namai › Horoskopai › Kokybinis baltymo nustatymas šlapime. Atsisiųskite knygą "Klinikiniai laboratoriniai tyrimai" (2,84Mb)

Kokybinis baltymo nustatymas šlapime. Atsisiųskite knygą "Klinikiniai laboratoriniai tyrimai" (2,84Mb)

Metodo principas:

Santykinis šlapimo tankis paprastai yra 1,015-1,025 g/cm 3 . Santykinis šlapimo tankis nustatomas naudojant specialius mažus hidrometrus, vadinamus urometrais. Urometrai yra dviejų tipų: pirmasis skirtas mažo ir normalaus santykinio tankio šlapimui (su padalijimu nuo 1000 iki 1,030 g / cm 3), antrasis - didelio santykinio tankio šlapimui (su padalijimu nuo 1,030 iki 1,060 g / cm3). ).

PROGRESAS

Nedideliame cilindre, kurio skersmuo, kad jame laisvai plūduriuotų urometras, tiriamasis šlapimas pilamas palei sienelę ir į jį atsargiai panardinamas urometras. Skaitymas atliekamas urometro skalėje paimant liniją, kuri atitinka apatinį skysčio menizą. Visi nustatymai atliekami 20 0 C temperatūroje, nes urometro skalė graduojama pagal šią temperatūrą. Jei šlapimas turi skirtingą temperatūrą, tada už kiekvieną 3 0 C viršijančią šią temperatūrą reikia pridėti, o už kiekvieną 3 0 C žemiau - atimkite 0,001 iš urometro skalės rodmens.

Patologinių šlapimo komponentų nustatymas

1. Kokybinės reakcijos nustatant baltymą šlapime - a) Gelerio testas su koncentruota azoto rūgštimi

Metodo principas:

Koncentruota mineralinė rūgštis HNO 3 sukelia baltymų denatūraciją ir sudaro sudėtingas baltymų druskas su rūgštimi. Ties dviejų skysčių sluoksnių riba susidaro mažo balto žiedo pavidalo nuosėdos.

Progresas

Į mėgintuvėlį įpilama 1 ml koncentruoto HNO 3, mėgintuvėlis pakreipiamas 45 0 kampu ir pipete atsargiai išilgai sienelės sluoksniuojama 1 ml šlapimo.

b) bandymas su koncentruota sulfosalicilo rūgštimi

Metodo principas:

Koncentruota organinė sulfosalicilo rūgštis sukelia baltymų denatūravimą. Baltymų nusodinimas nuosėdų arba drumstumo pavidalu yra susijęs su baltymų dalelių dehidratacija ir kompleksinių baltymų druskų su rūgštimis susidarymu.

Progresas

Į 1 ml šlapimo įlašinkite 3 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties. Esant baltymui šlapime, susidaro baltos nuosėdos.

2. Baltymų kiekio šlapime kiekybinis nustatymas naudojant

bandymo juostelės "Albufan".

Metodo principas:

Testas pagrįstas „indikatoriaus baltymo paklaidos“ principu. Reaktyviojoje zonoje yra deguonies buferis ir specialus indikatorius, kuris, esant baltymams, keičia spalvą nuo geltonos iki žalios iki mėlynos.

Tyrimas yra labai jautrus albuminui ir reaguoja į jo buvimą šlapime, kai koncentracija yra 0,10-0,15 g/l. Didelės molekulinės masės baltymai, tokie kaip imunoglobulinai, matuojami mažesniu jautrumu nei albuminai. Mažos molekulinės masės baltymai, tokie kaip beta-2 mikroglobulinas, Bence-Jones baltymai, šiuo tyrimu praktiškai neaptinkami.

Testo įvertinimas: teigiamas testas laikomas, jei pasikeičia reaktyviosios zonos spalva. Priklausomai nuo albumino koncentracijos šlapime, reaktyvioji zona gali įgauti atspalvį nuo žalios iki mėlynos. Šie atspalviai lyginami su spalvų skale, kurios zonos atitinka 0,3, 1, 3, 10 g/l baltymų koncentracijas.

PROGRESAS

Neliesdami rankomis reaktyviosios zonos, 1-2 sekundėms nuleiskite tyrimo juostelę į tiriamąjį šlapimą, kad zona sušlaptų. Tada pašalinkite šlapimo perteklių iš juostelės ir maždaug po 1 minutės palyginkite indikacinės zonos spalvą su rinkinio spalvų skale ir nustatykite baltymų kiekį, kuris išreiškiamas g/l.

