlygomis yra 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/l).

Bendrą baltymų kiekį šlapime sudaro trys pagrindinės frakcijos - albuminai, mukoproteinai ir globulinai.

Šlapimo albuminas yra ta serumo albumino dalis, kuri buvo filtruojama glomeruluose ir nebuvo reabsorbuota inkstų kanalėliuose; normalus albumino išsiskyrimas su šlapimu yra mažesnis nei 30 mg per parą. Kitas pagrindinis baltymų šaltinis šlapime yra inkstų kanalėliai, ypač distalinė kanalėlių dalis. Šie kanalėliai išskiria du trečdalius viso šlapimo baltymo; maždaug 50 % šio kiekio sudaro Tamm-Horsfall glikoproteinas, kurį išskiria distalinių kanalėlių epitelis ir kuris atlieka svarbų vaidmenį formuojant šlapimo akmenis. Kiti baltymai šlapime yra nedideliais kiekiais ir gaunami per inkstų filtrą mažos molekulinės masės plazmos baltymų, kurie nėra reabsorbuojami inkstų kanalėliuose, mikroglobulinų iš inkstų kanalėlių epitelio (RTE) ir prostatos bei makšties išskyrų.

Proteinurija, ty baltymų kiekio padidėjimas šlapime, yra vienas iš svarbiausių simptomų, atspindinčių inkstų pažeidimą. Tačiau daug kitų būklių taip pat gali lydėti proteinurija. Todėl yra dvi pagrindinės proteinurijos grupės: inkstų (tikroji) ir ekstrarenalinė (klaidinga) proteinurija.

Sergant inkstų proteinurija, baltymas į šlapimą patenka tiesiai iš kraujo, nes padidėja glomerulų filtro pralaidumas. Inkstų proteinurija dažnai nustatoma sergant glomerulonefritu, nefroze, pielonefritu, nefroskleroze, inkstų amiloidoze, įvairiomis nefropatijos formomis, pvz., nefropatija nėštumo metu, karščiuojant, sergant hipertenzija ir kt. Proteinurija gali pasireikšti ir sveikiems žmonėms po didelio fizinio krūvio, hipotermijos, psichologinio streso. Naujagimiams fiziologinė proteinurija stebima pirmosiomis gyvenimo savaitėmis, o esant vaikų ir paauglių astenijai, kartu su sparčiu augimu 7–18 metų amžiaus, galima ortostatinė proteinurija (stačioje kūno padėtyje).

Esant klaidingai (ekstrarenalinei) proteinurijai, baltymų šaltinis šlapime yra leukocitų, eritrocitų ir šlapimo takų epitelio urotelinių ląstelių mišinys. Šių elementų skilimas, ypač ryškus šarminėje šlapimo reakcijoje, sukelia baltymų patekimą į šlapimą, kuris jau praėjo inkstų filtrą. Ypač didelis klaidingos proteinurijos laipsnis sukelia kraujo priemaišą šlapime, o esant gausiai hematurijai jis gali siekti 30 g / l ar daugiau. Ligos, kurias gali lydėti ekstrarenalinė proteinurija – urolitiazė, inkstų tuberkuliozė, inkstų ar šlapimo takų navikai, cistitas, pyelitas, prostatitas, uretritas, vulvovaginitas.

Klinikinė klasifikacija apima lengvą proteinuriją (mažiau nei 0,5 g per parą), vidutinio sunkumo (0,5–4 g per dieną) arba sunkią (daugiau nei 4 g per dieną).

Daugumai pacientų, sergančių inkstų ligomis, pvz., ūminiu glomerulonefritu ar pielonefritu, pasireiškia lengva proteinurija, tačiau pacientai, sergantys nefroziniu sindromu, paprastai kasdien su šlapimu išskiria daugiau nei 4 g baltymų.

Baltymų kiekybiniam nustatymui naudojami įvairūs metodai, ypač vieningas Brandberg-Roberts-Stolnikov metodas, biureto metodas, metodas naudojant sulfosalicilo rūgštį, metodai naudojant Coomassie mėlynus dažus, pirogalolio raudonuosius dažus ir kt.

Naudojant įvairius metodus baltymų kiekiui šlapime nustatyti, kilo rimta painiava aiškinant normalaus baltymų kiekio šlapime ribas. Kadangi laboratorijose dažniausiai naudojami 2 metodai - su sulfosalicilo rūgštimi ir pirogalolio raudonaisiais dažais, mes apsvarstysime jiems nustatytų normų ribų teisingumo problemą. Iš sulfosalicilo metodo padėties normaliame šlapime baltymų kiekis neturi viršyti 0,03 g / l, iš pirogalolio metodo padėties - 0,1 g / l! Skirtumai trigubai!

Mažos baltymų koncentracijos šlapime normos vertės vartojant sulfosalicilo rūgštį atsiranda dėl šių punktų:

  • kalibravimo kreivė sudaryta ant vandeninio albumino tirpalo. Šlapimas savo sudėtimi labai skiriasi nuo vandens: pH, druskos, mažos molekulinės masės junginiai (kreatininas, karbamidas ir kt.). Dėl to, pasak Altshulerio, Rakovo ir Tkachevo, baltymų kiekio šlapime nustatymo klaida gali būti 3 ar daugiau kartų! Tie. teisingus nustatymo rezultatus galima gauti tik tada, kai šlapimo savitasis svoris yra labai mažas ir yra artimas vandeniui savo sudėtimi ir pH;
  • didesnis sulfosalicilo metodo jautrumas albuminui, palyginti su kitais baltymais (tuo tarpu, kaip minėta aukščiau, albuminas normaliuose šlapimo mėginiuose neviršija 30% viso šlapimo baltymo);
  • jei šlapimo pH pasislenka į šarminę pusę, sulfosalicilo rūgštis neutralizuojama, dėl to taip pat nuvertinami baltymų nustatymo rezultatai;
  • nuosėdų nusėdimo greitis labai kinta - esant žemai baltymų koncentracijai krituliai sulėtėja, o anksti sustabdžius reakciją, rezultatas neįvertinamas;
  • nusodinimo reakcijos greitis iš esmės priklauso nuo reakcijos mišinio sumaišymo. Esant didelei baltymų koncentracijai, intensyviai kratant mėgintuvėlį gali susidaryti dideli dribsniai ir greitai nusėsti.

Visos aukščiau išvardintos metodo ypatybės lemia reikšmingą šlapime nustatytos baltymų koncentracijos nepakankamumą. Nepakankamo įvertinimo laipsnis labai priklauso nuo konkretaus šlapimo mėginio sudėties. Kadangi taikant sulfosalicilo rūgšties metodą gaunamos nepakankamai įvertintos baltymų koncentracijos, šio metodo norma – 0,03 g/l – taip pat yra maždaug tris kartus neįvertinta, palyginti su duomenimis, pateiktais užsienio žinynuose apie klinikinę laboratorinę diagnostiką.

