Dom › Zanimljivo je › Određivanje individualne kompatibilnosti krvi. Testovi na kompatibilnost tokom transfuzije krvi

Određivanje individualne kompatibilnosti krvi. Testovi na kompatibilnost tokom transfuzije krvi

Detalji

Prilikom transfuzije krvi lekar mora uraditi sledeće:
1. Odrediti indikacije za transfuziju krvi, identifikovati kontraindikacije, prikupiti anamnezu transfuzije.
2. Odredite krvnu grupu i Rh faktor primaoca.
3. Odaberite odgovarajuću (jednogrupnu i jednorezusnu) krv i makroskopski procijenite njenu prikladnost.
4. Ponovo provjerite krvnu grupu davaoca (iz bočice) prema ABO sistemu.
5. Provedite test individualne kompatibilnosti prema ABO sistemu.
6. Provedite test individualne kompatibilnosti prema Rh faktoru.
7. Provedite biološki test.
8. Uradite transfuziju krvi.
9. Popunite dokumentaciju.

PRIKUPLJANJE TRANSFUZIOLOŠKE0G0 ANAMNEZE

Od pacijenta je potrebno saznati da li poznaje svoju grupu i Rh faktor (koristi se kao dodatna informacija), da li je u prošlosti bilo transfuzije krvi i njenih komponenti, da li je bilo komplikacija. Kod žena je potrebno utvrditi prisutnost trudnoća i njihovih komplikacija (posebno kod Rh negativnih žena).

MAKROSKOPSKA OCJENA POGODNOSTI KRVI

Prilikom vizuelnog pregleda potrebno je obratiti pažnju na:
■ Ispravnost.
■ Datum isteka.
■ Čvrsto pakovanje.
■ Krv treba podijeliti u tri sloja (crveni eritrociti na dnu, uska siva traka leukocita i trombocita iznad, žuta providna plazma iznad njih).
■ Plazma mora biti bistra, bez filmova i ljuskica (inficirana krv) i ugrušaka i bez crvene boje (hemoliza).
Ako barem jedan od predočenih zahtjeva nije ispunjen na makroskopskom pregledu, takva krv se ne može transfuzirati.

TESTOVI INDIVIDUALNE KOMPATIBILNOSTI

Prije postavljanja reakcija primatelju se uzima krv iz vene, koja se dijeli na ugrušak i serum (taloženjem ili centrifugiranjem).

a) Test za individualnu kompatibilnost prema ABO sistemu
Velika kap (0,1 ml) krvnog seruma primaoca i mala kap (0,01 ml) krvi davaoca iz bočice se nanose na bijelu površinu i pomiješaju jedna s drugom, periodično protresajući ploču. Reakcija se izvodi na temperaturi od 15-25°C, rezultati se procjenjuju nakon 5 minuta: odsustvo aglutinacije eritrocita donora ukazuje na kompatibilnost krvi davaoca i primaoca prema ABO sistemu. Pojava aglutinacije ukazuje na njihovu nekompatibilnost - takva krv se ne može transfuzirati ovom pacijentu.

b) Test individualne kompatibilnosti prema Rh faktoru
Nakon što se utvrdi kompatibilnost krvi davaoca i primaoca po ABO sistemu, potrebno je utvrditi kompatibilnost u odnosu na Rh faktor. Test kompatibilnosti Rh faktora može se provesti na jedan od dva načina:
■ test sa 33% poliglukina,
■ test sa 10% želatina.
U kliničkoj praksi najviše se koristi test sa poliglucinom.

Uzorak koristeći 33% poliglukina
Reakcija se izvodi u epruveti za centrifugiranje bez zagrijavanja 5 minuta. Na dno epruvete se dodaju 2 kapi seruma primaoca, 1 kap krvi donora i 1 kap 33% rastvora poliglucina. Nakon toga, sadržaj se miješa naginjanjem epruvete i rotiranjem oko svoje ose, raspoređujući sadržaj po stijenkama u ravnomjernom sloju. Epruveta se rotira 5 minuta, nakon čega se dodaje 3-4 ml fiziološke otopine i lagano miješa, naginjući epruvetu 2-3 puta u horizontalnu ravan (bez tresanja!). Nakon toga se procjenjuje rezultat: prisustvo aglutinacije eritrocita ukazuje na nekompatibilnost krvi davaoca i primatelja prema Rh faktoru, takva krv se ne može transfuzirati. Ujednačeno bojenje sadržaja u epruveti, odsustvo reakcije aglutinacije ukazuje na kompatibilnost krvi davaoca i primatelja u smislu Rh faktora.

Uzorak koristite 10% želatine
Na dno epruvete stavlja se 1 kap donorskih eritrocita, prethodno ispranih desetostrukom zapreminom fiziološkog rastvora, zatim se dodaju 2 kapi 10% rastvora želatina zagrejanog do tečenja i 2 kapi seruma primaoca.
Pomiješajte sadržaj epruvete i stavite unutra vodeno kupatilo na temperaturi od 46-48 C u trajanju od 10 minuta. Nakon toga se u epruvetu dodaje 6-8 ml fiziološke otopine, sadržaj se miješa, okrećući epruvetu 1-2 puta i procjenjuje se rezultat: prisustvo aglutinacije ukazuje na nekompatibilnost krvi davaoca i primatelja. , njegova transfuzija je neprihvatljiva.

Ako sadržaj epruvete ostane jednolično obojen i u njemu se ne uoči reakcija aglutinacije, krv davaoca je kompatibilna s krvlju primaoca prema Rh faktoru.
Kod nekih primatelja (u prisustvu nepotpunih latentnih ili blokirajućih antitijela, niske aktivnosti imunoloških antitijela) ovi testovi ne otkrivaju nekompatibilnost. U tim slučajevima se vrši individualna selekcija krvi davaoca.
Individualni odabir krvi donora je neophodan za sljedeće grupe primatelja:
1. Izoimunizirani prethodnim transfuzijama krvi ili trudnoćama.
2. Oni koji su imali komplikaciju transfuzije krvi.
3. Potrebna je masivna transfuzija krvi.
4. Ako je nemoguće preuzeti kompatibilnu krv konvencionalni testovi kompatibilnosti.

BIOLOŠKI UZORAK

Postoji veliki broj manji grupni sistemi koji mogu izazvati komplikacije. Da bi se ova mogućnost isključila, na početku transfuzije krvi se radi još jedan test kompatibilnosti - biološki test.

Prvo se mlazom transfuzuje 10-15 ml krvi, nakon čega se transfuzija prekida (kapaljka se blokira) i prati stanje pacijenta 3 minute. Sa odsustvom kliničke manifestacije reakcije ili komplikacije (povećan broj otkucaja srca, disanje, otežano disanje, otežano disanje, crvenilo lica, itd.) Ponovo se unosi 10-15 ml krvi i pacijent se ponovo posmatra 3 minuta. Ovo se ponavlja tri puta.

Izostanak reakcija kod pacijenta nakon trostruke kontrole je znak kompatibilnosti infuzirane krvi i služi kao osnova za provedbu cjelokupne transfuzije krvi.
Ako je krv davaoca i primaoca nekompatibilna tokom biološkog testa, ponašanje pacijenta postaje nemirno: tahikardija, otežano disanje, crvenilo lica, osjećaj jeze ili vrućine, stezanje u grudima, bol u trbuhu i jako važna karakteristika- Bol u lumbalnoj regiji.
Kada se ovi znakovi pojave, krv se smatra nekompatibilnom i transfuzija krvi se ne radi.

SPROVOĐENJE HEMO TRANSFUZIJE

U nedostatku znakova biološke nekompatibilnosti pristupa se transfuziji krvi kap po kap. Prije transfuzije, bočica s transfuziranom krvlju mora biti na sobnoj temperaturi u roku od 30-40 minuta, a u hitnim situacijama se zagrijava na 37 ° C u vodenom kupatilu. Transfuzija se vrši pomoću sistema za transfuziju krvi za jednokratnu upotrebu sa filterom, obično brzinom od 40-60 kapi u minuti.
Tokom transfuzije krvi nastavlja se praćenje stanja pacijenta. Nakon transfuzije, posuda sa ostacima transfuzionog medija (oko 15 ml) i serumom primaoca čuvaju se 2 dana u frižideru kako bi se mogle analizirati komplikacije transfuzije krvi ukoliko se pojave.

