Kvalitativno določanje beljakovin v urinu. Prenesite knjigo "Klinične laboratorijske raziskave" (2.84Mb)

Načelo metode:

Relativna gostota urina je običajno 1,015-1,025 g/cm 3 . Določitev relativne gostote urina se izvaja s posebnimi majhnimi hidrometri, imenovanimi urometri. Urometri so dveh vrst: prvi je za urin z nizko in normalno relativno gostoto (z delitvami od 1.000 do 1.030 g / cm3), drugi - za urin z visoko relativno gostoto (z delitvami od 1.030 do 1.060 g / cm3). ).

NAPREDEK

V majhen valj s takšnim premerom, da urometer prosto plava v njem, nalijemo testni urin ob steno in vanj previdno potopimo urometer. Odčitek se izvede tako, da se na lestvici urometra vzame črta, ki ustreza spodnjemu meniskusu tekočine. Vse določitve potekajo pri temperaturi 20 0 C, saj je lestvica urometra graduirana v skladu s to temperaturo. Če ima urin drugačno temperaturo, morate za vsake 3 0 C nad to temperaturo dodati in za vsake 3 0 C pod - odšteti 0,001 od odčitka lestvice urometra.

Odkrivanje patoloških sestavin urina

1. Kvalitativne reakcije za dokazovanje beljakovin v urinu - a) Gellerjev test s koncentrirano dušikovo kislino

Načelo metode:

Koncentrirana mineralna kislina HNO 3 povzroči denaturacijo beljakovin in tvori kompleksne soli beljakovin s kislino. Na meji dveh plasti tekočine nastane oborina v obliki majhnega belega obroča.

Napredek

V epruveto vlijemo 1 ml koncentrirane HNO 3, epruveto nagnemo pod kotom 45 0 in s pipeto previdno nanesemo po steni 1 ml urina.

b) test s koncentrirano sulfosalicilno kislino

Načelo metode:

Koncentrirana organska sulfosalicilna kislina povzroči denaturacijo beljakovin. Obarjanje beljakovin v obliki oborine ali motnosti je povezano z dehidracijo beljakovinskih delcev in tvorbo kompleksnih soli beljakovine s kislinami.

Napredek

Na 1 ml urina vlijemo 3 kapljice 20% sulfosalicilne kisline. Ob prisotnosti beljakovin v urinu nastane bela oborina.

2. Kvantitativno določanje beljakovin v urinu z uporabo

testni trakovi "Albufan".

Načelo metode:

Test temelji na principu "indikatorske beljakovinske napake". Reaktivna cona vsebuje kisikov pufer in poseben indikator, ki v prisotnosti beljakovin spremeni barvo iz rumene preko zelene v modro.

Test je zelo občutljiv na albumin in reagira na njegovo prisotnost v urinu v koncentraciji 0,10-0,15 g/l. Beljakovine z visoko molekulsko maso, kot so imunoglobulini, se merijo z manjšo občutljivostjo kot albumini. Nizkomolekularnih beljakovin, kot so beta-2 mikroglobulin, Bence-Jonesov protein, ta test praktično ne zazna.

Ocena testa: za pozitiven test se šteje, če se spremeni barva reaktivnega območja. Odvisno od koncentracije albumina v urinu lahko reaktivno območje prevzame barvo od zelene do modre. Ti odtenki se primerjajo z barvno lestvico, katere cone ustrezajo koncentraciji beljakovin 0,3, 1, 3, 10 g/l.

NAPREDEK

Ne da bi se z rokami dotaknili reaktivnega območja, spustite testni listič za 1-2 sekundi v testni urin, da se območje navlaži. Nato odstranite odvečni urin s traku in po približno 1 minuti primerjajte barvo indikacijske cone z barvno lestvico na kompletu in določite količino beljakovin, ki je izražena v g/l.