Didžioji dauguma Vakarų šalių laboratorijų atsisakė sulfosalicilo metodo baltymų koncentracijai šlapime nustatyti ir tam aktyviai naudoja pirogalolio metodą. Baltymų koncentracijos šlapime ir kituose biologiniuose skysčiuose nustatymo pirogalolio metodas pagrįstas fotometriniu principu matuojant spalvoto komplekso, susidarančio baltymų molekulėms sąveikaujant su pirogalolio raudonojo dažų komplekso ir natrio molibdato komplekso molekulėmis, optinį tankį. Pirogalolio raudonojo molibdato kompleksas).

Kodėl pirogalolio metodas suteikia tikslesnius šlapimo baltymų matavimus? Pirma, dėl didesnio šlapimo mėginio praskiedimo reakcijos mišinyje. Jei taikant sulfosalicilo metodą šlapimo mėginio / reagento santykis yra 1/3, tai pirogalolio metodu jis gali svyruoti nuo 1/12,5 iki 1/60, priklausomai nuo metodo varianto, o tai žymiai sumažina šlapimo sudėties poveikį. matavimo rezultatas. Antra, reakcija vyksta sukcinato buferyje, ty esant stabiliam pH. Ir galiausiai pats metodo principas, galima sakyti, yra „skaidresnis“. Natrio molibdatas ir pirogalolio raudonasis dažiklis sudaro kompleksą su baltymo molekule. Tai lemia tai, kad laisvos būsenos dažų molekulės, kurios nesugeria šviesos, kai bangos ilgis 600 nm, sugeria šviesą kartu su baltymu. Taigi, kiekvieną baltymo molekulę pažymime dažais ir dėl to pastebime, kad reakcijos mišinio optinio tankio pokytis esant 600 nm bangos ilgiui aiškiai koreliuoja su baltymo koncentracija šlapime. Be to, kadangi pirogalolio raudonojo afinitetas skirtingoms baltymų frakcijoms yra beveik vienodas, šis metodas leidžia nustatyti bendrą šlapimo baltymą. Todėl baltymų koncentracijos šlapime normalių verčių riba yra 0,1 g/l (tai nurodyta visose šiuolaikinėse Vakarų klinikinės ir laboratorinės diagnostikos gairėse, įskaitant N. Titzo redaguojamą klinikinį laboratorinių tyrimų vadovą). Lyginamosios pirogalolio ir sulfosalicilo metodų, skirtų baltymų kiekiui šlapime nustatyti, charakteristikos pateiktos 1 lentelėje.

Baigdamas norėčiau dar kartą atkreipti dėmesį į tai, kad laboratorijai perėjus nuo sulfosalicilo metodo baltymui šlapime nustatyti prie pirogalolio metodo, normalių verčių riba žymiai padidėja (nuo 0,03 g/l iki 0,1 g). /l!). Laboratorijos darbuotojai būtinai turi apie tai informuoti gydytojus, nes. Esant tokiai situacijai, proteinurijos diagnozę galima atlikti tik tada, kai baltymų kiekis šlapime viršija 0,1 g/l.

Bibliografija.

  1. Altshuler B.Yu., Rakov S.S., Tkachev G.A. // Klausimas. medus. chemija. - 2001. - Nr. 4. - C.426-438.
  2. Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I., Shibanov A.N. // Lab. medus. - 2003. - Nr. 6. - C.94-98.
  3. Klinikinis laboratorinių tyrimų vadovas, red. N. Titsa.- M.- Unimed-press.-2003.- 942 p.
  4. Kozlovas A.V., Slepyševa V.V. Baltymų nustatymo šlapime metodai: galimybės ir perspektyvos // VII met. darbų rinkinys. SPb nefrolis. seminaras. – Sankt Peterburgas: TNA. - 1999. - C.17-28.
  5. Pupkova V.I., Pikalovas I.V., Chrykina E.N., Kharkovskiy A.V. // Naujienos "Vector-Best". - 2003. - Nr.4 (30).
  6. Chambers R.E., Bullock D.G., Whoer J.T. // Ann. Clin. Biochem. - 1991. - T. 28 (5 punktas). - P.467-473.
  7. Klinikinės laboratorijos medicina. Red. pateikė Kennethas D. McClatchey. - 2 leid.-2001.- 1993p.
  8. Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // klinika. Biochem. - 2000. - T. 33.-P.487-494.
  9. Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Šlapimo baltymų tyrimo sudėtis ir prietaisas bei to paties naudojimo būdas // JAV patentas Nr. 5326707. – 1994 m.
  10. Kaplanas I.V., Levinsonas S.S. // klinika. Chem. - 1999. - T. 45.-P.417-419.
  11. Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. iš Med. - 2003. - T. 70 straipsnio 6 dalį. - P.535-547.
  12. Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Low P, Potter JM. // klinika. Chem. - 2001. - T. 47.-P.2183-2184.
  13. Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Straipsnis prancūzų kalba. - Ann. Biol. Clin. (Paryžius). - 1998. - T. 56 straipsnio 6 dalį. - P.719-723.
  14. Marshall T., Williams K.M. // klinika. Chem. - 2003. - T. 49 (12). - P.2111-2112.
  15. Pugia M., Newman D.J., Lott J.A., D'Mello L., Clark L., Profitt J.A., Cast T. // Clin. Chim. acta. - 2002. - T. 326 (1-2). - P.177-183.
  16. Ringsrud K.M., Linne J.J. Šlapimo analizė ir kūno skysčiai: „ColorText“ ir „Atlas“ // Mosby. - 1995. - P.52-54.
  17. Shepard M.D., Penberthy L.A. // klinika. Chem. - 1987. - T. 33.-P.792-795.
  18. Williams K.M., Marshall T. // J. Biochem. Biofizė. metodus. - 2001. - T. 47.-P.197-207.
  19. Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biofizė. metodus. - 2003. - T. 57 straipsnio 1 dalį. - P.45-55.


Turinys [Rodyti]

Sveikas žmogus per dieną išskiria 1,0–1,5 litro šlapimo. 8–10 mg/dl baltymų kiekis jame yra fiziologinis reiškinys. 100-150 mg baltymų paros norma šlapime neturėtų kelti įtarimų. Bendras baltymų kiekis šlapime yra globulinas, mukoproteinas ir albuminas. Didelis albumino nutekėjimas rodo filtravimo proceso inkstuose pažeidimą ir vadinamas proteinurija arba albuminurija.

Kiekvienai medžiagai šlapime priskiriama "sveika" norma, o jei baltymų indeksas svyruoja, tai gali reikšti inkstų patologiją.