KOMPLETIRANJE DOKUMENTACIJE

Nakon završetka transfuzije, doktor u anamnezu upisuje protokol transfuzije krvi:
■ indikacije za transfuziju,
■ podaci o pasošu iz svake bočice: ime davaoca, krvna grupa, Rh pripadnost, broj bočice, datum uzimanja krvi,
■ krvna grupa i Rh faktor primaoca i donora,
■ rezultati testova na individualnu kompatibilnost krvi davaoca i primaoca prema ABO sistemu i Rh faktoru,
■ rezultat biološkog uzorka,
■ prisustvo reakcija i komplikacija,
■ datum, ime doktora koji je izvršio transfuziju krvi, potpis.

POSMATRANJE PACIJENTA NAKON HEMOTRANSFUZIJE

Primalac nakon transfuzije krvi posmatra 2 sata odmor u krevetu a tokom dana je pod nadzorom dežurnog i dežurnog ljekara. Posebno pažljivo praćenje se provodi tokom prva tri sata nakon transfuzije krvi. Procjenjuje se prisustvo tegoba, promjene u općem stanju, mjerenje tjelesne temperature, pulsa i krvnog tlaka svakih sat vremena. Potrebno je makroskopski procijeniti prvu porciju urina nakon transfuzije krvi, obratiti pažnju na očuvanje mokrenja i boje urina.
Sutradan je obavezno uraditi kliničku analizu krvi i opšta analiza urin.

TESTOVI INDIVIDUALNE KOMPATIBIBILNOSTI DAVAOCA I PRIMAOCA KRVI

Svrha individualnog testa kompatibilnosti je spriječiti transfuziju nekompatibilnih crvenih krvnih stanica. Testiranje seruma primaoca sa eritrocitima nameravanog donora je najviše pouzdan način otkrivanje antitijela koja mogu uzrokovati oštećenje transfuziranih eritrocita, posttransfuzijske reakcije, uključujući hemolitičke. Ovaj test vam omogućava da:

potvrditi ABO kompatibilnost donatora i primaoca;
identificirati sva antitijela u serumu primaoca usmjerena protiv antigena eritrocita donora.

Test za individualnu kompatibilnost krvi za antigene ABO sistema

Napredak definicije:

na čistu, suhu površinu tablete ili ploče na sobnoj temperaturi, nanijeti i pomiješati serum primatelja i krv davaoca u omjeru 10:1;
periodično protresite tabletu, pratite tok reakcije;
u odsustvu aglutinacije unutar 5 minuta, krv je kompatibilna. Prisutnost aglutinacije ukazuje na nekompatibilnost krvi primatelja i davaoca. Ova krv se ne može transfuzirati. U sumnjivim slučajevima, rezultat testa se prati pod mikroskopom: u prisustvu „stupova novčića“ koji nestaju nakon dodavanja tople (+37°C) 0,9% otopine natrijum hlorida, krv je kompatibilna; ako su u kapi smjese vidljivi aglutinati, koji se ne raspršuju kada se doda topli 0,9% rastvor natrijum hlorida, krv je nekompatibilna.

Test kompatibilnosti krvi za antigene rezus sistema upotrebom 33% rastvora poliglucina

Budući da je osjetljivost ovog testa niska, koristite ga u stacionarnom stanju medicinske ustanove Nije preporuceno. Dozvoljeno je provesti test kompatibilnosti pomoću 33% otopine poliglucina ako je potrebno provesti transfuziju krvi u ekstremnim uvjetima.

Test kompatibilnosti za antigene Rhesus sistema ne zamjenjuje, već dopunjuje test kompatibilnosti za antigene ABO sistema.

Napredak definicije:

2 kapi pacijentovog seruma, jedna kap donorske krvi i jedna kap 33% rastvora poliglucina se dodaju na dno označene epruvete;
promešati sadržaj tube mućkanjem;
polako okrenite epruvetu tako da se sadržaj proširi preko zidova epruvete. Ovo povećava ozbiljnost reakcije aglutinacije;
nakon 5 minuta dodati 2-3 ml fiziološkog rastvora;
miješati sadržaj laganim okretanjem epruvete 2-3 puta bez trešenja;
prisustvo aglutinacije u epruveti ukazuje na to da krv davaoca nije kompatibilna s krvlju pacijenta i stoga se ne može transfuzirati. Ako sadržaj epruvete ostane jednolično obojen i nema znakova aglutinacije eritrocita, krv je kompatibilna.

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću centrifugiranja

Napredak definicije:

stavite 2 kapi seruma primaoca na dno označene epruvete;
dodati 1 kap 5% suspenzije tri puta ispranih donorskih eritrocita u rastvor niske jonske snage - RNIS (u nedostatku RNIS-a može se koristiti fiziološki rastvor, u kom slučaju se fiksacija antitela pogoršava). U opisu indirektnog Coombsovog testa dat je metod za pripremu tri puta 5% suspenzije ispranih eritrocita;
odmah nakon miješanja eritrocita donora i seruma primaoca, uzorak se centrifugira 15-20 s na 2000 o/min;
lagano protresti epruvetu, resuspendirati ćelijski sediment i vizualno odrediti prisustvo aglutinata. Prisustvo hemolize i/ili aglutinata može značiti:
- a) nekompatibilnost prema ABO sistemu;
- b) prisustvo u serumu primaoca potpunih hladnih antitela različite specifičnosti (anti-M, anti-N, anti-S itd.).

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću rastvora želatine

Potrebno je koristiti čistu, bez ljuskica, providnu želatinu, stvrdnjavanja na temperaturi od +4°C. Želatin ne treba zamrzavati. Da bi se isključila nespecifična aglutinacija eritrocita sa rastvorom želatine, preporučljivo je da se svaka serija želatina proveri u kontroli sa nesenzibilizovanim eritrocitima.

Napredak definicije:

zagrijati 10% rastvor želatine u vodenom kupatilu da se tečnost (+46-48°C) 10 minuta;
2 kapi zagrijane 10% otopine želatina dodaju se u mješavinu eritrocita donora i seruma primaoca (u omjeru 1:2) i dobro promiješaju;
10 min inkubirati epruvetu na +46-48°C u vodenom kupatilu ili 30 min u termostatu;
dodajte 5-8 ml fiziološke otopine i lagano promiješajte, okrećući epruvetu 1-2 puta;
vizualno odrediti prisustvo ili odsustvo aglutinacije eritrocita. At negativan rezultat prenijeti kap suspenzije eritrocita iz epruvete na predmetno staklo i mikroskop pri malom uvećanju.

Kao negativna kontrola koriste se sljedeći uzorci:

a) mješavina donora eritrocita sa želatinom i 0,9% rastvorom natrijum hlorida (u omjeru 1:2:2);
b) mješavina eritrocita i seruma primaoca sa želatinom (u omjeru 1:2:2).

Testirajte individualnu kompatibilnost krvi pomoću antiglobulinskog reagensa

Nemojte ponovo zamrzavati-odmrznuti antiglobulinski reagens. Za kontrolu kvaliteta antiglobulinskog reagensa, preporučljivo je provesti antiglobulinski test sa Rh-pozitivnim eritrocitima senzibiliziranim IgG (nepotpunim) anti-D antitijelima.

Napredak definicije:

Provedite test za individualnu kompatibilnost krvi pomoću centrifugiranja. Ako se ne otkrije hemoliza, a eritrociti nakon protresanja epruvete formiraju homogenu suspenziju:

inkubirajte epruvetu na 37°C: 15 min kada koristite RNIS, ili 45 min kada koristite fiziološki rastvor;
centrifugirati epruvetu 15-20 s na 2000-3000 o/min;
vizualno odrediti prisustvo hemolize u supernatantu;
lagano protresti epruvetu, resuspendirati ćelijski sediment i vizualno odrediti prisustvo aglutinata. Prisustvo hemolize i/ili aglutinata ukazuje na to da primalac ima potpuna topla antitela na antigene eritrocita donora;
u nedostatku hemolize i aglutinacije, eritrociti se temeljito isperu 3-4 puta, svaki put sa 5-10 ml fiziološkog rastvora;
ukloniti fiziološki rastvor;
dodati 1-2 kapi antiglobulinskog reagensa u sediment eritrocita i dobro promiješati;
centrifugirati 15-20 s na 2000-3000 o/min;
nježno resuspendirajte sediment eritrocita i vizualno odredite prisustvo ili odsustvo aglutinacije;
vizualno odrediti prisustvo ili odsustvo aglutinacije eritrocita.

Ako je rezultat negativan, kap suspenzije eritrocita se prenosi iz epruvete na predmetno staklo i mikroskopira pri malom uvećanju.

Kada se otkrije aglutinacija, krv davaoca i primaoca je nekompatibilna za antigene eritrocita.

Kao negativni kontrolni uzorci koriste se:

mješavina 5% suspenzije test eritrocita sa 0,9% otopinom natrijum hlorida (u omjeru 1:2) - kontrola spontane aglutinacije;
mješavina 5% suspenzije test eritrocita sa antiglobulinskim reagensom (u omjeru 1:2) - kontrola autosenzibilizacije.