Nisi suženj!
Zaprti izobraževalni tečaj za otroke elite: "Prava ureditev sveta."
http://noslave.org

Iz Wikipedije, proste enciklopedije

Gellerjev test, poimenovano po avst patolog J. F. Heller, splošno ime kvalitativna reakcija na beljakovine v urinu. Vzorec ima občutljivost 0,033 g/l in se uporablja v klinična diagnostika proteinurija. Načelo detekcije beljakovin temelji na njihovi denaturaciji pod vplivom denaturirajočega faktorja - koncentriranega dušikova kislina oz reagent Larionova.

Treba je opozoriti, da je določena količina beljakovin vedno prisotna v urinu, vendar je praviloma njegova koncentracija v urinu zdrave osebe pod pragom občutljivosti kvalitativne reakcije in ni zaznana s preprostimi metodami. Za količine beljakovin nad 0,033 g/l vzorec ni primeren. Pri višjih koncentracijah razredčite urin ali uporabite albuminometer Esbach.

Za določitev količine skupnih beljakovin v urinu se uporablja metoda, ki temelji na Gellerjevem testu - metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov (W. Roberts, 1830-1899, angleški terapevt). Tehnika vključuje redčenje urina na spodnjo mejo občutljivosti vzorca (0,033 g / l) in čas tvorbe obroča 2-3 minute.

Napredek analize

Reagenti: koncentrirana (dimeča) dušikova kislina ali Larionov reagent. Urin, ki ga je treba testirati, mora biti čist in kisel.

Priprava reagenta Larionova

Pripravimo nasičeno raztopino natrijevega klorida (20-30 g soli raztopimo v 100 ml tople vode, pustimo stati, dokler se ne ohladi). Supernatant se zavrže in filtrira. 99 ml filtrata dodajte 1 ml koncentrirane dušikove kisline (lahko nadomestite 2 ml klorovodikove kisline).

Raziskovalna tehnika

Približno enako količino urina previdno nanesemo vzdolž stene v epruveto z 1-2 ml reagenta. V prisotnosti beljakovin se po približno 2-3 minutah na meji med tekočinama opazi motnost - bel obroč denaturirane beljakovine.

Pri uporabi dušikove kisline se lahko pojavi lažno pozitiven rezultat zaradi visoke koncentracije nukleoalbumina ali uratnih soli. V prvem primeru izgine, ko cev rahlo stresemo, v drugem primeru pa se obroč nahaja veliko višje od vmesnika med mediji in izgine, ko se segreje; pri ponovitvi testa z razredčenim urinom se obroč ne oblikuje. Včasih se rjavkasto pigmentiran obroč pojavi tudi zaradi oksidacije urokroma z dušikovo kislino.

Uporaba Larionskega reagenta ima za razliko od dušikove kisline številne prednosti: pigmentni obroči se ne tvorijo na meji plasti, pozitiven rezultat pa daje jasnejše beljakovinske obroče.

Poglej tudi

Napišite oceno o članku "Gellerjev test"

Povezave

Literatura

[[C:Wikipedia:Članki brez slik (država: Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. )]][[C:Wikipedia:Članki brez slik (država: Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. )]]Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test Napaka Lua: callParserFunction: funkcija "#property" ni bila najdena. Gellerjev test