Tu ne vergas!
Uždaras edukacinis kursas elito vaikams: „Tikrasis pasaulio išdėstymas“.
http://noslave.org

Iš Vikipedijos, laisvosios enciklopedijos

Gelerio testas, pavadintas austro vardu patologas J. F. Heleris, bendras vardas kokybinė reakcija ant baltymas šlapime. Mėginio jautrumas yra 0,033 g/l ir naudojamas klinikinė diagnostika proteinurija. Baltymų aptikimo principas pagrįstas jo denatūravimu, veikiant denatūruojančiam faktoriui – koncentruotam azoto rūgštis arba reagentas Larionova.

Reikėtų pažymėti, kad šlapime visada yra tam tikras baltymų kiekis, tačiau, kaip taisyklė, jo koncentracija sveiko žmogaus šlapime yra mažesnė už kokybinės reakcijos jautrumo slenkstį ir nėra aptinkama paprastais metodais. Jei baltymų kiekis viršija 0,033 g/l, mėginys netinka. Esant didesnei koncentracijai, atskieskite šlapimą arba naudokite Esbach albuminometrą.

Bendro baltymo kiekiui šlapime nustatyti naudojamas Gelerio testu paremtas metodas – Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodas (W. Roberts, 1830-1899, anglų terapeutas). Metodas apima šlapimo praskiedimą iki apatinės mėginio jautrumo ribos (0,033 g / l) ir žiedo susidarymo laiką 2-3 minutes.

Analizės progresas

Reagentai: koncentruota (rūkstanti) azoto rūgštis arba Larionovos reagentas. Tiriamas šlapimas turi būti skaidrus ir rūgštus.

Larionovos reagento paruošimas

Paruoškite prisotintą natrio chlorido tirpalą (20-30 g druskos ištirpinkite 100 ml šilto vandens, leiskite pastovėti, kol atvės). Supernatantas išpilamas ir filtruojamas. Į 99 ml filtrato įpilkite 1 ml koncentruotos azoto rūgšties (galite pakeisti 2 ml druskos rūgšties).

Tyrimo technika

Maždaug tiek pat šlapimo atsargiai sluoksniuojame išilgai sienelės į mėgintuvėlį su 1-2 ml reagento. Esant baltymui, maždaug po 2-3 minučių skysčių sąsajoje pastebimas drumstumas – baltas denatūruoto baltymo žiedas.

Naudojant azoto rūgštį, dėl didelės nukleoalbumino arba uratų druskų koncentracijos gali atsirasti klaidingai teigiamas rezultatas. Pirmuoju atveju jis išnyksta, kai vamzdis šiek tiek pakratomas, o antruoju atveju žiedas yra daug aukščiau nei sąsaja tarp laikmenų ir dingsta kaitinant; kartojant tyrimą su atskiestu šlapimu žiedas nesusidaro. Kartais rusvai pigmentuotas žiedas atsiranda ir dėl urochromo oksidacijos azoto rūgštimi.

Larioninio reagento naudojimas, skirtingai nei azoto rūgštis, turi nemažai privalumų: pigmento žiedeliai nesusidaro ties sluoksniavimo riba, o teigiamas rezultatas suteikia aiškesnius baltyminius žiedus.

taip pat žr

Parašykite apžvalgą apie straipsnį "Gellerio testas"