Bendras šlapimo tyrimas reiškia, kad naudojama pirmoji (rytinė) porcija arba imamas kasdienis mėginys. Pastarasis yra tinkamesnis vertinant proteinurijos lygį, nes baltymų kiekis kasdien svyruoja. Šlapimas per dieną surenkamas į vieną indą, matuojamas bendras tūris. Laboratorijai, kuri tiria šlapimą dėl baltymų, pakanka standartinio mėginio (50–100 ml) iš šios talpyklos, likusio nereikia. Norėdami gauti daugiau informacijos, atliekamas papildomas Zimnitsky testas, kuris parodo, ar šlapimo rodikliai per dieną yra normalūs.

Baltymų kiekio šlapime nustatymo metodai
Žiūrėti Porūšis Ypatumai
kokybės Gelerio testas Šlapimo tyrimas dėl baltymų buvimo
Sulfosalicilo rūgšties tyrimas
Virimo analizė
kiekybinis Turbidimetrinis Baltymai iš šlapimo sąveikauja su reagentu, todėl sumažėja jo tirpumas. Kaip reagentai naudojami sulfosalicilo ir trichloracto rūgštys, benzetonio chloridas.
Kolorimetrinis Su kai kuriomis medžiagomis baltymas iš šlapimo pakeičia spalvą. Tai yra biureto reakcijos ir Lowry metodo pagrindas. Taip pat naudojami kiti reagentai – briliantinė mėlyna, pirogalolio raudona.
pusiau kiekybinis Pateikite santykinį baltymų kiekio supratimą, rezultatas interpretuojamas pagal mėginio spalvos pasikeitimą. Pusiau kiekybiniai metodai apima bandymo juosteles ir Brandberg-Roberts-Stolnikov metodą.

Atgal į rodyklę

Baltymų kiekis šlapime yra normalus suaugusiam žmogui neturi viršyti 0,033 g / l. Šiuo atveju paros norma yra ne didesnė kaip 0,05 g / l. Nėščiosioms baltymų norma paros šlapime yra didesnė – 0,3 g/l, o rytiniame šlapime tiek pat – 0,033 g/l. Baltymų normos atliekant bendrą šlapimo analizę ir vaikams skiriasi: 0,036 g / l rytinei porcijai ir 0,06 g / l per dieną. Dažniausiai laboratorijose analizė atliekama dviem metodais, kurie parodo, kiek baltymų frakcijos yra šlapime. Aukščiau pateiktos normos galioja analizei su sulfosalicilo rūgštimi. Jei buvo naudojamas pirogalolio raudonasis dažiklis, vertės skirsis tris kartus.


Atgal į rodyklę

  • filtravimas inkstų glomeruluose vyksta netinkamu keliu;
  • sutrinka baltymų absorbcija kanalėliuose;
  • kai kurios ligos labai apkrauna inkstus - kai kraujyje padaugėja baltymų, inkstai tiesiog „nespėja“ jo filtruoti.

Likusios priežastys laikomos ne inkstais. Taip išsivysto funkcinė albuminurija. Šlapimo tyrime esantys baltymai atsiranda sergant alerginėmis reakcijomis, epilepsija, širdies nepakankamumu, leukemija, apsinuodijimu, mieloma, chemoterapija ir sisteminėmis ligomis. Dažniausiai būtent šis rodiklis paciento analizėse bus pirmasis hipertenzijos varpas.

Baltymų padidėjimą šlapime gali lemti nepatologiniai veiksniai, todėl reikės atlikti papildomus tyrimus.

Kiekybiniai baltymų nustatymo šlapime metodai duoda klaidų, todėl rekomenduojama atlikti keletą analizių, o tada naudoti formulę, kad apskaičiuotumėte teisingą vertę. Baltymų kiekis šlapime matuojamas g/l arba mg/l. Šios baltymų vertės leidžia nustatyti proteinurijos lygį, pasiūlyti priežastį, įvertinti prognozę ir nuspręsti dėl strategijos.

Atgal į rodyklę

Kad organizmas veiktų visapusiškai, būtina nuolatinė kraujo ir audinių mainai. Tai įmanoma tik esant tam tikram osmosiniam slėgiui kraujagyslėse. Kraujo plazmos baltymai kaip tik palaiko tokį slėgio lygį, kai mažos molekulinės masės medžiagos lengvai pereina iš didelės jų koncentracijos aplinkos į aplinką, kurioje yra mažesnė. Dėl baltymų molekulių praradimo kraujas išsiskiria iš jo kanalo į audinius, o tai kupina sunkios edemos. Taip pasireiškia vidutinė ir sunki proteinurija.


Pradinės albuminurijos stadijos yra besimptomės. Pacientas atkreipia dėmesį tik į pagrindinės ligos apraiškas, dėl kurių šlapime atsiranda baltymų.

Pėdsakais proteinurija vadinamas baltymų kiekio padidėjimas šlapime dėl tam tikrų maisto produktų vartojimo.

Šlapimas analizei surenkamas į švarų, neriebų indą. Prieš rinkimą parodomas tarpvietės tualetas, kurį reikia nuplauti muilu. Moterims patariama makštį uždengti vatos gabalėliu arba tamponu, kad makšties išskyros nepakenktų rezultatui. Išvakarėse geriau negerti alkoholio, mineralinio vandens, kavos, aštraus, sūraus ir šlapimui spalvą suteikiančio maisto (mėlynių, burokėlių). Stiprus fizinis krūvis, ilgalaikis vaikščiojimas, stresas, karščiavimas ir prakaitavimas, per didelis baltymingo maisto ar vaistų vartojimas prieš šlapinantis išprovokuoja baltymų atsiradimą visiškai sveiko žmogaus šlapime. Šis toleruotinas reiškinys vadinamas pėdsakų proteinurija.

Atgal į rodyklę

Inkstų liga, dėl kurios netenkama baltymų:

  • Amiloidozė. Normalias ląsteles inkstuose pakeičia amiloidai (baltymų-sacharidų kompleksas), kurie trukdo normaliam organo darbui. Proteinurijos stadijoje amiloidai nusėda į inkstų audinius, sunaikindami nefroną ir dėl to inkstų filtrą. Taip baltymai patenka iš kraujo į šlapimą. Šis etapas gali trukti daugiau nei 10 metų.
  • diabetinė nefropatija. Dėl netinkamos angliavandenių ir lipidų apykaitos inkstuose sunaikinamos kraujagyslės, glomerulų ir kanalėlių. Baltymai šlapime yra pirmasis nuspėjamos diabeto komplikacijos požymis.
  • Uždegiminės kilmės ligos – nefritas. Dažniausiai pažeidimai pažeidžia kraujagysles, glomerulus ir dubens kaklelio sistemas, sutrikdo normalią filtravimo sistemos eigą.
  • Glomerulonefritas daugeliu atvejų yra autoimuninis. Pacientas skundžiasi sumažėjusiu šlapimo kiekiu, nugaros skausmais ir padidėjusiu spaudimu. Glomerulonefrito gydymui rekomenduojama laikytis dietos, režimo ir vaistų terapijos.
  • Pielonefritas. Ūminiu laikotarpiu pasireiškia bakterinės infekcijos simptomai: šaltkrėtis, pykinimas, galvos skausmas. Tai infekcinė liga.
  • Policistinė inkstų liga.