Kontrola aktivnosti antiglobulinskog reagensa (uvijek pozitivna reakcija) je mješavina 5% suspenzije donora eritrocita grupe 0 (I) D+ senzibiliziranih anti-Rh serumom (sadrži anti-D antitijela IgG klase) i antiglobulinski reagens (u omjeru 1:2).

Praćenje specifičnosti antiglobulinskog reagensa (uvijek backlash) - mješavina 5% suspenzije donorskih eritrocita grupe 0 (I) D - (nakon inkubacije sa anti-Rhesus serumom 45 minuta) i antiglobulinskog reagensa (u omjeru 1:2).

Čuvajte antiglobulinski reagens zamrznut na -20°C (suvi reagens može se čuvati na sobnoj temperaturi). Ponovljeno zamrzavanje-odmrzavanje reagensa je neprihvatljivo.

Razlozi za lažno pozitivne rezultate:

prisustvo autoantitijela na površini test eritrocita;
test eritrociti sadrže mikrobne nečistoće;
kršenje režima centrifugiranja ( mehaničko oštećenje membrane eritrocita pod prekomjernim opterećenjem).

Razlozi za lažno negativne rezultate:

test eritrociti su slabo isprani, ili su ostaci serumskih proteina prisutni na zidovima epruvete;
kršenje režima pranja ili inkubacije;
gubitak aktivnosti serumskih ili test eritrocita tokom skladištenja;
niska aktivnost antiglobulinskog reagensa;
nedovoljno vremena inkubacije.

Stranica

Praktična transfuziologija / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. itd. - Moskva: Triada-T, 1996. - 435 str.

Vodič za vojnu transfuziologiju / Ed. E. A. Nechaev. - Moskva, 1991. - 280 str.

Vodič za transfuzijsku medicinu / Ed. E. P. Svedentsova. - Kirov, 1999.- 716s.

Rumjancev A. G., Agranenko V. A. Klinička transfuziologija.- M.: GEOTAR MEDICINA, 1997.- 575 str.

Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Sigurna transfuzija krvi: Vodič za doktore - Sankt Peterburg: Peter, 2000. - 320 str.

Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Imunološka i infektivna sigurnost hemokomponentne terapije - Sankt Peterburg: Nauka, 1998. - 232 str.

Schiffman F.J. Patofiziologija krvi / Per. s engleskog - M. - Sankt Peterburg: Izdavačka kuća BINOM - Nevski dijalekt, 2000. - 448 str.

Transfuzija krvi u kliničkoj medicini / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 str.

Izvor: Medicinska laboratorijska dijagnostika, programi i algoritmi. Ed. prof. Karpishchenko A.I., Sankt Peterburg, Intermedica, 2001

Prilikom transfuzije komponenti krvi koje sadrže eritrocite, pored određivanja krvne grupe i Rh faktora, rade se i dva testa za utvrđivanje prisustva potpunih i nepotpunih antitijela na eritrocite donora kod primatelja. Osim toga, u bez greške provodi se trostruki biološki test.

Prilikom transfuzije plazme i njenih preparata izvodi se samo trostruki biološki test.

Prilikom transfuzije krvnih komponenti iz nekoliko bočica ili posuda pacijentu, potrebno je izvršiti testove kompatibilnosti sa sadržajem svake bočice ili posude, čak i ako pokazuju da je krv primljena od istog davaoca.

Test totalnih antitela

Ranije se zvao "Test individualne kompatibilnosti", "Hladni test". Omogućava vam da identifikujete aglutinine na antigene ABO, MNSs, Lewis, itd. sistema.

Test se izvodi sa krvnim serumom primaoca koji se dobija centrifugiranjem ili taloženjem krvi. Serum je pogodan za upotrebu pod uslovom da se čuva u frižideru na temperaturi od +4ºS ne duže od 2 dana.

2-3 kapi pacijentovog krvnog seruma se nanose na bijelu ploču u koju se doda 5 puta manja kap krvi ili eritrocitne mase davaoca (iz posude) - odnos krvi i seruma je otprilike 1: 10. Krv se pomiješa sa serumom staklenim štapićem sa otopljenim krajem, zatim se ploča mućka 5 minuta, promatrajući tok reakcije. Nakon navedenog vremena, preporučuje se dodati 1-2 kapi fiziološke otopine u reakcijsku smjesu kako bi se eliminirala "lažna aglutinacija".

Odsustvo aglutinacije ukazuje na kompatibilnost krvi davaoca i primaoca, a pojava aglutinacije ukazuje na njihovu nekompatibilnost i neprihvatljivost ove transfuzije krvi.

Nepotpun test na antitela

Ranije se zvao "test kompatibilnosti Rh faktora", "test topline".

To se može uraditi na nekoliko načina. Najosjetljiviji je indirektni Coombsov test. Međutim, njegova implementacija je prilično teška, zahtijeva poseban reagens (anti-Rhesus serum) i znatno vrijeme (oko 2 sata). Kao rezultat toga, Coombsov test se izvodi samo u laboratorijskim uslovima za posebne indikacije, za individualni odabir krv "teškim" primaocima. Nešto je inferiorniji u preciznosti, ali je tehnički lakši test sa 10% rastvorom želatine u vodenoj kupelji. Test sa 33% rastvorom poliglucina je tehnički najjednostavniji i najbrži, ali i najmanje tačan. Za potrebe praktičnog javnog zdravlja najpogodniji je uzorak sa 10% rastvorom želatine u vodenom kupatilu.

Test kompatibilnosti Rh faktora korištenjem 10% otopine želatine.

Suština reakcije je stvaranje koloidnog medija i povišena temperatura, u kojem se nepotpuna antitijela adsorbiraju na molekule želatine i, u interakciji s površinskim antigenima eritrocita, aglutiniraju ih.

Uzorak se pravi u epruvetama na temperaturi od +46-48ºS u trajanju od 10-15 minuta. Na dno odgovarajuće označene epruvete stavite 1 kap eritrocita donora, zatim dodajte 2 kapi pacijentovog seruma i 2 kapi 10% rastvora želatina zagrejanog do tečenja. Otopina želatine mora se pažljivo ispitati prije upotrebe. Kod zamućenja ili pojave ljuskica, želatina je neprikladna. Sadržaj epruvete se miješa protresanjem i stavlja u vodeno kupatilo na temperaturi od + 46-48ºS 10 - 15 minuta ili u termostat na istoj temperaturi 30 minuta. Zatim se u epruvetu doda 5-8 ml izotonične otopine natrijum hlorida, sadržaj se miješa 1-2 ponovljene inverzije epruvete i gleda na svjetlu golim okom ili kroz lupu.

Prisutnost aglutinacije u obliku suspenzije malih, rjeđe - velikih grudica na pozadini pročišćene ili potpuno promijenjene tečnosti znači da krv davatelja nije kompatibilna s krvlju pacijenta i ne može mu se transfuzirati.

Ako sadržaj epruvete ostane jednolično obojen, blago opalescentan, nema aglutinacije eritrocita, onda je krv davaoca kompatibilna sa krvlju pacijenta u odnosu na Rh faktor Rh (D).

NB ! U Uputstvu iz 2002. godine, u poređenju sa prethodnim uputstvima, izvršene su izmjene u tehnici postavljanja uzorka sa 10% želatine u vodeno kupatilo. Ranije je vrijeme zadržavanja u vodenom kupatilu bilo 10 min. nova uputstva- 15 minuta. Uvedeno korištenje termostata umjesto vodenog kupatila.

Test kompatibilnosti Rh faktora korištenjem 33% otopine poliglucina.

Suština testa je ista kao i prethodnog, ali temperaturni faktor je isključen.

Uzorak se izvodi u epruveti bez zagrijavanja 5 minuta. Na dno prethodno naznačene epruvete dodaju se 2 kapi pacijentovog seruma, 1 kap donorske krvi i 1 kap 33% rastvora poliglucina, specijalno proizvedenih za ovu svrhu u bočicama od 5 ml. Sadržaj epruvete se meša protresanjem, zatim se epruveta naginje do skoro horizontalnog nivoa i polako rotira tako da se sadržaj epruvete širi po zidovima. Ovaj postupak se nastavlja 5 minuta. Zatim se u epruvetu doda 3-4 ml izotonične otopine natrijum hlorida, pomiješa se 2-3 puta glatkim okretanjem epruvete, zatvaranjem čepom i gledanjem u svjetlost golim okom.