Nuorodos

Literatūra

Gelerio testą apibūdinanti ištrauka

Buvau beprotiškai įskaudintas ir liūdnas dėl jų, dėl savęs ir dėl visų kovojusių, vis dar tikėdamas, kad gali ką nors pakeisti... Bet ar galėjo? .. Jei visi kovoję tik mirė, ar ji. karas?
Staiga priešais mane pasirodė dar viena nuotrauka...
Toje pačioje mažoje akmeninėje „celėje“, kur ant grindų tebegulėjo kruvinas Magdalietės kūnas, aplink ją stovėjo jos Šventyklos riteriai, atsiklaupę... Visi buvo neįprastai apsirengę baltais – sniego baltumo ilgais drabužiais. . Jie stovėjo aplink Magdalietę išdidžiai nulenkę galvas, o ašaros bėgo jų rūsčiais, suakmenėjusiais veidais upeliais... Pirmas pakilo Magas, kurio draugas Jonas kadaise buvo. Jis atsargiai, lyg bijodamas susižaloti, įkišo pirštus į žaizdą ir kruvina ranka ant krūtinės nupiešė kažką panašaus į kruviną kryžių... Antrasis padarė tą patį. Taigi jie pakilo paeiliui ir pagarbiai panardindami rankas į šventą kraują, piešė raudonus kryžius ant sniego baltumo rūbų... Pajutau, kad man pradėjo sėstis plaukai. Tai buvo tarsi kažkoks klaikus ritualas, kurio vis dar negalėjau suprasti...
„Kodėl jie taip daro, Severai?..“ tyliai paklausiau, tarsi bijodama, kad mane išgirs.
„Tai priesaika, Izidora. Amžino keršto priesaika... Jie prisiekė Magdalietės krauju – švenčiausiu krauju jiems – atkeršyti už jos mirtį. Nuo tada Šventyklos riteriai dėvėjo baltus apsiaustus su raudonais kryžiais. Tik beveik niekas iš pašalinių nežinojo tikrosios jų reikšmės... Ir kažkodėl visi labai greitai „pamiršo“, kad Šventyklos riteriai prieš Magdalietės mirtį buvo apsirengę paprastais tamsiai rudais kombinezonais, „nepapuoštais“ jokiais kryžiais. . Šventyklos riteriai, kaip ir katarai, nekentė kryžiaus ta prasme, kuria krikščionių bažnyčia jį „gerbia“. Jie laikė jį niekšišku ir piktu žmogžudystės įrankiu, mirties įrankiu. O tai, ką jie piešė ant savo krūtinės Magdalietės krauju, turėjo visai kitą prasmę. Tiesiog bažnyčia visiškai „perbraižė“ Šventyklos riterių reikšmę, kad atitiktų savo poreikius, kaip ir visa kita, susijusi su Radomiru ir Magdalena...
Lygiai taip pat po mirties ji viešai paskelbė mirusią Magdaleną gatvės moterimi ...
- taip pat neigė Kristaus vaikus ir jo santuoką su Magdalena ...
- taip pat sunaikino juos abu „vardan Kristaus tikėjimo“, su kuriuo jie abu nuožmiai kovojo visą gyvenimą ...
- taip pat sunaikino Katarą, naudodamas Kristaus vardą... asmens, kurio tikėjimo ir žinių jie mokė, vardą...
- ji taip pat sunaikino tamplierius (šventyklos riterius), paskelbdama juos velnio pakalikai, šmeižė ir šmeižė purvą už jų poelgius ir vulgarizavo patį meistrą, kuris buvo tiesioginis Radomiro ir Magdalenos palikuonis ...
Atsikračiusi visų, galinčių kažkaip atkreipti dėmesį į „šventiausių“ Romos velnių menkumą ir niekšiškumą, krikščionių bažnyčia sukūrė legendą, kurią patikimai patvirtino „neginčijami įrodymai“, kurių niekas dėl kokių nors priežasčių niekada nepatvirtino. ir niekam net į galvą neatėjo mintis apie tai, kas vyksta.

Darbo vietos, skirtos baltymų kiekiui šlapime nustatyti, sudėtis apima šiuos elementus:

Cheminiai mėgintuvėliai, agliutinacija.
Graduuotų pipečių rinkinys.
Pipetės siauru ištrauktu galu.
Alkoholinės lempos arba dujinis degiklis.
Juodas popierius.
Ledinė acto rūgštis.
sulfosalicilo rūgštis.
Koncentruota azoto rūgštis.
Distiliuotas vanduo.

Baltymų kiekio šlapime nustatymo metodai

Visi metodai, naudojami kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti, yra pagrįsti baltymų krešėjimu. Baltymų krešėjimas pasireiškia įvairaus laipsnio drumstumu (nuo opalescencijos iki didelio drumstumo) arba pleiskanojimu.

Kokybinis baltymo nustatymas šlapime gali būti atliekamas vienu iš šių būdų:

virimas 10% acto rūgšties tirpalu;
reakcija su 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalu;
reakcija su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas);
reakcija su 1% azoto rūgšties tirpalu prisotintame paprastosios druskos tirpale (modifikuotas Geller testas pagal Larionovą).