Odlomek, ki opisuje Gellerjev test

Bila sem divje prizadeta in žalostna zaradi njih, zaradi sebe in zaradi vseh tistih, ki so se borili, še vedno verjamejo, da lahko nekaj spremenijo ... Ampak ali bi lahko? .. Če bi vsi, ki so se borili, samo umrli, kaj je smisel takega vojna?
Nenadoma se je pred mano pojavila druga slika ...
V isti majhni kamniti »celici«, kjer je na tleh še vedno ležalo okrvavljeno truplo Magdalene, so okoli nje stali in klečali vitezi njenega templja ... Vsi so bili nenavadno oblečeni v belo – snežno bela dolga oblačila. . Stali so okoli Magdalene s ponosno sklonjenimi glavami in solze so jim tekle po strogih, okamnelih obrazih v potokih ... Prvi je vstal mag, čigar Janez je bil nekoč prijatelj. Previdno je, kot da bi se bal, da bi se poškodoval, pomočil prste v rano in si z okrvavljeno roko na prsi narisal nekaj podobnega krvavemu križu ... Drugi je storil enako. Tako so vstajali po vrsti in si roke spoštljivo pomočili v sveto kri, risali rdeče križe na svoja snežno bela oblačila ... Čutila sem, kako se mi ježijo lasje. Bilo je kot nekakšen srhljiv ritual, ki ga še vedno nisem mogla razumeti ...
»Zakaj to delajo, Sever?..« sem tiho vprašala, kot da bi se bala, da me bodo slišali.
»To je prisega, Izidora. Prisega večnega maščevanja... Prisegli so na Magdalenino kri - zanje najsvetejšo kri - da bodo maščevali njeno smrt. Od takrat naprej so tempeljski vitezi nosili bele plašče z rdečimi križi. Samo skoraj nihče od zunanjih ni nikoli vedel njihovega pravega pomena ... In iz nekega razloga so vsi zelo hitro "pozabili", da so vitezi templja pred smrtjo Magdalene oblečeni v preproste temno rjave kombinezone, ki niso "okrašeni" s križi . Vitezi templja so tako kot katari sovražili križ v smislu, v katerem ga »časti« krščanska cerkev. Imeli so ga za podlo in zlobno orodje umora, orodje smrti. In to, kar so jim na prsi risali z Magdalenino krvjo, je imelo povsem drugačen pomen. Samo, da je cerkev pomen tempeljskih vitezov popolnoma »preoblikovala« po svojih potrebah, tako kot vse drugo, kar je povezano z Radomirjem in Magdaleno ....
Na enak način je po njeni smrti javno razglasila pokojno Magdaleno kot uličarko ...
- zanikal tudi Kristusove otroke in svojo poroko z Magdaleno ...
– oba tudi uničil »v imenu Kristusove vere«, s katero sta se oba vse življenje srdito borila ...
- tudi uničili Katar, z uporabo Kristusovega imena... imena osebe, katere Vero in Znanje so poučevali...
- uničila je tudi templjarje (viteze templja), jih razglasila za hudičeve sluge, obrekovala in blatila njihova dejanja ter vulgarizirala samega mojstra, ki je bil neposredni potomec Radomirja in Magdalene ...
Ko se je krščanska cerkev znebila vseh, ki bi lahko kakor koli opozorili na nizkotnost in podlost »najsvetejših« hudičev Rima, je ustvarila legendo, ki je bila zanesljivo potrjena z »neizpodbitnimi dokazi«, ki jih iz nekega razloga nihče nikoli ni preveril, in nikomur ni prišlo na misel, da bi razmišljal o tem, kaj se dogaja.

Sestava delovnega mesta za določanje beljakovin v urinu vključuje naslednje elemente:

1. Kemijske epruvete, aglutinacija.
2. Komplet graduiranih pipet.
3. Pipete z ozkim izvlečenim koncem.
4. Alkoholne svetilke ali plinski gorilnik.
5. Črn papir.
6. Ledocetna kislina.
7. sulfosalicilna kislina.
8. Koncentrirana dušikova kislina.
9. Destilirana voda.

Metode za določanje beljakovin v urinu

Vse metode, ki se uporabljajo za kvalitativno določanje beljakovin v urinu, temeljijo na koagulaciji beljakovin. Koagulacija beljakovin se kaže z različno izraženo motnostjo (od opalescence do visoke motnosti) ali z luščenjem.

Kakovostno določanje beljakovin v urinu se lahko izvede na enega od naslednjih načinov:

1. vrenje z 10% raztopino ocetne kisline;
2. reakcija z 20% raztopino sulfosalicilne kisline;
3. reakcija s 50% raztopino dušikove kisline (Gellerjev test);
4. reakcija z 1% raztopino dušikove kisline v nasičeni raztopini kuhinjske soli (modificiran Gellerjev test po Larionovi).