Ako u otopini postoje aglutinati na pozadini pročišćene ili potpuno izmjenjene tekućine, daje se zaključak da krv davatelja nije kompatibilna s krvlju pacijenta i da mu se ne može transfuzirati. Ako sadržaj epruvete ostane ravnomjerno obojen, bez znakova aglutinacije, donosi se zaključak o kompatibilnosti krvi pacijenta i davaoca u pogledu Rh o (D) faktora.

Test kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti. Tehnologija izvođenja. Priručnik za doktore./GOU DPO KSMA Roszdrav. - Kazanj, 2011. - 35 str.

U priručniku su predstavljene tehnologije za provođenje testova individualne kompatibilnosti prije transfuzije komponenti donorske krvi u cilju prevencije posttransfuzijskih komplikacija hemolitičkog tipa. Zahtjevi za uzorke krvi, za specijaliste koji sprovode ispitivanja, kao i postupak za provođenje testova, u zavisnosti od vrste transfuziranog medijuma za transfuziju i karakteristika vršenja testova u određene kategorije pacijenata.

Priručnik sadrži listu opreme i reagensa potrebnih za ispitivanje individualne kompatibilnosti.

Namijenjen je ljekarima svih specijalnosti koji provode terapiju transfuzije krvi. Može se koristiti u obuci specijalista u visokim i srednjim medicinskim obrazovnim ustanovama.

OD studijski vodič može se naći u biblioteci GOU DPO KSMA Roszdrav na adresi 420012, Kazan, ul. Muštari, 11

Uvod. Svrha testiranja na individualnu kompatibilnost je spriječiti transfuziju nekompatibilnih komponenti krvi. Kompatibilnost se odnosi na povoljnu kombinaciju krvi davaoca i primaoca. Njihova biološki nemoguća kombinacija antigena i antitela različitih grupnih sistema određuje nekompatibilnost krvi davaoca i primaoca.

ABO krvna grupa je skup antigena grupe A i B i prirodnih anti-A, anti-B antitela, koja je nasledno određena i ne menja se tokom života.

Rezus sistem je jedan od najpolimorfnijih antigenskih sistema ljudskih eritrocita. Uključuje oko 50 serološki različitih antigena, ne računajući slabe, prelazne i parcijalne forme. Na ljudskim eritrocitima postoji 5 glavnih antigena rezus sistema (D, C, c, E, e). Greatest klinički značaj ima antigen D. Posjedujući izražena imunogena svojstva, antigen D u 95% je uzročnik hemolitičke bolesti novorođenčeta, kao i uzrok teških posttransfuzijskih komplikacija. Osobe sa D antigenom nazivaju se Rh pozitivne (Rh+), one koje nemaju D antigen nazivaju se Rh negativne (Rh-).

Trenutno je poznato više od 236 antigena eritrocita, koji su raspoređeni u 29 genetski nezavisnih sistema. Antigeni ABO i Rhesus sistema su od najveće kliničke važnosti. Sistemi eritrocita Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd imaju manje praktična vrijednost, jer relativno rijetko izazivaju senzibilizaciju. Ovi sistemi postaju značajni u višestrukim transfuzijama krvi crvenih krvnih zrnaca, ponovljenim trudnoćama. Antitela na sve ove antigene mogu se formirati kod osobe bilo koje krvne grupe ABO sistema, rezus (bez obzira na Rh pripadnost). Nastaju pod istim uslovima kao i anti-D antitijela (višestruke transfuzije krvi crvenih krvnih zrnaca, ponovljene trudnoće) i može uzrokovati posttransfuzijske komplikacije hemolitičkog tipa i hemolitičke bolesti novorođenčeta. Ako se primaocu čija krv sadrži antitela transfuzuje krv davaoca čiji eritrociti sadrže antigene protiv kojih su antitela usmerena, takva krv će biti uništena u telu primaoca, tj. ona je nespojiva sa njim.

Ovaj priručnik predstavlja tehnologiju izvođenja testova za individualnu kompatibilnost, daje zahtjeve za uzorke krvi, za specijaliste koji provode testove, kao i postupak za provođenje testova u zavisnosti od vrste transfuziranog medijuma za transfuziju i karakteristika provođenja testova kod određenih kategorija pacijenata. .

Tehnologija za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti:

1. Karakteristike metodologije za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti

1.1. Zahtjevi za uzorke krvi

Prije postupka uzimanja krvi za ispitivanje kompatibilnosti navodi se prezime, ime i patronim primaoca. Uzimaju suvu, čistu epruvetu, na kojoj su navedeni podaci o pacijentu: ime i prezime, datum uzimanja krvi, za stacionarne - broj medicinske knjižice. Krv pacijenta se uzima iz vene u količini od 3-5 ml i prenosi u potpisanu epruvetu. Da bi se dobio serum, epruveta sa uzorkom krvi se ostavi na sobnoj temperaturi najmanje 1 sat ili in hitni slučajevi, centrifugiran u laboratorijskoj centrifugi pri brzini od 1500-2000 o/min. u roku od 5 minuta. Koristi se uzorak krvi primaoca koji se čuva na t+2 0 C…+8 0 C ne duže od dva dana.

Hemolizirana krv se ne koristi za istraživanja. U prisustvu hemolize, postupak uzimanja krvi se ponavlja.

Uzorak krvi primaoca prije transfuzije čuva se na +2 0 C…+8 0 C 5 dana. Ovo je neophodno za dalje ispitivanje krvi primaoca u specijalizovanoj laboratoriji krvne službe u slučaju komplikacija nakon transfuzije.

U slučaju posttransfuzijske komplikacije, uzorak krvi prije transfuzije primaoca i ostaci transfuzijske podloge šalju se na analizu u specijaliziranu laboratoriju krvne službe.

1.2. Zahtjevi za prostorije

Imunohematološke studije se izvode u prostoriji sa prirodnim svjetlom, temperatura zraka u prostoriji treba biti unutar +15 0 C ... +25 0 C.

1.3. Opšti zahtjevi za ispitivanje kompatibilnosti

Prije transfuzije komponenti krvi, sprovode se testovi na individualnu kompatibilnost prema ABO i Rhesus sistemu, te biološki uzorak.

Prilikom testiranja individualne kompatibilnosti po ABO sistemu detektuje se i kompatibilnost prema MNS sistemu, a kod ispitivanja individualne kompatibilnosti po Rhesus sistemu kompatibilnost se otkriva i prema drugim klinički značajnim sistemima krvnih grupa (Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd).

Testove kompatibilnosti neposredno prije svake transfuzije provodi ljekar koji vrši transfuziju krvi iz konzerve i njenih komponenti, nakon kontrolne redefinacije krvne grupe primaoca i davaoca, te kontrolne redefinacije Rh - pripadnosti krvi primaoca. Hitnost transfuzije ne izuzima se od testiranja na kompatibilnost.

1.4. Zahtjevi za obim studija u zavisnosti od vrste transfuziranog medijuma za transfuziju

1.4.1. Transfuzija krvi nosača gasova

Prije transfuzije nosača plinova iz krvi, sprovode se testovi na individualnu kompatibilnost krvi primaoca i davaoca, uključujući autodonora, prema ABO i Rhesus sistemima, kao i biološki test nakon sprovođenja kontrolnih studija grupa i Rh pripadnost krvi pacijenta i grupna pripadnost eritrocita davaoca (auto-donora).

Testovi kompatibilnosti za ABO i Rhesus krvne grupe provode se odvojeno, ne mogu se zamijeniti, jer antitijela drugacije prirode zahtijevaju različite metode za vaše otkriće.

Ispitivanje individualne kompatibilnosti prema ABO sistemu provodi se prema jednoj od sljedećih metoda: test kompatibilnosti na ravni na sobnoj temperaturi ili u gel testu.

Ispitivanje individualne kompatibilnosti prema Rhesus sistemu provodi se prema jednoj od sljedećih metoda: test sa 33% rastvorom poliglucina, test sa 10% rastvorom želatina ili u gel testu.

1.4.2. Transfuzija korektora hemostaze i fibrinolize, sredstva za korekciju imuniteta

Prije transfuzije korektora hemostaze i fibrinolize, sredstava za korekciju imuniteta krvi, radi se biološki test.

1.5. Zahtjevi za specijaliste

Testiranje individualne kompatibilnosti sprovode specijalisti obučeni za imunohematologiju na specijalizovanim kursevima usavršavanja baziranim na ustanovama dodatne stručno obrazovanje i (ili) na osnovu ustanova za krv u Republici Tatarstan (vidi tabelu 1).