Sveikame kūne baltymų molekulės (ir jos yra gana didelės) negali praeiti pro inkstų filtravimo sistemą. Todėl šlapime neturėtų būti baltymų. Šis skaičius yra vienodas tiek vyrams, tiek moterims. Jei analizė rodo proteinuriją, svarbu pasikonsultuoti su gydytoju, kad išsiaiškintumėte priežastis. Specialistas įvertins, kiek padidėjęs baltymų kiekis, ar nėra gretutinės patologijos, kaip atkurti normalią organizmo veiklą. Remiantis statistika, moteris turi didesnę riziką susirgti šlapimo takų infekcija nei vyras.

Metodo principas pagrįsta baltymų koaguliacija šlapime, kai yra azoto (arba 20 % sulfosalicilo rūgšties) rūgšties.

Progresas: 1-2 lašai azoto (arba sulfosalicilo) rūgšties įlašinami į 5 lašus šlapimo. Jei šlapime yra baltymų, atsiranda drumstumas.

Lentelė. Patologinių šlapimo komponentų nustatymas .


Pastaba: kai tiriamajame šlapime yra gliukozės ir baltymų, nustatomas jų kiekybinis kiekis.

Metodo principas : baltymui sąveikaujant su pirogalolio raudonuoju ir natrio molibdatu susidaro spalvotas kompleksas, kurio spalvos intensyvumas proporcingas baltymo koncentracijai mėginyje.

Reagentai: Darbinis reagentas - pirogalolio raudonojo tirpalas sukcinato buferyje, baltymų kalibravimo tirpalas, kurio koncentracija 0,50 g/l

Progresas:

Mėginius sumaišykite, palaikykite 10 min. kambario temperatūroje (18-25ºС). Išmatuokite eksperimentinio (Dop) ir kalibravimo mėginio (Dk) optinį tankį, palyginti su kontroliniu mėginiu, esant λ=598 (578-610) nm. Spalva išlieka stabili 1 val.

Skaičiavimas: baltymų koncentracija šlapime (С) g/l apskaičiuojama pagal formulę:

С= Dop/Dk×0,50

kur: Dop \u003d Dk \u003d C \u003d g / l.

Normalios reikšmės: iki 0,094 g/l, (0,141 g per dieną)

Išvada:

Metodo principas : Kai D-gliukozę oksiduoja atmosferos deguonis, veikiant gliukozės oksidazei, susidaro ekvimolinis vandenilio peroksido kiekis. Veikiant peroksidazei, vandenilio peroksidas oksiduoja chromogeninius substratus (fenolio ir 4 aminoantipirino mišinį – 4AAP), susidarant spalvotam produktui. Spalvos intensyvumas yra proporcingas gliukozės kiekiui.

gliukozės oksidazė


Gliukozė + O2 + H2O gliukonolaktonas + H2O2

peroksidazė

2H2O2 + fenolis + 4AAP spalvotas junginys + 4H2O

Progresas: į du mėgintuvėlius įpilkite 1 ml darbinio tirpalo ir 0,5 ml fosfatinio buferio. Į pirmąjį mėgintuvėlį įpilama 0,02 ml šlapimo, į antrą mėgintuvėlį įpilama 0,02 ml kalibratoriaus (kalibravimo, standartinis gliukozės tirpalas, 10 mmol/l). Mėginiai sumaišomi, laikomi 15 minučių 370C temperatūroje termostate, o eksperimentinių (Dop) ir kalibravimo (Dc) mėginių optinis tankis matuojamas darbinio reagento atžvilgiu, kai bangos ilgis 500-546 nm.

Skaičiavimas: С = Dop/Dk  10 mmol/l Dop= Dk =

Išvada:

Pastaba. Jei cukraus kiekis šlapime yra didesnis nei 1%, jis turi būti atskiestas.

Šiuo metu biocheminės laboratorijos taiko vieningą greitąjį šlapimo gliukozės tyrimo metodą, naudojant reaktyvųjį popierių gliukozei Glucotest arba kombinuotas pH, baltymų, gliukozės, ketoninių kūnų ir kraujo tyrimo juosteles. Bandymo juostelės 1 sekundei nuleidžiamos į indą su šlapimu. ir palyginkite spalvų skalę.

Baltymų nustatymas naudojant pirogalolio raudonąjį indikatorių

Metodo principas pagrįstas spalvoto komplekso, susidarančio baltymų molekulėms sąveikaujant su Pyrogallol Red-Molybdate komplekso dažų komplekso molekulėmis rūgščioje terpėje, tirpalo optinio tankio matavimu fotometriniu būdu. Tirpalo spalvos intensyvumas yra proporcingas baltymų kiekiui tiriamojoje medžiagoje. Detergentų buvimas reagente užtikrina lygiavertį skirtingos prigimties ir struktūros baltymų nustatymą.

Reagentai. 1) 1,5 mmol/l pirogalolio raudonojo (PGD) tirpalas: 60 mg PGA ištirpinama 100 ml metanolio. Laikyti 0–5 °C temperatūroje; 2) 50 mmol/l sukcinato buferis pH 2,5: 5,9 g gintaro rūgšties (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g natrio oksalato (Na2C2O4) ir 0,5 g natrio benzoato (C6H5COONa) ištirpinama 900 ml distiliuoto vandens; 3) 10 mmol/l natrio molibdato kristalo hidrato tirpalas (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg natrio molibdato ištirpinama 100 ml distiliuoto vandens; 4) Darbinis reagentas: 40 ml PGA tirpalo ir 4 ml natrio molibdato tirpalo įpilama į 900 ml sukcinato buferinio tirpalo. Tirpalo pH sureguliuojamas iki 2,5 0,1 mol/l druskos rūgšties (HCl) tirpalu, o tūris – iki 1 litro. Šios formos reagentas yra paruoštas naudojimui ir yra stabilus, kai laikomas nuo šviesos apsaugotoje vietoje ir 2–25 °C temperatūroje 6 mėnesius; 5) 0,5 g/l albumino etaloninis tirpalas.

Apibrėžimo pažanga. Į pirmąjį mėgintuvėlį įpilama 0,05 ml tiriamojo šlapimo, į antrąjį – 0,05 ml standartinio albumino tirpalo, į trečiąjį mėgintuvėlį (kontrolinis mėginys) įpilama 0,05 ml distiliuoto vandens, po to – 3 ml darbinio tirpalo. į šiuos mėgintuvėlius įpilama reagento. Mėgintuvėlių turinys sumaišomas ir po 10 minučių mėginys ir standartas yra fotometuojami prieš kontrolinį mėginį 596 nm bangos ilgiu kiuvetėje, kurios optinio kelio ilgis 10 mm.