Prieš kokybiškai nustatant baltymą šlapime, atliekami šie parengiamieji darbai:
1. Drumstas šlapimas filtruojamas per popierinį filtrą. Jei nepavyksta gauti skaidraus filtrato, atliekamas pakartotinis filtravimas per tą patį filtrą arba šlapimas sumaišomas su nedideliu kiekiu diatomitinės žemės ar talko, po to filtruojamas.
2. Jei šlapimas turi šarminę reakciją, jis parūgštinamas 10% acto rūgšties tirpalu iki silpnai rūgštinės reakcijos, kontroliuojant lakmuso arba universalaus indikatorinio popieriaus.
3. Su mažu druskos kiekiu (šviesiai geltonas arba šviesiai geltonas šlapimas su mažu savituoju sunkiu) kiekvienam
į mėginį įlašinami keli lašai prisotinto natrio chlorido tirpalo, nes dėl druskų trūkumo baltymas koaguliuoja.
4. Drumstumo laipsnis stebimas naudojant juodą foną. Fonas – juodas kartonas arba juodas popierius, naudojamas fotografijoje. Atsižvelgdami į reakciją juodame fone, galite nustatyti menkiausią drumstumo laipsnį.

Sunumeruoti mėgintuvėliai dedami į atskirą stovą. Jie sukelia vieną iš šių reakcijų.

1. Virimo bandymas su 10% acto rūgšties tirpalu. Šiam bandymui reikia 10 % acto rūgšties tirpalo, kuris paruošiamas taip: 10 ml ledinės acto rūgšties įpilama į cilindrą ir įpilama distiliuoto vandens iki 100 ml žymos.

Baltymų nustatymo technika. Į cheminį mėgintuvėlį įpilama 10-12 ml šiek tiek rūgštinės reakcijos filtruoto šlapimo. Tada viršutinė mėgintuvėlio dalis su šlapimu švelniai kaitinama iki virimo ir į ją įlašinama 8-10 lašų 10% acto rūgšties tirpalo. Mėgintuvėlis su šlapimu žiūrimas juodame fone skleidžiamoje šviesoje. Esant baltymui šlapime, atsiranda įvairaus laipsnio drumstumas (nuo opalescencijos iki didelio drumstumo) arba iškrenta dribsniai. Kontrolė yra apatinė mėgintuvėlio dalis, nekaitinama. Šiuo tyrimu nustatomas baltymų kiekis, pradedant nuo 0,015% o (% o - promilių).

2. Reakcija su 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalu. 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalas paruošiamas taip: 20 g sulfosalicilo rūgšties ištirpinama 70-80 ml distiliuoto vandens, supilama į 100 ml balioną ir iki žymės įpilama distiliuoto vandens. Paruoštas reagentas laikomas tamsaus stiklo inde.

Baltymų nustatymo technika. Į du vienodo skersmens mėgintuvėlius įpilama 2-3 ml filtruoto silpnai rūgštinės reakcijos šlapimo, į vieną iš mėgintuvėlių į šlapimą įlašinami 3-4 lašai 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, kitas mėgintuvėlis tarnauja. kaip kontrolė. Jei reagento mėgintuvėlyje yra baltymų, atsiras drumstumo arba koaguliuoto baltymo dribsnių. Kontroliniame vamzdelyje skystis išlieka skaidrus. Sulfosalicilo rūgštis kartu su serumo baltymu nusodina albumozes (peptidus), kurios yra baltymų skilimo produktas. Siekiant išsiaiškinti drumsto šlapimo priežastį, mėgintuvėlis su šlapimu pašildomas. Padidėja serumo baltymų sukeltas drumstumas, o dėl albumozės išnyksta drumstumas. Šis testas turi tokį patį jautrumą kaip ir ankstesnis.

3. Reakcija su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas). 50% azoto rūgšties tirpalas ruošiamas taip: 50 ml distiliuoto vandens (1:1 praskiedimas) įpilama į 50 ml azoto rūgšties, kurios savitasis tankis 1,2-1,4.

Baltymų nustatymo technika. Supilkite 1 ml 50% azoto rūgšties į siaurą nedidelį mėgintuvėlį (agliutinacijos tirpalas). 1 ml filtruoto tiriamojo šlapimo surenkama į pipetę siauru ištrauktu galu, sluoksniuojama ant reagento ir mėgintuvėlis perkeliamas į vertikalią padėtį. Esant baltymui, skysčių sąsajoje atsiranda baltas žiedas. Žiedo atsiradimo laikas, jo savybės priklauso nuo baltymų kiekio: jei baltymų mažai, tai žiedas atsiranda ne iš karto, todėl jo išvaizda stebima 2,5-3 minutes. Šiuo metodu nustatytas minimalus baltymų kiekis yra 0,033°/oo. Esant mažesniam baltymų kiekiui šlapime, žiedas nesusidaro. Atsižvelgiama į reakcijos, gautos juodame fone skleidžiamoje šviesoje, rezultatus.