Tabela 1

Zahtjevi za profesionalce za obavljanje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti

medicinska ustanova	Izvođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti	medicinsko osoblje	Dodatni zahtjevi za medicinsko osoblje
Bolnica, uključujući dnevnu bolnicu, u ambulantnim uslovima	Prije svake transfuzije krvi i njenih komponenti	Ljekar koji direktno daje transfuziju	Mora imati specijalnu obuku iz imunohematologije na specijalizovanim kursevima napredne obuke na bazi ustanova dodatnog stručnog obrazovanja i (ili) na bazi institucija službe krvi Republike Tatarstan najmanje jednom u 5 godina

2. Materijalni resursi

Za provođenje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti mora biti opremljeno posebno mjesto (ili posebna prostorija), koja je opremljena u skladu sa zahtjevima naredbe Ministarstva zdravlja Ruske Federacije br. 2 od 01/09. /1998 "O odobravanju uputstva za imunoserologiju".

2.1 Uređaji, alati, proizvodi medicinske svrhe

tabela 2

Uređaji, instrumenti, medicinski proizvodi neophodni za provođenje testova kompatibilnosti, kao i alternativni uređaji i proizvodi medicinske opreme.

Naziv uređaja, proizvoda medicinska tehnologija itd.	Broj uređaja alati, proizvodi medicinska tehnologija	Alternativni uređaj, proizvod medicinske opreme
Test kompatibilnosti krvnih grupa ABO sistema (u avionu)
Stolna laboratorija		Stol presvučen plastikom

Stolna lampa		Zidna lampa
Ploče za imunohematološke studije	1 PC. za 1 studiju	Plate bijele boje porculanske ili emajlirane
Pasteur pipeta
staklene šipke (lopatice)	Od 1 do 10 kom.	plastični štapić
Peščani sat 5 minuta		Štoperica


staklene čaše		staklene tegle
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Centrifuga laboratorija
upotrebom 33% rastvora poliglucina (in vitro)
Stolna laboratorija		Stol presvučen plastikom

Stolna lampa		Zidna lampa
Centrifuga cijev		biološka epruveta
Pasteur pipeta		Automatska pipeta promjenjivog volumena (20-200 µl)
Peščani sat 5 minuta		Štoperica
Lupa sa 4-6x uvećanjem
Laboratorijski stalak sa 10 utičnica
staklene čaše		staklene tegle
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Centrifuga laboratorija
Rhesus test kompatibilnosti upotrebom 10% rastvora želatine (in vitro)
Stolna laboratorija		Stol presvučen plastikom

Stolna lampa		Zidna lampa

Vodeno kupatilo na 46-48 0 S		Termostat za 46-48 0 S
Pasteur pipeta		Automatska pipeta promjenjivog volumena (20-200 µl)
Tankozidne epruvete (kapaciteta ne manje od 10 ml)		Centrifuga cijev
Peščani sat 15 minuta		Štoperica
Lupa sa 4-6x uvećanjem
Laboratorijski stalak sa 10 utičnica
staklene čaše		staklene tegle
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Centrifuga laboratorija

Stolna laboratorija		Stol presvučen plastikom

Stolna lampa		Zidna lampa
Automatska pipeta promjenjivog volumena	5-40 µl 1 kom. 100-1000 µl 1 kom.
Laboratorijski stalak sa 10 utičnica
staklene čaše		staklene tegle
Laboratorijska centrifuga OPN-3		Centrifuga laboratorija
Centrifuga za gel kartice
Inkubator na 37 0 S		Termostat na 37 0 S
Centrifuga cijev		biološka epruveta

2.2. Reagensi

Za provođenje testova individualne kompatibilnosti prije transfuzije krvi i njenih komponenti potrebni su reagensi koji su prikazani u tabeli 3.

Tabela 3

Reagensi potrebni za ispitivanje kompatibilnosti

Naziv reagensa	Dokument koji reguliše upotrebu reagens	Količina reagensa potrebna za pokretanje 1. studija	Uslovi i karakteristike skladištenja reagensa, rad s njim*
ABO test kompatibilnosti stan na sobnoj temperaturi
rastvor natrijum hlorida 0,9%			Pohranjen na t+15…+25 0 S.
Test kompatibilnosti upotrebom 33% rastvora poliglucina
Rastvor poliglucina 33,0%	Naredba Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 25. novembra 2002. br. 363 "O odobravanju Uputa za upotrebu krvnih komponenti"		Pohranjen na
rastvor natrijum hlorida 0,9%			Pohranjen na
Test kompatibilnosti koristeći 10% rastvor želatine
rastvor želatina 10,0%	Naredba Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 25. novembra 2002. br. 363 "O odobravanju uputstva za upotrebu krvnih komponenti"		Pohranjen na
rastvor natrijum hlorida 0,9%			Pohranjen na
Test kompatibilnosti prema ABO sistemu i Rhesus sistemu korištenjem gel dijagnostičkih kartica
Coombs+ dijagnostičke kartice	Upute priložene uz dijagnostičke kartice	Od 1/4 do 1/3 kom. ovisno o korištenoj dijagnostičkoj kartici.	Pohranjen na t+15…+25 0 S.
Rastvor za pripremu suspenzije test eritrocita	Upute u prilogu rješenja	Od 0,5 do 1,0 ml, u zavisnosti od proizvođača	Pohranjen na

* - Temperaturu unutar hladnjače, u kojoj se čuvaju reagensi, kontroliše bolničar dva puta dnevno. Očitavanja termometra se bilježe u „Dnevnik registracije temperaturni režimčuvanje dijagnostičkih standarda za imunohematološke studije” (vidi Aneks 1).

2.3 Drugi potrošni materijal

Drugi potrošni materijal se koristi za obavljanje testova kompatibilnosti prije transfuzije krvnih komponenti (vidi tabelu 4).

Tabela 4

Ime	Količina	Bilješka
Pamučna gaza	Za 1 tampon: vata - 3,0 gr., zavoj - 30 cm.	Za sušenje pipeta i staklenih štapića
Medicinske rukavice za jednokratnu upotrebu	1 par za svaka 3 sata rada	Zamijenite odmah ako je slomljena ili jako zaprljana.
rastvor natrijum hlorida 0,9%		Za pranje pipeta i štapića
Etil alkohol, medicinski, 70,0%	3,0 gr. za 1 tretman	Za obradu ruku osoblja nakon završetka posla
Rastvor za dezinfekciju	U skladu sa metodološkim smjernicama za korištenje dezinformacija. sredstva dozvoljena za korištenje u Ruskoj Federaciji i Republici Tatarstan	Za dezinfekciju biološki materijal, laboratorijsko stakleno posuđe i radno mjesto.
Savjeti za automatske pipete promjenjivog volumena, jednokratne	4 stvari. za 1 studiju

3. Postupak za testiranje kompatibilnosti

Svrha testiranja na kompatibilnost je spriječiti transfuziju krvi iz banke i njenih komponenti koje su nekompatibilne s krvlju primaoca. Za testove kompatibilnosti koriste se krvni serum primaoca i uzorak krvi davaoca.

Ako se pacijentu transfuzira krv iz konzerve i njene komponente iz više posuda, testovi kompatibilnosti se provode sa svakim spremnikom, čak i ako pokazuju da su komponente krvi dobivene od istog davaoca.

3.1 Testovi individualne kompatibilnosti prema ABO sistemu

3.1.1 Test kompatibilnosti za krvne grupe ABO sistema (u avionu)

Ispitivanje se izvodi na vlažnoj površinskoj ploči.

1. Tableta je označena, za koju je naznačeno puno ime. i krvnu grupu primaoca, puno ime i prezime i krvnu grupu davaoca i broj posude za krv.

2. Serum se pažljivo uzima iz epruvete sa krvlju primaoca za testiranje i nanosi na tabletu 1 velikom kapom (100 µl).

3. Mala kap (10 µl) donora eritrocita uzima se iz segmenta epruvete plastične vrećice sa transfuzionim medijumom, koji se priprema za transfuziju ovom pacijentu, i nanosi pored seruma primaoca (odnos seruma i eritrocita 10: 1).

4. Kapi se miješaju staklenom šipkom.

5. Posmatrajte reakciju 5 minuta, uz stalno mućkanje tablete. Nakon ovog vremena dodaju se 1-2 kapi (50-100 µl) rastvora natrijum hlorida, 0,9%.

reakcija u kapi može biti pozitivna ili negativna.

a) pozitivan rezultat (+) se izražava u aglutinaciji eritrocita, aglutinati su vidljivi golim okom u obliku malih ili velikih crvenih agregata. Krv je nekompatibilna, nemoguće je transfuzirati! (vidi sliku 1).

Slika 1. Krv davaoca i primaoca je nekompatibilna

b) sa negativnim rezultatom (-), kap ostaje homogeno obojena crvenom bojom, u njoj se ne detektuju aglutinati. Krv davaoca je kompatibilna s krvlju primaoca (vidi sliku 2).