Baltymų koncentracija tiriamajame šlapimo mėginyje apskaičiuojama pagal formulę:

čia C – baltymo koncentracija tiriamojo šlapimo mėginyje, g/l; Apr ir Ast - tirto šlapimo mėginio ir albumino etaloninio tirpalo ekstincija, g/l; 0,5 - etaloninio albumino tirpalo koncentracija, g/l.

Pastabos:

  • tirpalo spalva (spalvų kompleksas) išlieka stabili vieną valandą;
  • tiesiogiai proporcingas baltymų koncentracijos tiriamajame mėginyje ir tirpalo absorbcijos santykis priklauso nuo fotometro tipo;
  • kai baltymų kiekis šlapime viršija 3 g/l, mėginys skiedžiamas izotoniniu natrio chlorido tirpalu (9 g/l) ir nustatymas kartojamas. Nustatant baltymų koncentraciją atsižvelgiama į praskiedimo laipsnį.

Taip pat žiūrėkite:

  • Baltymų nustatymas šlapime
  • Standartizuotas testas su sulfosalicilo rūgštimi
  • Vieningas Brandberg-Roberts-Stolnikovo metodas
  • Baltymų kiekio šlapime nustatymas reaguojant su sulfosalicilo rūgštimi
  • Biureto metodas
  • Bence-Jones baltymo aptikimas šlapime

Proteinurija yra reiškinys, kai šlapime nustatomas baltymas, o tai rodo inkstų pažeidimo galimybę, yra širdies, kraujo ir limfinių kraujagyslių ligų vystymosi veiksnys.

Baltymų aptikimas šlapime ne visada rodo ligą. Panašus reiškinys būdingas net visiškai sveikiems žmonėms, kurių šlapime galima nustatyti baltymą. Hipotermija, fizinis aktyvumas, baltyminio maisto vartojimas lemia baltymų atsiradimą šlapime, kuris išnyksta be jokio gydymo.

Atrankos metu baltymų aptinkama 17% iš pažiūros sveikų žmonių, tačiau tik 2% iš šio skaičiaus žmonių teigiamas tyrimo rezultatas yra inkstų ligos požymis.

Baltymų molekulės neturėtų patekti į kraują. Jie gyvybiškai svarbūs organizmui – yra ląstelių statybinė medžiaga, dalyvauja reakcijose kaip kofermentai, hormonai, antikūnai. Tiek vyrams, tiek moterims norma yra visiškas baltymų nebuvimas šlapime.

Funkciją, neleidžiančią organizmui prarasti baltymų molekulių, atlieka inkstai.

Yra dvi inkstų sistemos, kurios filtruoja šlapimą:

  1. inkstų glomerulų – nepraleidžia didelių molekulių, bet nesulaiko albuminų, globulinų – nedidelės frakcijos baltymų molekulių;
  2. inkstų kanalėliai – adsorbuoja glomerulų filtruotus baltymus, grįžta atgal į kraujotakos sistemą.

Šlapime randama albuminų (apie 49 proc.), mukoproteinų, globulinų, iš kurių imunoglobulinai sudaro apie 20 proc.

Globulinai yra didelės molekulinės masės išrūgų baltymai, kuriuos gamina imuninė sistema ir kepenys. Daugumą jų sintetina imuninė sistema, tai yra imunoglobulinai arba antikūnai.

Albuminai yra ta baltymų dalis, kuri šlapime atsiranda pirmieji jau su nedideliu inkstų pažeidimu. Tam tikras albumino kiekis yra ir sveikame šlapime, tačiau jis toks nereikšmingas, kad laboratorinės diagnostikos pagalba jo neaptinkama.

Apatinė riba, kurią galima nustatyti naudojant laboratorinę diagnostiką, yra 0,033 g / l. Jei per dieną prarandama daugiau nei 150 mg baltymų, jie kalba apie proteinuriją.


Pagrindiniai faktai apie baltymus šlapime

Liga su lengvu proteinurija yra besimptomė. Vizualiai šlapimas, kuriame nėra baltymų, negali būti atskirtas nuo šlapimo, kuriame yra nedidelis baltymų kiekis. Šiek tiek putotas šlapimas tampa jau esant dideliam proteinurijos laipsniui.

Galima daryti prielaidą, kad aktyvus baltymų išsiskyrimas su šlapimu pacientui pasireiškia tik vidutinio ar sunkaus laipsnio liga, kai atsiranda galūnių, veido ir pilvo edema.

Ankstyvosiose ligos stadijose netiesioginiai proteinurijos požymiai gali būti simptomai:

  • šlapimo spalvos pokyčiai;
  • didėjantis silpnumas;
  • apetito stoka;
  • pykinimas Vėmimas;
  • kaulų skausmas;
  • mieguistumas, galvos svaigimas;
  • pakilusi temperatūra.

Tokių požymių atsiradimas neturėtų būti ignoruojamas, ypač nėštumo metu. Tai gali reikšti nedidelį nukrypimą nuo normos, gali būti besivystančios preeklampsijos, preeklampsijos simptomas.

Kiekybiškai nustatyti baltymų praradimą nėra lengva užduotis, norint gauti išsamesnį paciento būklės vaizdą, atliekami keli laboratoriniai tyrimai.

Sunkumai pasirenkant baltymų pertekliaus šlapime nustatymo metodą paaiškinami:

  • maža baltymų koncentracija, kuriai atpažinti reikalingi didelio tikslumo instrumentai;
  • šlapimo sudėtis, kuri apsunkina užduotį, nes jame yra medžiagų, kurios iškreipia rezultatą.

Daugiausia informacijos galima gauti analizuojant pirmą rytinę šlapimo dalį, kuri surenkama pabudus.

Analizės išvakarėse turi būti laikomasi šių sąlygų:

  • nenaudokite aštraus, kepto, baltymingo maisto, alkoholio;
  • vengti vartoti diuretikų 48 valandas;
  • apriboti fizinį aktyvumą;
  • atidžiai laikykitės asmeninės higienos taisyklių.

Rytinis šlapimas yra labiausiai informatyvus, nes jis ilgą laiką išlieka šlapimo pūslėje ir šiek tiek priklauso nuo suvartojamo maisto.

Baltymų kiekį šlapime galima analizuoti atsitiktine porcija, kuri paimama bet kada, tačiau tokia analizė yra mažiau informatyvi, o paklaidos tikimybė didesnė.