4. Reakcija su 1% azoto rūgšties tirpalu prisotintame valgomosios druskos tirpale yra modifikuotas Geller testas (pagal Larionovą). Bandymui naudojamas 1% azoto rūgšties tirpalas, paruoštas prisotintame valgomosios druskos tirpale (Larionovos reagentas). 35 g paprastosios druskos ištirpinama 100 ml distiliuoto vandens, tirpalas filtruojamas, 99 ml paruošto sotaus natrio chlorido tirpalo įpilama į 1 ml koncentruotos azoto rūgšties, kurios savitasis tankis 1,2-1,4.

Baltymų nustatymo technika taip pat kaip ir reakcijoje su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas), tačiau vietoj 1 ml 50% azoto rūgšties tirpalo į mėgintuvėlį įpilama 1 ml Larionovos reagento ir supilama 1 ml šlapimo. sluoksniuotas ant jo. Balto žiedo atsiradimas ties skysčių riba rodo baltymo buvimą tiriamajame šlapime. Larionovos testas yra toks pat jautrus kaip Helerio testas.

5. Kolorimetrinis (sausas) testas kokybiniam baltymų nustatymui. Kolorimetrinis (sausas) testas, skirtas kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti, yra pagrįstas baltymų poveikiu buferinio tirpalo indikatoriaus spalvai.

Baltymų nustatymo technika. Indikatoriaus popieriaus gabalas, skirtas baltymui nustatyti, trumpam panardinamas į šlapimą. Mėginys laikomas teigiamu, jei popierius pasidaro mėlynai žalias.

Baltymų kiekio šlapime nustatymas

Baltymų šlapime kiekybinis nustatymas grindžiamas tuo, kad kai šlapimas, kuriame yra baltymų, yra sluoksniuojantis ant 50% azoto rūgšties tirpalo arba Larionovos reagento, dviejų skysčių ribose susidaro baltas žiedas, o jei atsiranda skaidrus baltas žiedas. 3 minutes, tada baltymų kiekis yra apie 0,033% arba 33 mg 1000 ml šlapimo. Žiedo atsiradimas anksčiau nei po 3 minučių rodo didesnį baltymų kiekį šlapime.
Kiekybiškai nustatant baltymų kiekį šlapime, laikomasi šių taisyklių:

Kiekybinis baltymų nustatymas atliekamas tik tose šlapimo dalyse, kuriose jis buvo aptiktas kokybiškai.
Nustatymas atliekamas kruopščiai filtruotu šlapimu.
Tiksliai laikykitės technikos, kaip tirti šlapimą sluoksniuoti ant 50% azoto rūgšties tirpalo arba Larionovos reagento reagento ir šlapimo santykiu (1:1).
Žiedo atsiradimo laikas nustatomas chronometru: galutinai apskaičiuojant baltymų kiekį, atsižvelgiama į šlapimo sluoksniavimosi ant azoto rūgšties laiką, kuris yra 15 sekundžių.
Šlapimas skiedžiamas pagal žiedo savybes. Tokiu atveju kiekvienas paskesnis šlapimo skiedimas ruošiamas iš ankstesnio.
Žiedai identifikuojami juodame fone.

Labiausiai paplitę yra du kiekybinio baltymo šlapime nustatymo metodai: Robertso-Stolnikovo-Brandbergo metodas ir S. L. Erlicho ir A. Ya. Althausen metodas.

Robertso-Stolnikovo-Brandbergo metodas. Pagal šį metodą baltymo kiekis šlapime nustatomas jį skiedžiant tol, kol kitą šlapimą sluoksniuojant ant 50% azoto rūgšties tirpalo arba Larionovo reagento žiedelis pasirodo lygiai po 3 minučių. Baltymų kiekis apskaičiuojamas 0,033% padauginus iš šlapimo praskiedimo laipsnio. Gautas rezultatas išreiškia baltymų kiekį miligramais 1000 ml šlapimo, t.y. ppm (% o).
S. L. Erlicho ir A. Ya. Althausen metodas.Į stovą dedami keli agliutinacijos mėgintuvėliai, į kuriuos pirmiausia įpilama 1 ml 50% azoto rūgšties tirpalo arba Larionovos reagento. Tiriamasis šlapimas paimamas atskira švaria, sausa pipete siauru ištrauktu galu ir uždedamas ant reagento, po to įjungiamas chronometras. Žiedo atsiradimo laikas stebimas pastačius mėgintuvėlį ant juodo fono. Pasirodžius žiedui, chronometras išjungiamas.