Pred kvalitativno določitvijo beljakovin v urinu se izvedejo naslednja pripravljalna dela:
1. Moten urin filtriramo skozi papirnati filter. Če ni mogoče dobiti prozornega filtrata, se izvede ponovno filtriranje skozi isti filter ali pa se urin zmeša z majhno količino diatomejske zemlje ali smukca, nato pa se filtrira.
2. Če ima urin alkalno reakcijo, ga nakisamo z 10% raztopino ocetne kisline do rahlo kisle reakcije pod kontrolo lakmusovega ali univerzalnega indikatorskega papirja.
3. Z nizko vsebnostjo soli (svetlo rumen ali bledo rumen urin z nizko specifično težo) za vsakega
vzorcu dodamo nekaj kapljic nasičene raztopine natrijevega klorida, saj pomanjkanje soli povzroči koagulacijo beljakovin.
4. Stopnjo motnosti opazujemo na črnem ozadju. Ozadje je črn karton ali črn papir, ki se uporablja pri fotografiji. Upoštevanje reakcije na črnem ozadju vam omogoča, da prepoznate najmanjšo stopnjo motnosti.

Oštevilčene epruvete postavimo v ločeno stojalo. Proizvajajo eno od naslednjih reakcij.

1. Preskus vrenja z 10 % raztopino ocetne kisline. Ta preskus zahteva 10-odstotno raztopino ocetne kisline, ki jo pripravimo na naslednji način: 10 ml ledocetne kisline damo v valj in dolijemo destilirano vodo do oznake 100 ml.

Tehnika določanja beljakovin. V kemično epruveto damo 10-12 ml filtriranega urina rahlo kisle reakcije. Nato zgornji del epruvete z urinom rahlo segrejemo do vrenja in vanj dodamo 8-10 kapljic 10% raztopine ocetne kisline. Epruveto z urinom gledamo na črnem ozadju v prepustni svetlobi. Ob prisotnosti beljakovin v urinu se pojavi motnost različnih stopenj (od opalescence do velike motnosti) ali izpadanje kosmičev. Kontrola je spodnji del epruvete, ki ni izpostavljen segrevanju. Ta test zazna količino beljakovin, začenši z 0,015 % o (% o - promil).

2. Reakcija z 20% raztopino sulfosalicilne kisline. 20% raztopino sulfosalicilne kisline pripravimo takole: 20 g sulfosalicilne kisline raztopimo v 70-80 ml destilirane vode, prelijemo v 100 ml valj in dolijemo destilirano vodo do oznake. Pripravljen reagent je shranjen v temni stekleni posodi.

Tehnika določanja beljakovin. V dve epruveti enakega premera damo 2-3 ml filtriranega urina šibko kisle reakcije, v eno od epruvet dodamo 3-4 kapljice 20% raztopine sulfosalicilne kisline v urin, druga cev služi kot nadzor. Če je v reagentni epruveti prisoten protein, se pojavi motnost ali kosmiči koaguliranega proteina. V kontrolni epruveti ostane tekočina bistra. Sulfosalicilna kislina skupaj s serumskimi beljakovinami obarja albumoze (peptide), ki so produkt razgradnje beljakovin. Da bi razjasnili vzrok motnega urina, epruveto z urinom segrejemo. Motnost, ki jo povzročajo serumske beljakovine, se poveča, medtem ko motnost zaradi prisotnosti albumoze izgine. Ta test ima enako občutljivost kot prejšnji.

3. Reakcija s 50% raztopino dušikove kisline (Gellerjev test). 50% raztopino dušikove kisline pripravimo na naslednji način: 50 ml destilirane vode (razredčenje 1:1) dodamo 50 ml dušikove kisline s specifično težo 1,2-1,4.