Norint kiekybiškai įvertinti kasdienį baltymų netekimą, atliekama viso paros šlapimo analizė. Tam per 24 valandas visas per dieną išsiskiriantis šlapimas surenkamas į specialų plastikinį indą. Galite pradėti rinkti bet kuriuo metu. Pagrindinė sąlyga – lygiai viena surinkimo diena.

Kokybinis proteinurijos apibrėžimas pagrįstas baltymo savybe denatūruotis veikiant fiziniams ar cheminiams veiksniams. Kokybiniai metodai yra atrankos metodai, leidžiantys nustatyti baltymų buvimą šlapime, tačiau neleidžiantys tiksliai įvertinti proteinurijos laipsnio.

Naudoti pavyzdžiai:

  • su virimu;
  • sulfosalicilo rūgštis;
  • azoto rūgštis, Larionovos reagentas su Hellerio žiedo testu.

Bandymas su sulfosalicilo rūgštimi atliekamas lyginant kontrolinį šlapimo mėginį su eksperimentiniu, kurio metu į šlapimą įlašinami 7-8 lašai 20% sulfosalicilo rūgšties. Išvada apie baltymo buvimą daroma pagal opalinio drumstumo, atsirandančio mėgintuvėlyje reakcijos metu, intensyvumą.

Dažniau naudojamas Geller testas naudojant 50% azoto rūgšties. Metodo jautrumas 0,033 g/l. Esant tokiai baltymo koncentracijai mėgintuvėlyje su šlapimo mėginiu ir reagentu, praėjus 2-3 minutėms nuo eksperimento pradžios atsiranda baltas siūlinis žiedas, kurio susidarymas rodo baltymo buvimą.

Gelerio testas

Pusiau kiekybiniai metodai apima:

  • baltymų nustatymo šlapime metodas bandymo juostelėmis;
  • Brandbergo-Roberto-Stolnikovo metodas.

Brandberg-Roberts-Stolnikov nustatymo metodas pagrįstas Gelerio žiedo metodu, tačiau leidžia tiksliau įvertinti baltymų kiekį. Atliekant tyrimą pagal šį metodą, per 2–3 minutes nuo tyrimo pradžios kelių praskiedimų šlapime susidaro siūlinis baltymo žiedas.

Praktikoje naudojamas bandymo juostelių metodas, kai indikatorius yra bromfenolio mėlynasis dažiklis. Bandymo juostelių trūkumas yra selektyvus jautrumas albuminui, dėl kurio rezultatas iškraipomas, padidėjus globulinų ar kitų baltymų koncentracijai šlapime.

Metodo trūkumai taip pat apima palyginti mažą testo jautrumą baltymams. Bandymo juostelės pradeda reaguoti į baltymų buvimą šlapime, kai baltymų koncentracija viršija 0,15 g / l.

Kiekybinius metodus galima sąlygiškai suskirstyti į:

  1. drumstimetrinis;
  2. kolorimetrinis.

Metodai pagrįsti baltymų savybe sumažinti tirpumą veikiant rišikliui, susidarant blogai tirpstančiam junginiui.

Baltymus rišančios medžiagos gali būti:

  • sulfosalicilo rūgštis;
  • trichloracto rūgštis;
  • benzetonio chloridas.

Bandymų rezultatai daromi remiantis suspensijos mėginio šviesos srauto susilpnėjimo laipsniu, palyginti su kontroline medžiaga. Šio metodo rezultatus ne visada galima priskirti patikimiems dėl skirtingų vykdymo sąlygų: reagentų maišymo greičio, temperatūros, terpės rūgštingumo.

Įtakoti vaistų vartojimo vertinimą dieną prieš, prieš atlikdami tyrimus šiais metodais, negalite vartoti:

  • antibiotikai;
  • sulfonamidai;
  • jodo preparatai.

Metodas yra prieinamas, todėl jį galima plačiai naudoti atrankai. Tačiau tikslesnius rezultatus galima gauti naudojant brangesnius kolorimetrinius metodus.

Kolorimetriniai metodai yra vienas jautriausių metodų, leidžiančių tiksliai nustatyti baltymų koncentraciją šlapime.

Norėdami tai padaryti labai tiksliai, leiskite:

  • biureto reakcija;
  • Lowry technika;
  • dažymo metodai, kuriuose naudojami dažikliai, kurie sudaro kompleksus su šlapimo baltymais, kurie vizualiai skiriasi nuo mėginio.

Kolorimetriniai baltymų nustatymo šlapime metodai

Metodas patikimas, labai jautrus, leidžiantis nustatyti albuminų, globulinų, paraproteinų kiekį šlapime. Jis naudojamas kaip pagrindinis būdas išsiaiškinti prieštaringus tyrimų rezultatus, taip pat kasdienį baltymų kiekį šlapime ligoninių nefrologijos skyriuose.

Dar tikslesnius rezultatus galima pasiekti naudojant Lowry metodą, kuris paremtas biureto reakcija, taip pat Folino reakcija, atpažįstančia triptofaną ir tiroziną baltymų molekulėse.

Siekiant pašalinti galimas klaidas, šlapimo mėginys išvalomas dializės būdu iš aminorūgščių, šlapimo rūgšties. Galimos klaidos vartojant salicilatus, tetraciklinus, chlorpromaziną.

Tiksliausias būdas nustatyti baltymą yra pagrįstas jo gebėjimu prisijungti prie dažiklių, iš kurių naudojami:

  • ponceau;
  • coumasi briliantinė mėlyna;
  • pyrogall raudona.

Per dieną pasikeičia su šlapimu išsiskiriančių baltymų kiekis. Siekiant objektyviau įvertinti baltymų netekimą šlapime, įvedama kasdieninio baltymo šlapime sąvoka. Ši vertė matuojama g/dieną.

Norint greitai įvertinti paros baltymų kiekį šlapime, baltymo ir kreatinino kiekis nustatomas vienoje šlapimo porcijoje, tada pagal baltymų/kreatinino santykį daroma išvada apie baltymų netekimą per dieną.

Metodas pagrįstas tuo, kad kreatinino išsiskyrimo su šlapimu greitis yra pastovus dydis, nesikeičia per dieną. Sveikam žmogui normalus baltymų ir kreatinino santykis šlapime yra 0,2.

Šis metodas pašalina galimas klaidas, kurios gali atsirasti renkant kasdienį šlapimą.

Labiau tikėtina, kad kokybiniai mėginiai duoda klaidingai teigiamus arba klaidingai neigiamus rezultatus nei kiekybiniai. Klaidos atsiranda dėl vaistų vartojimo, mitybos įpročių, fizinio aktyvumo tyrimo išvakarėse.

Šio kokybinio tyrimo aiškinimas pateikiamas vizualiai įvertinus drumstumą mėgintuvėlyje, lyginant tyrimo rezultatą su kontroline medžiaga:

  1. silpnai teigiama reakcija įvertinta kaip +;
  2. teigiamas ++;
  3. labai teigiamas +++.