Sluoksniuojant šlapimą, priklausomai nuo baltymų kiekio, gali atsirasti kompaktiškas platus arba siūliškas žiedas. Padėjus šlapimą ant reagento iš karto atsiranda kompaktiškas platus žiedas. Į siūlą panašus žiedas gali pasirodyti iš karto, nepasibaigus vienai minutei arba intervalu nuo vienos iki 4 minučių.

Kai per 1–4 minutes atsiranda siūliškas žiedas, šlapimo skiesti nebūtina!
Baltymų kiekiui apskaičiuoti šiuo atveju pakanka naudoti autorių pasiūlytą lentelę-planą (1 lentelė).

1 pavyzdys Sluoksniuojant šlapimą ant reagento, po 2 minučių susidarė siūliškas žiedas. Jei žiedas būtų susiformavęs per 3 minutes, baltymų kiekis būtų 0,033%.

Šiuo atveju žiedas susiformavo anksčiau. Atitinkama korekcija pagal plano lentelę 2 minučių laikui yra 1 + 1/8. Tai reiškia, kad baltymo šioje šlapimo dalyje bus 1 + 1/8 karto daugiau nei 0,033 ° / oo, ty 0,033% o X (1 + 1/8) \u003d 0,037 ° / oo.

Pasirodžius siūliniam žiedui iki 1 minutės, t. y. po 40-60 sekundžių, vienas šlapimo praskiedimas atliekamas 1,5 karto (2 dalys šlapimo + 1 dalis vandens), o po to atskiestas šlapimas vėl uždedamas ant reagento. ir užfiksuojama žiedo išvaizda. Skaičiuojant rezultatus atsižvelgiama į tai, kad šlapimas buvo praskiestas 1,5 karto.

2 pavyzdys Po 1,5 karto praskiesto šlapimo sluoksniavimo po 2 minučių atsirado siūliškas žiedas. Jei žiedas atsirastų per 3 minutes, baltymas būtų 0,033%. Atitinkamas pakeitimas pagal lentelės planą, 2 minučių laikui yra 1 + 1/8. Baltymų šlapime yra 0,033% oX1,5X (1 + 1/8) \u003d 0,056% o.

Jei iš karto atsiranda siūliškas žiedas, šlapimas skiedžiamas 2 kartus (1 dalis šlapimo + 1 dalis vandens). Praskiestas šlapimas vėl užpilamas ant reagento ir po 1 minutės pažymimas žiedo atsiradimas.

3 pavyzdys Sluoksniuojant šlapimą, praskiestą 2 kartus ant reagento, po 1 minutės 15 sekundžių atsirado siūliškas žiedas. Tada baltymų kiekis tiriamame šlapime, pagal analogiją su ankstesniais skaičiavimais, bus lygus
0,033 % oX2X (1 + 3/8) \u003d 0,091 %.
Jei atsiranda platus žiedas, šlapimas skiedžiamas 4 kartus (1 dalis šlapimo + 3 dalys vandens).
Vėliau sluoksniuojant praskiestą šlapimą, siūlinis žiedas gali susidaryti ir prieš minutę, ir po jos. Tokiais atvejais baltymų kiekis apskaičiuojamas pagal analogiją su ankstesniais pavyzdžiais, ty 0,033% o dauginamas iš praskiedimo laipsnio ir atitinkamos pataisos.

1 pavyzdysŽiedas atskiedus šlapimą 4 kartus iš karto atsirado. Šlapimas skiedžiamas 2 kartus. Sluoksniavus šlapimą, praskiestą 8 kartus (4X2), po 1,5 minutės susidarė siūliškas žiedas. Šiuo atveju baltymų kiekis yra 0,033% oX8X1,25 \u003d 0,33% o ir kt.
Kai atsiranda kompaktiškas žiedas, šlapimas praskiedžiamas 8 kartus (1 dalis šlapimo + 7 dalys vandens). Vėliau ant reagento padengus praskiestą šlapimą, gali susidaryti kompaktiškas, platus arba siūliškas žiedas.