Tehnika določanja beljakovin. V ozko majhno epruveto (aglutinacijski izcedek) vlijemo 1 ml 50 % dušikove kisline. 1 ml filtriranega testnega urina zberemo v pipeto z ozkim izvlečenim koncem, nanesemo na reagent in epruveto prestavimo v navpičen položaj. V prisotnosti beljakovin se na meji tekočin pojavi bel obroč. Čas pojava obroča, njegove lastnosti so odvisne od količine beljakovin: če je beljakovin malo, se obroč ne pojavi takoj, zato se njegov videz spremlja 2,5-3 minute. Najmanjša količina beljakovin, določena s to metodo, je 0,033°/oo. Z nižjo vsebnostjo beljakovin v urinu se obroč ne oblikuje. Upoštevanje rezultatov reakcije, proizvedene na črnem ozadju v prepustni svetlobi.

4. Reakcija z 1% raztopino dušikove kisline v nasičeni raztopini kuhinjske soli je modificiran Gellerjev test (po Larionovi). Za test uporabimo 1% raztopino dušikove kisline, pripravljeno v nasičeni raztopini kuhinjske soli (reagent Larionova). 35 g navadne soli raztopimo v 100 ml destilirane vode, raztopino filtriramo, 99 ml pripravljene nasičene raztopine natrijevega klorida dodamo v 1 ml koncentrirane dušikove kisline s specifično težo 1,2-1,4.

Tehnika določanja beljakovin enako kot pri reakciji s 50% raztopino dušikove kisline (Gellerjev test), le da namesto 1 ml 50% raztopine dušikove kisline v epruveto vlijemo 1 ml Larionovega reagenta in 1 ml urina. plast na njej. Pojav belega obroča na meji tekočin kaže na prisotnost beljakovin v testnem urinu. Test Larionove je enako občutljiv kot Hellerjev test.

5. Kolorimetrični (suhi) test za kvalitativno določanje beljakovin. Kolorimetrični (suhi) test za kvalitativno določanje beljakovin v urinu temelji na vplivu beljakovin na barvo indikatorja v pufrski raztopini.

Tehnika določanja beljakovin. Košček indikatorskega papirja za določanje beljakovin se za kratek čas potopi v urin. Vzorec je pozitiven, če se papir obarva modrozeleno.

Kvantifikacija beljakovin v urinu

Kvantitativno določanje beljakovin v urinu temelji na dejstvu, da ko se urin, ki vsebuje beljakovine, nanese na 50% raztopino dušikove kisline ali Larionovega reagenta, na meji dveh tekočin nastane bel obroč, če pa se pojavi prozoren bel obroč. za 3 minute, potem je vsebnost beljakovin 0,033% približno ali 33 mg v 1000 ml urina. Pojav obroča prej kot 3 minute kaže na večjo vsebnost beljakovin v urinu.
Pri določanju količine beljakovin v urinu se upoštevajo naslednja pravila:

1. Kvantitativno določanje beljakovin se izvaja samo v tistih delih urina, kjer je bilo kvalitativno odkrito.
2. Določanje se opravi s skrbno filtriranim urinom.
3. Natančno upoštevajte tehniko nanosa testnega urina na 50% raztopino dušikove kisline ali Larionovega reagenta v razmerju reagent in urin (1:1).
4. Čas pojava obroča se določi s štoparico: pri končnem izračunu količine beljakovin se upošteva čas plastenja urina na dušikovi kislini, ki je 15 sekund.
5. Urin se razredči na podlagi lastnosti obroča. V tem primeru se vsako naslednje razredčenje urina pripravi iz prejšnjega.
6. Prstani so označeni na črnem ozadju.

Najpogostejši sta dve metodi za kvantitativno določanje beljakovin v urinu: metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg in metoda S. L. Erlicha in A. Ya. Althausena.