Slika 2. Krv davaoca je kompatibilna sa krvlju primaoca

3.2. Testovi individualne kompatibilnosti prema Rhesus sistemu

3.2.1. Test kompatibilnosti sa 33% rastvorom poliglucina

Redosled studija:

1. Za istraživanje uzmite epruvetu (centrifugu ili bilo koju drugu, kapaciteta najmanje 10 ml). Cijev je označena, za koju je naznačeno puno ime. i krvnu grupu primaoca, puno ime i prezime davaoca, broj posude sa krvlju.

2. Serum se pažljivo uzima iz epruvete sa krvlju primaoca koju treba ispitati pipetom i 2 kapi (100 µl) se dodaju na dno epruvete.

3. Jedna kap (50 µl) donorskih eritrocita uzima se iz segmenta epruvete plastične vrećice sa medijumom za transfuziju, koji je pripremljen za transfuziju ovom pacijentu, u istu epruvetu, 1 kap (50 µl) dodaje se 33% rastvor poliglucina.

4. Sadržaj epruvete se promeša protresanjem, a zatim polako okreće duž ose, naginjući se skoro do horizontalnog položaja tako da se sadržaj širi preko njenih zidova. Ovaj postupak se izvodi u roku od pet minuta.

5. Nakon pet minuta dodajte 3-5 ml fiziološkog rastvora u epruvetu. rješenje. Sadržaj epruveta se pomeša okretanjem epruveta 2-3 puta (bez protresanja!)

Tumačenje rezultata reakcije:

rezultat se uzima u obzir gledanjem u epruvete na svjetlu golim okom ili kroz lupu.

Ako se u epruveti uoči aglutinacija u obliku suspenzije malih ili velikih crvenih grudica na pozadini pročišćene ili potpuno promjenjene tekućine, tada krv davatelja nije kompatibilna s krvlju primatelja. Ne možete preliti!

Ako se u epruveti nalazi jednolično obojena, blago opalescentna tečnost bez znakova aglutinacije eritrocita, to znači da je krv davaoca kompatibilna sa krvlju primaoca u odnosu na antigene rezus sistema i drugih klinički značajnih sistema (vidi sliku 3). .

Slika 3. Rezultati ispitivanja kompatibilnosti uzoraka prema Rhesus sistemu (koristeći 33% rastvor poliglucina i 10% rastvor želatina)

3.2.2. Test kompatibilnosti sa 10% rastvorom želatine

Otopina želatine mora se pažljivo ispitati prije upotrebe. Kod zamućenja ili pojave ljuskica, kao i gubitka želatinoznih svojstava pri t + 4 0 C ... + 8 0 C, želatina je neprikladna.

Redosled studija:

1. Uzmite epruvetu za istraživanje (kapaciteta ne manjeg od 10 ml). Označena je epruveta, za koju je naznačeno puno ime, krvna grupa primaoca i davaoca i broj posude sa krvlju.

2. Jedna kap (50 µl) donora eritrocita se uzima iz segmenta epruvete plastične vrećice sa medijumom za transfuziju, koji je pripremljen za transfuziju ovom pacijentu, stavlja se u epruvetu 2 kapi (100 µl) 10% rastvora želatina zagrejanog u vodenom kupatilu dodaju se tečnosti na temperaturi od +46 0 C ... +48 0 C. Pažljivo uzmite pipetom serum iz epruvete sa krvlju primaoca i dodajte 2 kapi ( 100 μl) na dno epruvete.

3. Sadržaj epruvete se promućka da se promeša i stavi u vodeno kupatilo (t+46 0 C…+48 0 C) na 15 minuta ili u termostat (t+46 0 C…+48 0 C) na 45 minuta. minuta.

4. Nakon završetka inkubacije, epruveta se uklanja, dodaje se 5-8 ml fiziološkog rastvora. rastvora, sadržaj epruvete se meša sa jednom ili dve inverzije i vrednuje se rezultat studije.

Interpretacija rezultata reakcije.

rezultat se uzima u obzir posmatranjem cijevi na svjetlu golim okom ili kroz lupu, a zatim se posmatra mikroskopski. Da biste to učinili, kap sadržaja epruvete stavlja se na staklo i gleda pod malim povećanjem.

Ako se u epruveti uoči aglutinacija u obliku suspenzije malih ili velikih crvenih grudica na pozadini pročišćene ili potpuno izmjenjene tekućine, to znači da krv davaoca nije kompatibilna s krvlju primatelja i da mu se ne treba transfuzirati .

Ako epruveta sadrži jednolično obojenu, blago opalescentnu tečnost bez znakova aglutinacije eritrocita, to znači da je krv davaoca kompatibilna sa krvlju primaoca u odnosu na antigene rezus sistema i drugih klinički značajnih sistema (vidi sliku 3).

3.3. Test kompatibilnosti gela

Prilikom postavljanja u gel test, odmah se provode testovi kompatibilnosti prema ABO sistemu (u neutralnoj mikroepruveti) i test kompatibilnosti prema Rhesus sistemu (u Coombs mikroepruveti).

Redosled studija:

1. Prije studije provjerite dijagnostičke kartice. Nemojte koristiti kartice ako u gelu postoje suspendirani mjehurići, mikroepruveta ne sadrži supernatant, ako se uočava smanjenje volumena gela ili njegovo pucanje.

2. Mikroepruvete su potpisane (ime primaoca i broj uzorka donora).

3. Iz segmenta epruvete plastične vrećice sa medijumom za transfuziju, koji je pripremljen za transfuziju ovom pacijentu, automatskom pipetom se uzima 10 μl donorskih eritrocita i stavlja u epruvetu za centrifugiranje.

4. Dodajte 1 ml rastvora za razblaživanje.

5. Otvorite potreban iznos mikroepruvete (po jedna od Coombs i Neutral mikroepruveta).

6. Koristeći automatsku pipetu, dodajte 50 µl razrijeđenih donorskih eritrocita u Coombs i Neutral mikroepruvete.

7. Dodajte 25 µl seruma primaoca u obje mikroepruvete.

8. Inkubirajte na t+37 0 C 15 minuta.

9. Nakon inkubacije, kartica se centrifugira u centrifugi za gel kartice (vrijeme i brzina se podešavaju automatski).

Interpretacija rezultata:

ako se sediment eritrocita nalazi na dnu mikroepruvete, tada se uzorak smatra kompatibilnim (vidi sliku 4 br. 1). Ako se aglutinacije zadržavaju na površini gela ili u njegovoj debljini, onda je uzorak nekompatibilan (vidi sliku 4 br. 2-6).

№1 №2 №3 №4 №5 №6

Slika 4. Rezultati istraživanja uzoraka za individualnu kompatibilnost prema Rhesus sistemu gel metodom

3.4. biološki uzorak

Za provođenje biološkog testa koristi se krv i njene komponente pripremljene za transfuziju.

Biološki uzorak se izvodi bez obzira na volumen medija za transfuziju krvi i brzinu njegove primjene. Ako je potrebno transfuzirati više doza krvi i njenih komponenti, prije početka transfuzije svake nove doze provodi se biološki test.

Tehnika:

Jednom se transfuzuje 10 ml medijuma za transfuziju krvi brzinom od 2-3 ml (40-60 kapi) u minuti, zatim se transfuzija prekida i primaoca se prati 3 minuta, kontroliše mu puls, brzinu disanja, krvni pritisak, opšte stanje, boju kože, izmjeriti tjelesnu temperaturu. Ovaj postupak se ponavlja još dva puta. Pojava tokom ovog perioda čak i jednog od ovih kliničkih simptoma kao što su drhtavica, bol u leđima, osjećaj vrućine i stezanja u grudima, glavobolja, mučnina ili povraćanje, zahtijeva hitan prekid transfuzije i odbijanje transfuzije ovog transfuzijskog medija. Uzorak krvi se šalje u specijaliziranu laboratoriju krvne službe radi individualne selekcije crvenih krvnih zrnaca.

Hitnost transfuzije komponenti krvi ne izuzima od obavljanja biološkog testa. Tokom nje moguće je nastaviti transfuziju fizioloških rastvora.

Prilikom transfuzije krvi i njenih komponenti pod anestezijom, reakcija ili početne komplikacije sudene su nemotivisanim povećanjem krvarenja u hirurškoj rani, smanjenjem krvni pritisak i povećan broj otkucaja srca, promjena boje urina tokom kateterizacije Bešika, kao i prema rezultatima testa za otkrivanje rane hemolize. U takvim slučajevima se transfuzija ovog medijuma za transfuziju krvi prekida, a hirurg i anesteziolog-reanimatolog, zajedno sa transfuziologom, dužni su da utvrde uzrok hemodinamskih poremećaja. Ako ih ništa osim transfuzije ne može uzrokovati, onda se ovaj medij za hemotransfuziju ne transfuzira, o pitanju dalje transfuzijske terapije odlučuju oni, ovisno o kliničkim i laboratorijskim podacima.