2 pavyzdys Kai šlapimas buvo sluoksniuotas ant azoto rūgšties, iškart susidarė kompaktiškas žiedas. Šlapimas skiedžiamas 8 kartus (1 dalis šlapimo + 7 dalys vandens) ir vėl sluoksniuojamas. Tai vėl lėmė kompaktišką žiedą. Tada šlapimas skiedžiamas dar 8 kartus (tam 1 dalis praskiesto šlapimo supilama į cilindrą arba į mėgintuvėlį ir į jį įpilama 7 dalys vandens). Po dar vieno atskiesto šlapimo sluoksniavimo iš karto susidarė siūliškas žiedas. Šlapimas skiedžiamas 2 kartus (1 dalis šlapimo + 1 dalis vandens). Po kito atskiesto šlapimo sluoksniavimo 2 min. Baltymų kiekis tam tikroje šlapimo dalyje apskaičiuojamas taip: 0,033,% oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4,8% o.

Be plano lentelės, yra lentelė su apskaičiuotais baltymų skaičiais (2 lentelė). Jei šlapimas neskiestas, tai baltymų kiekis pateikiamas skiltyje „Visas neskiestas šlapimas“. Skiedžiant šlapimą sveikuoju skaičiumi kartų (8,4,2), naudojama 1 lentelė. 1. Skiedžiant šlapimą 1,5 karto, naudokite lentelę. 2.

Lentelės naudojimo būdas baltymų kiekiui šlapime nustatyti

Atitinkamuose lentelės stulpeliuose nurodomas žiedo atsiradimo laikas ir šlapimo praskiedimo laipsnis.
Iš šių dviejų rodiklių nubrėžtų horizontalių ir vertikalių linijų susikirtimo taške esantis skaičius rodo baltymo kiekį tiriamajame šlapime (% o).

Gali būti, kad esant teigiamam kokybiniam baltymų testui, žiedas nesusidaro sluoksniuojant ant 50% azoto rūgšties tirpalo. Tai reiškia, kad baltymų kiekis šlapime yra mažesnis nei 0,033%. Tokiais atvejais baltymų kiekis analizės formoje vadinamas „pėdsakais“.

Jei baltymas yra kiekybiškai įvertintas, baltymų kiekis ppromilėmis pažymimas šlapimo tyrimo formoje, pavyzdžiui, „baltymai - 0,66% o“.

Be kiekybinio baltymo nustatymo atskiroje šlapimo dalyje, apskaičiuojamas jo paros kiekis gramais. Tam surenkamas paros šlapimas, matuojamas jo kiekis ir nustatomas baltymų kiekis promilėse. Tada atliekamas skaičiavimas. Pavyzdžiui, paros šlapimo kiekis yra 1800 ml, baltymų - 7 ° / oo. Tai reiškia, kad baltymų paros kiekyje šlapime yra: 1,8X7 \u003d 12,6 g.

pirmiausia reikia filtruoti.

Mėginys su sulfosalicilo rūgštimi. Jautriausias ir dažniausias yra tyrimas su 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalu.

Apibrėžimo pažanga. Du cheminiai mėgintuvėliai pažymėti: „O“ – patirtis ir „K“ – kontrolinė. Į abu mėgintuvėlius pilama po 4-5 ml skaidraus šlapimo. Į eksperimentinį mėgintuvėlį įlašinkite 4-5 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, gerai išmaišykite. Abu mėgintuvėliai juodame fone tiriami vienas šalia kito. Jei mėgintuvėlyje yra baltymų, pastebimas drumstumas. Palyginimui naudojamas kontrolinis vamzdelis. Bandymo su sulfosalicilo rūgštimi jautrumas yra 0,015 g/l.

Baltymų skilimo produktai – albumozė – taip pat teigiamai reaguoja su sulfosalicilo rūgštimi. Norint nustatyti drumstumo priežastį, mėginys kaitinamas. Tokiu atveju migla, kurią sukelia albumino buvimas, išnyksta, o migla, kurią sukelia baltymo buvimas, didėja.

Helerio žiedo testas. Apibrėžimo pažanga. Į centrifugos mėgintuvėlį supilkite 1–1,5 ml 50% azoto rūgšties arba Larionovos reagento. Tada sluoksniuokite

rūgštinkite tokį pat kiekį šlapimo, kad skystis nesimaišytų. Esant baltymui ties skysčio riba, atsiranda baltas žiedas. Reakcija vertinama juodame fone ir atsižvelgiama į siūliško žiedo atsiradimo laiką Mėginio jautrumas 0,033 g/l. Esant tokiam baltymų kiekiui, skysčių sąsajoje tarp 2 ir 3 minučių atsiranda baltas siūlas.

sluoksniavimo technika. Šlapimas visada yra ant rūgšties, nes santykinis šlapimo tankis yra mažesnis nei rūgščių. Sluoksniavimas atliekamas Pasteur pipete su balionu, kuri surenka nedidelį kiekį šlapimo. Tada šlapimas įvedamas į siaurą centrifugos mėgintuvėlio dalį, laikant jį kampu, sluoksniuotas lašas po lašo, lėtai nuleidžiant šlapimą išilgai vamzdelio sienelių.