1. Roberts-Stolnik-Brandbergova metoda. Po tej metodi se količina beljakovin v urinu določi z redčenjem, dokler se z naslednjim nanosom urina na 50% raztopino dušikove kisline ali Larionovega reagenta obroč ne pojavi točno 3 minute. Količina beljakovin se izračuna tako, da se 0,033% pomnoži s stopnjo redčenja urina. Dobljeni rezultat izraža količino beljakovin v miligramih na 1000 ml urina, to je v ppm (% o).
2. Metoda S. L. Erlicha in A. Ya. Althausena. V stojalo postavimo več aglutinacijskih epruvet, v katere najprej vlijemo 1 ml 50% raztopine dušikove kisline ali Larionovega reagenta. Testni urin se odvzame z ločeno čisto, suho pipeto z ozkim izvlečenim koncem in se nanese na reagent, nato pa se vklopi štoparica. Čas pojava obroča spremljamo tako, da epruveto postavimo na črno podlago. Ko se pojavi prstan, se štoparica izklopi.

Pri plastenju urina se lahko glede na količino beljakovin pojavi kompakten, širok ali nitast obroč. Takoj po nanosu urina na reagent se pojavi kompakten širok obroč. Nitasti obroč se lahko pojavi takoj, pred pretekom ene minute ali v intervalu od ene do 4 minut.

Ko se filiformni obroč pojavi v eni do 4 minutah, urina ni treba redčiti!
Za izračun količine beljakovin v tem primeru zadostuje uporaba tabele, ki so jo predlagali avtorji (tabela 1).

Primer 1 Pri nanosu urina na reagent se je po 2 minutah oblikoval filiformni obroč. Če bi se obroč oblikoval do 3 minut, bi bila količina beljakovin 0,033 %.

V tem primeru je obroč nastal prej. Ustrezni popravek glede na tabelo načrta za čas 2 minut je 1 + 1/8. To pomeni, da bo beljakovina v tem delu urina 1 + 1/8-krat večja od 0,033 ° / oo, to je 0,033% o X (1 + 1/8) \u003d 0,037 ° / oo.

Ko se filiformni obroč pojavi do 1 minute, to je po 40-60 sekundah, naredimo eno razredčitev urina za 1,5-krat (2 dela urina + 1 del vode), nato pa razredčeni urin ponovno nanesemo na reagent. in videz obroča se zabeleži. Pri izračunu rezultatov se upošteva, da je bil urin razredčen 1,5-krat.

Primer 2 Po nanosu urina, razredčenega 1,5-krat, se je po 2 minutah pojavil filiformni obroč. Če bi se obroč pojavil po 3 minutah, bi bila beljakovina 0,033 %. Ustrezna sprememba glede na tabelo je za čas 2 minut 1 + 1/8. Beljakovine v urinu vsebujejo 0,033% oX1,5X (1 + 1/8) \u003d 0,056% o.

Če se filiformni obroč pojavi takoj, se urin razredči 2-krat (1 del urina + 1 del vode). Razredčen urin ponovno nanesemo na reagent in po 1 minuti opazimo videz obroča.

Primer 3 Pri nanosu 2-krat razredčenega urina na reagent se je po 1 minuti 15 sekund pojavil filiformni obroč. Potem bo količina beljakovin v urinu, ki se preučuje, po analogiji s prejšnjimi izračuni enaka
0,033 % oX2X (1 + 3/8) \u003d 0,091 %.
Če se pojavi širok obroč, se urin razredči 4-krat (1 del urina + 3 dele vode).
Z naknadnim nanosom razredčenega urina se lahko filiformni obroč oblikuje pred in po eni minuti. V takih primerih se izračun količine beljakovin izvede po analogiji s prejšnjimi primeri, tj. 0,033 % o pomnožimo s stopnjo razredčitve in z ustreznim popravkom.

Primer 1 Obroč po redčenju urina 4-krat se je pojavil takoj. Urin se razredči 2-krat. Po plastenju urina, razredčenega 8-krat (4X2), se je po 1,5 minutah oblikoval filiformni obroč. V tem primeru je količina beljakovin 0,033% oX8X1,25 \u003d 0,33% o itd.
Ko se pojavi kompakten obroč, se urin razredči 8-krat (1 del urina + 7 delov vode). Po naknadnem nanosu razredčenega urina na reagent se lahko oblikuje kompakten, širok ali nitast obroč.