Biološki test, kao i individualni test kompatibilnosti, takođe je obavezan u slučajevima kada se transfuzuje individualno odabrana u laboratoriji ili fenotipizirana eritrocitna masa ili suspenzija.

Nakon završetka transfuzije, donorski kontejner s malom količinom preostalog medija za transfuziju krvi koji se koristi za ispitivanje individualne kompatibilnosti podliježe obavezna konzervacija u roku od 48 sati na temperaturi od +2 0 C…+8 0 C.

Nakon transfuzije, primatelj se pridržava dva sata mirovanja u krevetu, a prati ga ljekar ili dežurni ljekar. Svakog sata mu se mjeri tjelesna temperatura i krvni tlak, čime se ovi pokazatelji fiksiraju u pacijentovu medicinsku dokumentaciju. Prati se prisustvo i satni volumen mokrenja i boja urina. Pojava crvene boje urina uz održavanje transparentnosti ukazuje na akutnu hemolizu. Sljedeći dan nakon transfuzije obavezna je klinička analiza krvi i urina.

U slučaju ambulantne transfuzije krvi, primalac nakon završetka transfuzije treba da bude pod nadzorom lekara najmanje tri sata. Samo u nedostatku bilo kakvih reakcija, prisutnosti stabilnog krvnog pritiska i pulsa, normalnog mokrenja, pacijent može biti otpušten iz bolnice.

3.5. Registracija rezultata ispitivanja kompatibilnosti

Rezultat kontrolnih testova uzoraka na kompatibilnost (posebno za svaku vrstu) unosi se u transfuzijsku karticu zdravstvenog kartona pacijenta (vidi Dodatak 2).

3.6. Individualni odabir

Individualni odabir nosača gasova krvi vrši se u ustanovama za krvotok (SPK ili OPK) od strane doktora kliničke laboratorijska dijagnostika koji imaju specijalnu obuku iz imunohematologije na specijalizovanim ciklusima i na bazi institucija službe krvi Republike Tatarstan.

3.6.1. Indikacije za individualni odabir

otežana transfuzijska anamneza (anamneza reakcija nakon transfuzije ili komplikacija prethodnih transfuzija, višestruke transfuzije)
otežana akušerska anamneza (prisustvo u anamnezi rođenja djece sa HDN, mrtvorođenih, pobačaja u kasnijim fazama);
hemolitička bolest novorođenčad;
poteškoće u određivanju grupe i/ili Rh-pripadnosti krvi pacijenta,
pozitivno ili sumnjiv rezultat najmanje jedan od testova za individualnu kompatibilnost ili biološki test;
prisustvo izoimunih anti-eritrocitnih antitijela bilo koje specifičnosti;
višestruke transfuzije.

3.6.2. Zahtjevi za uzorke krvi koji se šalju na individualnu selekciju

Uzorak krvi za individualnu selekciju uzima se u dvije epruvete:
1 epruveta - sa konzervansom (3 ml),
2 epruvete - bez konzervansa (5 ml).

Kao konzervans koristi se rastvor EDTA ili rastvor natrijum citrata 5% Odnos test krvi i konzervansa za natrijum citrat je 10:1, za EDTA - 100:1.

Ako je potrebna individualna selekcija, novorođenom djetetu se dodjeljuju dvije epruvete:

1 epruveta - sa uzorkom krvi djeteta (najmanje 1,5 ml),

2 epruvete - sa uzorkom krvi majke (5 ml).

Obe epruvete moraju biti potpisane (puno ime, datum uzorkovanja, broj istorije bolesti).

Uputa se sastavlja u skladu sa Dodatkom br.3.

Individualni odabir nosača plinova krvi je preliminarni postupak. Ako se masa ili suspenzija eritrocita individualno bira za primaoca u specijalizovanoj laboratoriji, lekar koji obavlja transfuziju utvrđuje krvnu grupu i Rh pripadnost primaoca, krvnu grupu davaoca pre transfuzije i vrši samo jedan test kompatibilnosti u avionu u sobi. temperature i na početku transfuzije - biološki test .

3.7. Dodatne informacije o karakteristikama izvođenja testova kompatibilnosti

Tabela 5

Kategorija pacijenata	Individualne karakteristike	Priroda poteškoća	Način rješavanja problema
novorođenčad	Prisutnost majčinih aloantitijela u krvi novorođenčeta		At pozitivan rezultat najmanje jedan od uzoraka, uzorak krvi novorođenčeta i majke šalje se u specijalizovanu laboratoriju na individualnu selekciju.
trudna	Prisustvo izoimunih anti-eritrocitnih antitijela.	Nekompatibilnost u najmanje jednom od uzoraka	Uzorak krvi primaoca (trudnice, porodilje) šalje se u specijalizovanu laboratoriju na individualnu selekciju.
Pacijenti sa hematološkim ili onkološke bolesti, kao i pacijenti sa drugim vrstama patologija (opekotine, ciroza jetre, sepsa itd.)	Prisustvo nespecifičnih alo- i/ili autoantitijela	Nekompatibilnost u najmanje jednom od uzoraka	Provođenje pojedinačnih testova kompatibilnosti u gel testu ili
Kod različitih kategorija pacijenata	Prisustvo anti-A1 antitela (ekstra aglutinin α1)	Nekompatibilnost ABO sistema	Slanje uzorka krvi primaoca u specijalizovanu laboratoriju krvne službe na individualnu selekciju.
	Masivna transfuzija krvi ili transfuzija inkompatibilnih nosača plinova u krvi korištenjem ABO sistema i (ili) sistema Rhesus		Slanje uzorka krvi primaoca u specijalizovanu laboratoriju krvne službe na individualnu selekciju.
	Intravenska primjena otopina krvnih nadomjestaka.	Sumnjivi rezultati testova za kompatibilnost	Slanje uzorka krvi primaoca u specijalizovanu laboratoriju krvne službe na individualnu selekciju.

Prijave

Prilog 1

Kontrolni datum	Očitavanja termometra		Potpis odgovorne osobe	Preduzete mjere
Kontrolni datum	Jutro	Večernje	Potpis odgovorne osobe	Preduzete mjere

Dodatak 2

TRANSFUZIJSKA KARTICA br. _______

Datum transfuzije ___________________

Primalac:

BP____________Ps___________T˚S_____________

Indikovana transfuzija _________________________

(navesti naziv medijuma za transfuziju)

Istorija transfuzije _____________________

_________

Akušerska anamneza _______________________

___________________________________________

sa ciljem ___________________________________

Rezultat kontrolne provjere krvne grupe

prema ABO ____________ Rhesus __________________

Donator (auto):

(Podvucite sve što je primjenjivo)

PUNO IME._____________________________________

Individualni br. __________________________

ABO krvna grupa ________ rezus ___________

(prema etiketi)

Rezultat kontrolne provjere krvne grupe davaoca prema ABO _______________________________

Korišteni dijagnostički standardi:

1) Standardni ABO izohemaglutinirajući serumi ili kolikloni (podvučeni prema potrebi) sljedeće serije:

__________/____________Prodaje______________

2) Univerzalni reagens anti-rhesus Rh 0 (D) ili anti-D super anti-D super (podvučeno prema potrebi) sljedeće serije: ________________ važi do _______________

Pasoš medijuma za transfuziju	Rezultati testa kompatibilnosti	Transfuzijski medij transfuziran
Proizvođač		Ime
		Ind. uzorkovanje krvi
		Priprema za transfuziju

Datum nabavke		Filtracija
		Resuspenzija
		Način i brzina transfuzije
	Biol. probaj
		Trajanje transfuzije

Posmatranje primaoca

Rani posttransfuzijski period			Prvi dan nakon transfuzije
	Tokom transfuzije	(za kola hitne pomoći)	Analiza urina od _________	Test krvi od ________	Dnevna diureza
					Dodijeljeno
Objektivno



Prva porcija urina:

doktor _______________________________________

Mjesto za lijepljenje Mjesto za rezultate lijepljenja

naljepnice transfuzijskog medija za pojedinačno uzimanje krvi

Saglasnost primaoca

za transfuziju krvnih komponenti

ja, _______________________________________________________________________________

dobio objašnjenje o operaciji transfuzije krvi. Lekar mi je objasnio svrhu transfuzije, njenu neophodnost, prirodu i karakteristike postupka, moguće posljedice, u slučaju čijeg razvoja sam saglasan da izvršim sve što je potrebno medicinske mjere. Obaviješten sam o mogućem toku bolesti u slučaju odbijanja transfuzije krvnih komponenti.

Dobio sam i informacije o alternativne metode tretman.

Intervju je vodio doktor _______________ (potpis ljekara). "___" __________20

Pacijent se složio sa predloženim planom liječenja, koji je svojom rukom potpisao

______________________________________________ (potpis pacijenta)

ili potpisan ___________________________________________ (potpis, puno ime i prezime)

U slučaju kada stanje građanina ne dozvoljava da izrazi svoju volju, a medicinska intervencija je hitna,

Odluka konzilija ljekara ________________________________

__________________________________

ili potpis dežurnog ljekara, nakon čega slijedi obavještenje zvaničnici medicinska ustanova ___________________________________

Upute za popunjavanje transfuzijske kartice

1. Za svaku transfuziju komponenti krvi, uključujući autolognu krv, autokomponente, primaocu se popunjava transfuzijski karton i unosi se u medicinsku dokumentaciju stacionarnog (vanbolničkog) pacijenta u obliku transfuzijske kartice.

2. Na poleđini transfuzijske kartice na propisanom obrascu upisuje se pristanak primaoca na transfuziju.

3. Broj transfuzijske kartice je naznačen u skladu sa rednim brojem transfuzije primaocu.

4. U rubriku "Primalac" upisuje se rezultat kontrolne provjere prije transfuzije krvne grupe primaoca prema ABO i Rhesus sistemu.

5. U redu "Istorija transfuzije" potrebno je prikazati broj transfuzija i reakcija na njih. U redu "Akušerska istorija" - broj trudnoća, porođaja, pobačaja, prisustvo spontani pobačaji, mrtvorođenost, hemolitička bolest novorođenčeta.

6. Rezultat kontrolnog ponovnog određivanja krvne grupe davaoca po ABO sistemu upisuje se u rubriku „Donor“. U slučaju transfuzije korektora hemostaze i fibrinolize, kao i sredstava za korekciju imuniteta, nije potrebno ponovno određivanje krvne grupe davaoca po ABO sistemu.

7. U rubrici "Pasoš transfuzijskog medijuma" podaci o proizvođaču, datum pripreme prepisuju se sa etikete transfuzionog medijuma. Nakon završetka transfuzije, naljepnica se odlijepi sa posude sa komponentom krvi i zalijepi na poleđinu transfuzijske kartice.

8. U odjeljku "Transfuzirani transfuzijski medij":

- u redu "Naziv" se navodi naziv komponente krvi u skladu sa etiketom;

- u redu "Individualna selekcija krvi" označava laboratoriju, ustanovu čiji su specijalisti izvršili individualnu selekciju;

- u redu "Priprema za transfuziju" navodi se način, temperatura i trajanje pripreme transfuzijskog medijuma za transfuziju;

- u redu "Filtracija" naznačen je tip filtera, njegov proizvođač;

- red "Resuspenzija" će se popuniti kada se u posudu sa komponentom krvi prije transfuzije doda 0,9% izotonični rastvor natrijum hlorida, navodeći njenu zapreminu, broj serije i proizvođača.

- u redu "Volume" je naznačen volumen transfuziranog medijuma za transfuziju.

9. Posmatranje primaoca vrši se tokom transfuzije i u roku od dva sata nakon transfuzije. Kada se transfuzija provodi ambulantno, trajanje promatranja se povećava na tri sata.

Dodatak 3

Smjer do SPK (OPK)

za određivanje grupe i Rh - pribor, individualni odabir

( Podvuci šta god je primjenjivo)

Naziv medicinske ustanove __________________________ odjel ___________________

PUNO IME. doktora koji je poslao uzorak krvi

Kontakt broj______________________________________________________

PUNO IME. pacijent ________________________________________________________________

Datum i godina rođenja _______________ Broj medicinske knjižice __________________

Dijagnoza: ________________________________________________________________

Anamneza transfuzije (broj transfuzija i reakcija na njih) __________________

__________________________________________________________________________

Akušerska anamneza (broj trudnoća, broj porođaja, HDN djece,

pobačaji, mrtvorođeni, abortusi) _______________________________________

_________________________________________________________________________

Rezultati imunohematološkog testa krvi dobijeni u medicinskoj ustanovi:

ABO krvna grupa ___________________________________

Rezus - pripadnost ________________________________

Prisustvo aloantitela protiv eritrocita ________________

Naziv komponenti krvi potrebnih za transfuziju ___________________

____________________________________________________________________________

Datum ________________________________ Potpis ljekara ________________________________

Napomena: epruveta sa uzorkom krvi mora biti označena (puno ime pacijenta, datum uzimanja krvi, broj medicinske dokumentacije).

Ako je Hb bolesnika ispod 70 g/l, potrebno je uzeti dvije epruvete za određivanje grupe i rezus pripadnosti, za individualni odabir:

1 tuba sa konzervansom (3 ml),

2 tube bez konzervansa (5 ml).

Spisak skraćenica

MPU - medicinsko-preventivna ustanova

MH RT - Ministarstvo zdravlja Republike Tatarstan

Ministarstvo zdravlja Ruske Federacije - Ministarstvo zdravlja Ruske Federacije

HDN - hemolitička bolest novorođenčeta

OPK - odjel za transfuziju krvi

SPK - stanica za transfuziju krvi

Priručnik je pripremio Šef Odjeljenja za anesteziologiju-reanimaciju i transfuziologiju Državne obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja KSMA Roszdrava, profesor V.M. E.A. Sidoruk, asistenti katedre R.S. Gadylshina, L.N. Sibgatullina, E.R. Khamidullina, dr. Terehova, T.V. Ivanova.

Recenzenti:

glava Odeljenje za hirurške bolesti br. 1 sa kursevima onkologije, anesteziologije i reanimacije Državne obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja "KSMU Roszdrav", dr. med., profesor D.M. Krasilnikov;

glava Odjel za kliničku anatomiju i ambulantnu hirurgiju, Državna obrazovna ustanova DPO "KSMA Roszdrav", profesor V.V. Fattakhov.

književnost:

1. Donskov S.I., Morokov V.A., Dubinin I.V. Grupni antigeni eritrocita. Koncept kompatibilnosti. - M.: "IP Skorokhodov", 2008. - 172 str.

2. Mineeva N.V. Ljudske krvne grupe. Osnove imunohematologije. - Sankt Peterburg: LLC "A-print", 2004. - 188 str.

3. Naredba Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 01.09.1998. br. 2 "O odobrenju uputstva za imunoserologiju".

4. Naredba Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 25. novembra 2002. br. 363 „O odobravanju Uputstva za upotrebu komponenti krvi“.

5. Naredba Ministarstva zdravlja Republike Tadžikistan od 13. maja 1999. godine br. 367 „O mjerama za sprečavanje komplikacija u toku transfuzije komponenti, krvnih proizvoda, krvnih zamjena”.

6. Naredba Ministarstva zdravlja Republike Tadžikistan od 05.08.2004. br. 1135 „O unapređenju rada na prevenciji posttransfuzijskih komplikacija u zdravstvenim ustanovama Republike Tatarstan“

7. Naredba Ministarstva zdravlja Republike Tadžikistan od 27. aprila 2004. br. 691 „O unapređenju prekoncepcije, prenatalne i postnatalne prevencije imunokonfliktne trudnoće u Republici Tatarstan“.

8. Naredba Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 25. decembra 1997. br. 380 „O stanju i mjerama za poboljšanje laboratorijske podrške za dijagnostiku i liječenje pacijenata u zdravstvenim ustanovama Ruske Federacije“.

9. Naredba Ministarstva zdravlja Republike Tadžikistan od 16. jula 2004. godine br. 1047 „O postupku pribavljanja, evidentiranja i čuvanja komponenti krvi“.

10. Smjernice br. 52001-109 Ministarstva zdravlja Ruske Federacije, RNII za hematologiju i transfuziologiju "Zahtjevi za provođenje imunohematoloških studija donatora i primatelja u SEC-u iu medicinskim ustanovama", St. Petersburg, 2002

12. Metodološko pismo Ministarstva zdravlja i socijalnog razvoja Rusije od 10.10.2008. br. 15-4 / 3118-09 „O postupku sprovođenja imunohematoloških studija kod trudnica, porodilja, fetusa i novorođenčadi“.

13. Smjernice "Organizacija imunoseroloških studija (određivanje krvne grupe i Rh - faktora) za pacijente u laboratorijama medicinskih ustanova u Samari i Samarskoj regiji."

14. Uputstvo o postupku sprovođenja imunohematoloških studija pacijenata u zdravstvenim ustanovama Sankt Peterburga, 2005.