Hellerio žiedo testas tiksliau įvertina baltymo buvimą šlapime, tačiau baltymo šlapime kiekybiškai nenustato. Kaip ir sulfosalicilo rūgšties testas, Hellerio testas suteikia tik apytikslį supratimą apie baltymų kiekį šlapime.

Metodas leidžia kiekybiškai įvertinti proteinurijos laipsnį, tačiau jis yra per daug sunkus, netikslus, nes stipriai praskiedus vertinimo tikslumas mažėja.

Norėdami apskaičiuoti baltymą, turite padauginti šlapimo praskiedimo laipsnį iš 0,033 g / l:

1 1 1: 2 0,066
1 2 1: 3 0,099
1 3 1: 4 0,132
1 4 1: 5 0,165
1 5 1: 6 0,198
1 6 1: 7 0,231
1 7 1: 8 0,264
1 8 1: 9 0,297
1 9 1: 10 0,33

Tyrimui atlikti nereikia specialių sąlygų, šią procedūrą nesunku atlikti namuose. Norėdami tai padaryti, turite 2 minutes nuleisti bandymo juostelę į šlapimą.

Rezultatai bus išreikšti pliusų skaičiumi ant juostelės, kurios dekodavimas pateiktas lentelėje:

  1. Tyrimo rezultatai, atitinkantys vertes iki 30 mg/100 ml, atitinka fiziologinę proteinuriją.
  2. Bandymo juostelės vertės 1+ ir 2++ rodo reikšmingą proteinuriją.
  3. Vertės 3+++, 4++++ stebimos esant patologinei proteinurijai, kurią sukelia inkstų liga.

Bandymo juostelėmis galima tik apytiksliai nustatyti padidėjusį baltymo kiekį šlapime. Jie nėra naudojami tiksliai diagnozei nustatyti, o tuo labiau jie negali pasakyti, ką tai reiškia.

Neleiskite, kad bandymo juostelės tinkamai įvertintų baltymų kiekį nėščių moterų šlapime. Patikimesnis vertinimo metodas yra baltymų nustatymas paros šlapime.

Baltymų nustatymas šlapime naudojant bandymo juostelę:

Kasdienis baltymas šlapime yra tikslesnė inkstų funkcinės būklės diagnozė. Norėdami tai padaryti, per dieną turite surinkti visą šlapimą, išsiskiriantį per inkstus.

Priimtinos baltymų ir kreatinino santykio vertės yra lentelėje pateikti duomenys:

Jei netenkate daugiau nei 3,5 g baltymų per dieną, būklė vadinama didžiule proteinurija.

Jei šlapime yra daug baltymų, po 1 mėnesio reikia atlikti antrą tyrimą, po 3 mėnesių, pagal kurio rezultatus nustatoma, kodėl viršijama norma.

Baltymų padidėjimo šlapime priežastys yra padidėjusi jo gamyba organizme ir inkstų veiklos sutrikimas, išskiriama proteinurija:

  • fiziologiniai – nedideli nukrypimai nuo normos atsiranda dėl fiziologinių procesų, išsisprendžia savaime;
  • patologinis – pakitimai atsiranda dėl patologinio proceso inkstuose ar kituose organizmo organuose, progresuoja be gydymo.

Nedidelį baltymų padidėjimą galima pastebėti esant gausiai baltymų mitybai, mechaniniams nudegimams, traumoms, kartu su padidėjusia imunoglobulinų gamyba.

Nedidelį proteinurijos laipsnį gali sukelti fizinis aktyvumas, psichoemocinis stresas, tam tikrų vaistų vartojimas.

Fiziologinė proteinurija reiškia baltymų padidėjimą šlapime vaikams pirmosiomis dienomis po gimimo. Tačiau jau po savaitės gyvenimo baltymų kiekis vaiko šlapime laikomas nukrypimu nuo normos ir rodo besivystančią patologiją.

Inkstų ligas, infekcines ligas taip pat kartais lydi baltymų atsiradimas šlapime.

Tokios būklės dažniausiai atitinka lengvą proteinurijos laipsnį, yra laikini reiškiniai, greitai išnyksta savaime, nereikalaujant specialaus gydymo.

Sunkesnės būklės, sunki proteinurija pastebima šiais atvejais:

  • glomerulonefritas;
  • diabetas
  • širdies liga;
  • pūslės vėžys;
  • daugybinė mieloma;
  • infekcija, vaistų sukeltas sužalojimas, policistinė inkstų liga;
  • aukštas kraujo spaudimas;
  • sisteminė raudonoji vilkligė;
  • Goodpasture sindromas.

Žarnyno nepraeinamumas, širdies nepakankamumas, hipertireozė gali sukelti baltymų pėdsakų šlapime.

Proteinurijos veislės klasifikuojamos keliais būdais. Norėdami kokybiškai įvertinti baltymus, galite naudoti Jaroševskio klasifikaciją.

Pagal Jaroševskio sistematiką, sukurtą 1971 m., Išskiriama proteinurija:

  1. inkstų - tai apima glomerulų filtracijos pažeidimą, kanalėlių baltymų išsiskyrimą, nepakankamą baltymų resorbciją kanalėliuose;
  2. prerenalinis - atsiranda už inkstų ribų, išsiskiria hemoglobinas, baltymai, kurių perteklius kraujyje atsiranda dėl daugybinės mielomos;
  3. postrenalinis - atsiranda šlapimo takų srityje po inkstų, baltymų išsiskyrimas naikinant šlapimo organus.

Norint kiekybiškai įvertinti, kas vyksta, proteinurijos laipsnis yra sąlygiškai izoliuotas. Reikia atsiminti, kad be gydymo jie gali lengvai pasunkėti.

Sunkiausia proteinurijos stadija išsivysto, kai per dieną netenkama daugiau nei 3 g baltymų. Baltymų praradimas nuo 30 mg iki 300 mg per parą atitinka vidutinio sunkumo stadiją arba mikroalbumuriją. Iki 30 mg baltymų per dieną šlapime reiškia lengvą proteinurijos laipsnį.

Kiek baltymų yra šlapime?

  1. Paprastai šlapime praktiškai nėra baltymų (mažiau nei 0,002 g / l). Tačiau tam tikromis sąlygomis sveikų žmonių šlapime gali atsirasti nedidelis kiekis baltymų, suvalgius didelį kiekį baltyminio maisto, dėl vėsinimo, emocinio streso, užsitęsusio fizinio krūvio (vadinamoji žygiuojanti proteinurija).

    Didelio kiekio baltymų atsiradimas šlapime (proteinurija) yra patologija. Proteinuriją gali sukelti inkstų (ūminis ir lėtinis glomerulonefritas, pielonefritas, nėštumo nefropatija ir kt.) arba šlapimo takų (šlapimo pūslės, prostatos, šlapimtakių uždegimai) ligos. Inkstų proteinurija gali būti organinė (glomerulinė, kanalėlių ir per didelė) ir funkcinė (karščiuojanti proteinurija, ortostatinė paaugliams, per daug maitinantiems kūdikiams, naujagimiams). Funkcinė proteinurija nėra susijusi su inkstų patologija. Baltymų paros norma pacientams svyruoja nuo 0,1 iki 3,0 g ar daugiau. Šlapimo baltymų sudėtis nustatoma elektroforezės būdu. Bence-Jones baltymo atsiradimas šlapime būdingas daugybinei mielomai ir Waldenströmo makroglobulinemijai, #223;2 mikroglobulinas inkstų kanalėlių pažeidimo atveju.

  2. Paprastai šlapime baltymų praktiškai nėra (mažiau nei 0,002 g/l).
  3. Pagrindiniai ligos požymiai, nustatyti tiriant šlapimą.

    SG Savitasis svoris. Specifinio svorio sumažėjimas rodo inkstų gebėjimo koncentruoti šlapimą ir pašalinti toksinus iš organizmo sumažėjimą, o tai atsitinka esant inkstų nepakankamumui. Savito svorio padidėjimas yra susijęs su dideliu cukraus ir druskų kiekiu šlapime. Atkreiptinas dėmesys, kad tik vienu šlapimo tyrimu savitojo svorio įvertinti neįmanoma, gali būti atsitiktinių pakitimų, šlapimo tyrimą kartoti reikia 1-2 kartus.

    Baltymai Baltymai šlapime - proteinurija. Proteinurijos priežastis gali būti pačių inkstų pažeidimas nefritu, amiloidoze, nuodų pažeidimais. Baltymų šlapime gali atsirasti ir dėl šlapimo takų ligų (pyelonefrito, cistito, prostatito).

    Gliukozė Gliukozę (cukrų) šlapime – gliukozuriją – dažniausiai sukelia diabetas. Retesnė priežastis yra inkstų kanalėlių pažeidimas. Labai nerimą kelia, jei ketoniniai kūnai nustatomi kartu su cukrumi šlapime. Tai atsitinka sergant sunkiu, netinkamai reguliuojamu cukriniu diabetu ir yra sunkiausios diabeto komplikacijos – diabetinės komos – pranašas.

    Bilirubinas, urobilinogenas Bilirubinas ir urobilinas nustatomi šlapime esant įvairioms geltos formoms.

    Eritrocitai Eritrocitai šlapime – hematurija. Tai atsitinka arba pažeidžiant pačius inkstus, dažniausiai dėl jų uždegimo, arba pacientams, sergantiems šlapimo takų ligomis. Jei, pavyzdžiui, akmuo juda išilgai jų, gali sužaloti gleivinę, šlapime bus raudonųjų kraujo kūnelių. Irstantis inkstų navikas taip pat gali sukelti hematuriją.

    Leukocitai Leukocitai šlapime – leukociturija, dažniausiai šlapimo takų uždegiminių pakitimų pasekmė pacientams, sergantiems pielonefritu, cistitu. Leukocitai dažnai nustatomi esant moterų išorinių lytinių organų uždegimams, vyrams – su prostatos liaukos uždegimu.

    Cilindrai Cilindrai yra savotiški mikroskopiniai dariniai. Sveikam žmogui gali būti 1–2 hialino cilindrų. Jie susidaro inkstų kanalėliuose, tai yra baltymų dalelės, sulipusios. Tačiau jų skaičiaus padidėjimas, kitų tipų cilindrai (granuliuoti, eritrocitai, riebaliniai) visada rodo paties inkstų audinio pažeidimą. Yra cilindrų sergant uždegiminėmis inkstų ligomis, medžiagų apykaitos pažeidimais, pavyzdžiui, cukriniu diabetu.

    Metodo informatyvumas ir jo ribos. Bendrojo šlapimo tyrimo informatyvumas atskiroms inkstų ligoms atpažinti yra mažas, dažniausiai reikalingi papildomi, tikslesni tyrimai. Tačiau šis tyrimas yra labai svarbus, ypač atliekant prevencinius tyrimus, nes jis leidžia nustatyti ankstyvus inkstų ligos požymius. Taip pat žinoma, kad dažnai inkstų ligos yra paslėptos, o tik šlapimo tyrimas leidžia jas įtarti ir atlikti tolesnius būtinus tyrimus.

  4. Daugumoje laboratorijų, tirdami šlapimą dėl baltymų, pirmiausia taiko kokybines reakcijas, kurios neaptinka baltymo sveiko žmogaus šlapime. Jei baltymas šlapime aptinkamas kokybinėmis reakcijomis, atliekamas kiekybinis (arba pusiau kiekybinis) nustatymas. Tuo pačiu metu svarbios naudojamų metodų ypatybės, apimančios skirtingą uroproteinų spektrą. Taigi, nustatant baltymą naudojant 3% sulfosalicilo rūgštį, baltymų kiekis iki 0,03 g/l laikomas normaliu, o naudojant pirogalolio metodą, normalių baltymų verčių riba pakyla iki 0,1 g/l. Šiuo atžvilgiu analizės formoje turi būti nurodyta normalioji baltymo vertė laboratorijoje taikytam metodui.

    Nustatant minimalius baltymų kiekius, analizę rekomenduojama kartoti, abejotinais atvejais reikia nustatyti paros baltymų netekimą šlapime. Normalaus dienos šlapime yra nedidelis kiekis baltymų. Esant fiziologinėms sąlygoms, išfiltruotą baltymą beveik visiškai reabsorbuoja proksimalinių kanalėlių epitelis, o jo kiekis paros šlapimo kiekyje, priklausomai nuo skirtingų autorių, skiriasi nuo pėdsakų iki 20-50, 80-100 mg ir net iki 150-200. mg. Kai kurie autoriai mano, kad 30-50 mg per parą baltymų išskyrimas yra suaugusio žmogaus fiziologinė norma. Kiti teigia, kad baltymų išskyrimas su šlapimu neturėtų viršyti 60 mg/m2 kūno paviršiaus per dieną, išskyrus pirmąjį gyvenimo mėnesį, kai fiziologinė proteinurija gali būti keturis kartus didesnė už nurodytą reikšmę.

    Bendra baltymų atsiradimo sveiko žmogaus šlapime sąlyga yra pakankamai didelė jų koncentracija kraujyje ir ne didesnė kaip 100-200 kDa molekulinė masė.

  5. tai nera norma, su tavo diagnoze tai galima, kitas reikalas, kad nefroziniam sindromui tai is tikro mazas rodiklis.. pasiziurekit i klinika - patinimai, spaudimas ir t.t. toliau vartokite paskirtą gydymą.
  6. ir vis dėlto pasakysiu: tai NETURI būti normalu!

Į viršų