Primer 2 Ko je urin nanesel na dušikovo kislino, je takoj nastal kompakten obroč. Urin razredčimo 8-krat (1 del urina + 7 delov vode) in ponovno slojimo. To je ponovno povzročilo kompakten obroč. Nato urin razredčimo še 8-krat (v ta namen vzamemo 1 del razredčenega urina v valj ali epruveto in mu dodamo 7 delov vode). Po ponovnem nanosu razredčenega urina se je takoj oblikoval filiformni obroč. Urin razredčimo 2-krat (1 del urina + 1 del vode). Po naslednjem nanosu razredčenega urina se je v 2 minutah oblikoval filiformni obroč. Izračun količine beljakovin v danem delu urina se izvede na naslednji način: 0,033,% oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4,8% o.

Poleg planske tabele je tabela z izračunanimi beljakovinskimi številkami (tabela 2). Če urin ni razredčen, se količina beljakovin nahaja v stolpcu "Cel nerazredčen urin". Pri redčenju urina za celo število krat (8,4,2) se uporablja tabela 1. 1. Pri redčenju urina za 1,5-krat uporabite tabelo. 2.

Tehnika uporabe tabele za določanje vsebnosti beljakovin v urinu

V ustreznih stolpcih tabele sta navedena čas pojava obroča in stopnja redčenja urina.
Številka, ki se nahaja na presečišču vodoravne in navpične črte, potegnjene iz teh dveh indikatorjev, označuje količino beljakovin v testnem urinu (% o).

Možno je, da pri pozitivnem kvalitativnem testu za beljakovine obroč ne nastane, ko se nanese na 50% raztopino dušikove kisline. To pomeni, da je količina beljakovin v urinu manjša od 0,033 %. V takih primerih se količina beljakovin v obrazcu za analizo imenuje "sledi".

Če je beljakovina kvantificirana, se vsebnost beljakovin v ppromilu zabeleži v obrazcu za analizo urina, na primer "beljakovine - 0,66% o".

Poleg kvantitativnega določanja beljakovin v ločenem delu urina se izračuna njegova dnevna količina v gramih. V ta namen odvzamemo dnevni urin, izmerimo njegovo količino in določimo vsebnost beljakovin v promilu. Nato se naredi izračun. Na primer, dnevna količina urina je 1800 ml, beljakovin - 7 ° / oo. To pomeni, da beljakovine v dnevni količini urina vsebujejo: 1,8X7 \u003d 12,6 g.

je treba najprej filtrirati.

Vzorec s sulfosalicilno kislino. Najbolj občutljiv in pogost je test z 20% raztopino sulfosalicilne kisline.

Napredek definicije. Dve kemični epruveti sta označeni: "O" - izkušnja in "K" - kontrola. V obe epruveti vlijemo 4-5 ml čistega urina. V poskusno epruveto dodajte 4-5 kapljic 20% raztopine sulfosalicilne kisline, dobro premešajte. Obe epruveti se pregledata eno poleg druge na črnem ozadju. Ob prisotnosti beljakovin v epruveti opazimo motnost. Za primerjavo se uporablja kontrolna cev. Občutljivost testa s sulfosalicilno kislino je 0,015 g/l.

Produkti cepitve beljakovin - albumoza - dajejo tudi pozitivno reakcijo s sulfosalicilno kislino. Da ugotovimo vzrok motnosti, vzorec segrejemo. Hkrati izgine meglica, ki jo povzroča prisotnost albumina, poveča pa se meglica, ki jo povzroča prisotnost beljakovine.

Hellerjev prstanski test. Napredek definicije. V centrifugirno epruveto vlijemo 1 - 1,5 ml 50% dušikove kisline ali Larionovega reagenta. Nato nanesite plast

kisline enako količino urina, da se tekočina ne pomeša. V prisotnosti beljakovin na tekoči meji se pojavi bel obroč. Reakcijo ocenjujemo na črni podlagi in upoštevamo čas pojava filiformnega obroča.Občutljivost vzorca je 0,033 g/L. Pri tej vsebnosti beljakovin se med 2. in 3. minuto na meji tekočin pojavi bel nitast obroč.

tehnika plastenja. Urin je vedno prekrit s kislino, saj je relativna gostota urina manjša od gostote kislin. Plastenje poteka s Pasteurjevo pipeto z balonom, ki zbere majhno količino urina. Nato urin vnesemo v ozek del centrifugalne cevi, ga držimo pod kotom, po plasteh po kapljicah in počasi spuščamo urin vzdolž sten cevi.

Pomanjkljivost vzorca je pojav pigmentnega obroča zaradi oksidacije urokroma z dušikovo kislino.Ta rjavkasti obroč lahko moti določanje. V urinu, ki vsebuje urate, se včasih pojavi belkast obroč nad mejo tekočine.

Bolj jasen rezultat Hellerjevega testa dobimo, če namesto 50% raztopine dušikove kisline uporabimo Larionov reagent (1% raztopina dušikove kisline v nasičeni raztopini natrijevega klorida).

kvantifikacija

Količina beljakovin v urinu se lahko določi na dva načina: 1) z metodo Brandberg-Roberts-Stolnikova z redčenjem urina; 2) glede na motnost, ki nastane z dodatkom 3% sulfosalicilne kisline.

Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda. Ta metoda temelji na Hellerjevem obročnem testu. Znano je, da ko je vsebnost beljakovin v urinu 0,033 g / l, se filamentni obroč oblikuje 2-3. ni širok nitast. Takšen urin je treba razredčiti z destilirano vodo in ponovno preliti z dušikovo kislino z razredčenim urinom. Če se po plastenju med 2. in 3. minuto pojavi nitast obroč, se šteje, da je redčenje končano. Količina beljakovin v tem primeru se določi tako, da se 0,033 g/l ng pomnoži s stopnjo redčenja urina. Redčenje urina se izbere z uporabo naslednje približne ocene lastnosti! obroči: če se po plastenju takoj pojavi filiformni obroč, se urin razredči 2-krat, če se takoj pojavi širok obroč, 4-krat, če se takoj pojavi kompakten obroč, 8 ali 10-krat.

Redčenje urina opravimo v merilni centrifugalni epruveti, pri čemer urin dolijemo do oznake 1 ml in dodamo vodo do oznake, kolikokrat redčimo. Vsebino epruvete temeljito premešamo s Pasteurjevo pipeto z balonom.

Včasih morate večkrat razredčiti urin. V tem primeru se pri izračunu količine beljakovin upoštevajo vse razredčitve. Primer. Pri plastenju celotnega urina se je takoj pojavil kompakten obroč. Urin 10-krat razredčimo v merilni centrifugalni epruveti (1 ml urina in 9 ml vode do oznake 10). Plast 10-krat razredčenega urina na dušikovi kislini. Če se takoj pojavi širok obroč, potem določanje ni končano, ga je treba nadaljevati. Od prvega 10-kratnega redčenja je potrebno narediti še 4-kratno redčenje. Skupna stopnja redčenja bo v tem primeru 40 (10x4). S 40-krat razredčenim urinom se ponovno postavi Hellerjev obročni test. Ko se med 2. in 3. minuto pojavi filiformni obroč, se šteje, da je določanje končano.

Pri delu lahko uporabite korekcijo Erlich-Althausen, če se filiformni obroč pojavi pred 2. minuto. Da ne bi dodatno razredčili urina, so avtorji predlagali določitev časa pojava filiformnega obroča in popravek izračuna za čas. V tem primeru se količina beljakovin izračuna tako, da se 0,033 g/l pomnoži s stopnjo razredčitve in s popravkom. Vrednosti sprememb so povzete v tabeli. 3.

Tabela 3. Korekcijske vrednosti za določanje beljakovin

Čas oblikovanja" Popravek obroča, min Čas oblikovanja Popravek obroča, min