Mėginio trūkumas yra pigmentinio žiedo atsiradimas dėl urochromo oksidacijos azoto rūgštimi.Šis rusvas žiedas gali trukdyti nustatymui. Šlapime, kuriame yra uratų, virš skysčio ribos kartais atsiranda balkšvas žiedas.

Aiškesnis Helerio testo rezultatas gaunamas, jei vietoj 50% azoto rūgšties tirpalo naudojamas Larionovos reagentas (1% azoto rūgšties tirpalas sočiame natrio chlorido tirpale).

kiekybinis įvertinimas

Baltymų kiekį šlapime galima nustatyti dviem būdais: 1) Brandberg-Roberts-Stolnikov metodu su šlapimo praskiedimu; 2) pagal drumstumą, susidarantį pridedant 3% sulfosalicilo rūgšties.

Brandbergo-Roberto-Stolnikovo metodas. Šis metodas pagrįstas Helerio žiedo testu. Yra žinoma, kad kai baltymų kiekis šlapime yra 0,033 g/l, 2-3 minutę susidaro siūlinis žiedas.Jei baltymo šlapime yra daugiau nei 0,033 g/l, tai žiedas atsiranda anksčiau, o. nėra platus siūlinis. Tokį šlapimą reikia atskiesti distiliuotu vandeniu ir vėl sluoksniuoti azoto rūgštimi su atskiestu šlapimu. Jei po sluoksniavimo tarp 2 ir 3 minučių atsiranda siūliškas žiedas, skiedimas turėtų būti laikomas baigtu. Baltymų kiekis šiuo atveju nustatomas šlapimo praskiedimo laipsnį padauginus iš 0,033 g/l. Šlapimo skiedimas parenkamas naudojant tokį apytikslį savybių įvertinimą! žiedai: jei po sluoksniavimo iš karto atsiranda siūliškas žiedas, šlapimas skiedžiamas 2 kartus, jei iš karto atsiranda platus žiedas, 4 kartus, jei iš karto atsiranda kompaktiškas žiedas, 8 ar 10 kartų.

Šlapimas skiedžiamas matavimo centrifugos mėgintuvėlyje, pilant šlapimą iki 1 ml žymos ir įpilant vandens iki žymės, kiek kartų skiedžiama. Mėgintuvėlio turinys kruopščiai sumaišomas Pasteur pipete su balionu.

Kartais tenka kelis kartus praskiesti šlapimą. Šiuo atveju, skaičiuojant baltymų kiekį, atsižvelgiama į visus praskiedimus. Pavyzdys. Sluoksniuojant visą šlapimą iškart atsirado kompaktiškas žiedas. Šlapimas 10 kartų praskiedžiamas matavimo centrifugos mėgintuvėlyje (1 ml šlapimo ir 9 ml vandens iki 10 žymos). Sluoksnis, praskiestas 10 kartų šlapimu ant azoto rūgšties. Jei iš karto atsiranda platus žiedas, tada nustatymas nebaigtas, jį reikia tęsti. Nuo pirmojo praskiedimo 10 kartų reikia dar kartą praskiesti 4 kartus. Bendra praskiedimo norma šiuo atveju bus 40 (10x4). Kai šlapimas praskiedžiamas 40 kartų, vėl atliekamas Helerio žiedo testas. Kai tarp 2 ir 3 minučių atsiranda siūlų formos žiedas, nustatymas turėtų būti laikomas baigtu.

Dirbdami galite naudoti Erlich-Althausen korekciją, jei siūlinis žiedas pasirodo prieš 2 minutę. Kad šlapimas dar labiau neskiesti, autoriai pasiūlė nustatyti siūliško žiedo atsiradimo laiką ir pakoreguoti laiko skaičiavimą. Šiuo atveju baltymų kiekis apskaičiuojamas 0,033 g/l padauginus iš praskiedimo laipsnio ir iš pataisos. Pakeitimų reikšmės apibendrintos lentelėje. 3.

3 lentelė. Baltymų nustatymo pataisos vertės

Susiformavimo laikas" Žiedo korekcija, min. Susiformavimo laikas Žiedo korekcija, min

Populiarus kategorijoje: